展开时间很长。
[0133](3)采用乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水混合液(15: I: 2: 4)，展开需要35min，展开时间较短，但是有三个主斑点没有分开，展开效果差。
[0134](3)采用乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水混合液(15: I: I: 4)，展开需要30min，展开时间短，但是主斑点完全没有分开，展开效果很差。
[0135]由本对比例可知，当乙酸乙酯和/或甲酸在展开剂中所占的比例大于本发明的保护范围，分离效果与本发明基本相当，可使全部主斑点分开，但是展开时间会延长25min以上。当冰醋酸和/或水在展开剂中所占的比例大于本发明的保护范围，展开时间可以缩短30min左右，但是分离效果太差，主斑点无法完全分开，严重影响甘草的鉴别。综上所述，本发明以乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水混合液(14?16:1?3:1:1?3)为展开剂，展开效果好，可使全部主斑点分开，且展开时间适宜，以较小的优势处于较佳的效果。
[0136]对比例4
[0137]考察提取方法对盐酸麻黄碱含量测定的影响。
[0138]盐酸麻黄碱的含量测定:照高效液相色谱法《中国药典》2010年版一部附录VID测定。
[0139]色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积比乙腈:0.1￥%磷酸溶液=9: 87的乙腈-ο.磷酸溶液混合液为流动相；检测波长为207nm ;理论板数按盐酸麻黄碱峰计算应不低于3000 ；
[0140]对照品溶液的制备:取盐酸麻黄碱对照品10mg，精密称定，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，精密量取2ml，置25ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，制成对照品溶液?’每Iml对照品溶液含盐酸麻黄碱8 μ g。
[0141]供试品溶液的制备:取本品20片，精密称取本品0.4?0.6g，置索氏提取器中，加甲醇50?70ml，水浴加热回流2h，滤过，滤液置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液I?2ml，置10?20ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，得供试品溶液。
[0142]测定法:分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，测定；本品每片含麻黄以盐酸麻黄碱计，为3.3mgo
[0143]对比实施例1?3和本对比例4可知，常规的加热回流提取方法与本发明所述的超声提取方法提取含量测定结果基本相当，因此更优选操作更加方便简单、时间最短的超声方法提取。
[0144]对比例5
[0145]考察超声提取时间对盐酸麻黄碱含量测定的影响。
[0146]取同一批次制得的复方川贝精片，按照实施例1中的实施过程测试，各项均符合国家标准。在盐酸麻黄碱的测试过程中，超声处理(功率120W，频率59KHz) 10min、15min、20min、30min，分别取样，按照实施例1中的高效液相色谱条件进行测试。测定盐酸麻黄碱的含量结果分别为本品每片含盐酸麻黄碱3.lmg,3.3mg、3.4mg、3.4mg。
[0147]由对比例5可知，提取时间为1min时，盐酸麻黄碱的含量较低，表明盐酸麻黄碱未得到充分的提取。当提取时间增长到30min后，盐酸麻黄碱的含量基本不再变化，因此超声提取时间为15?20min为宜，其中提取时间20min时的提取效果以较小的优势处于较佳的效果。
【主权项】
1.一种复方川贝精片的检测方法，包括性状、显微观察、薄层色谱定性鉴别、含量测定项目，其特征在于:所述薄层色谱定性鉴别包括对复方川贝精片中麻黄根素和麻黄新碱A的鉴别、远志和白薇的鉴别、甘草的鉴别；所述含量测定包括对制剂中盐酸麻黄碱的含量测定; (1)性状 本品为糖衣片，除去糖衣后显黄褐色；气香、味苦； (2)显微观察 取本品，置显微镜下观察，草酸钙针晶成束，长32?144 μ m，存在于粘液细胞中或散在；淀粉粒广卵形或贝壳形，直径40?64 μ m，脐点短缝状、人字状或马蹄状，层纹可察见； (3)薄层色谱定性鉴别 麻黄根素和麻黄新碱A的薄层色谱定性鉴别:以麻黄根素对照品和麻黄新碱A对照品的混合溶液为对照品溶液；以体积比甲苯:甲醇:氨水=8?12: 3.5?4.5: I的甲苯-甲醇-氨水混合液为展开剂，用薄层色谱法鉴别； 远志和白薇的薄层色谱定性鉴别:分别以远志对照药材和白薇对照药材为对照品，以体积比乙酸乙酯:甲苯:三氯甲烷=8?12: 6?10:1的乙酸乙酯-甲苯-三氯甲烷混合液为展开剂，用薄层色谱法鉴别； 甘草的薄层色谱定性鉴别:以甘草对照药材为对照品；以体积比乙酸乙酯:甲酸:冰醋酸:水=14?16: I?3: I: I?3的乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水混合液为展开剂，用薄层色谱法鉴别； (4)含量测定 盐酸麻黄碱的含量测定:照高效液相色谱法《中国药典》2010年版一部附录VID测定； 色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积比乙腈:0.1￥%磷酸溶液=8?10: 85?90的乙腈-0.磷酸溶液混合液为流动相；检测波长为207nm ;理论板数按盐酸麻黄碱峰计算应不低于3000 ; 对照品溶液的制备:取盐酸麻黄碱对照品8?12mg，精密称定，置100?150ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，精密量取I?3ml，置25?50ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，得对照品溶液； 供试品溶液的制备:取本品，研细，精密称取本品0.4?0.6g，置10ml量瓶中，加甲醇50?70ml，超声处理，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液I?2ml，置10?20ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，得供试品溶液； 测定法:分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各8?12 μ 1，注入液相色谱仪，测定；本品每片含麻黄以盐酸麻黄碱计，不得少于3mg。
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述(3)项下麻黄根素和麻黄新碱A的薄层色谱定性鉴别具体步骤为:取本品，研细，加水使溶解，用乙醚振摇提取2?3次，弃去乙醚液，水液水浴蒸干，残渣加乙醇使溶解，滤过，滤液水浴蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为供试品溶液；另取麻黄根素对照品和麻黄新碱A对照品，加甲醇制成同时含麻黄根素对照品和麻黄新碱A对照品的混合溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法《中国药典》2010年版一部附录VI B试验，吸取上述供试品溶液和对照品溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比甲苯:甲醇:氨水=8?12: 3.5?4.5: I的甲苯-甲醇-氨水混合液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10v%硫酸乙醇溶液，在105°C加热3?6min至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，不得显相同颜色的斑点。
3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于:所述甲苯-甲醇-氨水混合液为体积比的甲苯:甲醇:氨水=10: 4:1。
4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述(3)项下远志和白薇的薄层色谱定性鉴别具体步骤为:取本品，研细，加甲醇，超声处理，滤过，滤液水浴蒸干，残渣加乙酸乙酯使溶解，作为供试品溶液；另取远志对照药材，粉碎成粗粉，按照供试品溶液的制法制成远志对照药材溶液；另取白薇对照药材，粉碎成粗粉，按照供试品溶液的制法制成白薇对照药材溶液；照薄层色谱法《中国药典》2010年版一部附录VI B试验，吸取供试品溶液、远志对照药材溶液和白薇对照药材溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比乙酸乙酯:甲苯:三氯甲烷=8?12: 6?10: I的乙酸乙酯-甲苯-三氯甲烷混合液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10v%硫酸乙醇溶液，在105°C加热3?6min至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与远志对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点，在与白薇对照药材色谱相应的位置上，不得显相同颜色的主斑点。
5.根据权利要求4所述的检测方法，其特征在于:所述乙酸乙酯-甲苯-三氯甲烷混合液为体积比的乙酸乙酯:甲苯:三氯甲烷=10: 8:1。
6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述(3)项下甘草的薄层色谱定性鉴别具体步骤为:取本品，研细，加水使溶解，离心，取上清液，通过Dltll型大孔吸附树脂柱，用水洗脱至洗脱液无色，弃去水液，再用80v%乙醇洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加水使溶解，用水饱和的正丁醇提取2?3次，每次水饱和的正丁醇使用量为15?30ml，合并正丁醇液，再用正丁醇饱和的水洗涤2?3次，每次正丁醇饱和的水使用量为15?20ml，弃去水液，取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，取上清液作为供试品溶液；另取甘草对照药材，加乙醇，加热回流15?25min，滤过，取滤液，蒸干，残澄加水使溶解，用水饱和的正丁醇提取2?3次，每次水饱和的正丁醇使用量为15?30ml，合并正丁醇液，再用正丁醇饱和的水洗涤2?3次，每次正丁醇饱和的水使用量为15?20ml，弃去水液，取正丁醇液，蒸干，残澄加甲醇使溶解，取上清液作为对照药材溶液；照薄层色谱法《中国药典》2010年版一部附录VI B试验，吸取上述供试品溶液和对照品溶液，分别点于同一以lwt%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以体积比乙酸乙酯:甲酸:冰醋酸:水=14?16: I?3: I: I?3的乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水混合液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1(^%硫酸乙醇溶液，105°C加热3?6min至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点。
7.根据权利要求6所述的检测方法，其特征在于:所述乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水混合液为体积比的乙酸乙酯:甲酸:冰醋酸:水=15:1:1: 2。
8.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于:所述含量测定项下供试品溶液的制备中，所述超声处理的时间为15?20min。
9.根据权利要求8所述的检测方法，其特征在于:所述含量测定项下供试品溶液的制备中，所述超声处理的时间为20min。
【专利摘要】本发明公开了一种复方川贝精片的检测方法。该检测方法包括性状、显微观察、薄层色谱定性鉴别、含量测定项目，所述薄层色谱定性鉴别包括对制剂中麻黄根素和麻黄新碱A的鉴别、远志和白薇的鉴别、甘草的鉴别；所述含量测定包括对制剂中盐酸麻黄碱的含量测定。本发明所述的检测方法不仅有效地控制了麻黄根和白薇的混入，同时有效地控制了复方川贝精片的成分和含量，使该药品更加安全、有效。
【IPC分类】G01N30-90, G01N30-02
【公开号】CN104777265
【申请号】CN201510198724
【发明人】钟茂团, 吴诗惠, 何德中, 古莉
【申请人】四川逢春制药有限公司
【公开日】2015年7月15日
【申请日】2015年4月24日