一种天然番茄红素的鉴别方法
【专利摘要】本发明公开了一种天然番茄红素的鉴别方法，其在番茄红素样品中加入抗氧化剂，然后有机溶剂溶解，再用流动相稀释，得到供试品溶液；采用液相色谱法检测供试品溶液，当6～8min有三个色谱峰时，则为天然番茄红素。本方法对不同来源的番茄红素进行检测，结果特征峰均较明显，说明本发明方法特异性高。本发明在样品处理时采用了抗氧化剂，对生育酚起到保护作用，确保检测的准确性；本方法适合不同来源的番茄红素的鉴别，操作简便，分析快速准确，鉴别方法容易、判断指标清晰明确。
【专利说明】
一种天然番茄红素的鉴别方法
技术领域
[0001]本发明属于天然产物鉴别技术，尤其是一种天然番茄红素的鉴别方法。
【背景技术】
[0002]天然番茄红素(Lycopene)是一种类胡萝卜素，广泛存在于番茄、西瓜、胡萝卜等植物中，其中，尤以番茄中的含量最为丰富。近年来的研究表明，天然番茄红素具有抗氧化、抗癌、降血脂、提高免疫力等多种生理活性，因而被广泛应用于保健食品、医药、化妆品等行业。目前市场上常见的番茄红素生产方法有3种:以天然生物资源为原料提取的天然番茄红素、采用化学法合成的合成番茄红素以及采用微生物发酵制备的发酵番茄红素。从分子结构来看，三者并没有显著差异，但在保健功能及安全性上却有不同的效果。化学合成法生产的番茄红素由于有化学试剂及中间产物残留，具有一定的毒性和致癌性。发酵番茄红素存在辐射残留及产品质量不稳定等问题。天然番茄红素具有天然、安全、无污染等特点，克服了合成番茄红素和发酵番茄红素的缺点，在市场上得到了广泛的认可。目前，市场上各类产品鱼龙混杂，很难判断其原料来源及生产工艺，扰乱了市场秩序，不利于番茄红素行业的健康发展。
[0003]有关天然番茄红素、合成番茄红素、发酵番茄红素鉴别的报道主要有:《食品科学》2007，28(9):462-466论文《番茄红素人工合成品与天然产物的鉴定》中同时采用C18-HPLC和C30-HPLC进行检测，天然产物中存在前体八氢番茄红素和后体β-胡萝卜素，并同时存在一定比例的顺式异构体，合成品中不存在上述的色谱峰。该鉴别采用两种不同的色谱柱，通过多种成分的差异进行鉴别，鉴别方法比较繁琐，且由于前处理、检测时间长，容易发生其他氧化反应而导致误判。
【发明内容】
[0004]本发明要解决的技术问题是提供一种快速、准确的天然番茄红素的鉴别方法。
[0005]为解决上述技术问题，本发明所采取的技术方案是:在番茄红素样品中加入抗氧化剂，然后有机溶剂溶解，再用流动相稀释，得到供试品溶液;采用液相色谱法检测供试品溶液，当6?Smin有三个色谱峰时，则为天然番茄红素。
[0006]本发明所述抗氧化剂为乙氧基喹啉。所述抗氧化剂加入量为番茄红素样品重量的
I%?10%O
[0007]本发明所述有机溶剂为二氯甲烷。
[0008]本发明所述液相色谱法的检测条件为:采用十八烷基硅烷键合硅胶柱为固定相；以乙腈:甲醇:二氯甲烷:正己烷为流动相进行洗脱;流速1.5mL/min；检测波长O?16min:472nm; 16?20.3min: 350nm ； 20.3?25min: 288nm ；色谱柱温度为40 °C。
[0009]采用上述技术方案所产生的有益效果在于:本发明对不同来源的番茄红素进行检测，结果特征峰均较明显，说明本发明方法特异性高。本发明在样品处理时采用了抗氧化剂，对生育酚起到保护作用，确保检测的准确性;本发明适合不同来源的番茄红素的鉴别， 操作简便，分析快速准确，鉴别方法容易、判断指标清晰明确。
【附图说明】
[0010]下面结合附图和【具体实施方式】对本发明作进一步详细的说明。
[0011]图1是天然番茄红素的HPLC色谱图；
图2是合成番茄红素的HPLC色谱图；
图3是发酵番茄红素的HPLC色谱图。
【具体实施方式】
[0012]本天然番茄红素的鉴别方法采用下述方法工艺:
(I)建立番茄红素中番茄红素和生育酚的分析方法:
(a)供试品溶液的制备:分别精密称取天然番茄红素、合成番茄红素、发酵番茄红素适量，加入抗氧化剂，抗氧化剂采用乙氧基喹啉，抗氧化剂的质量为称样量的1%?10%;加入二氯甲烷超声溶解，冷却后定容，按每克称样量定容至10ml进行定容;再用流动相稀释10倍，即为供试品溶液。
[0013](b)色谱条件:采用十八烷基硅烷键合硅胶柱(250X4.6 mm，5ym)为固定相；以乙腈:甲醇:二氯甲烷:正己烷=475/475/25/25(V/V/V/V)为流动相进行洗脱;流速1.5mL/min;检测波长:O?16min: 472nm ； 16?20.3min: 350nm ； 20.3?25min: 288nm ；色谱柱温度为40 °C。
[0014](c)测定:分别精密吸取天然番茄红素供试品溶液、合成番茄红素供试品溶液、发酵番茄红素供试品溶液，注入液相色谱仪，用液相色谱法测定，找出6?Smin色谱峰的异同。
[0015](2)确定色谱峰的差异为生育酚的个数的差异:图1、2、3分别为天然番茄红素、合成番茄红素和发酵番茄红素的HPLC色谱图；由图可见，天然番茄红素在6?8min有三个生育酚的色谱峰(α、β+γ、3)，合成番茄红素和发酵番茄红素在6?Smin只有一个生育酚的色谱峰(β+γ)。
[0016](3)结果判断:由于天然番茄红素在6?8 min有三个生育酚的色谱峰(α、β+γ、δ)，而合成番茄红素和发酵番茄红素只有一个生育酚的色谱峰(β+γ)，那么即可根据这一色谱峰特征判断未知来源的番茄红素是否属于天然番茄红素。
[0017]实施例1:本天然番茄红素的鉴别方法的具体工艺如下所述。
[0018](I)分别称取天然番茄红素、合成番茄红素Ig于10mL容量瓶中，加入0.05g乙氧基喹啉，加30mL 二氯甲烷，超声5min，冷却后二氯甲烷定容，再用流动相稀释1倍成供试品溶液。
[0019](2)分别精密吸取天然番茄红素供试品溶液、合成番茄红素供试品溶液10yL，注入液相色谱仪，用液相色谱法测定。
[0020](3)谱图中，合成番茄红素在6.7min有一个生育酚的色谱峰；天然番茄红素在
6.2min、6.7min、7.6min有三个生育酚的色谱峰。
[0021]实施例2:本天然番茄红素的鉴别方法的具体工艺如下所述。
[0022](I)分别称取天然番茄红素、发酵番茄红素Ig于10mL容量瓶中，加入0.1g乙氧基喹啉，加30mL 二氯甲烷，超声5min，冷却后二氯甲烷定容，再用流动相稀释10倍即为供试品溶液。
[0023](2)分别精密吸取天然番茄红素供试品溶液、发酵番茄红素供试品溶液10yL，注入液相色谱仪，用液相色谱法测定。
[0024](3)谱图中，发酵番茄红素在6.7min有一个生育酚的色谱峰；天然番茄红素在
6.2min、6.7min、7.6min有三个生育酚的色谱峰。
[0025]实施例3:本天然番茄红素的鉴别方法的具体工艺如下所述。
[0026](I)分别称取天然番茄红素、合成番茄红素、发酵番茄红素Ig于10mL容量瓶中，加入0.0lg乙氧基喹啉，加30mL 二氯甲烧，超声5min，冷却后二氯甲烧定容，再用流动相稀释10倍即为供试品溶液。
[0027](2)分别精密吸取天然番茄红素供试品溶液、合成番茄红素供试品溶液、发酵番茄红素供试品溶液1yL，注入液相色谱仪，用液相色谱法测定。
[0028](3)谱图中，合成番茄红素、发酵番茄红素在6.7min有一个生育酚的色谱峰;天然番茄红素在6.2min、6.7min、7.6min有三个生育酚的色谱峰。
【主权项】
1.一种天然番茄红素的鉴别方法，其特征在于:在番茄红素样品中加入抗氧化剂，然后有机溶剂溶解，再用流动相稀释，得到供试品溶液;采用液相色谱法检测供试品溶液，当6?8min有三个色谱峰时，则为天然番茄红素。2.根据权利要求1所述的一种天然番茄红素的鉴别方法，其特征在于:所述抗氧化剂为乙氧基喹啉。3.根据权利要求1所述的一种天然番茄红素的鉴别方法，其特征在于:所述抗氧化剂加入量为番茄红素样品重量的1%?10%。4.根据权利要求1所述的一种天然番茄红素的鉴别方法，其特征在于:所述有机溶剂为二氯甲烷。5.根据权利要求1一 4任意一项所述的一种天然番茄红素的鉴别方法，其特征在于，所述液相色谱法的检测条件为:采用十八烷基硅烷键合硅胶柱为固定相；以乙腈:甲醇:二氯甲烧:正己烧为流动相进行洗脱;流速1.5mL/min;检测波长O?16min:472nm; 16?20.3min:350nm ； 20.3?25min: 288nm ；色谱柱温度为40 °C。
【文档编号】G01N30/86GK106093255SQ201610731038
【公开日】2016年11月9日
【申请日】2016年8月26日
【发明人】周丽, 杨清山, 刘登帅, 吉桂珍, 张晓芳
【申请人】晨光生物科技集团股份有限公司