用于诊断胰腺癌的组合物以及使用该组合物诊断胰腺癌的方法
【技术领域】
[0001] 本公开内容涉及用于诊断胰腺癌的组合物和试剂盒，其包含用于测量蛋白的蛋白 表达水平或编码所述蛋白的基因的mRNA表达水平的试剂，可用于确定胰腺癌的发病或发 病的可能性，以及涉及使用所述组合物或试剂盒诊断胰腺癌的方法。
【背景技术】
[0002] 目前，在人类主要疾病中具有代表性的是癌症。关于癌症的研究正在积极进行，特 别是在高发癌症（包括肺癌、肝癌、胃癌等）领域，但是对低发癌症（包括食管癌、结直肠 癌、胰腺癌等）进行的研究较少。
[0003] 特别地，胰腺癌在其早期通常不引起可识别的症状，并且该疾病通常由于其症状 轻微（例如疼痛、体重减轻等），直到疾病从胰腺本身扩散至全身才被诊断出。此外，胰腺癌 的存活率通常很低，因此定期诊断非常重要。在大多数情况下，胰腺癌的临床症状是缓慢暴 露的，胰腺癌患者最常出现虚弱、厌食和体重减轻。已发现胰腺癌的五年存活率是1-4%，中 位生存期是5个月，其非常致命并且是人类癌症中预后最差的。诊断后，发现80-90%的人 不能通过有希望的根治性切除术治疗。这是通常预后非常差的主要原因之一。主要使用化 学疗法治疗胰腺癌。因此，与其他癌症相比，迫切需要胰腺癌的早期诊断方法。尽管目前已 知一些抗癌药物（包括5-氟尿嘧啶、吉西他滨和特罗凯）可用于治疗胰腺癌，但是它们表 现出非常低的疗效和对癌症治疗的仅15%左右的反应率。这些情况表明，迫切需要更有效 的胰腺癌的早期诊断和治疗，由此可改善预后。
[0004] 根据血液学检验（CA19-9)、使用X-射线造影剂的胃肠道造影术和十二指肠造影 术、经皮肤和肝的胆管造影术、或内镜逆行胰胆管造影术确定胰腺癌的诊断。许多疾病病变 可通过这样的方法检测，但是目前最优选的是超声波扫描术和计算机断层扫描术。更谨慎 的活检方法可导致相对更精确的结果。上述诊断方法由于其通常是精确的而被使用，但是， 受试者不愿经受检查，因为这些诊断方法是令人不舒服的或疼痛的。因此，需要方便并快速 诊断胰腺癌的方法。
[0005] 在这一方面，韩国专利No. 10-0819122公开了使用多种胰腺癌标记物（包括母 系蛋白、甲状腺素运载蛋白和人分层蛋白）的技术。此外，未经审查的韩国专利申请公开 No. 2012-0082373描述了使用多种胰腺癌标记物诊断胰腺癌。KR2009-0003308公开了通 过检测受试者血液样品中REG4的表达水平诊断胰腺癌。KR2012-0009781A描述了测量受 试者癌症组织中XISTRNA表达水平的分析方法，由此可提供受试者的胰腺癌的发病信息。 KR2007-0119250A公开了新的LBFL313基因家族，它们在正常胰腺组织和胰腺癌组织之间 以不同模式表达。US2011/0294136A1公开了使用生物标记物（包括角蛋白8蛋白）的胰 腺癌的诊断方法。但是，不同标记物之间的诊断效率和精确度非常不同。因此，迫切需要非 常有效的标记物和使用该标记物的诊断方法。
[0006] 本发明人努力开发出一种可用于在早期诊断胰腺癌的标记物，因此鉴定出胰腺癌 中过表达或低表达的蛋白，并通过确认使用所述蛋白可容易地诊断胰腺癌而完成了本发 明。
【发明内容】
[0007] 技术问题
[0008] 因此，本公开内容的一个目的是提供胰腺癌的诊断组合物，使用该组合物可在早 期方便地诊断胰腺癌发病的可能性。
[0009] 本公开内容的另一个目的是提供用于诊断胰腺癌的试剂盒，其包含所述组合物。
[0010] 本公开内容的再一个目的是提供用于使用所述诊断组合物或试剂盒诊断胰腺癌 或提供关于胰腺癌的诊断结果的信息的方法。
[0011] 技术方案
[0012] 为实现以上目的，本公开内容提供了用于诊断胰腺癌的组合物，其包含用于测量 ABAT蛋白（4-氨基丁酸转氨酶；GenBank登录号：NP_001120920. 1)的蛋白表达水平或编码 ABAT蛋白的基因的mRNA表达水平的试剂。
[0013] 为实现以上目的，本公开内容提供了用于诊断胰腺癌的组合物，其包含用于测量 ABAT蛋白（4-氨基丁酸转氨酶；GenBank登录号：NP_001120920. 1)的蛋白表达水平或编码 ABAT蛋白的基因的mRNA表达水平；以及CHI3L1蛋白（几丁质酶-3-样蛋白1前体；GenBank 登录号：NP_001267. 2)的表达水平或编码CHI3L1蛋白的基因的mRNA表达水平的试剂。
[0014] 为实现以上目的，本公开内容提供了用于诊断胰腺癌的试剂盒，其包含所述组合 物。
[0015] 为实现以上目的，本公开内容提供了用于诊断胰腺癌的方法，其包括：
[0016] (a)从待进行胰腺癌发病诊断的受试者中获得样品；
[0017] (b)测量ABAT蛋白（4-氨基丁酸转氨酶；GenBank登录号：NP_001120920. 1)的蛋 白表达水平或编码ABAT蛋白的基因的mRNA表达水平；
[0018] (c)将ABAT蛋白的蛋白表达水平或编码ABAT蛋白的基因的mRNA表达水平与相应 的正常对照的表达水平进行比较；以及
[0019] (d)基于（c)步骤中的比较结果，当待进行胰腺癌发病检测的受试者的ABAT蛋白 的蛋白表达水平或编码ABAT蛋白的基因的mRNA表达水平比待进行胰腺癌发病检测的相应 的正常对照的表达水平更高时，确定胰腺癌的发病或发病的可能性高。
[0020] 为实现以上目的，本公开内容提供了用于诊断胰腺癌的方法，其包括：
[0021] (a)从待进行胰腺癌发病诊断的受试者中获得样品；
[0022] (b)测量ABAT蛋白（4-氨基丁酸转氨酶；GenBank登录号：NP_001120920. 1)的蛋 白表达水平或编码ABAT蛋白的基因的mRNA表达水平、以及CHI3L1蛋白（几丁质酶-3-样 蛋白1前体；GenBank登录号：NP_001267. 2)的蛋白表达水平或编码CHI3L1蛋白的基因的 mRNA表达水平；
[0023] (c)将ABAT蛋白的蛋白表达水平或编码ABAT蛋白的基因的mRNA表达水平、以及 CHI3L1蛋白的蛋白表达水平或编码CHI3L1蛋白的基因的mRNA表达水平与相应的正常对照 的表达水平进行比较；以及
[0024] (d)基于（c)步骤中的比较结果，当待进行胰腺癌发病检测的受试者的ABAT蛋 白的蛋白表达水平或编码ABAT蛋白的基因的mRNA表达水平比相应的正常对照的表达水 平更高时，以及当待进行胰腺癌发病检测的受试者的CHI3L1蛋白的蛋白表达水平或编码 CHI3L1蛋白的基因的mRNA表达水平比受试者的相应的正常对照的表达水平更低时，确定 胰腺癌的发病或发病的可能性高。
[0025] 本发明的诊断胰腺癌的标记物可使得能够有效地估计或确定胰腺癌发病的可能 性，以在早期诊断胰腺癌和胰腺癌的严重程度。此外，本发明的诊断方法允许以无创性方式 从样品（例如血液）中方便地检测胰腺癌。
[0026] 有益效果
[0027] 如上所述，本公开内容的胰腺癌的诊断标记物可用于在早期预测或诊断胰腺癌的 发病、发病的可能性及严重性。所述标记物还可用于胰腺癌肿瘤发生的研究。此外，本发明 的诊断方法允许以无创性方式在样品（例如血液）中方便地检测胰腺癌。
【附图说明】
[0028] 图1是示出了对照组和胰腺癌患者组的ABAT蛋白的相对浓度的图，如通过MRM定 量分析所测量的。
[0029] 图2是示出了ABAT的癌细胞（AUC)诊断性能的R0C曲线（接收者操作特征）。
[0030] 图3是示出了CA19-9的癌细胞（AUC)诊断性能的R0C曲线（接收者操作特征）， 本领域已知CA19-9是胰腺癌的血液标记物。
[0031] 图4是比较了ABAT与CA19-9的癌细胞（AUC)诊断性能的R0C曲线（接收者操作 特征）。
[0032] 图5是示出了ABAT和CA19-9的结合物的癌细胞（AUC)诊断性能的R0C曲线（接 收者操作特征）。
[0033] 图6是比较了单独的CA19-9和ABAT与CA19-9和ABAT的结合物的癌细胞（AUC) 诊断性能的R0C曲线（接收者操作特征）。
[0034] 图7是示出了对照组和胰腺癌患者组的CHI3L1蛋白的相对浓度的图，如通过MRM 定量分析所测量的。
[0035] 图8是示出了CHI3L1和CA19-9的结合物的癌细胞（AUC)诊断性能的R0C曲线 (接收者操作特征）。
[0036] 图9是比较了CA19-9与ABAT和CHI3L1的结合物的癌细胞（AUC)诊断性能的R0C 曲线（接收者操作特征）。
[0037] 图10是示出了ABAT、CHI3L1和CA19-9的结合物的癌细胞（AUC)诊断性能的R0C 曲线（接收者操作特征）。
[0038] 图11是比较了ABAT、CHI3L1和CA19-9的结合物与ABAT和CHI3L1的结合物或单 独的CA19-9的癌细胞（AUC)诊断性能的R0C曲线（接收者操作特征）。
【具体实施方式】
[0039] 术语为下文所定义。
[0040] 本文使用的术语"诊断"旨在涵盖确定受试者对某种疾病或病症的易感性、确 定受试者是否患有某种疾病或病症、确定患有某种疾病或病症的受试者的预后（例如鉴 定癌症的转移前状态或转移状态、确定癌症的阶段或癌症对治疗的响应）或度量疗法 (therametrics)(例如，监测受试者的状态以提供关于治疗功效的信息）。特别地，本文使 用的诊断意指确定胰腺癌的发病或发病的可能性（风险）。
[0041] 本文使用的术语"胰腺癌"意指产生于胰腺中的细胞的癌症（癌）或恶性肿瘤。有 多种类型的胰腺肿瘤，这类肿瘤的90%是胰腺导管腺癌（PDAC)。因此，胰腺导管腺癌在狭 义上被称为胰腺癌。胰腺癌的其他实例包括神经内分泌肿瘤和囊腺癌。
[0042] 本文使用的术语"标记物"、"生物标记物"或"诊断标记物"意指允许区分正常和疾 病状态、或能够使治疗结果被预测或客观测量的标签。具体地，在与胰腺癌相关的情况下， 标记物意指在患胰腺癌或有胰腺癌发病风险的受试者中，相比于正常对照（未患胰腺癌的 受试者），其蛋白或基因表达水平显著升高或降低的有机生物分子，例如多肽或核酸（例如 mRNA等）、脂质、糖脂、糖蛋白、糖（单糖、二糖、寡糖等）。
[0043] 本公开内容提供了用于诊断胰腺癌的组合物，其包含用于测量ABAT蛋白（4-氨基 丁酸转氨酶；GenBank登录号：NP_001120920. 1)的蛋白表达水平或编码ABAT蛋白的基因 的mRNA表达水平的试剂。
[0044] 在本发明中，ABAT被用作检测胰腺癌的标记物，从而有效地诊断受试者的胰腺癌 发病或发病的可能性。