专利名称：一种缢蛏杂交育种方法
技术领域：
本发明涉及缢蛏育种，具体涉及一种縊蛏杂交育种方法。
背景技术：
缢蛏(&'"owm/cw/ai cww/r/cto Lamark)，俗称蛏子、蜻、海蛏，属软体动物门 (Mollusca)，瓣鳃纲(LamellibranChia)、异齿亚纲(Heterodonta)、帘蛤目(Veneroida)、 竹蛏科(Solcnidoe)、縊蛏属(&'"o"ovflcw/")。它分布于西太平洋沿海的中国和日本，从 我国辽宁到广东沿海均有分布，被称为四大养殖贝类之一。缢蛏营养丰富，味道鲜 美，是高蛋白、低脂肪、低热量的海洋健康食品之一。目前对于缢蛏的研究主要集中 在生态习性、营养成分、养殖技术、遗传结构与生化遗传特征分析等几个方面进行。 而利用杂交选育良种未见报道。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种缢蛏杂交育种方法，用该方法得到的杂交缢 蛏具有新陈代谢旺盛，生命活力较高，适应环境的能力相对较高的优点。
本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为 一种缢蛏杂交育种方法，包括下述 步骤
1) 亲贝选择在10月份，选取2龄的宁海缢蛏和乐清缢蛏为杂交亲本，所述杂交 亲本为个体健壮，进出水管伸縮有力迅速，生殖腺饱满的个体；
2) 促熟杂交亲本洗净消毒后，将上述杂交亲本入暂养池暂养，杂交亲本的暂养 密度为3500 4500个/i^水体，在暂养池每天用金藻和熟蛋黄早晚各投喂一次，每天金 藻的投喂量为5 10万个/1113水体，每天熟蛋黄的投喂量为5 10g/i^水体，暂养至杂 交亲本的性腺成熟；利用熟蛋黄可以让杂交亲本提早和基本同步性腺成熟，使受精率得 到提高；
3) 催产:将上述性腺成熟的杂交亲本先在温度为2 5'C条件下低温催产2 5小时， 再在常温条件下阴干催产8小时，然后用流水冲洗催产，得到精子和卵细胞；
4) 受精和孵化将上述精子和卵细胞按2: l的数目比例混合受精，让受精卵在孵 化池中充气孵化至D形幼虫；
5) 幼虫培育将上述D形幼虫用400目筛网捞出移到培育池中充气培育至D形幼 虫长成为稚贝，培育池中D形幼虫的培育密度为40 60万个/m3，培育池中的海水比重为1.01 1.03， PH值为8.0 8.5，水温为18 23°C，光照为1800 2300LmX，培育 池中每天换水一次，每天换水量为30 100%，培育池中每天用金藻和扁藻早晚各投喂 一次，每天金藻的投喂量为3 8万个/m"K体，每天扁藻的投喂量为0.5 2万个/n^水 体；
6)育种选取个体大的上述稚贝作为直系杂交育种品种进行遗传育种，该杂交育 种品种的个体大的子代即为杂交缢蛏。取杂交缢蛏、宁海缢蛏和乐清缢蛏的小段水管， 提取RNA，反转录合成cDNA，用试剂盒和下述引物进行PCR检测ATP合成酶引物 F: 5，-CAGGCTGCCAGATTTATTGG-3，， R: 5，-GCTGCTTCAG GGATGGGTTT-3， 0-肌动蛋白引物F : 5'-AGTTGCCGCT CTTGTCGTGG-3', R : 5'-TGCTCTGGGC TTCATCTCCG-3，试剂盒由大连宝生生物工程有限公司提供，引物由上海生工生物工程 有限公司提供；检测结果，杂交缢蛏比宁海缢蛏、乐清缢蛏的ATP合成酶都要高2倍多， 说明该品种不同于宁海缢蛏、乐清缢蛏，为杂交缢蛏，显示杂交优势，该杂交缢蛏新陈 代谢旺盛，生命活力较高，适应环境的能力相对较高，因此生长速度快，个体大，养殖 的经济效率高。
在幼虫培育步骤中，当所述D形幼虫培育5 8天后，在所述培育池中投入软沙泥， 所述软沙泥的投放量为2 3Kg/m"K体，以后每隔3 5天更换所述软沙泥一次；软沙 泥作为附着基质效果较好，更换软沙泥是为了防止病菌滋生。
所述软沙泥为海区滩涂的干泥用水泡成匀浆，经160 300目的筛绢过滤，滤液煮沸 消毒，入池沉淀24小时后的沉淀泥，经过滤的软沙泥质地优良。
在促熟步骤中，用熟豆浆代替所述熟蛋黄，每天熟豆浆的投喂量为5 10ml熟豆浆/m3 水体。
与现有技术相比，本发明的优点在于一种缢蛏杂交育种方法，通过亲贝选择、促熟、 催产、受精和孵化、幼虫培育和育种，得到了杂交缢蛏，该杂交缢蛏新陈代谢旺盛，生 命活力较高，适应环境的能力相对较高，因此其个体比宁海缢蛏和乐清缢蛏都大，生长 速度也快，是一种具较高经济效率的养殖品种。本发明的育种方法用熟蛋黄促熟，用低 温和阴干催产，用合理的培育密度、合适的水温、盐度、PH值和光照等条件的幼虫培育， 直系遗传育种技术，本发明的方法合理、科学，得到杂交缢蛏的经测定其ATP合成酶的 相对量较高，与宁海缢蛏和乐清缢蛏不同，符合杂交品种特征。
具体实施例方式
以下结合实施例对本发明作进一步详细描述。 实施例
一种缢蛏杂交育种方法，首先在10月份，选取个体健壮，进出水管伸縮有力迅速，
生殖腺饱满的2龄的宁海缢蛏和乐清缢蛏为杂交亲本；将选取的杂交亲本洗净消毒后， 投入暂养池暂养，每立方米水体(r^水体)中杂交亲本的暂养密度为3500 4500个，
4在暂养池每天用金藻和熟蛋黄早晚各投喂一次，每立方米水体中每天金藻的投喂量为 5~10万个，每天熟蛋黄的投喂量为5 10g，暂养至杂交亲本的性腺基本同步成熟；选 取性腺成熟的杂交亲本先放入低温箱中在2 5°C (—般为4'C)条件下低温催产2 5 小时，低温催产时要注意观察，防止杂交亲本冻死，低温催产后再在常温条件下阴干催 产8小时，然后将杂交亲本放入流水中，让流水冲洗，杂交亲本的性腺受流水剌激后， 精子或卵细胞从性腺中流出来了，收集精子和卵细胞，精子和卵细胞按2: 1的数目比 例混合受精，让受精卵在孵化池中充气孵化至D形幼虫；将孵化池的D形幼虫用400 目筛网捞出移到培育池中充气培育至D形幼虫长成为稚贝，培育池的每立方米水体中D 形幼虫的培育密度为40 60万个，培育池中的海水比重为1.01 1.03，PH值为8.0 8.5， 水温为18 23'C，光照为1800 2300LmX，培育池中每天换水一次，每天换水量为30 100%，培育池中每天用金藻和扁藻早晚各投喂一次，每天金藻的投喂量为3 8万个/m3 水体，每天扁藻的投喂量为0.5 2万个/1113水体，当D形幼虫培育5 8天后，在培育 池中投入经筛选和高温消毒的软沙泥作为底质，软沙泥的投放量为2 3Kg/i^水体，以 后每隔3~5天移池更换培育池的底质一次，并对幼苗进行冲洗；稚贝出池后，快速运 往暂养池，暂养池每2 3天换水一次，每次换水1/3 1/2，根据池水肥瘦，适时投喂 饼粕上清液等；在清明到芒种将稚贝均匀播放在的蛏田内养殖；再选取其中个体大，健 壮，生殖腺饱满的2龄的缢蛏为直系杂交育种品种进行遗传育种，在得到子代中也选取 其中个体大，健壮的稚贝为杂交缢蛏亲本进行养殖和自然或人工繁殖都可。
上述实施例中熟蛋黄也可以用熟豆浆代替，每天熟豆浆的投喂量为5 10ml熟豆浆 /m3水体。
权利要求
1、一种缢蛏杂交育种方法，其特征在于包括下述步骤1)亲贝选择在10月份，选取2龄的宁海缢蛏和乐清缢蛏为杂交亲本，所述杂交亲本为个体健壮，进出水管伸缩有力迅速，生殖腺饱满的个体；2)促熟杂交亲本洗净消毒后，将上述杂交亲本入暂养池暂养，杂交亲本的暂养密度为3500～4500个/m3水体，在暂养池每天用金藻和熟蛋黄早晚各投喂一次，每天金藻的投喂量为5～10万个/m3水体，每天熟蛋黄的投喂量为5～10g/m3水体，暂养至杂交亲本的性腺成熟；3)催产将上述性腺成熟的杂交亲本先在温度为2～5℃条件下低温催产2～5小时，再在常温条件下阴干催产8小时，然后用流水冲洗催产，得到精子和卵细胞；4)受精和孵化将上述精子和卵细胞按2∶1的比例混合受精，让受精卵在孵化池中充气孵化至D形幼虫；5)幼虫培育将上述D形幼虫用400目筛网捞出移到培育池中充气培育至D形幼虫长成为稚贝，培育池中D形幼虫的培育密度为40～60万个/m3，培育池中的海水比重为1.01～1.03，PH值为8.0～8.5，水温为18～23℃，光照1800～2300LmX，培育池中每天换水一次，每天换水量为30～100％，培育池中每天用金藻和扁藻早晚各投喂一次，每天金藻的投喂量为3～8万个/m3水体，每天扁藻的投喂量为0.5～2万个/m3水体；6)育种选取个体大的上述稚贝作为杂交育种品种进行遗传育种，该杂交育种品种的个体大的子代即为杂交缢蛏。
2、 如权利要求1所述的一种縊蛏杂交育种方法，其特征在于在幼虫培育步骤中， 当所述D形幼虫培育5 8天后，在所述培育池中投入软沙泥，所述软沙泥的投放量为 2 3Kg/mS水体，以后每隔3 5天更换所述软沙泥一次。
3、 如权利要求2所述的一种缢蛏杂交育种方法，其特征在于所述软沙泥为海区滩 涂的干泥用水泡成匀浆，经160 300目的筛绢过滤，滤液煮沸消毒，入池沉淀24小时 后的沉淀泥。
4、 如权利要求1所述的一种缢蛏杂交育种方法，其特征在于在促熟步骤中，用熟 豆浆代替所述熟蛋黄，每天熟豆浆的投喂量为5 10ml/m"K体。
全文摘要
本发明公开了一种缢蛏杂交育种方法，通过亲贝选择、促熟、催产、受精和孵化、幼虫培育和育种，得到了杂交缢蛏，该杂交缢蛏新陈代谢旺盛，生命活力较高，适应环境的能力相对较高，因此其个体比宁海缢蛏和乐清缢蛏都大，生长速度也快，是一种具较高经济效率的养殖品种。本发明的育种方法用熟蛋黄促熟，用低温和阴干催产，用合理的培育密度、合适的水温、盐度、pH值和光照等条件的幼虫培育，直系遗传育种技术，本发明的方法合理、科学，得到杂交缢蛏的经测定其ATP合成酶的相对量较高，与宁海缢蛏和乐清缢蛏不同，符合杂交品种特征。
文档编号A01K61/00GK101664007SQ20091015292
公开日2010年3月10日 申请日期2009年9月21日 优先权日2009年9月21日
发明者慧 李, 晔 李, 李太武, 石晓辉, 秦玉明, 苏秀榕 申请人:宁波大学