一种检测单硝酸异山梨酯中乙酸乙酯残留量的方法
【专利摘要】本发明提供了一种检测单硝酸异山梨酯中乙酸乙酯残留量的方法，包括：取单硝酸异山梨酯待测品与水混合，制得供试品溶液；取乙酸乙酯对照品与水混合，制得对照品溶液；按照气相色谱法，使用以氰丙基苯基?二甲基聚硅氧烷为固定液的色谱柱，将所述供试品溶液和对照品溶液分别注入气相色谱仪，测定所述供试品溶液中乙酸乙酯的残留量。本发明能够快速检测单硝酸异山梨酯原料中乙酸乙酯的残留量，符合对单硝酸异山梨酯原料中乙酸乙酯残留的检测要求，且数据结果稳定，检测精准度高。
【专利说明】
一种检测单硝酸异山梨酯中乙酸乙酯残留量的方法
技术领域
[0001] 本发明涉及药物分析技术领域，具体涉及一种检测单硝酸异山梨酯原料中乙酸乙 酯溶剂残留量的方法。
【背景技术】
[0002] 单硝酸异山梨酯（Isosorbide Mononitrate)，通用名1,4:3,6-二脱水-D-山梨醇-5_硝酸酯，是白色结晶性粉末，本品在甲醇或丙酮中易溶，在三氯甲烷或水中溶解，在己烷 中几乎不溶，是硝酸异山梨酯的活性代谢产物。单硝酸异山梨酯是由德国Boehringer Mannheim Gmb.h公司研制的，于1981年上市，用于治疗冠心病和心绞痛，经多年的临床使 用，其疗效确切。该药的主要作用机制为:通过扩张静脉容量血管和外周阻力血管(特别是 增加静脉血容量），减少回流量，降低心脏前后负荷，减少心肌耗氧量；同时，还可以通过促 进心肌血流的重新分布，改善缺血区的血流供应，发挥抗心肌缺血作用；与硝酸异山梨酯相 比，该药具有作用维持时间较长，口服吸收后分布迅速等优点，是目前为止发现的最为理想 的硝酸酯类药物。
[0003] 单硝酸异山梨酯在制备时，在硝化过程结束后可能会使用乙酸乙酯作为提取剂， 最终在单硝酸异山梨酯原料中就可能会有乙酸乙酯的残留。由于单硝酸异山梨酯可制成注 射剂直接进入人体，因此，对该原料进行溶剂残留检查是十分必要的。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的是克服现有技术中存在的缺陷，提供一种操作较简便，对检测目标 物干扰少，数据结果稳定，检测精准度高的检测单硝酸异山梨酯原料中乙酸乙酯溶剂残留 量的方法。
[0005] 实现本发明目的技术方案如下：
[0006] -种检测单硝酸异山梨酯中乙酸乙酯残留量的方法，包括：
[0007] 取单硝酸异山梨酯待测品与水混合，制得供试品溶液；
[0008] 取乙酸乙酯对照品与水混合，制得对照品溶液；
[0009] 按照气相色谱法，使用以氰丙基苯基-二甲基聚硅氧烷为固定液的色谱柱，将所述 供试品溶液和对照品溶液分别注入气相色谱仪，测定所述供试品溶液中乙酸乙酯的残留 量。
[0010] 优选地，所述固定液即所述氰丙基苯基-二甲基聚硅氧烷的组成为6wt%氰丙基苯 基-94wt %二甲基聚硅氧烷;进一步优选地，所述色谱柱中固定液膜厚度为0.25μηι。
[0011] 优选地，所述色谱柱为毛细管柱。
[0012]在本发明实施例中采用色谱柱:CP-HP-5(毛细管柱）；规格:30m X 0.32mm。由安捷 伦公司提供。
[0013] 优选地，所用载气为氮气；优选地，载气流速为1.0-5 . OmL/min，进一步优选为 1·0mL/min〇
[0014]优选地，进样模式:进样量UiL;分流模式1:5-15,进一步优选为1:10。
[0015]优选地，所述气相色谱检测方法为外标法，以峰面积或峰高计算样品中乙酸乙酯 残留量。
[0016] 优选地，所用检测器为氢火焰离子化检测器(FID)。
[0017] 优选地，所述气相色谱法采用岛津GC-2014C。
[0018] 优选地，所述色谱柱柱温为35-45 °C，进一步优选为40 °C。
[0019] 优选地，所述检测器温度为225-275°C，进样口温度为180-220°C ;进一步优选地， 所述检测器温度为250°C，进样口温度为200°C。
[0020] 优选地，顶空瓶平衡温度75-85 °C，平衡时间为25-35分钟;进一步优选顶空瓶平衡 温度为80 °C，平衡时间为30分钟。
[0021 ]优选地，进样方式为顶空进样。
[0022]上述检测单硝酸异山梨酯中乙酸乙酯残留量的方法，具体包括以下步骤：
[0023] 1)精密称取单硝酸异山梨酯0.2g，置顶空瓶中，精密加水2mL使其溶解，密封，作为 供试品溶液；
[0024] 2)精密称取乙酸乙酯，加水配制成0.05mg/mL的溶液，精密量取2mL，置顶空瓶中， 密封，作为对照品溶液；
[0025] 3)取上述供试品溶液和对照品溶液分别顶空进样，注入气相色谱仪，记录色谱图， 按外标法以峰面积或峰高计算供试品溶液中的乙酸乙酯残留量。
[0026]本发明具有以下优点：
[0027]本发明对气相色谱条件进行了改进，具体对色谱柱、固定液(相）、流动相、温度及 升温方式、气流速度等一系列参数进行优化，能够快速检测单硝酸异山梨酯原料中乙酸乙 酯的残留量，符合对单硝酸异山梨酯原料中乙酸乙酯残留的检测要求，且数据结果稳定，检 测精准度高。
[0028]本发明采用水为溶剂，减小了其他物质的干扰，针对性地提高了乙酸乙酯的检测 精准度，且方便操作，污染小本发明选用外标法的检测速度更快。2010年版中国药典二部附 录ΥΠΙΡ的规定，乙酸乙酯的最大残留限度为0.5%。由于单硝酸异山梨酯作为注射剂原料，因 此，将其限度标准定为0.05%。本发明方法可达到该限度要求。
【附图说明】
[0029]图1为实施例1供试品20130201乙酸乙酯残留气相色谱图；
[0030]图2为实施例1供试品20130202乙酸乙酯残留气相色谱图；
[0031]图3为实施例1供试品20130203乙酸乙酯残留气相色谱图；
[0032]图4为实施例1对照品乙酸乙酯残留气相色谱图；
[0033]图5为实施例1供试品乙酸乙酯残留气相色谱图。
【具体实施方式】
[0034]以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。实施例中未注明具体 技术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件，或者按照产品说明书进行。所用 试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可通过正规渠道商购买得到的常规产品。
[0035]其中，单硝酸异山梨酯购自山东科源制药有限公司，样品批号：20130201、 20130202、20130203。
[0036] 所用气相色谱仪采用岛津GC-2014C，检测器为氢火焰离子化检测器(FID)。
[0037] 所用色谱柱:CP-HP-5(毛细管柱）；规格:30m X 0.32mm;由安捷伦公司提供。
[0038] 实施例1
[0039]检测单硝酸异山梨酯中乙酸乙酯残留量的方法，具体步骤如下：
[0040] 1)精密称取单硝酸异山梨酯0.2g，置顶空瓶中，精密加水2mL使其溶解，密封，作为 供试品溶液；
[0041 ] 2)精密称取乙酸乙酯，加水配制成0.05mg/mL的溶液，精密量取2mL，置顶空瓶中， 密封，作为对照品溶液；
[0042] 3)按照残留溶剂测定法（中国药典2010年版附录VIP第一法），取供试品溶液和对 照品溶液分别顶空进样，注入气相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算供试品溶液 中的乙酸乙酯残留量；
[0043]包括以下检测条件：
[0044]色谱柱固定液:6 % wt氰丙基苯基-94wt %二甲基聚硅氧烷，色谱柱中固定液膜厚 0.25um〇
[0045] (1)温度
[0046]柱温为 40 Γ;
[0047] 进样口温度200°C ;检测器温度250°C ;
[0048] 顶空瓶平衡温度为80 °C，平衡时间为30分钟；
[0049] (2)气流速率
[0050]载气：氮气，3.0mL/min;
[00511 (3)进样模式:进样量lyL，分流比：1:10;
[0052] (4)进样方式:顶空进样。
[0053] 检测结果见下表1和图1-4。
[0054]表 1
[0056] 结论：按照上述方法对连续生产的3批(样品批号：20130201、20130202、20130203) 单硝酸异山梨酯产品进行检测，其乙酸乙酯含量均小于0.05%，符合要求。
[0057] 对比例1
[0058] 与实施例1的区别仅在于:色谱条件：
[0059] 氮气为载气，流速为20mL/min;空气流速为300mL/min;氢气流速为30mL/min;进样 器温度：180°C;检测器温度：180°C，进样量为2yL。检测结果见图5。经检验，其存在出峰过 快，并与溶剂水，可能存在连峰的情况。由图5可知，该方法对乙酸乙酯检测效果较差，检测 结果不稳定。而本发明方法检测结果均稳定可靠。
[0060] 综上所述，本发明提供的方法测定结果准确、可靠，适用于单硝酸异山梨酯原料中 乙酸乙酯残留量检测。
[0061] 虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在 本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因 此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。
【主权项】
1. 一种检测单硝酸异山梨酯中乙酸乙酯残留量的方法，其特征在于，包括： 取单硝酸异山梨酯待测品与水混合，制得供试品溶液； 取乙酸乙酯对照品与水混合，制得对照品溶液； 按照气相色谱法，使用以氰丙基苯基-二甲基聚硅氧烷为固定液的色谱柱，将所述供试 品溶液和对照品溶液分别注入气相色谱仪，测定所述供试品溶液中乙酸乙酯的残留量。2. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述固定液为6wt %氰丙基苯基-94wt %二 甲基聚硅氧烷;优选地，所述色谱柱中固定液膜厚度为0.25μπι。3. 根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述色谱柱为毛细管柱;优选为CP-HP-5色谱柱。4. 根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所用载气为氮气;优选地，载气流速为 1 .〇-5.0mL/min，进一步优选为 1 · OmL/min〇5. 根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所用检测器为氢火焰离子化检测器。6. 根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，进样量ΙμΜ分流模式1:5-15，优选为1: 10。7. 根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于， 所述色谱柱柱温为35-45 °C ;和/或， 所述检测器温度为225-275 °C，进样口温度为180-220 °C ;和/或， 顶空瓶平衡温度75-85 °C，平衡时间为25-35分钟。8. 根据权利要求7所述的方法，其特征在于， 所述色谱柱柱温为40°C ;和/或， 所述检测器温度为250°C，进样口温度为200°C ;和/或， 顶空瓶平衡温度为80°C，平衡时间为30分钟。9. 根据权利要求1-8任一项所述的方法，其特征在于，包括以下步骤： 1) 精密称取单硝酸异山梨酯〇.2g，置顶空瓶中，精密加水2mL使其溶解，密封，作为供试 品溶液； 2) 精密称取乙酸乙酯，加水配制成0.05mg/mL的溶液，精密量取2mL，置顶空瓶中，密封， 作为对照品溶液； 3) 取所述供试品溶液和对照品溶液分别顶空进样，注入气相色谱仪，记录色谱图，按外 标法以峰面积或峰高计算供试品溶液中的乙酸乙酯残留量。
【文档编号】G01N30/02GK106093247SQ201610693668
【公开日】2016年11月9日
【申请日】2016年8月19日 公开号201610693668.8, CN 106093247 A, CN 106093247A, CN 201610693668, CN-A-106093247, CN106093247 A, CN106093247A, CN201610693668, CN201610693668.8
【发明人】张爱文, 袁媛, 余宏燕
【申请人】蚌埠丰原涂山制药有限公司