本发明涉及一种新型农药及制备方法和应用，具体涉及一种向日葵秸秆抑菌剂及其制备方法和在防治马铃薯早疫病中的应用。
背景技术：
马铃薯早疫病(Alternaria solani Sorauer)是互隔交链孢(Alternaria alternata)引起的一种世界性病害，在我国马铃薯产区分布较为普遍。早疫病多发生在马铃薯生长后期，引起叶片提前干枯，产量降低，个别严重地块全田无收。近年来，早疫病在许多马铃薯产区频繁反生并有上升趋势，一般年份可造成马铃薯减产5％～10％，严重的年份减产量可达50％以上。由互隔交链孢引起的贮藏期马良数块茎腐烂也成为马铃薯产业的一个严重问题，在一些地区，贮藏块茎损失达到30％。马铃薯早疫病病情严重，产量损失越大，病害严重为50％时，产量损失20％，病害严重度为100％时，产量损失为40％。
在实际生产中抗早疫病的马铃薯品种较少，主要依靠化学药剂防治，常用的杀菌剂主要有代森锰锌、百菌清、嘧菌酯等，但是这些化学药剂防治效果不理想，使用成本较高，且国外报道互隔交链孢第嘧菌酯已产生抗药性。为了提高防治效果和降低成本，现有技术中常利用生产中的杀菌剂进行混配，来延缓病菌抗药性的产生，例如台莲梅等人研究混配杀菌剂对马铃薯早疫病的防效及对产量的影响(混配杀菌剂对马铃薯早疫病的防效及对产量的影响,台莲梅,江苏农业科学,第42卷第9期，2014：110-112)，采用嘧菌酯和代森锰锌混用达到优势互补，但是混配杀菌剂依然能够促使病菌产生抗药性。
技术实现要素：
有鉴于此，本发明的目的在于提供一种植物源抑菌剂-向日葵秸秆提取物，使所述向日葵秸秆提取物对引起的马铃薯早疫病的互隔交链孢有抑制作用，从而达到对马铃薯早疫病的防效的目的。
为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
本发明提供了向日葵秸秆抑菌剂，包括以向日葵秸秆为原料，采用溶剂提取获得的向日葵秸秆提取物，所述溶剂为石油醚。
优选的，所述向日葵秸秆的质量与溶剂的体积比为1kg：(5～15)L。
优选的，所述提取的方法包括以下步骤：
1)将向日葵秸秆粉碎，得到的向日葵秸秆粉末；
2)将所述向日葵秸秆粉末与溶剂混合，浸提，得到浸提液；
3)将所述步骤2)得到的浸提液离心，得到的上清液为向日葵秸秆抑菌剂。
优选的，所述浸提的时间为3～5d。
优选的，所述步骤3)中的离心后还包括：将得到的上清液进行浓缩和干燥。
本发明还提供一种所述的向日葵秸秆抑菌剂的制备方法，包括以下步骤：
1)将向日葵秸秆粉碎，得到的向日葵秸秆粉末；
2)将所述向日葵秸秆粉末与溶剂混合，浸提，得到浸提液，所述溶剂为石油醚、乙酸乙酯或石油醚；
3)将所述步骤2)得到的浸提液离心，得到的上清液为向日葵秸秆抑菌剂。
优选的，所述步骤2)中的向日葵秸秆粉末在与溶剂混合前过60～100目筛。
优选的，所述步骤3)中离心的转速为2000～4000r/min转速；所述步骤3)中的离心的时间为10～20min。
本发明还提供了所述的向日葵秸秆抑菌剂在抑制马铃薯早疫病菌中的应用。
优选的，所述的向日葵秸秆抑菌剂的质量浓度为80～360mg/ml。
本发明提供了向日葵秸秆抑菌剂，包括以向日葵秸秆为原料采用溶剂提取获得的向日葵秸秆提取物，所述溶剂为石油醚。采用石油醚为提取溶剂从向日葵秸秆中的提取活性物质，所得向日葵秸秆石油醚提取物中的活性物质均有抑菌功能。
同时，本发明提供了向日葵秸秆抑菌剂，提取的原料来源广泛，容易获得，通过将向日葵秸秆提取抑菌物质，将向日葵秸秆变废为宝，同时减少了向日葵秸秆因焚烧对环境造成的污染，也降低了向日葵秸秆的处理成本。
本发明还提供一种所述的向日葵秸秆抑菌剂的制备方法，将向日葵秸秆粉碎后得到的粉末与溶剂混合，浸提，离心，得到的上清液为向日葵秸秆抑菌剂。所述制备方法具有方法简单，操作简便，制备方法对操作人员的技术要求不高，重复性好的特点。
本发明还提供所述的向日葵秸秆抑菌剂在抑制马铃薯早疫病菌中的应用。所述向日葵秸秆抑菌剂能够有效抑制引起马铃薯早疫病的互隔交链孢的生长，从而达到对马铃薯早疫病的抑制作用，抑菌率达到10.57％～18.02％。
进一步的，本发明所述的向日葵秸秆抑菌剂在质量浓度为80～360mg/mL时对引起马铃薯早疫病的互隔交链孢的抑菌圈直径为12.30～12.83mm，对互隔交链孢的抑菌率为15.27％～17.75％。
具体实施方式
本发明提供了向日葵秸秆抑菌剂，包括以向日葵秸秆为原料，采用溶剂提取获得的向日葵秸秆提取物，所述溶剂为石油醚。
本发明提供了向日葵秸秆抑菌剂，采用弱极性的溶剂石油醚提取向日葵秸秆中的活性物质，得到的向日葵秸秆石油醚提取物中的活性物质有抑菌功能。
在本发明中，所述向日葵秸秆的质量与溶剂的体积比优选为1kg：(5～15)L，更优选为1kg：10L。
在本发明中，所述提取的方法优选包括以下步骤：
1)将向日葵秸秆粉碎，得到向日葵秸秆粉末；
2)将所述向日葵秸秆粉末与溶剂混合，浸提，得到浸提液；
3)将所述步骤2)得到的浸提液离心，得到的上清液为向日葵秸秆提取物。
在本发明中，所述向日葵秸秆选择无虫害、霉变的向日葵秸秆。
在本发明中，所述向日葵秸秆优选在粉碎之前进行烘干。所述烘干的温度优选为35～60℃，更优选为37～50℃；烘干的时间优选为1～5h，更优选为2～4h。
在本发明中，所述粉碎的方法没有特殊限制，采用本领域技术人员所熟知的粉碎方法即可。在本发明中，所述的粉碎通过研磨的方法实现。
在本发明中，所述粉碎后向日葵秸秆的粒度优选为60～100目，更优选为70～90目。
得到向日葵秸秆粉末后，本发明将所述向日葵秸秆粉末与溶剂混合，浸提，得到浸提液。本发明对所述混合的方法没有特殊限制，采用本领域技术人员所熟知的混合方法即可。在本发明实施例中，所述的混合采用搅拌的方法使原料和溶剂混合均匀。
在本发明中，所述浸提的时间为3～5d。所述浸提优选在常温条件下进行。
得到浸提液后，本发明对所述浸提液进行离心，得到上清液。在本发明中，所述离心的速度优选为2000～4000r/min，更优选为3500r/min。所述离心的时间为10～20min，更优选为15min。
得到上清液后，本发明优选将所述上清液进行浓缩和干燥，得到向日葵秸秆提取物固体粉末。
在本发明中，所述浓缩优选为旋转蒸馏浓缩。所述的旋转蒸馏浓缩的温度优选为30～45℃，更优选为35～40℃。所述浓缩的时间优选为1～5h，更优选为2～4h。
在本发明中，所述的干燥优选为真空干燥。所述的真空干燥的冷阱温度优选为-25～-55℃，更优选为-30～-45℃。所述的真空干燥的真空度优选为15～110KPa，更优选为30～100KPa。
在本发明中，向日葵秸秆抑菌剂优选还包括农药领域接受的辅料，制成农药领域的剂型。
本发明还提供一种所述的向日葵秸秆抑菌剂的制备方法，包括以下步骤：
1)将向日葵秸秆粉碎，得到的向日葵秸秆粉末；
2)将所述向日葵秸秆粉末与溶剂混合，浸提，得到浸提液，所述溶剂为石油醚、乙酸乙酯或石油醚；
3)将所述步骤2)得到的浸提液离心，得到的上清液为向日葵秸秆抑菌剂。
在本发明中，所述向日葵秸秆粉末在与溶剂混合前过60～100目筛，更优选为70～90目。
在本发明中，所述离心的转速优选为2000～4000r/min，更优选为3500r/min；所述离心的时间优选为10～20min，更优选为15min。
本发明中，所述得到的向日葵秸秆抑菌剂优选还包括农药领域接收的辅料。
在本发明中，所述农药领域接受的辅料的种类优选为优选包括润湿剂，分散剂，崩解剂，稳定剂，pH值调节剂，消泡剂，增效剂和填料中的一种和几种。
在本发明中，所述向日葵秸秆抑菌剂优选制成农药领域的抑菌剂剂型。
在本发明中，所述剂型的种类优选为石油醚分散粒剂或可湿性粉剂。
本发明还提供了所述的向日葵秸秆抑菌剂在抑制马铃薯早疫病菌中的应用。
在本发明中，所述的向日葵秸秆抑菌剂的质量浓度优选为80～36mg/ml，更优选为160～240mg/ml。
下面结合实施例对本发明提供的向日葵秸秆抑菌剂、制备方法及其在防治马铃薯早疫病中的应用进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例1
选择无虫害、霉变的向日葵秸秆为原料，用粉碎机制成粉状，过95目筛，收集得到的向日葵秸秆粉末。称取粉末1kg，与10L的石油醚混合，加入桶中浸提3天，浸提液以3000r/min转速离心20min，收集上清液，在45℃的条件下旋蒸浓缩2h，浓缩物经真空冷冻干燥，得提取物粉末，4℃冰箱中保藏备用。
实施例2
选择无虫害、霉变的向日葵秸秆为原料，用粉碎机制成粉状，过70目筛，收集得到的向日葵秸秆粉末。称取粉末1kg，与15L的石油醚混合，加入桶中浸提5天，浸提液以4000r/min转速离心10min，收集上清液，在35℃的条件下旋蒸浓缩3h，浓缩物经真空冷冻干燥，得提取物粉末，4℃冰箱中保藏备用。
实施例3
选择无虫害、霉变的向日葵秸秆为原料，用粉碎机制成粉状，过60目筛，收集得到的向日葵秸秆粉末。称取粉末1kg，与5L的石油醚混合，加入桶中浸提4天，浸提液以3500r/min转速离心15min，收集上清液，在30的条件下旋蒸浓缩4h，浓缩物经真空冷冻干燥，得提取物粉末，4℃冰箱中保藏备用。
实施例4、5和6
将实施例1，实施例2和实施例3得到的向日葵秸秆石油醚提物粉末分别配制成质量浓度为80mg/mL、160mg/mL、240mg/mL和360mg/mL。
向日葵秸秆石油醚提取物抑菌试验准备4个含20mLPDA培养皿，待PDA凝固后，将9个浓度的提取液分别滴入1mL至不同培养皿中并涂布均匀作为试验组，未作处理的培养皿为空白对照。每个培养皿倒置等距离接入3个培养1周的互隔交链孢菌饼(直径为6mm)。接种后，所有培养皿于28℃恒温培养箱中培养24h。培养结束后，用游标卡尺以十字交叉法测量计算每个培养皿中3个菌落直径的平均值，，并根据如下公式计算抑菌率。
实施例1、实施例2和实施例3得到的向日葵秸秆石油醚提取物对互隔交链孢的抑制作用见表1。
表1向日葵秸秆石油醚提取物对互隔交链孢的产生的抑菌圈与抑菌率结果
由以上实施例可知，本发明提供了向日葵秸秆抑菌剂，包括以向日葵秸秆为原料采用溶剂提取获得的向日葵秸秆提取物，所述溶剂为石油醚。所述向日葵秸秆抑菌剂有效成分浓度在80mg/mL以上对马铃薯早疫病病原菌-互隔交链孢具有明显的抑菌效果，抑菌率为10.72％，并且随着有效成分浓度增加对互隔交链孢具有明显的抑菌效果增强。从成本角度考虑，优选向日葵秸秆抑菌剂有效成分浓度在160～240mg/mL时能够达到较好的抑菌效果，抑菌率15.27％～17.75％。当向日葵秸秆抑菌剂有效成分浓度在360mg/mL，抑菌率最高达到18.02％。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。