低温处理藏红花切块制备子种球的方法
【专利摘要】本发明公开了一种利用低温处理藏红花切块制备子种球的方法，通过对种球进行选种、切块、消毒、低温处理、营养土种植等步骤大规模生产种球，解决种球繁殖系数低的问题，降低生产和种植成本，还可以减少或消除病害浸染，为大规模种植藏红花奠定基础，从根本上解决藏红花资源短缺的问题。
【专利说明】低温处理藏红花切块制备子种球的方法
【技术领域】
[0001]本发明属于生物工程领域，具体涉及到利用藏红花生物学特性开发一种利用低温处理藏红花切块生产其种球的方法。
【背景技术】
[0002]藏红花(Saffron ;学名:Crocus sativus L)属于鳶尾科多年生草本植物，又名西红花、番红花、撒馥兰、泊夫兰等。主要出产在地中海、欧洲和中亚地区，其中以西班牙、法国、伊朗、印度、意大利、希腊、德国为主，被西班牙人誉为“红色金子”。我国藏红花是从印度经西藏传入内地，故称藏红花。目前，藏红花已经被国家中医药管理局列为重点发展的中药材品种。
[0003]藏红花是一种名贵药食两用植物，不仅药用广泛，还大量用于日用化工、食品、染料等工业，是美容化妆品与香料制品的宝贵原料。藏红花取其柱头入药，具有活血化瘀、消肿止痛、健胃通经之效，在国内外都有较长的药用历史。近年来研究发现藏红花成分藏红花酸(Crocetin)、藏红花醒(Safranal)、藏红花素类(Crocins)和藏红花苦素(Picrocrocin)等都具有较强的抗肿瘤活性，特别对于血癌细胞、乳头癌、扁平细胞瘤和软组织肉瘤等都具有较强的抑制作用，有望发展成新的抗肿瘤制剂。藏红花仅用柱头，其产量低，大约7-15万朵花经400小时的劳动才能加工成I公斤干柱头。近年来由于藏红花应用范围的不断扩大，价格不断攀升，2010年亳州市场上的价格超过30000元/公斤。2012-2013年市场价格也维持在15000-2000元/公斤。据统计，目前国际上西红花的需求缺口较大，我国目前西 红花年产量仅20吨左右，约占市场需求的20%左右，因此需要进口大量的西红花才能满足市场的需求。
[0004]目前，关于藏红花种球繁殖或复壮的研究也有相关报道，如申请号为CN200510114652.9的“一种藏红花种球(苗)规模化组培快繁方法”是在固体培养基上诱导出不同类型的藏红花愈伤，在自制的鼓泡式、周期浸没式、雾化生物反应器中进行大规模培养增殖，最终在周期浸没式、雾化反应器中大量诱导出藏红花种球和种苗直接用于大田种植，球茎还可经适度脱水，长时间保藏。申请号为CN200810201021.4的“番红花的组织培养快速繁殖方法”是通过外植体灭菌、愈伤组织诱导、丛生芽诱导培养、不定芽继代培养和球茎诱导培养等步骤，最后诱导出球茎。如申请号为CN201210071665.2的“西红花的培育方法”是在现有的西红花培育技术基础上对其具体的播种工艺、施肥方法等进行研究的基础上获得的，可提高西红花的产量及质量。申请号为CN201010181832.X的“一种藏红花种球的园艺加工工艺”是通过藏红花种球的园艺加工工艺，解决了以前使藏红花种球受环境温度影响大，容易发霉、腐烂和发芽的问题，可以长期保存，易于携带，增加了室内观赏花的品种，提高了藏红花种球制品的附加值，开拓了藏红花种球销售的广阔市场。如申请号为CN201010238431.3的“新疆西红花种植技术”是利用种植技术解决了西红花球茎繁育率低的问题，实现了西红花的无公害种植，采用该发明技术种植的西红花质量达到国家标准，重金属和农药残留达到国际标准。产量可达到干花产量与球茎投入量之比为1: 1000以上。
[0005]我国从60年代开始从日本、德国引种藏红花，在在浙江、上海、河南、江苏、北京、广西、湖北、西藏等地都有种植，但亩产仅0.5 -1.0公斤，产量低，远满足不了市场需求。藏红花染色体为三倍体，花粉败育高，开花后罕见结实，只能靠球茎无性繁殖。球茎繁殖率很低，一般比率只有1.5-2.0，提高繁殖系数导致子球茎小，花产量下降，难以同时扩大种植面积和提高花产量。
[0006]在我国藏红花种植方式一般采用室内采花，大田繁殖种球的方法。2012-2013年种球市场价格维持在30-55元/公斤，每亩种植量在300-500公斤，种植投资成本巨大，生产成本高。种植过程中存在的萎花现象、病毒病菌侵染造成藏红花产量质量下降、种球退化，损失更为严重(陈书安等，中草药，32(12):1137-1139，2001)。栽培技术难度大，产量又很低。故各地药农在有其他种植效益高的品种可选择的前提下都不愿种植藏红花。因此缺乏一种藏红花种球简易快繁方法，能够大规模繁育脱毒种球，不仅有利于扩大种源、降低生产成本、扩大种植面积，形成规模效益，同时不受节气限制，提高经济效益和社会效益。
【发明内容】
[0007]为了克服上述缺陷，本发明提供了一种利用低温处理藏红花切块制备子种球的方法，通过对种球进行选种、切块、消毒、低温处理、营养土种植等步骤大规模生产种球，解决种球繁殖系数低的问题，降低生产和种植成本，还可以减少或消除病害浸染，为大规模种植藏红花奠定基础，从根本上解决藏红花资源短缺的问题。
[0008]本发明为了解决其技术问题所采用的技术方案是:一种低温处理藏红花切块制备子种球的方法，包括以下步骤:
1)选种:选择成熟的、含水量低的、无病虫害、无破损、无霉烂、肥大的优质藏红花种球，要求每只种球重量在8-40克以上，尽量选择芽点饱满多的种球；
2)清洗:先清除步骤I)中种球表面包膜，将种球浸泡水中10-15分钟后用软牙刷洗去表面泥土、黑斑等杂质,不能伤芽点，再用流水洗涤15-20分钟，最后凉干备用；
3)切块:将步骤2)处理后的种球按芽点分布进行切块，切块后的大小为0.25-1立方厘米；
4)消毒:消毒前先将步骤3)中切块后的种球用清水洗去表面的淀粉，消毒分两步:第一步用75%酒精浸泡30秒,用水洗I次；第二步用3%次氯酸钠浸泡2-3分钟,用清水洗3_4次，然后用50%多菌灵800倍液浸泡1-2小时，凉干备用；
5)低温处理:将步骤4)处理后的切块放入带盖透明的须经过洗净、干燥后的容器内，盖好后放入冰箱冷藏室内，温度控制在2-8°C内，每周定期检查芽点萌发及切块表面霉变情况，低温处理时间30-75天，芽长至2.5厘米时终止低温处理；
6)室内种植:将步骤5)的种苗种植步骤6)按株行距为3.5-5厘米种植在营养土中进行，深度控制在1.5-2.5厘米之间，温度控制在8-20°C，营养土湿度控制在70%-90%之间，另外，适当进行水肥管理和病虫害防治。
[0009]作为本发明的进一步改进，所述步骤3)按芽点分布进行切块时，中如遇种球内部有黑斑或呈黑色，应切除其有黑斑或呈黑色的组织或废弃种球，同时在切块时尽量不可伤及芽点。[0010]作为本发明的进一步改进，所述步骤5)中切块放入容器内，不得超过2/3容器体积。
[0011]作为本发明的进一步改进，所述步骤4)中消毒第一步用的清水为冷开水。
[0012]作为本发明的进一步改进，在步骤6)种植之前可以先进行营养土处理:松树皮与基质按1:9重量比例进行混合制成营养土。
[0013]本发明的有益效果是:本发明建立了一种利用低温处理藏红花切块制备子种球的方法，该方法通过对种球进行切块和低温处理，打破种球休眠期，可诱导种球表面更多的芽点萌发，生产大量的种苗，无需通过组织培养的过程，缩短时间，减少操作环节，降低了生产成本和劳动强度，且该方法操作简便，设备要求低且成本低廉，为大规模种植藏红花奠定了基础。
【具体实施方式】
[0014]为了进一步了解本发明。下面结合实施例对本发明实施方案进行描述，但是应当理解，这些描述只是为进一步说明本发明的特征和优点，而不是对本发明权利要求的限制。
[0015]实施例一:
选择10只的优质藏红花种球，要求每只种球重量在30-40克，尽量选择芽点饱满多的种球；清除种球表面包膜，将种球浸泡水中10-15分钟后用软牙刷洗去表面泥土、黑斑等杂质，再流水洗涤15-20分钟；种球切块按根据表面芽点分布进行切块，切成大小0.25-1立方厘米小方块，共计87个小方块；用清水洗去表面的淀粉后消毒，先用75%酒精浸泡30秒，用清水(最好是冷开水)洗I次，再用3%次氯酸钠浸泡2-3分钟,用清水洗3-4次。然后用50%多菌灵800倍液浸泡1-2小时，凉干后的切块放入带盖透明容器内，装容积2 /3，盖好后放入冰箱冷藏室内，温度在2-8°C内，经过30天低温处理时间后，共有62个小方块长芽，长芽率达71.3%，芽长在0.3-0.5厘米之间，再经过30天低温后，65个小方块长芽，长芽率达74.7%，芽长0.5-1.5厘米之间，健壮，并出现少量叶。
[0016]实施例二:
选择15只的优质藏红花种球，要求每只种球重量在15-25克；清除种球表面包膜，将种球浸泡水中10-15分钟后用软牙刷洗去表面泥土、黑斑等杂质，再流水洗涤15-20分钟；种球切块按根据表面芽点分布进行切块，切成大小0.25-1立方厘米小方块，共计106个小方块；用清水洗去表面的淀粉后消毒，先用75%酒精浸泡30秒，用清水(最好是冷开水)洗I次，再用3%次氯酸钠浸泡2-3分钟，用清水洗3-4次。然后用50%多菌灵800倍液浸泡I小时，凉干后的切块放入带盖透明容器内，装容积2 /3，盖好后放入冰箱冷藏室内，温度在2-8°C内，经过30天低温处理时间后，共有69个小方块长芽，长芽率达65.1%，芽长在0.3-0.5厘米之间，再经过30天低温后，74个小方块长芽，长芽率达69.8%，芽长0.5-1.3厘米之间，健壮，并出现叶鞘分化。
[0017]实施例三:
选择20只的优质藏红花种球，要求每只种球重量在8-15克；清除种球表面包膜，将种球浸泡水中10-15分钟后用软牙刷洗去表面泥土、黑斑等杂质，再流水洗涤15-20分钟；种球切块按根据表面芽点 分布进行切块，切成大小0.25-1立方厘米小方块，共计116个小方块；用清水洗去表面的淀粉后消毒，先用75%酒精浸泡30秒，用清水(最好是冷开水)洗I次，再用3%次氯酸钠浸泡2-3分钟,用清水洗3-4次。然后用50%多菌灵800倍液浸泡
1.5小时，凉干后的切块放入带盖透明容器内，装容积2 /3，盖好后放入冰箱冷藏室内，温度在2-8°C内，经过30天低温处理时间后，共有63个小方块长芽，长芽率达54.3%，芽长在
0.3-0.5厘米之间，再经过30天低温后，71个小方块长芽，长芽率达61.2%，芽长0.5-1.5厘米之间，芽呈细长型。
[0018] 实施例四:
如实施一、二、三得到已长芽小方块后方可在温棚内进行种植，温度控制在20°C以下，自然光照，以松树皮与基质按1:9重量比例进行混合制成营养土种植为佳，按株行距为
3.5-5厘米进行，深度控制在1.5-2.5厘米之间，营养土保持充足的水份，在70%-90%之间为宜。根据种苗生长情况，适当进行水肥管理和防病虫害防治。生长周期在45-90天左右，叶完全发黄，即可 收获，收获后的子种球直径在1.2-3.5厘米，经脱水，方可用于秋季田间种植。
【权利要求】
1.一种低温处理藏红花切块制备子种球的方法，其特征在于，包括以下步骤: 1)选种:选择成熟的、含水量低的、无病虫害、无破损、无霉烂、肥大的藏红花种球，要求每只种球重量在8-40克以上； 2)清洗:先清除步骤I)中种球表面包膜，将种球浸泡水中10-15分钟后洗去表面泥土、黑斑等杂质，用流水洗涤15-20分钟，最后凉干备用； 3)切块:将步骤2)处理后的种球按芽点分布进行切块，切块后的大小为0.25-1立方厘米； 4)消毒:消毒前先将步骤3)中切块后的种球用清水洗去表面的淀粉，消毒分两步:第一步用75%酒精浸泡30秒,用水洗I次；第二步用3%次氯酸钠浸泡2-3分钟,用清水洗3_4次，然后用50%多菌灵800倍液浸泡1-2小时，凉干备用； 5)低温处理:将步骤4)处理后的切块放入容器内，盖好后放入冰箱冷藏室内，温度控制在2-8°C内，低温处理时间30-75天，芽长至2.5厘米时终止低温处理； 6)室内种植:将步骤5)的种苗按株行距为3.5-5厘米种植在营养土中，深度控制在1.5-2.5厘米之间，温度控制在8-20°C，营养土湿度控制在70%-90%之间。
2.根据权利要求1所述的低温处理藏红花切块制备子种球的方法，其特征在于:所述步骤3)按芽点分布进行切块时，应切除有黑斑或呈黑色的组织。
3.根据权利要求1所述的低温处理藏红花切块制备子种球的方法，其特征在于:所述步骤5)中切块放入容器内，不得超过2/3容器体积。
4.根据权利要求1所述的低温处理藏红花切块制备子种球的方法，其特征在于:所述步骤4)中消毒第一步用的水为冷开水。
5.根据权利要求1所述的低温处理藏红花切块制备子种球的方法，其特征在于:在步骤6)种植之前可以先进行营养土处理:松树皮与基质按1:9重量比例进行混合制成营养土。
【文档编号】A01G1/00GK103875432SQ201410139136
【公开日】2014年6月25日 申请日期:2014年4月9日 优先权日:2014年4月9日
【发明者】丁爱军, 朱笑扣, 孙月娟, 陈集双, 陈相华 申请人:南京工业大学大丰海洋产业研究院