一种复方川贝精片的检测方法_4

文档序号:8456373阅读:来源:国知局
甲醇Iml使溶解,取上清液作为供试品溶液;另取甘草对照药材lg,加乙醇30ml,加热回流25min,滤过,取滤液,蒸干,残澄加水20ml使溶解,用水饱和的正丁醇提取3次,每次水饱和的正丁醇使用量为30ml,合并正丁醇液,再用正丁醇饱和的水洗涤3次,每次正丁醇饱和的水使用量为20ml,弃去水液,取正丁醇液,蒸干,残渣加甲醇Iml使溶解,取上清液作为对照药材溶液;照薄层色谱法《中国药典》2010年版一部附录VI B试验,吸取上述供试品溶液和对照品溶液各10 μ 1,分别点于同一以lwt%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上,以体积比乙酸乙酯:甲酸:冰醋酸:水=16: 3:1: 3的乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水混合液为展开剂,展开60min,取出,晾干,喷以1(^%硫酸乙醇溶液,105°C加热5min至斑点显色清晰;供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的主斑点。
[0094](4)含量测定
[0095]盐酸麻黄碱的含量测定:照高效液相色谱法《中国药典》2010年版一部附录VID测定。
[0096]色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以体积比乙腈:0.1¥%磷酸溶液=10: 90的乙腈- 0.磷酸溶液混合液为流动相;检测波长为207nm ;理论板数按盐酸麻黄碱峰计算应不低于3000 ;
[0097]对照品溶液的制备:取盐酸麻黄碱对照品10mg,精密称定,置10ml量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,精密量取2ml,置25ml量瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀,制成每Iml含盐酸麻黄碱8 μ g的对照品溶液。
[0098]供试品溶液的制备:取本品20片,研细,精密称取本品0.6g,置10ml量瓶中,加甲醇70ml,在功率120W、频率59KHz下超声处理20min,加甲醇稀释至刻度,摇匀,滤过,弃去初滤液,即得供试品溶液。
[0099]测定法:分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各12 μ 1,注入液相色谱仪,测定;本品每片含麻黄以盐酸麻黄碱计,为3.3mgo
[0100]实施例3
[0101](I)性状
[0102]本品为糖衣片,除去糖衣后显黄褐色;气香、味苦。
[0103](2)显微观察
[0104]取本品,置显微镜下观察,草酸钙针晶成束,长32?144 μ m,存在于粘液细胞中或散在;淀粉粒广卵形或贝壳形,直径40?64 μπι,脐点短缝状、人字状或马蹄状,层纹可察见。
[0105](3)薄层色谱定性鉴别
[0106]麻黄根素和麻黄新碱A的薄层色谱定性鉴别:取本品10片,研细,加水20ml使溶解,用乙醚振摇提取2次,每次乙醚的使用量为15ml ;弃去乙醚液,水液水浴蒸干,残渣加乙醇20ml使溶解,滤过,滤液水浴蒸干,残渣加甲醇Iml使溶解,作为供试品溶液;另取麻黄根素对照品和麻黄新碱A对照品,加甲醇制成每Iml含麻黄根素对照品和麻黄新碱A对照品各Img的混合溶液,作为对照品溶液;照薄层色谱法《中国药典》2010年版一部附录VI B试验,吸取上述供试品溶液和对照品溶液各8 μ 1,分别点于同一硅胶G薄层板上,以体积比甲苯:甲醇:氨水=8: 3.5: I的甲苯-甲醇-氨水混合液为展开剂,展开50min,取出,晾干,喷以10v%硫酸乙醇溶液,在105°C加热4min至斑点显色清晰;供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,未显相同颜色的斑点。
[0107]远志和白薇的薄层色谱定性鉴别:取本品10片,研细,加甲醇20ml,超声处理lOmin,滤过,滤液水浴蒸干,残渣加乙酸乙酯Iml使溶解,作为供试品溶液;另取远志对照药材lg,粉碎成粗粉,按照供试品溶液的制法制成远志对照药材溶液;另取白薇对照药材lg,粉碎成粗粉,按照供试品溶液的制法制成白薇对照药材溶液;照薄层色谱法《中国药典》2010年版一部附录VI B试验,吸取供试品溶液、远志对照药材溶液和白薇对照药材溶液各I μ 1,分别点于同一硅胶G薄层板上,以体积比乙酸乙酯:甲苯:三氯甲烷=8: 6:1的乙酸乙酯-甲苯-三氯甲烷混合液为展开剂,展开60min,取出,晾干,喷以1(^%硫酸乙醇溶液,在105°C加热6min至斑点显色清晰;供试品色谱中,在与远志对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的主斑点,在与白薇对照药材色谱相应的位置上,未显相同颜色的主斑点。
[0108]甘草的薄层色谱定性鉴别:取本品10片,研细,加水30ml使溶解,离心,取上清液,通过Dltll型大孔吸附树脂柱(所述D 1(11型大孔吸附树脂柱内径为15_,高为12cm ;所述D 101型大孔吸附树脂柱使用前需要依次经以下方法处理:乙醇浸泡24h —用乙醇洗至流出液与水按体积比1: 5混合不浑浊一用水洗至无醇味一5v %盐酸通过树脂并浸泡2?4h —水洗至中性一2wt%氢氧化钠溶液通过树脂柱,并浸泡2?4h —水洗至中性,备用),用水洗脱至洗脱液无色,弃去水液,再用80v%乙醇80ml洗脱,收集洗脱液,蒸干,残渣加水20ml使溶解,用水饱和的正丁醇提取2次,每次水饱和的正丁醇使用量为15ml,合并正丁醇液,再用正丁醇饱和的水洗涤2次,每次正丁醇饱和的水使用量为15ml,弃去水液,取正丁醇液,蒸干,残渣加甲醇Iml使溶解,取上清液作为供试品溶液;另取甘草对照药材lg,加乙醇20ml,加热回流15min,滤过,取滤液,蒸干,残渣加水20ml使溶解,用水饱和的正丁醇提取2次,每次水饱和的正丁醇使用量为15ml,合并正丁醇液,再用正丁醇饱和的水洗涤2次,每次正丁醇饱和的水使用量为15ml,弃去水液,取正丁醇液,蒸干,残渣加甲醇Iml使溶解,取上清液作为对照药材溶液;照薄层色谱法《中国药典》2010年版一部附录VI B试验,吸取上述供试品溶液和对照品溶液各5 μ 1,分别点于同一以lwt%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上,以体积比乙酸乙酯:甲酸:冰醋酸:水=14: I: I: I的乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水混合液为展开剂,展开60min,取出,晾干,喷以1(^%硫酸乙醇溶液,105°C加热4min至斑点显色清晰;供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的主斑点。
[0109](4)含量测定
[0110]盐酸麻黄碱的含量测定:照高效液相色谱法《中国药典》2010年版一部附录VID测定。
[0111]色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以体积比乙腈:0.1¥%磷酸溶液=8: 85的乙腈-ο.磷酸溶液混合液为流动相;检测波长为207nm ;理论板数按盐酸麻黄碱峰计算应不低于3000 ;
[0112]对照品溶液的制备:取盐酸麻黄碱对照品10mg,精密称定,置10ml量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,精密量取2ml,置25ml量瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀,制成每Iml含盐酸麻黄碱8 μ g的对照品溶液。
[0113]供试品溶液的制备:取本品20片,研细,精密称取本品0.4g,置10ml量瓶中,加甲醇50ml,在功率120W、频率59KHz下超声处理15min,加甲醇稀释至刻度,摇匀,滤过,弃去初滤液,即得供试品溶液。
[0114]测定法:分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各8μ1,注入液相色谱仪,测定;本品每片含麻黄以盐酸麻黄碱计,为3.4mgo
[0115]对比例I
[0116]考察麻黄根素和麻黄新碱A的薄层色谱定性鉴别中,展开剂对薄层色谱定性鉴别的影响,其余均同实施例1。
[0117](I)采用甲苯-甲醇-氨水混合液(7: 5: 1),展开需要30min,展开时间短,但是有两个主斑点没有分开,分离效果差。
[0118](2)采用甲苯-甲醇-氨水混合液(13: 3: 1),展开需要65min,全部主斑点分开,分离效果与实施例1?3基本相当,但是展开时间较长。
[0119](3)采用甲苯-甲醇-氨水混合液(10: 4: 2),展开需要30min,展开时间较短,但是有三个主斑点没有分开,分离效果差。
[0120](4)采用甲苯-甲醇-氨水混合液(15: 5: 1),展开需要80min,全部主斑点分开,分离效果好,但是展开时间太长。
[0121]由本对比例可知,当甲苯在展开剂中所占的比例大于本发明的保护范围,分离效果与本发明基本相当,可是全部主斑点分开,但是展开时间会延长15min以上。当甲醇和/或氨水在展开剂中所占的比例大于本发明的保护范围,展开时间可以缩短20min左右,但是分离效果太差,有2?3个主斑点无法分开,显著影响麻黄根素和麻黄新碱A的鉴别。综上所述,本发明以甲苯-甲醇-氨水混合液(8?12: 3.5?4.5: I)为展开剂,展开效果好,展开时间适宜,以较小的优势处于较佳的效果。
[0122]对比例2
[0123]考察远志和白薇的薄层色谱定性鉴别中,展开剂对薄层色谱定性鉴别的影响,其余均同实施例1。
[0124](I)采用乙酸乙酯-甲苯-三氯甲烷混合液(7: 12: 1),展开需要80min,全部主斑点分开,分离效果与实施例1?3基本相当,但是分离时间较长。
[0125](2)采用乙酸乙酯-甲苯-三氯甲烷混合液(13: 5: 1),展开需要30min,展开时间较短,但是有两个主斑点没有分开,分离效果差。
[0126](3)采用乙酸乙酯-甲苯-三氯甲烷混合液(15: 4: 1),展开需要25min,展开时间很短,但是主斑点完全没有分开,分离效果很差。
[0127](4)采用乙酸乙酯-甲苯-三氯甲烷混合液(10: 10: 2),展开需要90min,全部主斑点分开,分离效果好,但是分离时间太长。
[0128]由本对比例可知,当甲苯在展开剂中所占的比例大于本发明的保护范围,分离效果与本发明基本相当,可是全部主斑点分开,但是展开时间会延长20min以上。当乙酸乙酯在展开剂中所占的比例大于本发明的保护范围,展开时间可以缩短30min以上,但是分离效果太差,主斑点无法分开,严重影响到远志和白薇的鉴别。综上所述,本发明以乙酸乙酯-甲苯-三氯甲烷混合液(8?12: 6?10: I)为展开剂,展开效果好,可使全部主斑点分开,且展开时间适宜,以较小的优势处于较佳的效果。
[0129]对比例3
[0130]考察甘草的薄层色谱定性鉴别中,展开剂对薄层是色谱定性鉴别的影响,其余均同实施例1。
[0131](I)采用乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水混合液(13: 4: I: 2),展开需要85min,全部主斑点分开,分离效果与实施例1?3基本相当,但展开时间较长。
[0132](2)采用乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水混合液(17: I: I: 2),展开需要90min,全部主斑点分开,展开效果好,但是
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