利用高效液相色谱检测食用油中苯并(a)芘的方法
【专利摘要】本发明公开了一种利用高效液相色谱检测食用油中苯并(a)芘的方法，该方法包括：1)将食用油、四氢呋喃和乙腈混合形成食用油溶液；2)将食用油溶液通过有机滤膜过滤，取滤液以制得检测样溶液；3)将检测样溶液通过高效液相色谱仪进行检测；其中，流动相为乙腈水溶液，色谱柱的温度为28?32℃，检测器为荧光检测器。该方法具有操作简单、检测时间短、回收率高和灵敏度高特点。
【专利说明】
利用高效液相色谱检测食用油中苯并(a)芘的方法
技术领域
[0001]本发明涉及食用油中苯并(a)芘的检测方法，具体地，涉及一种利用高效液相色谱检测食用油中苯并(a)芘的方法。
【背景技术】
[0002]苯并芘又称苯并(α)芘，是一种常见的高活性间接致癌物和突变原，3，4_苯并芘释放到大气中以后，总是和大气中各种类型微粒所形成的气溶胶结合在一起，在8微米以下的可吸入尘粒中，吸入肺部的比率较高，经呼吸道吸入肺部，进入肺泡甚至血液，导致肺癌和心血管疾病。劣质食用油常常含有苯并芘，因此检测食用油中苯并(a)芘十分重要。
[0003]目前，主要检测食用油中苯并(a)芘的方法为国标GB/T22509-2008规定的《动植物油脂苯并(a)芘的测定反向高效液相色谱法》，具体步骤为:将样品经溶剂溶解，通过氧化铝柱吸附，用洗脱试剂洗脱苯并(a)芘，用高效液相色谱分离，荧光检测器检测。主要工艺条件如下:称取0.4g样品，加入2mL石油醚溶解。向层析柱中加入一般高度石油醚，22g氧化铝，30mm高无水硫酸钠，打开层析柱旋塞使石油醚高度至硫酸钠顶部，关闭旋塞。向层析柱中移入样品，并加入80mL石油醚洗脱，流速为lmL/min，弃去前20mL后用圆底烧瓶收集洗脱液。将洗脱液置于65°C水浴旋转蒸发至0.5-1.0mL，转移至一已知质量的玻璃样品瓶中，于35°C水浴蒸发，用氮气吹至近干，称量并计算样品瓶内残渣质量，注入10yL四氢呋喃混合液，涡旋溶解，待测。上述方法虽然能够检测到食用油中苯并(a)芘，但是仍然存在一系列的缺陷:样品的前处理繁琐，不适应对大批量样本的检测，且回收率和测定结果不稳定。
【发明内容】
[0004]本发明的目的是提供一种利用高效液相色谱检测食用油中苯并(a)芘的方法，该方法具有操作简单、检测时间短、回收率高和灵敏度高特点。
[0005]为了实现上述目的，本发明提供了一种利用高效液相色谱检测食用油中苯并(a)芘的方法，该方法包括:
[0006]I)将食用油、四氢呋喃和乙腈混合形成食用油溶液；
[0007]2)将食用油溶液通过有机滤膜过滤，取滤液以制得检测样溶液；
[0008]3)将检测样溶液通过高效液相色谱仪进行检测；
[0009]其中，流动相为乙腈水溶液，色谱柱的温度为28_32°C，检测器为荧光检测器。
[0010]优选地，在步骤3)中，进样量为8-12yL，流速为0.8-1.2mL/min。
[0011 ]优选地，在步骤3)中，在流动相中，乙腈与水的体积比为85-90: 10-15。
[0012]优选地，在步骤I)中，相对于2.5g的食用油，四氢呋喃的用量为4-6mL，乙腈的用量为1.5-3.5mL。
[0013]优选地，在步骤2)中，有机滤膜中的过滤孔的直径为0.3-0.6μπι。
[0014]优选地，在步骤3)中，色谱柱为Agilent公司牌号TC-C18的色谱柱。
[0015]优选地，在步骤3)中，色谱柱的尺寸为250_X4.6mm。
[0016]优选地，在步骤3)中，高效液相色谱仪为日本岛津公司牌号LC-20A的高效液相色谱仪。
[0017]优选地，在步骤3)中，荧光检测器至少满足以下条件:激发波长为380-390nm，发射波长为400-410nmo
[0018]通过上述技术方案，本发明通过对现有技术中国标GB/T 22509-2008中的检测方法进行改进，使得该方法能够适应对大批量样本的检测、操作简单、检测时间短、回收率、测定结果稳定且灵敏度高。
[0019]本发明的其他特征和优点将在随后的【具体实施方式】部分予以详细说明。
【具体实施方式】
[0020]以下对本发明的【具体实施方式】进行详细说明。应当理解的是，此处所描述的【具体实施方式】仅用于说明和解释本发明，并不用于限制本发明。
[0021]本发明提供了一种利用高效液相色谱检测食用油中苯并(a)芘的方法，该方法包括:
[0022]I)将食用油、四氢呋喃和乙腈混合形成食用油溶液；
[0023]2)将食用油溶液通过有机滤膜过滤，取滤液以制得检测样溶液；
[0024]3)将检测样溶液通过高效液相色谱仪进行检测；
[0025]其中，流动相为乙腈水溶液，色谱柱的温度为28_32°C，检测器为荧光检测器。
[0026]在本发明中，进样量以及流速均可以在宽的范围内选择，但是为使得该检测方法具有有优异的检测限和回收率，优选地，在步骤3)中，进样量为8-12yL，流速为0.8-1.2mL/
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[0027]在本发明中，流动相的组分含量可以在宽的范围内选择，但是为使得该检测方法具有有优异的检测限和回收率，优选地，在步骤3)中，在流动相中，乙腈与水的体积比为85-90:10-15。
[0028]在本发明的步骤I)中，食用油溶液的组分含量可以在宽的范围内选择，但是为使得该检测方法具有有优异的检测限和回收率，优选地，在步骤I)中，相对于2.5g的食用油，四氢呋喃的用量为4_6mL，乙腈的用量为1.5-3.5mL。
[0029]在本发明的步骤2)中，有机滤膜中的过滤孔的直径可以在宽的范围内选择，但是为使得该检测方法具有有优异的检测限和回收率，优选地，在步骤2)中，有机滤膜中的过滤孔的直径为0.3-0.6μπι。
[0030]在本发明的步骤3)中，色谱柱的具体种类可以在宽的范围内选择，但是为使得该检测方法具有有优异的检测限和回收率，优选地，在步骤3)中，色谱柱为Agilent公司牌号TC-C18的色谱柱。
[0031]在本发明的步骤3)中，色谱柱的尺寸可以在宽的范围内选择，但是为使得该检测方法具有有优异的检测限和回收率，优选地，在步骤3)中，色谱柱的尺寸为250mmX4.6mm。
[0032]在本发明的步骤3)中，高效液相色谱仪的具体种类可以在宽的范围内选择，但是为使得该检测方法具有有优异的检测限和回收率，优选地，在步骤3)中，高效液相色谱仪为日本岛津公司牌号LC-20A的高效液相色谱仪。
[0033]在本发明的步骤3)中，荧光检测器的检测条件可以在宽的范围内选择，但是为使得该检测方法具有有优异的检测限和回收率，优选地，在步骤3)中，荧光检测器至少满足以下条件:激发波长为380-390nm，发射波长为400-410nmo
[0034]以下将通过实施例对本发明进行详细描述。
[0035]实施例1
[0036]I)将食用油、四氢呋喃和乙腈按照2.5g:5mL:2.5mL的配比混合形成食用油溶液；
[0037]2)将食用油溶液通过有机滤膜(过滤孔的直径为0.4μπι)过滤，取滤液以制得检测样溶液；
[0038]3)将检测样溶液通过日本岛津公司牌号LC-20A的高效液相色谱仪进行检测；其中，流动相为乙腈水溶液(乙腈与水的体积比为8 8:12 )，色谱柱的温度为3 O °C，检测器为荧光检测器(激发波长为385nm，发射波长为405nm);色谱柱为Agilent公司牌号TC-C18的色谱柱，尺寸为250_X4.6mm;进样量为10yL，流速为lmL/min。
[0039]实施例2
[0040]I)将食用油、四氢呋喃和乙腈按照2.5g:4mL:l.5mL的配比混合形成食用油溶液；
[0041]2)将食用油溶液通过有机滤膜(过滤孔的直径为0.3μπι)过滤，取滤液以制得检测样溶液；
[0042]3)将检测样溶液通过日本岛津公司牌号LC-20A的高效液相色谱仪进行检测；其中，流动相为乙腈水溶液(乙腈与水的体积比为8 5:10 )，色谱柱的温度为2 8 °C，检测器为荧光检测器(激发波长为380nm，发射波长为400nm);色谱柱为Agilent公司牌号TC-C18的色谱柱，尺寸为250mm X 4.6mm ；进样量为8yL，流速为0.8mL/min。
[0043]实施例3
[0044]I)将食用油、四氢呋喃和乙腈按照2.5g:6mL:3.5mL的配比混合形成食用油溶液；
[0045]2)将食用油溶液通过有机滤膜(过滤孔的直径为0.6μπι)过滤，取滤液以制得检测样溶液；
[0046]3)将检测样溶液通过日本岛津公司牌号LC-20A的高效液相色谱仪进行检测；其中，流动相为乙腈水溶液(乙腈与水的体积比为9 0: 15 )，色谱柱的温度为3 2 °C，检测器为荧光检测器(激发波长为390nm，发射波长为410nm);色谱柱为Agilent公司牌号TC-C18的色谱柱，尺寸为250mm X 4.6mm ；进样量为12yL，流速为1.2mL/min。
[0047]在上述实施例1-3中，检测结果为:苯并(a)芘的含量为Omg/kg，回收率为95-96%，检测限为2yg/kg。
[0048]对比例I
[0049]按照国标GB/T 22509-2008规定的《动植物油脂苯并(a)芘的测定反向高效液相色谱法》对上述食用油中的苯并(a)芘进行检测，结果为:苯并(a)芘的含量为Omg/kg，回收率为 94.7%0
[0050]以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于上述实施方式中的具体细节，在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，这些简单变型均属于本发明的保护范围。
[0051]另外需要说明的是，在上述【具体实施方式】中所描述的各个具体技术特征，在不矛盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合，为了避免不必要的重复，本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。
[0052]此外，本发明的各种不同的实施方式之间也可以进行任意组合，只要其不违背本发明的思想，其同样应当视为本发明所公开的内容。
【主权项】
1.一种利用高效液相色谱检测食用油中苯并(a)芘的方法，其特征在于，所述方法包括: 1)将食用油、四氢呋喃和乙腈混合形成食用油溶液； 2)将所述食用油溶液通过有机滤膜过滤，取滤液以制得检测样溶液； 3)将所述检测样溶液通过高效液相色谱仪进行检测； 其中，流动相为乙腈水溶液，色谱柱的温度为28-32°C，检测器为荧光检测器。2.根据权利要求1所述的方法，其中，在步骤3)中，进样量为8-12yL，流速为0.8-1.2mL/mino3.根据权利要求2所述的方法，其中，在步骤3)中，在所述流动相中，乙腈与水的体积比为85-90:10-15。4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其中，在步骤I)中，相对于2.5g的食用油，所述四氢呋喃的用量为4_6mL，所述乙腈的用量为1.5-3.5mL。5.根据权利要求4所述的方法，其中，在步骤2)中，所述有机滤膜中的过滤孔的直径为0.3-0.6μπι06.根据权利要求4所述的方法，其中，在步骤3)中，色谱柱为Agilent公司牌号TC-C18的色谱柱。7.根据权利要求6所述的方法，其中，在步骤3)中，所述色谱柱的尺寸为250_X 4.6_。8.根据权利要求4所述的方法，其中，在步骤3)中，所述高效液相色谱仪为日本岛津公司牌号LC-20A的高效液相色谱仪。9.根据权利要求4所述的方法，其中，在步骤3)中，所述荧光检测器至少满足以下条件:激发波长为380-390nm，发射波长为400-410nmo
【文档编号】G01N30/06GK105866288SQ201610303625
【公开日】2016年8月17日
【申请日】2016年5月10日
【发明人】项威, 宋满星, 刘卫军, 孙扬, 张滔
【申请人】芜湖雨耕山食品检测有限公司