专利名称：：一种含醚菌酯和春雷霉素的杀菌组合物的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一种杀菌剂农药，具体是一种含醚菌酯和春雷霉素的杀菌组合物。
背景技术：
：水稻是我国主要粮食作物之一，种植面积约占全国耕地面积的1/4，年产量约占全国粮食总产的1/2。然而，水稻病害的危害一直严重影响着水稻生产，稻瘟病是水稻三大病害中流行情况最复杂，潜在威胁最大的病害，在1975—1990年的16年间，由稻瘟病引起的全球粮食损失高达1.57亿吨，年平均超过O.l亿吨。该病是由真菌感染所致，危害地域广泛，在大风吹动下可在同一时间席巻整个田野，摧毁水稻，甚至可能导致颗粒无收；因此水稻稻瘟病的防治就成了摆在广大水稻种植户面前的一大难题。春雷霉素属农用抗菌素类低毒杀菌剂，具有较强的内吸渗透性，同时具有预防和治疗作用，其治疗作用更为显著。其作用机理是干扰病原菌的氨基酸代谢的酯酶系统，破坏蛋白质的生物合成，抑制菌丝的生长和造成细胞颗粒化，使病原菌失去繁殖和侵染能力，从而达到杀死病原菌防治病害的目的。对细菌、酵母以及植物真菌均有活性，尤其是对水稻稻瘟病菌的孢子萌发、茵丝生长和孢于形成均有抑制氨基酸合成为蛋白质的作用。春雷霉素施用于水稻等作物后，经内吸传导到植物体内，显著地抑制稻瘟病蛋白质的合成乃至菌丝生长，使肽键拉长，抑制肽转移酶的活性。醚菌酯是一种高效、广谱、新型杀菌剂。醚菌酯对半知菌、子囊菌、担子菌、卵菌纲等真菌引起的多种病害具有很好的活性，如水稻稻瘟病、葡萄白粉病、小麦锈病、马铃薯疫病、南瓜疫病等病害，特别对水稻稻瘟病、黄瓜白粉病、梨黑星病特效。醚菌酯不仅具有广谱的杀菌活性，同时兼具有良好的保护和治疗作用。醚菌酯与其它常用的杀菌剂无交互抗性，且比常规杀菌剂持效期长，并具有高度的选择性，对作物、人畜及有益生物安全，对环境基本无污染。实际的农药田间试验表明，重复且专一施用一种活性化合物来防治有害真菌在很多情况下导致菌株的快速选择性，为降低抗性菌株选择性的危险性，通常使用的方法是筛选出不同活性的化合物的混合物来防治有害真菌。而如何将具有不同作用机理的活性化合物进行组合，使其能延缓抗性，降低施用量，减少防治成本，一直是人们不断研究的课题。
发明内容本发明所要解决的技术问题是提供一种对于防治稻瘟病病菌具有协同增效作用的杀菌组合物。本发明以如下技术方案解决上述技术问题本发明杀菌组合物由下述组分组成春雷霉素和醚菌酯以及农药的常规助剂，其中春雷霉素和醚菌酯作为活性组分，它们的重量比为1:29，优选为2:8。春雷霉素和醚菌酯累积重量占制剂总重量比的911%。所述杀菌组合物的加工剂型为悬浮剂，配制时添加以下占制剂总重量比的助剂润湿剂13%、增稠剂13%、消泡剂13%、分散剂35%、余量为水。试验结果表明，本发明产品具有增效作用明显、速效性好、持效期长、高效低残留等优点，可以延缓水稻稻瘟病对三环唑的抗性，发病前预防稻瘟病保护水稻，发病后提高水稻抗病力，治疗稻瘟病，兼有预防和治疗作用，与当前市场需求相吻合，具有很大的市场曰目U景。本发明产品与其它常用的杀菌剂无交互抗性，而且比常规杀菌剂持效期长。该药主要干扰氨基酸的代谢酯酶系统，从而影响蛋白质的合成，抑制菌丝伸长和造成细胞颗粒化，但对孢子萌发无影响，具有高度的选择性，对作物、人畜及有益生物安全，对环境基本无污染。本发明产品中的有效成分是春雷霉素和醚菌酯，它们的名称、结构式和基本物化参数如下a)有效成分I:醚菌酯IS0通用名称kresoxim-methylCAS号143390-89-0化学名称甲基(E)-2-甲氧基亚氨基-2-[2-(0-甲苯氧基)苯基]醋酸盐结构式具体实施方式<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>分子式C18H19N04相对分子质量(按2001年国际相对原子质量计)313.35生物活性杀菌比重1.258;熔点10rC;蒸气压20。C时〈1X10-5Pa。b)有效成分II:春雷霉素ISO通用名称Kasugamycin化学名称[5-氨基-2-甲基-6-(2，3，4，5,6-羰基环己基氧代)吡喃-3-基氨基-a-亚氨瞎分子式Cl4H25N309相对分子质量(按2001年国际相对原子质量计)433.8生物活性杀菌；熔点202°C-204°C(分解)；蒸汽压(25'C):〈13mPa;溶解性能以盐酸盐形式存在，易溶于水，微溶于甲醇,不溶于乙醇、丙醇、酯类(乙酸)、乙酸、三氯甲烷、苯及石油醚等有机溶剂。稳定性在常温下稳定，在酸性和中性条件下稳定，在碱性条件下易分解。本发明产品是由符合标准的春雷霉素和醚菌酯原药与助剂溶解在适宜的溶剂中制成的悬浮液。长期存放可有少量沉淀或分层，但置于室温下用手摇动应能恢复原状。本发明有效成分的分析方法是春雷霉素生物测定法萤光杯法(NIHJB-245);醚菌酯毛细管气相色谱法。本发明产品主要应用于水稻，防治对象是稻瘟病，有效成分施用量是250330克/公顷，使用方法是喷雾。结构式:以下是三个实施例A、B、C的原料配比表:o々含量g，ml/kgABC春雷霉素原药65%15.031.046.0醚菌酯原药95%90.084.073.0润湿剂/20.020.020.0增稠剂/10.010.010.0分散剂/40.040.040.0消泡剂/10.010.010.0水/815.0805.0801.0总计1000.01000.01000.0本发明产品的制备工艺是将购进的春雷霉素原药和醚菌酯原药入厂检验有效成分后，通过计算，加入计算所需的春雷霉素原药和醚菌酯原药，在不断搅拌的情况下，再加入润湿剂、增稠剂和分散剂进行充分搅拌混匀，时间为45分钟，补足水后，放入消泡剂，经化验室取样分析合格后，通过灌装机灌装成品，粘上合格标签，包装成成品，再有化验室随机抽样合格后，入库出厂。所述润湿剂可以是聚乙二醇、拉开粉、十二烷基磺酸钠、十二垸基硫酸钠、壬(辛)基酚聚氧乙烯醚、木质素磺酸钠、十二烷基苯磺酸钠、二辛基丁二酸酯磺酸钠、椰子油N一甲基牛磺酸钠、十六烷基甜菜碱、二壬基磷酸钠、茶皂素、月桂醇醚硫酸钠以及它们的复配物。所述分散剂可以是亚甲基双甲基苯磺酸钠、单烷基萘磺酸钠、双烷基萘磺酸钠、萘磺酸甲醛縮合物钠盐、烷基或芳烷基磺酸甲酸縮合物钠盐、萘酚磺酸甲醛縮合物钠盐、石油磺酸钠、烷基苯磺酸钙盐、N—甲基一脂肪酰基一牛磺酸盐、有机磷酸酯类、垸基酚聚氧乙烯醚甲醛縮合物、木质素磺酸盐、壬(辛)基酚聚氧乙烯醚、脂肪酸聚氧乙烯酯、烷基酚聚氧乙烯聚氧丙烯醚以及它们的复配物。所述增稠剂可以是聚乙二醇双硬脂酸酯、聚乙烯醇、聚己二醇、聚丙烯酰胺、膨润土、水玻璃、黄原胶、明胶、阿拉伯胶、海藻酸钠、羧甲基纤维素钠、羧甲基淀粉钠以及这些品种的复配物。所述消泡剂可以是有机硅，也可以是其它品种的消泡剂。本发明由南宁德丰富化工有限责任公司将本发明产品与春雷霉素和醚菌酯的单剂进行农药室内联合毒力测定对比及本发明产品的配方筛选试验，有关数据及结果如下1试验依据NY/T1156.2-2006;供试靶标水稻稻瘟病原菌。本试验从田间采集稻瘟病样品并分离纯化得到水稻稻瘟病菌种，采用菌丝生长速率抑制6法，进行春雷霉素与醚菌酯不同比例二元混配的联合毒力测定，评价其增效作用，并综合分析其毒力、增效作用及生产成本，确定这两种药剂混配的最佳配比。2试验条件2.1供试靶标水稻稻瘟病(/yn'cWan'aoryzse)，从广西南宁市武鸣县水稻田采集稻瘟病样品，室内分离纯化鉴定培养，得到水稻稻瘟病菌种。2.2培养条件菌种保存在25'C光照培养箱中。接种后置于光照培养箱中培养，温度27士rC，相对湿度85%左右条件下培养。2.3仪器设备2.3.l光照培养箱(广东医疗器械厂)；2.3.2电子天平(感量O.lmg);2.3.3打孔器；2.3.4培养皿；2.3.5接种器；2.3.6移液管2.3.7卡尺等。3试验设计3.1试材准备PDA培养基(1000mU的制备马铃薯200g，葡萄糖17g，琼脂17g。供试的稻瘟病菌株，先在PDA培养基上，置于光照培养箱中培养，温度27士rC，相对湿度85%左右条件下培养备用。3.2试剂3.2.1试验药剂混剂l号(春雷霉素醚菌酯=3.0:7.0，下同)、混剂2号(2.5:7.5)、混剂3号(2.0:8.0)、混剂4号(1.5:8.5)、混剂5号(1.0:9.0)。3.2.2对照药剂醚菌酯(kresoxim-methyl)原药，含量94%，德国巴斯夫欧洲公司，市购；春雷霉素(kasugamycin)原药，含量65%，华北制药集团制剂有限公司，市购。3.2.3其他试剂丙酮(分析纯)；0.05%吐温-80蒸馏水溶液。3.3剂量设置3.3.1剂量设置根据预备试验结果，设置等比浓度如下春雷霉素设置处理浓度为80、40、20、10、5mg/L;醚菌酯设置处理浓度为128、64、32、16、8mg/L;混剂1号设置处理浓度为64、32、16、8、4mg/L;混剂2号设置处理浓度为64、32、16、8、4mg/L;混剂3号设置处理浓度为64、32、16、8、4mg/L;混剂4号设置处理浓度为64、32、16、8、4mg/U混剂5号设置处理浓度为64、32、16、8、4mg/L。3.4处理时间测定日期为2009年7月6日。4试验步骤4.1药剂配制在预备试验的基础上，准确称取94%醚菌酯原药1.0638g，用丙酮溶解，装入100ml的容量瓶中，用丙酮定容，得10g'L—i母液；准确称取65%春雷霉素原药1.5385g，用丙酮溶解，装入100ml的容量瓶中，用丙酮定容，得10g'L—'母液；然后分别称取醚菌酯母液、春雷霉素母液按下列比例混配混剂1号、春雷霉素醚菌酯=3.0:7.0;混剂2号、春雷霉素醚菌酯=2.5:7.5;;混剂3号、春雷霉素醚菌酯=2.0:8.0;8混剂4号、春雷霉素醚菌酯=1.5:8.5;混剂5号、春雷霉素醚菌酯=1.0:9.0;最后再将两种单剂和上述5种不同配比的混剂母液，分别用O.05%吐温-80蒸馏水溶液按照等比梯度稀释成5个浓度的药液，剂量设置参见3.3.1。4.2药剂处理在无菌条件下，将预先融化的灭菌培养基定量加入无菌锥形瓶中，从低浓度到高浓度依次定量吸取相同体积(lml)药液，分别加入上述锥形瓶中，充分摇匀，然后等量倒入4个直径为9cm的培养皿中，制成相应浓度的含药平板。试验设不添加药剂的PDA平板处理为空白对照。4.3菌饼的移植与培养用灭过菌的孔径为5mm的打孔器在培养好的菌落上选均匀部分打取菌饼，用消毒镊子夹取菌饼放于药液处理过的PDA平板上，菌丝面朝下，在27。C恒温培养箱中培养7d，与空白对照相比较，每处理4次重复。5数据调查与统计分析5.1调査方法视空白对照培养皿中菌的生长情况，在培养箱中培养7d左右，用"十"字交叉法测定2次，以其平均值代表各处理菌落的增长直径。5.2计算方法根据调查数据，按照公式(1)计算防效，单位为百分率(％)，计算结果保留小数点后两位。尸=A-Axl0。..........................................(1)式中尸——防治效果"。^空白对照菌落直径A~—药剂处理菌落直径5.3统计分析利用DPS(数据处理软件)及Excel,建立各药剂的毒力回归方程，计算LCs。值、LC9。和95%置信限。5.4混配剂共毒系数计算及增效作用评价9釆用孙云沛法(I960)评价混剂增效作用。根据下列公式计算混剂实测毒力指数c<formula>formulaseeoriginaldocumentpage10</formula>似式中ATI——混剂实测毒力指数；S——标准药剂的ECs。，单位为毫克每升(mg/L);M——混剂的ECs。，单位为毫克每升(mg/L)。根据下列公式计算混剂理论毒力指数<formula>formulaseeoriginaldocumentpage10</formula>式中TTI——混剂理论毒力指数；TIA——A药剂毒力指数；<formula>formulaseeoriginaldocumentpage10</formula>-A药剂在混剂中的百分含量，单位为百分率(％);一B药剂毒力指数；-B药剂在混剂中的百分含量，单位为百分率(％)。根据下列公式计算混剂的共毒系数<formula>formulaseeoriginaldocumentpage10</formula>式中CTC——共毒系数；ATI——混剂实测毒力指数；TTI——混剂理论毒力指数。复配剂的共毒系数(CTC)》120表现为增效作用；CTC《80表现为拮抗作用；80<ctc<120表现为相加作用。6试验结果与分析6.1单剂对水稻稻瘟病的毒力测定结果单剂处理菌落的发病情况和毒力测定结果见附表l，经统计分析，单剂的毒力回归方程及检验结果见附表2。从附表2看出，醚菌酯对水稻稻瘟病的ECs。为23.72，EC9。为253.82;春雷霉素对水稻稻瘟病的ECs。为21.14，EC^。为179.63。6.2混剂对水稻稻瘟病的毒力测定结果分别测定了5个不同配比的春雷霉素与醚菌酯对水稻稻瘟病的毒力。混剂的毒力均明显高于春雷霉素与醚菌酯。毒力高低次序依次为混剂3号>混剂4号>混剂2号〉混剂5号>混剂1号，毒力最高的混剂3号(即春雷霉素醚菌酯=2.0:8.0)对水稻稻瘟病的ECs。为6.09，EU为174.54，毒力最低的混剂1号(即春雷霉素醚菌酯=3.0:7.0)对水稻稻瘟病的ECs。为19.78，EC9。为141.19。(见附表2)6.3混剂对水稻稻瘟病的共毒系数从共毒系数(见附表3)计算结果看出，各混剂的共毒系数分别为122.53、139.41、165.21、145.53、131.36，均大于120，表明这些混剂增效作用明显，其中混剂3号(春雷霉素*醚菌酯=2.0:8.0)，其共毒系数为165.21，增效最为明显，综合成本、防效、增效情况等多方面的因素考虑，该配比比较合理。7试验结论7.1本次试验所测定的春雷霉素和醚菌酯5个配比混剂对水稻稻瘟病的共毒系数(CTC)都大于120，表现出明显的增效作用，说明利用春雷霉素和醚菌酯混配是合理可行的，可以显著提高药效.7.2在所测定的5个配比混剂中，混剂3号(即春雷霉素醚菌酯=2.0:8.0)的共毒系数大于其他混剂。综合考虑混剂的增效作用、毒力及经济性能等，认为混剂3号的配比比较合理。附表1春雷霉素、醚菌酯及其混剂对水稻稻瘟病的毒力测定结果<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>64419.1180.45.85421.806232431.6462.95.32931.5051混剂1号16442.6947.54.93771.20418457.7226.64.37460.90314468.1412.13.82870.602164419.0880.45.85571.806232424.6172.75.60351.5051混剂2号16436.3256.45.16071.20418451.5935.14.61790.90314460.6122.64.24660.602164415.7585.06.03771.806232420.4878.45.78721.5051混剂3号16429.6965.65.40201.20418437.9254.25.10440.90314445.8343.14.82720.602164420.8977.95.76791.778232431.8262.75.32261.4771混剂4号16444.9644.44.85801.17618456.9527.74.40690.87514467.8712.43.84720.574064419.2280.25.84871.806232426.8469.65.51251.5051混剂5号16438.9252.85.06931.20418451.8234.84.60930.90314460.9322.14.23160.6021CK/476.810.0//附表2供试药剂对水稻稻瘟病的毒力回归方程及检验结果药剂毒力回归方程相关系数ECs。及CU(mg/L)ECg。及CU(mg/L)SE(B)醚菌酯原药Y=l.3886X+3.09490.993823.72(17.97-29.65)253.82(130.23-377.41)0.174312<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>权利要求1.一种含醚菌酯和春雷霉素的杀菌组合物，其特征在于含有春雷霉素和醚菌酯作为活性组分制成的杀菌剂中，春雷霉素与醚菌酯的重量比为1∶2～9，春雷霉素和醚菌酯累积重量占制剂总重量比的9～11％。2.根据权利要求1所述含醚菌酯和春雷霉素的杀菌组合物，其特征在于春雷霉素与醚菌酯的重量比为2:8。全文摘要本发明公开了一种含醚菌酯和春雷霉素的杀菌组合物，该组合物中含有春雷霉素和醚菌酯作为活性组分制成的杀菌剂中，春雷霉素与醚菌酯的重量比为1∶2～9，春雷霉素和醚菌酯累积重量占制剂总重量比的9～11％。本发明产品具有增效作用明显、速效性好、持效期长、高效低残留等优点，可以延缓水稻稻瘟病对三环唑的抗性，发病前预防稻瘟病保护水稻，发病后提高水稻抗病力，治疗稻瘟病，兼有预防和治疗作用，与当前市场需求相吻合，具有很大的市场前景。文档编号A01N43/16GK101664031SQ200910114449公开日2010年3月10日申请日期2009年9月30日优先权日2009年9月30日发明者史万琪,琦李,李婧婧,鲁王申请人:南宁市德丰富化工有限责任公司