alytical Chemists.1990(Official Methods of Analysis^iSiGermicidal and Detergent Sanitizing Action of Disinfectants 960.09 中，第138-140 页，卷 I.第15版.A0AC， Arlington，Va.)。对于相同的目的，欧洲人倾向于使用其它标准，如EN 1040、EN1656和EN 14885测试方法。所有这些标准经此引用并入本文至如同在本文中充分公开的程度。在本实 施例中，使用测试方法EN 1656。
[0082]根据修改的EN1656稀释中和法，将冷冻干燥的大肠杆菌(ATCC 11229)、金黄色葡 萄球菌(ATCC 6538)、乳房链球菌、铜绿假单胞菌、停乳链球菌和无乳链球菌水合，生长四天 并转移。随后将该细菌稀释以形成具有大约10 7cfu/mL的初始浓度的悬浮液。
[0083]灭菌脱脂乳在所有测试中取代EN 1656规程中的牛白蛋白作为干扰物质。将1毫升 牛奶和1毫升细菌悬浮液混合并令其在25°C下接触2分钟。随后向混合物中加入8毫升如下 表1I中所述的制剂，并令其在25°C下接触15秒。取出1毫升所得溶液并用9毫升pH 7.2的磷 酸盐缓冲液稀释，并随后进行四次连续稀释。来自各次稀释的样品一式两份铺板并加入琼 月旨。向9毫升中和溶液中加入1毫升先前的混合物并随后混合。对该溶液进行三次连续稀释， 并将各溶液的1毫升一式两份分配到培养皿中。另外，一式两份分配〇. 1毫升最稀溶液。向各 培养皿中加入大约15毫升无菌胰蛋白胨葡萄糖提取物琼脂，并在凝固时，将各个板在37°C 下培育24小时。对所有待测试样品重复进行该程序。
[0084] 为了对照，将IO7CfVmL细菌悬浮液稀释至IO4和IO3CfVmL的浓度。将一毫升 104cfu/mL稀释液和0.1毫升103cfu/mL稀释液(一式三份进行)分配到培养皿上并加入大约 15毫升胰蛋白胨葡萄糖提取物琼脂。当凝固时，将该板在37°C下培育24小时。该103cfu/mL 稀释液的一式三份铺板的平板细菌计数的平均值视为初始数字对照计数。
[0085]按照EN 1656测试方法对具有细菌群落25至250的板进行计数，结果表示为对数减 少。下表1I提供了EN 1656测试的结果和受试的制剂。Witconate八03是(：14-(：16€[-烯烃磺酸 盐(磺酸，C 14-C16-烷烃羟基和C14-C16-烯烃，钠(CAS#68439-57-6))。辛烷磺酸钠的CAS#为 142-31-4，~60(丨01花91-8的043#为68439-46-3。表11还提供了制剂8的刺激试验的结果。如 上所述测定刺激试验的H50、DI和L/D值。
[0086]表1I:含有羟基乙酸以及含有和不含有辛烷磺酸钠的制剂
[0088] 来自表1I的结果显示，包含羟基乙酸、醇乙氧基化物和辛烷磺酸钠的组合物可以 表现出在几种不同类型的细菌中造成超过4对数减少的抗微生物活性。此外，该结果表明， 抗微生物效力取决于阴离子型表面活性剂辛烷磺酸钠的存在。例如，制剂A-D，其包括辛烷 磺酸钠，均在所有类型的受试细菌中表现出至少4对数减少，而缺乏辛烷磺酸钠的制剂E和F 在几种类型的受试细菌中表现出显著较低的抗微生物活性，例如大约2-对数降低。此外，对 制剂A和D的比较表明，通过提高辛烷磺酸钠的浓度，抗微生物活性水平提高至最大功效，即 在所有类型的受试细菌中至少5对数减少。
[0089] 实施例2:具有不同浓度的辛烷磺酸钠的制剂的抗微生物活性
[0090] 在该实施例中，测试了不同浓度的辛烷磺酸钠的抗微生物效力。对该制剂施以如 上文实施例1中所述的EN 1656测试。结果显示在下表1II中。
[0091 ]表1II:含有羟基乙酸和不同浓度的辛烷磺酸钠的制剂
[0093]来自表1II的结果显示，具有不同浓度的辛烷磺酸钠(0.7至1.5重量％ )的制剂表 现出最大抗微生物效力，即在所有类型的受试细菌中至少5对数减少。
[0094] 实施例3:具有不同浓度的十二烷基硫酸钠的制剂的抗微生物活性
[0095] 在该实施例中，测试了具有不同浓度的十二烷基硫酸钠的制剂的抗微生物效力。 对该制剂施以如上文实施例1中所述的EN 1656测试。结果显示在下表1V中。十二烷基硫酸 钠的CAS#为151 -21 -3。表1V还提供了制剂A的刺激试验的结果。如上所述测定刺激试验的 H50、DI 和L/D 值。
[0096]表1V:含有羟基乙酸和十二烷基硫酸钠的制剂
L0100」*该制剂的杀菌结果与对小含AOS的其它制剂所产生的数据小一致。因此，测试/ 对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的杀菌效力。大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的对数减少分别为 4.7和5.3。这些结果与其它数据点一致。
[0101]来自表1V的结果显示，包含羟基乙酸、醇乙氧基化物、AOS和十二烷基硫酸钠的抗 微生物组合物可以表现出最大抗微生物效力，即在所有类型的受试细菌中的至少5对数减 少，条件是使用大于〇. 25重量％ (绝对)的AOS。
[0102 ]实施例4:具有羟基乙酸和各种表面活性剂的制剂的抗微生物活性
[0103] 在该实施例中，测试了具有羟基乙酸和各种阴离子型、阳离子型和非离子型表面 活性剂的制剂的抗微生物效力。对该制剂施以如上文实施例1中所述的EN 1656测试。结果 显示在下表V中。Glucopon⑧22OTK是烷基多糖苷C8-C10(CAS#68515-73-l)的商品名。二甲 苯磺酸钠具有1300-72-7的CAS#。Bark)x?；L2是N-椰油烷基-N，N-二甲基氧化胺（CAS# 61788-90-7)的商品名。Colalipid C是椰油酰胺基PG-二铵氯化物磷酸盐(CAS#83682-78-4)的商品名。
[0104] 表V:含有羟基乙酸和各种表面活性剂的制剂
[0107]来自表V的结果表明，在具有羟基乙酸和上述受试的非离子型、阳离子型和阴离子 型表面活性剂的制剂中均无法获得最大抗微生物效力，即在所有类型的受试细菌中的至少 5对数减少。这些结果与实施例1-3和5中的结果结合，证实了羟基乙酸不能与任意表面活性 剂结合以表现最大抗微生物效力。
[0108]实施例5:在存在和不存在羟基乙酸、辛烷磺酸钠与十二烷基硫酸钠的情况下的制 剂的抗微生物活性
[0109]在该实施例中，进行一系列对照试验，测试羟基乙酸、辛烷磺酸钠和十二烷基硫酸 钠对抗微生物活性的影响。具体而言，测试包括以下成分的制剂:含量增加的羟基乙酸但是 不含辛烷磺酸钠或十二烷基硫酸钠（制剂A-E);不含羟基乙酸但含有辛烷磺酸钠或十二烷 基硫酸钠(制剂F和G);以及具有羟基乙酸和辛烷磺酸钠的对照制剂(制剂H)。对该制剂施以 如上文实施例1中所述的EN 1656测试。结果显示在下表VI中。
[0110]表VI:含有和不含有羟基乙酸、辛烷磺酸钠和十二烷基硫酸钠的制剂
[0113]表VI中的结果显示，羟基乙酸和阴离子型表面活性剂如辛烷磺酸钠或十二烷基硫 酸钠是获得最大抗微生物效力所必需的，即在所有类型的受试细菌中的至少5对数减少。具 体而言，制剂A-E显示，包含羟基乙酸但不包含辛烷磺酸钠或十二烷基硫酸钠的制剂没有表 现出最大抗微生物效力，即使在含量提高的羟基乙酸情况下。此外，制剂F和G显示，包含辛 烷磺酸钠或十二烷基硫酸钠但不包含羟基乙酸的制剂没有表现出最大抗微生物效力，而包 含羟基乙酸与辛烷磺酸钠的制剂H表现出最大抗微生物效力。这些结果证明，在包含羟基乙 酸、阴离子型表面活性剂，例如辛烷磺酸钠，和非离子型表面活性剂，例如醇乙氧基化物的 组合物中实现了协同抗微生物效果。
[0114] 实施例6:具有不同浓度的表面活性剂和羟基乙酸的制剂的抗微生物活性
[0115] 在该实施例中，测试了具有不同浓度的羟基乙酸、Neodol 91-8和Witconate AOS 的一系列制剂的抗微生物效力。对该制剂施以如上文实施例1中所述的EN 1656测试。结果 显示在下表VII中。
[0116] 表VII:具有不同浓度的表面活性剂和羟基乙酸的制剂
[0119]来自表VII的结果显示，所有受试制剂均显示针对大肠杆菌的大于5的对数减少。 具有辛烷磺酸钠和羟基乙酸而不含附加阴离子型或非离子型表面活性剂的制剂A没有表现 出最大抗微生物效力。具有羟基乙酸、辛烧磺酸钠 、Witconate AOS和Surfonic Ll2-8(-种 具有每摩尔醇平均大约6或8摩尔环氧乙烷的C8-Ciq醇）的制剂B表现出最大抗微生物效力。 Surfonic L12-8的CAS#为66455-15-0。制剂C和D，具有较小量的羟基乙酸（分别为2.5和20 重量％)表现出最大抗微生物效力；尽管两种制剂均未表现出金黄色葡萄球菌的全对数减 少(6.73对数减少）。具有0.10重量％的非离子型表面活性剂Neodol 91-8的制剂E表现出最 大抗微生物效力，尽管其未表现出金黄色葡萄球菌的全对数减少(6.73对数减少）。制剂G显 示，具有0.2重量A0S、羟基乙酸、辛烷磺酸钠和Neodol 91-8的制剂没有表 现出最大抗微生物效力，而含有0.4重量％AOS的相同制剂（制剂F)也没有表 现出最大抗微生物效力。
[0120] 实施例7:具有辛烷磺酸钠和不同浓度的山梨糖醇与甘油的成膜性制剂（阻隔制 剂，barrier formulation)的抗微生物活性
[0121] 在该实施例中，测试了具有辛烷磺酸钠和不同浓度的山梨糖醇与甘油的一系列成 膜性制剂的抗微生物效力。对该制剂施以如上文实施例1中所述的EN 1656测试。结果显示 在下表VIII中。
[0122] 表VIII:含有辛烷磺酸钠和各种浓度的润肤剂:甘油与山梨糖醇的成膜性制剂
[0124] 表VIII中的结果显示，改变受试制剂中存在的润肤剂一一山梨糖醇和甘油的比例 不会不利地影响这些制剂的抗微生物效力，因为制剂A-D均表现出最大抗微生物效力。
[0125] 实施例8:具有十二烷基硫酸钠和不同浓度的山梨糖醇与甘油的成膜性制剂的抗 微生物活性
[0126] 在该实施例中，测试了具有十二烷基硫酸钠和不同浓度的山梨糖醇与甘油的一系 列成膜性制剂的抗微生物效力。对该制剂施以如上文实施例1中所述的EN 1656测试。结果 显示在下表1X中。
[0127] 表1X:含有十二烷基硫酸钠和不同浓度的润肤剂:甘油与山梨糖醇的成膜性制剂
[0129] 表1X中的结果显示，改变受试制剂中的润肤剂一一山梨糖醇和甘油的比例不会不 利地影响这些制剂的抗微生物效力，因为这些制剂表现出最大抗微生物效力。
[0130] 实施例9:含有羟基乙酸和各种表面活性剂的成膜性制剂的抗微生物活性
[0131] 在该实施例中，测试了具有羟基乙酸和各种表面活性剂的一系列成膜性制剂的抗 微生物效力。NatrosoI 250H是由Ashland Corp商业化的轻乙基纤维素。对该制剂施以如上 文实施例1中所述的EN 1656测试。结果显示在下表X中。
[0132]表X:含有羟基乙酸和各种表面活性剂的成膜性制剂
[0134] 表X中的结果显示，在具有羟基乙酸和上文列举的浓度的上述受试的非离子型、阳 离子型和阴离子型表面活性剂但不包含辛烷磺酸钠的成膜性制剂中没有获得最大抗微生 物效力，即在所有类型的受试细菌中至少5的对数减少。
[0135] 实施例10:含有辛烷磺酸钠、α-烯烃磺酸盐和羟基乙酸的乳头药浴剂