(4-碘 苯）-3-(2,4-二硝基苯1)-5-(2,4-二磺基苯1)-211-四氮唑0.1臟〇1/1和对羟基苯甲 酸酯 〇.lg/L。
[0023]实施例2、糖化血清蛋白检测试剂 糖化血清蛋白检测试剂包括体积比为3:1的试剂Rl和试剂R2,所述试剂Rl包括以下 组分： pH值为7. 0的磷酸钾缓冲液20mmol/L、尿酸酶6U/ml、抗坏血酸氧化酶12U/ml、烷基醇 酰胺聚氧乙稀醚40mmol/L、乙二醇6mg/ml、氯化f丐35ymol/L和对羟基苯甲酸酯0. 2g/L; 所述试剂R2包括以下组分： pH值为10. 5的MES缓冲液lmmol/L、烷基聚葡萄糖苷45mmol/L、2- (4-碘 苯）-3-(2,4-二硝基苯1)-5-(2,4-二磺基苯1)-211-四氮唑0.5臟〇1/1和对羟基苯甲 酸酯 0. 2g/L。
[0024]实施例3、糖化血清蛋白检测试剂 糖化血清蛋白检测试剂包括体积比为3:1的试剂Rl和试剂R2,所述试剂Rl包括以下 组分： pH值为7. 5的磷酸钾缓冲液30mmol/L、尿酸酶8U/ml、抗坏血酸氧化酶12U/ml、烷基醇 酰胺聚氧乙稀醚60mmol/L、乙二醇10mg/ml、氯化f丐40ymol/L和对羟基苯甲酸酯0. 4g/L; 所述试剂R2包括以下组分： pH值为10. 8的MES缓冲液I. 5mmol/L、烷基聚葡萄糖苷80mmol/L、2- (4-碘 苯）-3-(2,4-二硝基苯1)-5-(2,4-二磺基苯1)-211-四氮唑1.2臟〇1/1和对羟基苯甲 酸酯 〇. 4g/L。
[0025] 试验例一、糖化血清蛋白检测试剂的相关性试验 1、试验试剂：实施例2制备的糖化血清蛋白检测试剂，美国Diazyme Laboratores酶法 测定试剂。
[0026] 2、试验方法：采用日立7170自动生化分析仪同时测定20份临床血清样品进行对 照检测，得两种试剂的相关性曲线。日立7170自动生化分析仪设定的参数为：反应温度设 置为37°C，主波长设为405nm，副波长设为546nm，加入18 y 1的样品，接着把270 y 1试剂 Rl加入样品中反应5min后加入90 y 1试剂R2反应3min，开始读取第一点吸光度值，2min 后读取第二点吸光度值，与标准比较后定量。
[0027] 3、试验结果： 试验结果如图1所示，经测定结果计算，两种检测试剂的相关系数为0.9966,说明两 者有极大的相关性，从而证明本发明提供的糖化血清蛋白检测试剂具有很好的实用性。
[0028] 试验例二、糖化血清蛋白检测试剂的精密度试验 1、试验试剂：实施例2制备的糖化血清蛋白检测试剂，低、中、高浓度糖化血清蛋白的 混合血清样品各一份。
[0029] 2、试验方法：采用日立7170自动生化分析仪分别对低、中、高浓度糖化血清蛋白 的混合血清样品进行测定，重复测定20次，计算出批内变异系数（CV)，将低、中、高浓度糖 化血清蛋白的混合血清样品分装成20管，放置-20°C中保存，采用日立7170自动生化分析 仪每天测一管，连续测定20天，计算出批间变异系数（CV)。
[0030] 3、试验结果 试验结果如表1所示。
[0031] 表1糖化血清蛋白检测试剂的批内和批间的变异系数
由表1得出，本发明提供的糖化血清蛋白检测试剂的低、中、高浓度糖化血清蛋白的混 合血清样品的变异系数小于5%，证明本发明的糖化血清蛋白检测试剂的测定结果精密度 尚。
[0032] 试验例三、糖化血清蛋白检测试剂的干扰试验 1、试验方法：在一份糖化血清蛋白含量为242. 17ymol/L的血清样品中，加入不同含 量的血红蛋白、甘油三酯、胆红素、葡萄糖、抗坏血酸、尿酸，同时以样品中加入等体积的生 理盐水作为基础样品。采用本发明实施例2制备的糖化血清蛋白检测试剂进行检测。
[0033] 2、试验结果： 经检测结果表明：血红蛋白含量少于850mg/L、甘油三酯含量少于6. 8mmol/L、胆红 素含量少于115mg/L、葡萄糖含量少于7. 5g/L、抗坏血酸含量少于16mg/L、尿酸含量少于 500mg/L时测定结果的偏差在±5%以内，证明本发明提供的糖化血清蛋白检测试剂抗干扰 能力强。
【主权项】
1. 一种糖化血清蛋白检测试剂，其特征在于，所述试剂包括体积比为3:1的试剂Rl和 试剂R2,所述试剂Rl包括以下组分： 磷酸钾缓冲液10-30mmol/L、尿酸酶2-10U/ml、抗坏血酸氧化酶8-20U/ml、烷基醇酰 胺聚氧乙稀醚20_60mmol/L、多元醇5-10mg/ml、氯化I丐25-45ymol/L和防腐剂0? 1-lg/L; 所述试剂R2包括以下组分： 1￡3缓冲液0.1-2臟〇1/1、烷基聚葡萄糖苷30-80臟〇1/1、2-(4-碘苯)-3-(2,4-二硝 基苯 1) -5- (2, 4-二磺基苯I)-2H-四氮唑 0. 1-1. 5mmol/L和防腐剂 0. 1-lg/L。2. 如权利要求1所述的糖化血清蛋白检测试剂，其特征在于，所述试剂包括体积比为 3:1的试剂Rl和试剂R2,所述试剂Rl包括以下组分： 磷酸钾缓冲液20mmol/L、尿酸酶6U/ml、抗坏血酸氧化酶12U/ml、烷基醇酰胺聚氧乙 稀醚40mmol/L、多元醇6mg/ml、氯化|丐35ymol/L和防腐剂0? 2g/L; 所述试剂R2包括以下组分： 1￡3缓冲液1臟〇1/1、烷基聚葡萄糖苷45臟〇1/1、2-(4-碘苯）-3-(2,4-二硝基苯 1) -5- (2, 4-二磺基苯I) -2H-四氮唑 0? 5mmol/L和防腐剂 0? 2g/L。3. 如权利要求1或2所述的糖化血清蛋白检测试剂，其特征在于，所述磷酸钾缓冲液的 pH值为 6. 5-7. 5。4. 如权利要求3所述的糖化血清蛋白检测试剂，其特征在于，所述磷酸钾缓冲液的pH 值为7.0。5. 如权利要求1或2所述的糖化血清蛋白检测试剂，其特征在于，所述MES缓冲液的 pH值为 9. 5-10. 8。6. 如权利要求5所述的糖化血清蛋白检测试剂，其特征在于，所述MES缓冲液的pH值 为 10. 5〇7. 如权利要求1或2所述的糖化血清蛋白检测试剂，其特征在于，所述防腐剂为对羟基 苯甲酸酯。8. 如权利要求1或2所述的糖化血清蛋白检测试剂，其特征在于，所述多元醇为 1，2-丙二醇或乙二醇。9. 一种如权利要求1-8任一所述的糖化血清蛋白检测试剂在检测糖化血清蛋白中的 应用。
【专利摘要】本发明属于医学检验技术领域，具体涉及一种糖化血清蛋白检测试剂及其应用。该试剂包括体积比为3:1的试剂R1和试剂R2，所述试剂R1主要由磷酸钾缓冲液、尿酸酶、抗坏血酸氧化酶、烷基醇酰胺聚氧乙烯醚、多元醇、氯化钙和防腐剂组成；所述试剂R2主要由MES缓冲液、烷基聚葡萄糖苷、2-（4-碘苯）-3-（2,4-二硝基苯1）-5-（2,4-二磺基苯1）-2H-四氮唑和防腐剂组成。本发明提供的糖化血清蛋白检测试剂具有抗干扰能力强、测定灵敏度和精密度高、测定结果重复性好的优点，而且该检测试剂稳定性高、水溶性好，有利于该糖化血清蛋白检测试剂的临床应用。
【IPC分类】G01N21/31, G01N21/78
【公开号】CN105223192
【申请号】CN201510580414
【发明人】燕启江, 郭周萍, 庞柳, 刘菲菲
【申请人】广州金域医学检验中心有限公司
【公开日】2016年1月6日
【申请日】2015年9月14日