专利名称：一种铁皮石斛的培育方法
技术领域：
本发明属于生物技术领域，尤其涉及一种铁皮石斛的培育方法。
背景技术：
石斛是常用名贵中药，具有养阴清毒，生津止渴、明目强身等多种功效，应用历史非常悠久。作为一种名贵中药，石斛除配伍入药外，近年来国内外对石斛进行了大量深层次的开发，对石斛的需求量也越来越大。
但由于石斛属自然繁殖率很低，加上人们长期无节制的采挖，造成野生资源严重贫乏。因此，石斛的栽培对缓解资源紧张局面、保护生物多样性、满足人民医疗保健需要及出口创汇等起着责无旁贷的作用。
目前，对于铁皮石斛的人工培育技术大多通过田间栽培，培育的时间比较长，大约需要4年左右，成活率较低，铁皮石斛鲜品的质量不稳定，食用药效低，而且不能大规模工业化生产。
发明内容
本发明的目的是提供了一种铁皮石斛的培育方法，该方法可以使得铁皮石斛的培育时间缩短，种苗的成活率得到提高，铁皮石斛鲜品的质量更稳定，食用药效高，可以大规模工业化生产。
本发明的技术方案是一种铁皮石斛的培育方法，该培育方法包括下列步骤①、细胞分化选取铁皮石斛原球茎细胞团接种到分化培养基上培养，置于温度为22℃-25℃，光照为2000-3000LX的环境下培养，培养17-24天就可再次分化扩增，如此以1∶4的比例扩增3次，50-70天后就可以选取已分化生长的小种苗细胞团；②、种苗培育将已分化生长的小种苗细胞团接种到生长培育基上培养，置于温度为25℃-28℃，光照为2500-2800LX的环境下培养，连续培养18-25天即可长成铁皮石斛种苗；③、定植培育优选培育完成的种苗移种到定植培养基上培养，置于温度为25℃-28℃，光照为2500-3000LX的环境下连续培养3-5个月，即可得到铁皮石斛鲜茎；所述的3个培育步骤都是全程无菌式培育；所述的分化培养基是在1/2MS培养基中添加了分化生长素，所述的分化生长素是玉米复方生长素；所述的生长培育基是在1/2MS培养基中添加了壮苗生长素，所述的壮苗生长素是人参复方壮苗素；所述的定植培养基是在1/2MS培养基中添加了壮苗生长素和复方营养液，所述的壮苗生长素是黄精复方壮苗素，所述的复方营养液是灵芝复方营养液；所述的铁皮石斛原球茎细胞团通过铁皮石斛种子诱导产生；所述的铁皮石斛原球茎细胞团通过铁皮石斛鲜茎切片诱导产生。
本发明的技术方案具有如下效果1、大大缩短了培育时间，整个周期控制在6个月左右；2、无需田间栽培，可以大规模工业化生产；3、优选培育种苗，培养生产的铁皮石斛鲜品质量更加稳定，食用药效更加上乘。
具体实施例方式
以下结合具体实施例对本发明的技术特征进一步说明。
实施例1优选铁皮原种，消毒后诱导产生原球茎细胞团接种到分化培养基上培养，分化培养基是在1/2MS培养基中添加了玉米复方生长素，将其放置于瓶子中，温度为22℃，光照为3000LX，每天光照超过8小时，培养23天就可再次分化扩增，如此以1∶4的比例扩增3次，66天后就可以选取已分化生长的小种苗细胞团。
将已分化生长的小种苗细胞团接种到生长培育基上培养，生长培育基是在1/2MS培养基中添加了人参复方壮苗素，将其放置于瓶子中，温度为25℃，光照为2500LX，每天光照超过8小时，连续培养19天即可长成铁皮石斛种苗。
将培育完成的种苗按每瓶8小株移种到定植培养基上培养，锥形瓶高13cm，口径7.5cm，定植培养基是1/2MS培养基中添加了人参复方壮苗素和灵芝复方营养液，温度为25℃，光照为2500LX，每天光照超过8小时，连续培养4个半月，即可得到铁皮石斛鲜茎，即可长成直径2-4mm，高度6-8cm，具有铁皮色茎叶，鲜嫩饱满的铁皮石斛鲜茎。
实施例2优选铁皮原种，消毒后诱导产生原球茎细胞团接种到分化培养基上培养，分化培养基是在1/2MS培养基中添加了玉米复方生长素，将其放置于瓶子中，温度为25℃，光照为3000LX，每天光照超过8小时，培养18天就可再次分化扩增，如此以1∶4的比例扩增3次，54天后就可以选取已分化生长的小种苗细胞团。
将已分化生长的小种苗细胞团接种到生长培育基上培养，生长培育基是在1/2MS培养基中添加了人参复方壮苗素，将其放置于瓶子中，温度为28℃，光照为2800LX，每天光照超过8小时，连续培养25天即可长成铁皮石斛种苗。
将培育完成的种苗按每瓶7小株移种到定植培养基上培养，锥形瓶高13cm，口径7.5cm，定植培养基是1/2MS培养基中添加了人参复方壮苗素和灵芝复方营养液，温度为27℃，光照为2800LX，每天光照超过8小时，连续培养4个月，即可得到铁皮石斛鲜茎，即可长成直径2-4mm，高度6-8cm，具有铁皮色茎叶，鲜嫩饱满的铁皮石斛鲜茎。
实施例3从鲜茎上切片，消毒后诱导产生原球茎细胞团接种到分化培养基上培养，分化培养基是在1/2MS培养基中添加了玉米复方生长素，将其放置于瓶子中，温度为26℃，光照为3000LX，每天光照超过8小时，培养21天就可再次分化扩增，如此以1∶4的比例扩增3次，63天后就可以选取已分化生长的小种苗细胞团。
将已分化生长的小种苗细胞团接种到生长培育基上培养，生长培育基是在1/2MS培养基中添加了人参复方壮苗素，将其放置于瓶子中，温度为29℃，光照为2700LX，每天光照超过8小时，连续培养24天即可长成铁皮石斛种苗。
将培育完成的种苗按每瓶7小株移种到定植培养基上培养，锥形瓶高13cm，口径7.5cm，定植培养基是1/2MS培养基中添加了人参复方壮苗素和灵芝复方营养液，温度为26℃，光照为2900LX，每天光照超过8小时，连续培养4个月，即可得到铁皮石斛鲜茎，即可长成直径2-4mm，高度6-8cm，具有铁皮色茎叶，鲜嫩饱满的铁皮石斛鲜茎。
权利要求
1.一种铁皮石斛的培育方法，其特征在于该培育方法包括下列步骤①、细胞分化选取铁皮石斛原球茎细胞团接种到分化培养基上培养，置于温度为22℃-25℃，光照为2000-3000LX的环境下培养，培养17-24天就可再次分化扩增，如此以1∶4的比例扩增3次，50-70天后就可以选取已分化生长的小种苗细胞团；②、种苗培育将已分化生长的小种苗细胞团接种到生长培育基上培养，置于温度为25℃-28℃，光照为2500-2800LX的环境下培养，连续培养18-25天即可长成铁皮石斛种苗；③、定植培育优选培育完成的种苗移种到定植培养基上培养，置于温度为25℃-28℃，光照为2500-3000LX的环境下连续培养3-5个月，即可得到铁皮石斛鲜茎。
2.根据权利要求1所述的一种铁皮石斛的培育方法，其特征在于所述的3个培育步骤都是全程无菌式培育。
3.根据权利要求1所述的一种铁皮石斛的培育方法，其特征在于所述的分化培养基是在1/2MS培养基中添加了分化生长素，所述的分化生长素是玉米复方生长素。
4.根据权利要求1所述的一种铁皮石斛的培育方法，其特征在于所述的生长培育基是在1/2MS培养基中添加了壮苗生长素，所述的壮苗生长素是人参复方壮苗素。
5.根据权利要求1所述的一种铁皮石斛的培育方法，其特征在于所述的定植培养基是在1/2MS培养基中添加了壮苗生长素和复方营养液，所述的壮苗生长素是黄精复方壮苗素，所述的复方营养液是灵芝复方营养液。
6.根据权利要求1所述的一种铁皮石斛的培育方法，其特征在于所述的铁皮石斛原球茎细胞团通过铁皮石斛种子诱导产生。
7.根据权利要求1所述的一种铁皮石斛的培育方法，其特征在于所述的铁皮石斛原球茎细胞团通过铁皮石斛鲜茎切片诱导产生。
全文摘要
一种铁皮石斛的培育方法，涉及生物技术领域。该方法包括细胞分化、种苗培育、定植培育三个步骤。该方法大大缩短了铁皮石斛的培育时间，整个周期控制在6个月左右，且无需田间栽培，可以大规模工业化生产，优选培育种苗，培养生产的铁皮石斛鲜品质量更加稳定，食用药效更加上乘。
文档编号A01H4/00GK1675991SQ200410017380
公开日2005年10月5日 申请日期2004年4月1日 优先权日2004年4月1日
发明者寿伟康 申请人:寿伟康