用于快速检定适用抗蛇毒血清的蛇毒试片装置的制造方法
【技术领域】
[0001] 本实用新型关于一种蛇毒检验试片，特别是指一种能快速且有效地检测出人体血 清中是否含有特定蛇毒的快速检验试片，供第一线医护人员选用适当抗蛇毒血清加以治 疗。
【背景技术】
[0002] 目前，毒蛇咬伤发生率及死亡率最高的地区，仍在于南亚、东南亚等热带地区，在 该些地区毒蛇咬伤往往容易造成死亡及失能，先前的医疗观念主张遭遇毒蛇咬伤的患者， 医师会尝试要求该患者去辨识是哪一只毒蛇所咬伤，或希望病患或家属将毒蛇带来医院辨 识，指认正确的毒蛇种类。但毒蛇的外貌相当多变复杂，若要求病人活捉及打死毒蛇则很有 可能造成旁人和患者的生命危险；再加上依照患者主观描述毒蛇的外貌仍有判断错误的风 险，进而导致使用错误的治疗方法。
[0003] 台湾眼镜蛇（Najaatra)属于亚洲种，是重要的毒蛇之一。根据统计，眼镜蛇 咬伤事件占全台湾毒蛇咬伤事件的10%。在中部地区，被眼镜蛇的咬伤频率与赤尾鲐 (Trimeresurusstejnegeri)或龟壳花（Protobothropsmucrosquamatus)的咬伤步页率相 当。受到眼镜蛇咬伤时，临床症状主要出现局部组织红肿、发炎反应后的组织坏死及少见的 神经毒性等症状。由于眼镜蛇咬伤初期，常因明显的组织红、肿及缺少典型的神经症状，因 此常被误认为是赤尾鲐、龟壳花等毒蛇咬伤，而延迟给予正确且专一的抗血清的时机，延误 诊断的结果，造成病人肢体局部伤口皮肤严重的坏死、溃烂，严重者需要做外科清创及皮肤 移植手术，而毒蛇咬伤的适当处置安排，仰赖于医师的临床诊断经验。再者，由于许多病患 可能是被非毒蛇咬伤，然而在缺乏明确的症状出现之前，需要观察至少24小时，这样的现 象不仅浪费医疗资源也耗费相当多的人力成本。而真正被毒蛇咬伤的患者，却因为早期诊 断工具的缺乏，无法及时判别毒蛇种类及蛇咬伤的严重性，导致未能及时使用抗蛇毒血清 而造成更严重的临床症状，甚至产生不可逆的组织损伤。
[0004] 根据林奈氏生物分类法（Linnaeantaxonomy)，眼镜蛇属（Naja)分类在蝙蝠蛇科 (Elapidae)下，目前约有20多个物种已确认并归类在眼镜蛇属。此属的成员主要分布于 中东、东南亚、非洲、印度大陆等地。过去研究发现，眼镜蛇属的主要蛇毒成分与其他属的蛇 毒组成具有相似的蛇毒蛋白（cobrotoxins)，差别在于浓度与含量的不同（Chang,etal.， 2000;Joubert&Taljaard, 1980;Wei,etal. , 2003) ；NPAV(NeuroPolyvalentSnake Antivenom)抗蛇毒血清对于大部分眼镜蛇属的蛇毒具有不同程度的中和效果（Leonget al.，2012)，即使同属于蝙蝠蛇科的不同蛇种，其蛇毒组成成份虽有差异，却仍具有相似之 处。
[0005]同样地，蛇毒的差异性极其微细且种类繁多，蛇毒检测的应用上仍存在难度需要 克服，例如：样本体积必须要多、要新鲜，取样必须接近伤口，其检测灵敏度亦较低，在临床 的使用上有许多的限制。 【实用新型内容】
[0006] 本实用新型的目的在于提供一种用于快速检定适用抗蛇毒血清的蛇毒试片装置， 在于提供紧急时刻，可以协助医护人员快速且正确的选用适当抗蛇毒血清加以治疗，于短 时间内进彳丁有效治疗。
[0007] 本实用新型提供一种用于快速检定适用抗蛇毒血清的蛇毒试片装置，包括：
[0008] -试卡本体，包括一内槽及与该内槽相对应接合的一基底层及一载体层，该载体 层上设置有相间隔的一检体垫片、一与该检体垫片相邻接的金标结合垫片、一吸收垫片及 一连接在该金标结合垫片与该吸收垫片之间的分析薄膜，该分析薄膜上依序形成相间隔的 一测试线区及一控制线区，该测试线区包括多个抗蛇毒血清测试线；以及多个植入单元，包 括一分布于该金标结合垫片的抗蛇毒金标抗体，及多个分别固定于该测试线区的与蛇毒蛋 白具有特异性结合的抗蛇毒抗体，及固定于该控制线区的与该抗蛇毒金标抗体结合的第二 抗体。
[0009] 其中该固定于该测试线区的抗蛇毒抗体由分别与抗同属的不同种蛇毒蛋白具有 特异性结合的抗体组成。
[0010] 其中该固定于该测试线区的抗蛇毒抗体进一步包括与抗不同属的蛇毒蛋白具有 特异性结合的抗体。
[0011] 其中该植入单元包含5-100ng/ml的抗蛇毒抗体。
[0012] 其中该分布于该金标结合垫片的抗蛇毒金标抗体包含由不同抗蛇种蛇毒的抗体 组成的抗体混和物。
[0013] 本实用新型具有的优点在于：
[0014] 本实用新型只需要将检体滴入该试卡本体的载体层的检体垫片上，利用侧流免疫 层析技术（lateral-flowimmunochromatographicassaytechnique,LFA)通过流体白然 的毛细作用，该检体往该金标结合垫片移动，并与该金标结合垫片内的抗蛇毒金标抗体相 互作用，再继续沿该分析薄膜移动至该测试线区与该控制线区，分别与该蛇毒蛋白具有特 异性结合的抗蛇毒抗体及该抗蛇毒金标抗体结合的第二抗体相互作用，产生红色指示线， 就能分别借由判读该控制线区是否呈色判读该检验试片是否有效，及借由判读该测试线区 呈色结果判读该检体是否含有蛇毒及其蛇种，借此，使本实用新型能快速且有效地检验出 生物检体中是否含有特定的蛇毒，以实时进行治疗。
[0015] 本实用新型的特点在于，该测试线区可能出现一道或多道的红色指示线，表示医 护人员可依照红色指示线，选用任一种抗蛇毒血清加以治疗，亦即通过本实用新型可以协 助第一线救护人员选用有效的抗蛇毒血清。
【附图说明】
[0016] 图1是一不完整的正视示意图，说明现有的一蛇毒快速检验试片一较佳实施例的 一试卡本体的一载体层的配置型式；
[0017]图2是一不完整的侧视示意图，说明该较佳实施例的试卡本体由一基底层与该载 体层相对应接合的情形；
[0018]图3是一蛇毒试片装置其较佳实施例的立体示意图；
[0019]图4是一侧视的使用示意图，说明将含有非眼镜蛇科蛇毒的检体滴加到该较佳实 施例的试卡本体的检体垫片上的情形；
[0020] 图5-侧视的使用示意图，说明将含有眼镜蛇科蛇毒的检体滴加到该较佳实施例 的试卡本体的检体垫片上的情形；
[0021] 图6是该蛇毒试片装置其较佳实施例的正视示意图；
[0022] 图7是一使用示意图，说明以该较佳实施例的试卡本体测试该检体后呈现二道红 色指示线时的显示结果。
[0023] 图中：
[0024] 10检体；
[0025] 100非眼镜蛇毒；
[0026]101眼镜蛇毒；
[0027]2蛇毒试片装置；
[0028] 3试卡本体；
[0029] 31基底层；
[0030] 32载体层；
[0031] 321检体垫片；
[0032] 322吸收垫片；
[0033] 323金标结合垫片；
[0034] 324分析薄膜；
[0035] 325测试线区；
[0036]3251测试线；
[0037]3252测试线；
[0038]3253测试线；
[0039]3254测试线；
[0040]326控制线区；
[0041]4植入单元；
[0042]41抗蛇毒金标抗体；
[0043]410金标抗体-眼镜蛇蛇毒蛋白结合体；
[0044]411兔抗Naja atra蛇毒抗体；
[0045]412奈米金颗粒；
[0046]42抗蛇毒抗体；
[0047]43抗蛇毒抗体；
[0048]44抗蛇毒抗体；
[0049]45抗蛇毒抗体；
[0050]46羊抗兔抗体；
[0051]43兔抗Naja atra抗体；
[0052]5卡匣；
[0053]51壳体；
[0054]511第一标记；
[0055]512第二标记；
[0056] 513第三标记；
[0057] 514第四标记；
[0058] 515第五标记；
[0059] 52加样区；
[0060] 53 判读窗口。
【具体实施方式】
[0061] 下面结合附图和具体实施例对本实用新型作进一步说明，以使本领域的技术人员 可以更好的理解本实用新型并能予以实施，但所举实施例不作为对本实用新型的限定。
[0062] 参阅图1、图3与图5,本实用新型用于快速检定适用抗蛇毒血清的蛇毒试片装置 2的较佳实施例是用以检测一生物检体10中的眼镜蛇毒101，在该实施例中是以该蛇毒试 片装置2侦测该生物检体10中的蛇毒，该蛇毒试片装置2包含一试卡本体3、一设置于该试 卡本体3的植入单元4,及一围绕该试卡本体3设置的卡匣5。
[0063] 参阅图1与图2,该试卡本体3包括相对应接合的一基底层（Backing) 31及一 载体层32,该载体层32具有相间隔设置的一检体垫片（Samplepad)321、一吸收垫片 (Absorbentpad) 322、一与该检体垫片321相邻接的金标结合垫片（Conjugatedrelease pad) 323,及一连接在该金标结合垫片323与该吸收垫片322之间的分析薄膜324,在该分 析薄膜324上并依序形成相间隔设置的一测试线区325及一控制线区326,在该测试区325 上依序形成一测试线3251、一测试线3252、一测试线3253及一测试线3254。
[0064] 其中，该检体垫片321、吸收垫片322及金标结合垫片323均是由玻璃纤维材质所 制成。且该分析薄膜324属于硝化纤维膜（cellulosenitratemembrane，简称为NC膜）。
[0065] 参阅图4与图5,该植入单元4包括多个分布在该试卡本体3的金标结合垫片323 内的抗蛇毒金标抗体41、多个固定在该试卡本体3的分析薄膜324的控制线区326,用以与 该等金标抗体41相结合呈色的第二抗体46、及多个分别固定在该分析薄膜324测试线区 325的测试线3251、测试线3252、测试线3253及测试线3254,用以与结合有蛇毒101的金 标抗体41相结合呈色的抗蛇毒抗体42、抗蛇毒抗体43、抗蛇毒抗体44及抗蛇毒抗体45。
[0066] 其中，该多个抗蛇毒金标抗体41实质上为兔抗Naja蛇毒（Rabbitanti-Naja IgG)的金标抗体，且是使用多个兔抗Naja蛇毒抗体411分别与一胶体金溶液中的多个奈 米金颗粒412相结合而制成。为了使呈色优化，并可推广应用至东南亚地区，通过试片上 奈米金颗粒与不同比例的兔抗蛇毒抗体混合如表1。该等第二抗体46实质上为羊抗兔抗 体（Goatanti-rabbitIgG)、该多个抗蛇毒抗体42实质上为兔抗Najasiamensis抗体 (Rabbitanti-NajasiamensisIgG)、该等多个蛇毒抗体43实质上为兔抗Najanaja抗体 (Rabbitanti-NajanajaIgG)、该多个抗蛇毒抗体44实质上为兔抗Najakao