专利名称：：益生菌复合制剂及其预混合饲料的制作方法
技术领域：
：本发明渉及益生菌制剂类的饲料添加剂，尤其是涉及一种含有多种益生菌的词料添加剂及其预混合饲料。技术背景1999年元月欧共体立法除四种抗生素被限制使用外，禁止所有抗生素和合成抗菌药作为禽畜饲料的添加剂。美国及欧盟的这一决定大大推动了微生态制剂行业的发展，其影响必然波及世界主要农业大国，无污染、无残留、无毒副作用的益生菌制剂作为饲料添加剂，在未来必将替代抗生素起防病抗病的作用，而且益生菌制剂作为禽畜饲料的添加剂的重要作用还在于其能提高禽畜的日增重量。益生菌制剂分为仅含有单一益生菌菌株的单一菌制剂以及含有两种以上益生菌菌株的复合菌制剂，复合菌制剂更符合实际生态环境，其作为饲料添加剂用于饲喂畜禽的有益效果比单一菌制剂更好。我国目前用于生产复合菌制剂的菌株主要有蜡样芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、乳酸杆菌、乳酸球菌、酵母菌，或者双歧杆菌、乳酸杆菌、粪链球菌等。如国内宝来利来公司的"产酶益生素"由芽孢杆菌、乳酸杆菌、酵母菌及光合菌等多种菌复合配制而成的。上述菌株及其复合制剂的缺点是稳定性不够好，当外界环境变化不利时，例如在贮存和口服过程中易受外界各种生化和物理因素的影响而失去活性，活菌存活率低，导致产品贮存期短、质量不稳定，词喂畜禽的有益效果常常不尽如人意。
发明内容本发明针对上述益生菌复合制剂稳定性不够好及由此影响饲喂畜禽效果的问题，提供一种稳定性高、畜禽喂养效果好的益生菌复合制剂，其在不良环境下能保持比较好的稳定性，应用于禽畜全价配合饲料中，具有互补增益作用，能有效提高畜禽的日增重和饲料转化率，同时具有提高畜禽免疫力及防病抗病的作用；本发明的另一个目的是提供一种含有上述益生菌复合制剂的预混合饲料，将其加入配合饲料中供畜禽食用，使益生菌复合制剂在配合饲料中能混合均匀。为了解决上述技术问题，本发明采用如下的技术方案一种益生菌复合制剂，由纳豆芽孢杆菌制剂和酪酸芽孢杆菌制剂组成，其重量配比为纳豆芽孢杆菌制剂为5%35%,酪酸芽孢杆菌制剂为65%95%;纳豆芽孢杆菌制剂含活菌数不少于2亿个/克，芽孢率〉85%;所述酪酸芽孢杆菌制剂含活菌数不少于2亿个/克，芽孢率〉85%。纳豆芽泡杆菌是好氧性益生菌，PH值77.2，革兰氏阳性、芽孢杆状、两端钝圆。除能耐受一般的饲料制粒条件外，饲喂畜禽后，在胃部即能迅速萌芽，并在短时间内将肠道改变呈无氧状态，有利于厌气性酪酸菌与绝对厌气性双岐杆菌、乳酸杆菌等厌氧菌的生长、增殖，进而分泌丁酸与醋酸达到抑制病原菌的效果，而且能有效抑制肠道中肠杆菌和肠球菌等需氧有害菌的生长，促进宿主肠道正常菌群生长，保持微生态平衡。另一方面纳豆芽孢杆菌产生有益代谢产物在动物肠道内分泌蛋白酶、淀粉酶、溶纤酶等消化酶和维生素，从而提高动物对饲料营养成分的消化吸收，提高畜禽的饲料转化率和生产性能。因此，纳豆芽孢杆菌使用安全，具有防病、治病及促进畜禽生长的双重作用。所以它不但是一种营养型益生菌，又是一种环境改良型益生菌。酪酸芽孢杆菌是一种厌氧性益生菌，革兰氏阳性，有圆形或椭圆形芽孢，PH值7时为生长发育的最适宜条件，不仅具有耐酸碱、耐高温、存放稳定性好、安全性好等优点，而且能够在动物肠道中定植生长。在畜禽肠道内可促进双歧杆菌等乳酸菌的增殖，阻止有害菌的定植和入侵，纠正肠道内的菌群紊乱。它能利用多种糖类发挥增益作用，如葡萄糖、乳糖、麦芽糖、蔗糖和果糖等，并能利用淀粉。该菌的主要代谢产物为丁酸、乙酸，能产生多种酶类，促进动物消化酶活性;.具有拮抗动物病原菌，维护和调节肠道生态平衡功能，防病、治病双重作用，能预防和治疗猪腹泻、鸡白痢等病症，在伺料中长期添加，能起到预防肠道疾病、促进畜禽生长、提高饲料利用率的作用。酪酸芽孢杆菌与纳豆菌芽胞杆菌有多共性，均具有抗逆性强、耐酸、耐高温高压、稳定性好、易贮存等独特的生物学特性。好气性纳豆芽孢杆菌，除能耐受一般的W料制粒条件外，饲喂畜禽后，在胃部即能迅速萌芽，并在短时间内将肠道环境改变成无氧状态，有利于厌氧性酪酸芽孢杆菌与绝对厌气性双岐杆菌的增殖，进而分泌丁酸与乙酸，抑制有害菌类的生长和产生，达到抑制和杀灭病原菌的效果。本发明合理应用厌氧菌和好氧菌不同性状，将二种活菌制剂在肠道中的作用互补及协同增益，增强肠道微生态平衡作用，提高动物促生长效果。益生菌复合制剂实际应用时，由于制剂添加量相对较小，必需进行二次预混，才能保证其在产品中被混合均匀，也就是说，益生菌复合制剂应首先加入预混合饲料中充分混合，再将预混合饲料加入配合基础饲料中供畜禽食用。因此，本发明又提供了一种配制含有上述益生菌复合制剂的预混合饲料的技术方案益生菌复合制剂的预混合饲料，由下述重量配比的原材料组成益生菌复合制剂1%6%，营养性添加剂45.2%62.6%，非营养性添加剂8%10%，其余为载体；上述营养性添加剂包括维生素、氨基酸、微量元素和矿物盐；上述非营养性添加剂包括抗氧化剂、酶制剂、防霉剂、食盐、药物；上述载体可'以，是淀粉或细麸粉；上述载体也可以由细麸粉与碳酸钙粉组成，其重量配比为细麸粉50%70%、碳酸钙粉30%50%。上述营养性添加剂中的维生素、氨基酸、微量元素和矿物盐均是市售原料；上述非营养性添加剂中的抗氧化剂、酶制剂、防霉剂、食盐、药物等也均是市售原料。上述的维生素可以是复合维生素，其包括维生素A、维生素D、维生素K3、维生素B1、维生素B2、维生素B6、维生素B12、烟酸、泛酸钙、氯化胆碱、叶酸、生物素等；氨基酸可以是蛋氨酸、赖氨酸中的至少一种；微量元素可以是硫酸亚铁、硫酸锌、硫酸铜、硫酸锰、亚硒酸钠、碘酸钙、氯化钴等；矿物盐可以是硫酸镁、氯化钾、碳酸钠、硫酸铝等；抗氧化剂是抗氧喹；酶制剂可以是植酸酶、复合酶制剂之一。防霉剂可以是克霉星、鲜灵之一；药物可以是痢菌净、抗敌素、速酸肥、球利灵等的一种或几种。上述各种营养性添加剂及非营养性添加剂添加量的配比可由专业人员根据畜禽的不同品种、不同的生长阶段、不同个体大小及不同的季节来调整。在实际应用中，用5%预混合词料与95%的基础词料充分混合均匀后即可用于畜禽的饲养。本发明所涉及的纳豆芽孢杆菌制剂和酪酸芽孢杆菌制剂均为粉剂，可以自行分离或从直接由菌种保藏单位购买。本发明的技术效果由于组成本发明益生菌复合制剂的酪酸芽孢杆菌与纳豆菌芽胞杆菌都具有良好的稳定性及性状或生存条件的互补性，使得本发明益生菌复合制剂也具有良好的稳定性，其活菌存活率高。其应用于畜禽词料中，具有良好的饲喂畜禽的技术效果1.在防病、治病作用方面，避免了使用抗生素对畜禽消化道内其他微生物群落的不良影响，还可促进畜禽体内有益微生物的代谢，提高畜禽机体的免疫力，同时可避免长期使用抗生素所出现的抗药性、耐药性、残留等毒副作用。2.纳豆芽孢杆菌与酪酸芽孢杆菌的性能具有互补增益作用，可提高畜禽对词料的消化和吸收利用率，促进畜禽生长，更好地提高畜禽的日增重和饲料转化率，提高经济效益。具体实施方式下面结合实施例对本发明作进一步详细的说明。1.纳豆芽孢杆菌与酪酸芽孢杆菌复合制剂及其预混合饲料的配比实施例1益生菌复合制剂组分的重量配比(每1公斤益生菌复合制剂)含纳豆芽孢杆菌制剂为0.10公斤，酪酸芽孢杆菌制剂为0.90公斤。预混合饲料组分的重量配比(每100公斤预混合饲料)上述重量配比的益生菌复合制剂2公斤、营养性添加剂60公斤(其中复合维生素26公斤、蛋氨酸6公斤、赖氨酸盐酸盐4公斤、微量元素复合矿物盐13公斤、磷酸氢钙ll公斤)、非营养性添加剂10公斤(其中抗氧喹2.5公斤、鲜灵2.5公斤、食盐5公斤)、细麸粉28公斤。实施例2益生菌复合制剂组分的重量配比(每1公斤益生菌复合制剂)纳豆芽孢杆菌制剂为、0.20公斤，酪酸芽孢杆菌制剂为0.80公斤。预混合饲料组分的重量配比(每100公斤预混合饲料)上述重量配比的益生菌复合制剂5公斤、营养性添加剂52公斤(其中复合维生素22公斤、蛋氨酸5公斤、赖氨酸盐酸盐3公斤、微量元素复合矿物盐12公斤、磷酸氢钙IO公斤)、非营养性添加剂9公斤(其中抗氧喹2.5公斤、克霉星2.5公斤、食盐4公斤)、细麸粉17公斤、碳酸钙粉17公斤。实施例3益生菌复合制剂组分的重量配比(每1公斤益生菌复合制剂)纳豆芽孢杆菌制剂为0.20公斤，酪酸芽孢杆菌制剂为0.80公斤。预混合饲料组分的重量配比(每100公斤预混合饲料)上述重量配比的益生菌复合制剂1公斤、营养性添加剂46公斤(其中复合维生素20公斤、蛋氨酸4公斤、赖氨酸盐酸盐3公斤、微量元素复合矿物盐ll公斤、磷酸氢钙8公斤)、非营养性添加剂10公斤(其中抗氧喹2.5公斤、鲜灵2.5公斤、食盐5公斤)、细麸粉43公斤。实施例'4，益生菌复合制剂组分的重量配比(每1公斤益生菌复合制剂)纳豆芽孢杆菌制剂为0.30公斤，酪酸芽孢杆菌制剂为0.70公斤。预混合饲料组分的重量配比(每100公斤预混合饲料)上述重量配比的益生菌复合制剂6公斤、营养性添加剂56公斤(其中复合维生素24公斤、蛋氨酸5公斤、赖氨酸盐酸盐4公斤、微量元素复合矿物盐12公斤、磷酸氢钙ll公斤)、非营养性添加剂8公斤(其中抗氧喹2公斤、克霉星2公斤、食盐4公斤)、淀粉30公斤。上述实施例中的复合维生素以及微量元素复合矿物盐采用无锡市大江中盛词料有限公司的商品化的成品，其中微量元素复合矿物盐是微量元素与矿物盐配制后的产品。必要时，还可以在上述实施例中按常规加入酶制剂或药物。2.上述实施例的试验数据及其技术效果2.1益生菌复合制剂的稳定性试验比较1)耐温性对饲料用益生菌复合制剂必须在词料加工过程中经受高温的考验，所以菌种对温度的稳定性显得尤为重要，不同的菌种对高温的耐受力差异较大。在耐温性试验中，由上述实施例l、2、4配制的本发明益生菌复合制剂各称取3份，每份1克，其中一份编为第一组实验制剂，置于25T:的恒温箱中5分钟；第二份编为第二组实验制剂，置于8(TC的恒温箱中5分钟；第三份编为第三组实验制剂，置于95E的恒温箱中2分钟。到时间之后，将所述三组实验制剂从恒温箱中取出，在室温(25°C)下分别测试各组实验制剂中活菌数的存活率(百分比)，测试结果如表1所示。从表1可见，在室温(25°C)及85。C下，实验制剂中按各实施例配制的本发明制剂的活菌数基本无损失，95°C下，实验制剂中按各实施例配制的本发明制剂的活菌数分别损失5%至10%。表1耐温试验活菌存活率变化情况(％)<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>作为比较实施例，将市售乳酸杆菌制剂及市售酵母菌制剂按重量比各占50%，配制成普通益生菌复合制剂，称取该复合菌制剂3份，每份1克，作为第四、第五、第六组实验制剂，与上述相同方法，将该三组实验制剂分别置于25°C、8(TC以及95匸的恒温箱中5分钟、5分钟以及2分钟，按上述相同方法分别测试各组实,验制剂中活菌数的存活率(百分比)，测试结果如表1所示。从表1可见，实验制剂中的活菌数在801:下5分钟损失70%-80%，实验制剂中的活菌数在95"下2分钟损失达98%-99%。耐温性试验结果表明，本发明选用的纳豆芽孢杆菌和酪酸芽孢杆菌配制成的复合菌制剂耐温性能显著增强。2)贮存时间将本发明实施例1、2、4的益生菌复合制剂各500克(活菌存活率为100%)，分别在室温条件下保存2年，贮存后抽样测定其活菌存活率(即活菌数)，见表2第1、2、3组数据，从表2可见，活菌存活率>55%。作为比较实施例，将市售乳酸杆菌制剂及市售酵母菌制剂按重量比各占50%配制的普通益生菌复合制剂各500克(活菌存活率为100%)，分别在室温条件下保存2年，]fc存后抽样测定其活菌存活率(即活菌数)，见表2第4、5、6组数据，从表2可见，普通益生菌复合制剂活菌存活率《14%，死亡率很高。表225t:贮存2年时间的存活率<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>上述的试验中的活菌数(或活菌存活率)的检测方法按国家标准SNO168-1992实施。上述的试验结果表明，本发明的纳豆芽孢杆菌和酪酸芽孢杆菌复合制剂的稳定性显著优于普通益生菌复合制剂。2.2.本发明实施例预混合饲料用于鸡的饲喂试验比较1)试验用纳豆芽孢杆菌制剂、酪酸芽孢杆菌制剂，每克制剂分别含活菌数不少于2.0亿(2.0x108个/克)，均由无锡市大江中盛饲料有限公司出品。2)实验鸡苗鸡来自无锡市祖代鸡场有限公司，用健康的19日龄AA肉鸡试验。3)肉鸡日粮的基础配方及营养水平见表3。表3中的预混合饲料的配比参见表4。选择健康活泼、体重相近的19日龄AA肉鸡5040羽，试验鸡随机如表4分为7组，试验37天。表3AA肉鸡基础日粮配方及营养水平<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>表4"试验鸡分组及益生菌复合制剂在100公斤预混合饲料中的添加量(重量)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>4)试验肉鸡的伺养管理和方法:饲养试验自由采食，自由饮水，各组饲养条件基本一致。各项管理按常规迸行，每天观察记录鸡只的生长活动、健康与疾病情况等，在试验第37天(56日龄)空腹称重和试验分析。5)试验结果按表4在日粮中添加益生菌复合制剂预混合饲料后，对肉鸡生长性能的影响，见表5。表5对肉鸡生长性能的效果数据<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>由表5可以看出D、E、F、G各组日增重与A组相比均有较显著的提高，与B、C组相比均有较好的提高，其中以E组日增重最高，达到52.07克。由表5还可以看出D、E、F、G各组饲料系数分别比A、B、C组降低，因而其饲料'报酬得到相应提高，其中E组词料系数最低,为2.26，并且E组试验鸡存活率最高，达99.44%，比A组提高2.08个百分点。另外，在无锡市祖代鸡场、无锡鸡场等单位，将上述实施例2的预混合词料添加到AA鸡种的饲料中，进行万羽推广应用，全程养殖应用中发现，本发明益生菌复合制剂可使肉用仔鸡的腹泻死亡率下降23.3%;用上述预混合饲料对上述600羽患白痢腹泻病的AA鸡进行治疗试验，其有效率为93%，治愈率为78%，对鸡的防病、治病效果显著。3.本发明益生菌复合制剂及其预混合词料的制备3.1.益生菌复合制剂的制备纳豆芽抱杆菌单一菌制剂的生产采用常规固态发酵法，酪酸芽孢杆菌单一菌制剂的生产采用常规厌氧罐液体发酵法，二种芽孢杆菌分别发酵后，分别按常规工艺低温干燥，制成粉剂状的单一菌制剂，检验纳豆芽孢杆菌制剂含活菌数不少于2亿个/克，芽孢率>85%;所述酪酸芽孢杆菌制剂含活菌数不少于2亿个/克，芽孢率>85%，作为合格品。在十万级空气净化车间内按重量比纳豆芽孢杆菌制剂5%35%，酪酸芽孢杆菌制剂65%95%的比例制成益生菌复合制剂。3.2.预混合饲料的制备称量实施例1至4的各原料，其中对载体、微量元素复合矿物盐进行清理粉碎，各原料采用"先大量、比重大的物料先进机；后小量，配比小、比重轻的物料后进机"的混合顺序放入饲料混合搅拌机中充分混合均匀。一般使用50kg100kg规格的不锈钢鼓式混合机、双螺旋立式行星高效混合机或250kg双轴浆叶型混合机，在混合机中的最佳混合时间为510分钟/批，混合完成后，选择合适的包装方式和包装材料对其进行包装，以保障预混合饲料的稳定性。以上实施例针对预混合词料用于鸡的饲喂比较，本发明同样适用于猪等家畜类的饲喂，同样可以达到本发明说明书所述的技术效果。权利要求1.益生菌复合制剂，其特征在于由纳豆芽孢杆菌制剂和酪酸芽孢杆菌制剂组成，其重量配比为纳豆芽孢杆菌制剂5％～35％，酪酸芽孢杆菌制剂65％～95％。2.按照权利要求1所述的益生菌复合制剂，其特征在于所述纳豆芽孢杆菌制剂含活菌数不少于2亿个/克，芽孢率〉85%;所述酪酸芽孢杆菌制剂含活菌数不少于2亿个/克，芽孢率>85%。3.含有权利要求1或2所述的益生菌复合制剂的预混合饲料，其特征在于其由下述重量配比的原材料组成益生菌复合制剂1%6%，营养性添加剂45.2%62.6%，非营养性添加剂8%10%，其余为载体。4.按照权利要求3所述的预混合词料，其特征在于所述营养性添加剂包括维生素、氨基酸、微量元素和矿物盐。5.按照权利要求3所述的预混合饲料，其特征在于所述非营养性添加剂包括抗氧化剂、酶制剂、防霉剂、食盐、药物。6.按照权利要求3所述的预混合饲料，其特征在于所述载体是淀粉或者细麸粉。7.按照权利要求3所述的预混合饲料，其特征在于所述载体由细麸粉及碳酸钙粉组成，其重量配比为细麸粉50%70%、碳酸钙粉30%50%。全文摘要本发明涉及益生菌复合制剂及其预混合饲料，可添加于畜禽的饲料中。该益生菌复合制剂按重量配比的组成为纳豆芽孢杆菌制剂5％～35％，酪酸芽孢杆菌制剂65％～95％。含有该益生菌复合制剂的预混合饲料，其重量配比为纳豆芽孢杆菌及酪酸芽孢杆菌复合制剂1％～6％，营养性添加剂45.2％～62.6％，非营养性添加剂8％～10％，其余为载体。本发明复合制剂中的好氧性纳豆芽孢杆菌与厌氧性酪酸芽孢杆菌的性能具有互补增益作用，其应用到畜禽饲喂中，可提高动物的免疫力，具有防病、治病作用；可提高饲料消化和吸收利用率，提高畜禽的日增重、饲料转化率以及存活率，提高畜禽饲养的经济效益。文档编号A23K1/16GK101116474SQ20071013087公开日2008年2月6日申请日期2007年8月29日优先权日2007年8月29日发明者颖任,张阳军,杨盛荣申请人:颖任