;V是样品定容体积;N是溶液的稀释倍数。
[0033] 10)计算栀子黄样品中总藏花酸衍生物的相对含量。按式(6)计算栀子黄样品中总 藏花酸衍生物的相对含量：
[0034]
[0035] 其中，M"Tcital是栀子黄样品中总藏花酸衍生物相对含量，MTcital是栀子黄样品中总 藏花酸衍生物含量，Μ是栀子黄样品的质量。
[0036] 11)计算各藏花酸衍生物的相对质量。按式(7)，根据HPLC色谱图上各组分峰面积 计算栀子黄样品中各藏花酸衍生物的相对质量。
[0037]
[0038] 其中，Μ\[%]是含藏花酸结构组分i的相对质量，是含藏花酸结构组分i的浓 度吸光系数，h是含藏花酸结构组分i的峰的面积，η是含藏花酸结构组分的数量。
[0039] 12)计算栀子黄样品中各藏花酸衍生物的质量。按式(8)计算栀子黄样品中各藏花 酸衍生物的质量。
[0040] Μ?[8]=Μ、ΜΤ0^ι ⑶
[0041] 其中，Mi是含藏花酸结构组分i的质量，M'i是含藏花酸结构组分i的相对质量，i是 含藏花酸结构组分的编号，MTcital是栀子黄样品中总藏花酸衍生物含量。
[0042]本发明的优点和有益效果为：
[0043] 1)提供了一种测定栀子黄产品中藏花酸衍生物总量和组成的方法，能够精确计算 栀子黄产品中藏花酸衍生物总含量和各组分含量，实现对栀子黄产品着色能力的量化评 估，并为产品的安全性评估创造了条件。
[0044] 2)本发明提供的测定栀子黄产品中藏花酸衍生物总量和组成的方法能够在部分 藏花酸衍生物分子结构尚不清楚的情况下应用，因而具有很好的实用价值。
[0045] 3)本方法具有简单、可行、重复性良好等优点。
【附图说明】
[0046] 下面结合附图和实施例对本发明作进一步说明。
[0047] 图1为本发明所述一种测定栀子黄产品中藏花酸衍生物总量和组成的方法流程 图。
【具体实施方式】
[0048] 实施例1
[0049] 选标注色价(E)为500的栀子黄产品为测试样品。参见图1，实施步骤如下：
[0050] 1)测定栀子黄样品的吸光值。准确称取样品0.0502克（精确到0.0001克），在水中 完全溶解后定容至50mL，将溶液稀释100倍。在紫外可见光分光光度计上，440nm波长下，测 定稀释液吸光值A为0.5064。
[0051 ] 2)获得样品的色谱图。在HPLC-PDA(反相高效液相色谱法)上获得样品的色谱图。 色谱条件是:固定相为C18柱，参数为250 X 4.6mm i . d.，5μπι;流动相A为水-乙腈-乙酸，体积 比为74.95:25:0.05;流动相B为乙腈;采取线性梯度洗脱方法:流动相B在20分钟内从0升至 13.3 % (V/V)，20-35分钟内B维持13.3 % (V/V)，流速为0.8毫升/分，进样体积20微升，柱温 为室温;检测波长为440nm。对各组分积分得到峰面积，如表1所示。
[0052] 3)鉴定含有藏花酸结构的各组分。应用HPLC-MS-MS，鉴定色谱图上含有藏花酸结 构的各组分。色谱条件：同步骤2)。质谱条件:喷雾电压:-4Kv，鞘气30arb，辅助气lOarb，吹 扫气Oarb;毛细管温度350 °C ;负离子检测模式;数据依赖性扫描;CID碰撞能量35 % ;碎片质 量检测范围m/z为150至2000。
[0053] 4)计算各组分的分子离子峰m/z值。在一级质谱图上，鉴定各含藏花酸结构组分的 分子离子峰，并记录各含藏花酸结构组分的分子离子峰m/z值。如表1所示。
[0054] 5)计算各藏花酸衍生物组分的峰面积相对比例。按式（1)计算各藏花酸衍生物组 分的峰面积相对比例，如表1所示。
[0055] 6)计算各组分的浓度吸光系数。根据已公布的藏花酸浓度吸光系数 <〖_;11=：3820 (甲醇），按式(2)计算各含藏花酸结构组分的浓度吸光系数，如表1所示。
[0056] 7)计算栀子黄中总藏花酸衍生物的浓度吸光系数。根据式（1)和式（2)的计算结 果，按式(3)以加权求和法计算栀子黄中总藏花酸衍生物的浓度吸光系数为1125。
[0057] 8)计算藏花酸衍生物在总色素中的相对含量。按式(4)计算藏花酸衍生物在总色 素中的相对含量为97.20 %。
[0058] 9)计算栀子黄样品中总藏花酸衍生物的含量。根据式（1)、式（3)和式(4)所得结 果，按式(5)计算栀子黄样品中总藏花酸衍生物含量为0.0225g。
[0059] 10)计算栀子黄样品中总藏花酸衍生物的相对含量。按式(6)计算栀子黄样品中总 藏花酸衍生物的相对含量为44.82%。
[0060] 11)计算各藏花酸衍生物的相对质量。按式(7)，根据HPLC色谱图计算栀子黄样品 中各藏花酸衍生物的相对质量，如表1所示。
[0061] 12)计算栀子黄样品中各藏花酸衍生物的质量。按式(8)计算栀子黄样品中各藏花 酸衍生物的质量，如表1所示。
[0062]表1标注色价(E)为500的栀子黄样品各组分色谱行为、光谱特征和含量
[0063]
[0064] 实施例2
[0065] 选标注色价(E)为450的栀子黄产品为测试样品。参见图1，实施步骤如下：
[0066] 1)测定栀子黄样品的吸光值。准确称取样品0.0531克（精确到0.0001克），在水中 完全溶解后定容至50mL，将溶液稀释100倍。在紫外可见光分光光度计上，440nm波长下，测 定稀释液吸光值A为0.4971。
[0067] 2)获得样品的色谱图。在HPLC-PDA(反相高效液相色谱法）上获得样品的色谱图。 色谱条件是:固定相为C18柱，参数为250 X 4.6mm i . d.，5μπι;流动相A为水-乙腈-乙酸，体积 比为74.95:25:0.05;流动相B为乙腈;采取线性梯度洗脱方法:流动相B在20分钟内从0升至 13.3 % (V/V)，20-35分钟内B维持13.3 % (V/V)，流速为0.8毫升/分，进样体积20微升，柱温 为室温;检测波长为440nm。对各组分积分得到峰面积，如表2所示。
[0068] 3)鉴定含有藏花酸结构的各组分。应用HPLC-MS-MS，鉴定色谱图上含有藏花酸结 构的各组分。色谱条件：同步骤2)。质谱条件:喷雾电压:-4Kv，鞘气30arb，辅助气lOarb，吹 扫气Oarb;毛细管温度350 °C ;负离子检测模式;数据依赖性扫描;CID碰撞能量35 % ;碎片质 量检测范围m/z为150至2000。
[0069] 4)计算各组分的分子离子峰m/z值。在一级质谱图上，鉴定各含藏花酸结构组分的 分子离子峰，并记录各含藏花酸结构组分的分子离子峰m/z值。如表2所示。
[0070] 5)计算各藏花酸衍生物组分的峰面积相对比例。按式（1)计算各藏花酸衍生物组 分的峰面积相对比例，如表2所示。
[0071] 6)计算各组分的浓度吸光系数。根据已公布的藏花酸浓度吸光系数4^=3820 (甲醇），按式(2)计算各含藏花酸结构组分的浓度吸光系数，如表2所示。
[0072] 7)计算栀子黄中总藏花酸衍生物的浓度吸光系数。根据式（1)和式（2)的计算结 果，按式(3)以加权求和法计算栀子黄中总藏花酸衍生物的浓度吸光系数为1127。
[0073] 8)计算总藏花酸衍生物在总色素中的相对含量。按式(4)计算总藏花酸衍生物在