一种繁育考来木的方法与流程

文档序号:12299253阅读:362来源:国知局

本发明属于植物快繁方法技术领域,具体涉及一种繁育考来木的方法。



背景技术:

大多数景观植物的花期主要集中在早春到初夏时期,虽然开展了色叶植物的推广应用工程,起到了一定效果,但秋冬季节植物景观仍相对单调,广大市民对于冬季开花植物的需求十分渴望。

考来木属芸香科、考来木属常绿小灌木,原产澳大利亚,分布较为广泛,树型不规则。呈直立或半匍匐生长;叶片短小,对生,背面多有绒毛。逆光观察时可见半透明的油滴状斑点;花多着生于叶腋处,钟状、灯笼状、长管状或细长管状,长约2.5 cm,单株花朵数量众多,花瓣顶端多反卷呈星状,花蕊突出花瓣外。花期较长,多数品种从夏末开至晚冬、甚至到初春;花色较多,有火红色、白色、绿色、粉色、橘红色等。在寒冷的冬日,考来木以其浓绿的叶片、纤细可爱的繁花、五彩缤纷的色彩夺人眼球,宛如冬季里的精灵。

近年来,从澳大利亚重点引进的考来木经过科技人员近三年的研究最终繁育成功,并通过扦插、组织培养等无性繁育方式进行了繁育试验,但是现有的考来木培育技术无法实现规模化、自动化快速繁殖。



技术实现要素:

本发明要解决的技术问题是克服现有技术中无法实现考来木规模化、自动化快速繁殖的缺陷,提供一种繁育考来木的方法,其以考来木的带腋芽枝条为外植体,通过外植体消毒、愈伤组织诱导、增殖、丛生芽诱导、生根诱导等过程实现考来木的离体培养。

为了解决上述技术问题,本发明提供了如下的技术方案:

本发明一种繁育考来木的方法,其包括以下步骤:

S1、外植体消毒处理:选择生长健壮、无病虫害的考来木的带腋芽枝条为外植体,先用0.5 mg/L 的GA3浸泡外植体10~20min,使外植体保持快速分裂的生长状态,降低后序消毒等处理对细胞分裂状态的影响;然后将外植体用洗衣粉水浸泡10~30min,然后自来水漂洗干净,然后置于超净台上,用75%酒精消毒30~60S,无菌水冲洗4~6遍后再用2.5%次氯酸钠溶液消毒10~30min,消毒滤纸吸干水分后用;

S2、愈伤组织诱导:将步骤S1消毒处理好的外植体切取0.5cm左右长度的茎段接种于诱导培养基中进行全黑暗,19~22℃,空气相对湿度为50%~60%的条件下培养8~12天,然后再置于普通日光灯为光源、光照强度为 1500-20001x 下,每日光照15小时,温度20-25℃、湿度为 50%~60%,培养 2~4 天至愈伤组织形成,然后置于每日光照12~14小时、光照强度为1000~2000lx、培养温度为25~28℃、空气相对湿度为75%的条件下培养30天后统计诱导率;优选的,为了减少愈伤组织的褐化或木栓化,培养愈伤组织时,可以加入纳米活性炭、PVP和柠檬酸中的一种或几种来抑制褐变效应,更优选的可以加入纳米活性炭2~4g/L、PVP 0.5~1 g/L和柠檬酸4~6mg/L作为复合防褐和防木栓化制剂;

S3、增殖培养:将步骤S2诱导培养得到的愈伤组织转接到增殖培养基中进行继代,接种后置于每天光照12~14小时,光照强度为2000~3000lx,置于培养温度为25~28℃,空气相对湿度为75%的条件下培养30天后统计增殖情况;

S4、丛生芽诱导:将步骤S3继代得到的愈伤组织转接至芽诱导培养基中进行诱导分化培养,接种后置于每天光照12~14小时,光照强度为2000~3000lx,置于培养温度为25~28℃,空气相对湿度为75%的条件下培养30天后统计分化情况;

S5、生根培养:将经步骤S4分化培养得到的丛生芽转接至生根培养基中进行生根,接种后置于每天光照12~14小时,光照强度为2000~3000lx,置于培养温度为25~28℃,空气相对湿度为75%的条件下培养30天后统计生根情况;

S6、炼苗移栽:丛生芽生根20天后,具备发达健壮的根时将组培苗不揭瓶盖在自然光下炼苗,移栽时用镊子取出组培苗,小心洗净基部残留的培养基,选择健壮苗移栽到消过毒的轻基质中,浇足水,遮荫处理,移栽后经常喷水,保持空气湿度,植株成活后移至珍珠岩、草炭土的混合基质中定植。优选的所述轻基质由以下重量份数的各组分组成:熟田土40~60份、稻草灰15~30份、树皮粉末25~35份、膨化珍珠岩6~10份、

发酵稻壳15~20份、椰糠10~20份 ;沼渣8~12份、长效复合缓释肥2~5份。

进一步地,步骤S1中,所述的外植体为带腋芽的枝条切取成长度为0.5~2.5cm,腋芽位于中间的茎段,切去叶片,保留两片叶柄基部保护腋芽生长点,进行消毒处理。

进一步地,步骤S2中,所述的诱导培养基为:MS+1.0~3.0mg/L6-BA+0.1~0.5mg/LNAA+0.1~0.5g/LLH+1~2g/LPVP+25~30g/L蔗糖+3.5~6.0g/L琼脂,pH为5.4~5.8。

进一步地,步骤S3中,所述的增殖培养基为:MS+1.0~2.0mg/L6-BA+0.1~0.2mg/LNAA+25~30g/L蔗糖+3.5~6.0g/L琼脂,pH为5.4~5.8。

进一步地,步骤S4中,所述的芽诱导培养基为:MS+0.5~1.0mg/LNAA+0.1~0.5mg/L6-BA+20~30g/L蔗糖+3.5~6.0g/L琼脂,pH为5.4~5.8。

进一步地,步骤S5中,所述的生根培养基为:1/2MS+1.0~5.0mg/LNAA+20~30g/L蔗糖+3.5~6.0g/L琼脂,pH为5.4~5.8。

进一步地,步骤S6中,将生根试管苗置于自然环境中6~10 天,取出洗净根部,用500~600 倍托布津水溶液浸泡数秒,移栽到草炭土、珍珠岩的混合基质中,起始6~10 天内保持苗的叶面湿润并适当遮阳,其后按干透湿透的原则浇水,逐渐加强光照至全光照,进行栽种。

本发明所达到的有益效果是:

本发明以考来木的带腋芽枝条为外植体,通过外植体消毒、愈伤组织诱导、增殖、丛生芽诱导、生根诱导等过程实现考来木的离体培养,为考来木的工厂化生产和推广应用提供了技术支持。本发明提供的繁殖方法,极大加快了考来木的繁殖速度,一旦得到无菌苗后,可以利用无菌苗诱导增殖出大量不定芽,不定芽生根和移栽成活后,即再生为完整植株,形成了一个良好的生产体系,且不受季节限制,环境易控,适合全国各地,解决了考来木引种费用高的问题。

具体实施方式

以下对本发明的优选实施例进行说明,应当理解,此处所描述的优选实施例仅用于说明和解释本发明,并不用于限定本发明。

一种繁育考来木的方法,其包括以下步骤:

S1、外植体消毒处理:选择生长健壮、无病虫害的考来木的带腋芽枝条为外植体,先用0.5 mg/L 的GA3浸泡外植体10~30min,然后将外植体用洗衣粉水浸泡10~30min,然后自来水漂洗干净,然后置于超净台上,用75%酒精消毒30~60S,无菌水冲洗4~6遍后再用2.5%次氯酸钠溶液消毒10~30min,消毒滤纸吸干水分后用;所述的外植体为带腋芽的枝条切取成长度为0.5~2.5cm,腋芽位于中间的茎段,切去叶片,保留两片叶柄基部保护腋芽生长点,进行消毒处理;

S2、愈伤组织诱导:将步骤S1消毒处理好的外植体切取0.5cm左右长度的茎段接种于诱导培养基中进行全黑暗,19~22℃,空气相对湿度为50%~60%的条件下培养8~12天,然后再置于普通日光灯为光源、光照强度为 1500-20001x 下,每日光照 15 小时,温度20~25℃、湿度为50%~60%,培养2~4天至愈伤组织形成,然后置于每日光照12~14小时、光照强度为1000~2000lx、培养温度为25~28℃,空气相对湿度为75%的条件下培养30天后统计诱导率;所述的诱导培养基为:MS+1.0~3.0mg/L6-BA+0.1~0.5mg/LNAA+0.1~0.5g/LLH+1~2g/LPVP+25~30g/L蔗糖+3.5~6.0g/L琼脂,pH为5.4~5.8;诱导培养基中还可以包含纳米活性炭2~4g/L、PVP 0.5~1 g/L和柠檬酸4~6mg/L。

S3、增殖培养:将步骤S2诱导培养得到的愈伤组织转接到增殖培养基中进行继代,接种后置于每天光照12~14小时,光照强度为2000~3000lx,置于培养温度为25~28℃,空气相对湿度为75%的条件下培养30天后统计增殖情况;所述的增殖培养基为:MS+1.0~2.0mg/L6-BA+0.1~0.2mg/LNAA+25~30g/L蔗糖+3.5~6.0g/L琼脂,pH为5.4~5.8;

S4、丛生芽诱导:将步骤S3继代得到的愈伤组织转接至芽诱导培养基中进行诱导分化培养,接种后置于每天光照12~14小时,光照强度为2000~3000lx,置于培养温度为25~28℃,空气相对湿度为75%的条件下培养30天后统计分化情况;所述的芽诱导培养基为:MS+0.5~1.0mg/LNAA+0.1~0.5mg/L6-BA+20~30g/L蔗糖+3.5~6.0g/L琼脂,pH为5.4~5.8;

S5、生根培养:将经步骤S4分化培养得到的丛生芽转接至生根培养基中进行生根,接种后置于每天光照12~14小时,光照强度为2000~3000lx,置于培养温度为25~28℃,空气相对湿度为75%的条件下培养30天后统计生根情况;所述的生根培养基为:1/2MS+1.0~5.0mg/LNAA+20~30g/L蔗糖+3.5~6.0g/L琼脂,pH为5.4~5.8;

S6、炼苗移栽:丛生芽生根20天后,具备发达健壮的根时将组培苗不揭瓶盖在自然光下炼苗,移栽时用镊子取出组培苗,小心洗净基部残留的培养基,选择健壮苗移栽到消过毒的轻基质中,浇足水,遮荫处理,移栽后经常喷水,保持空气湿度,植株成活后移至珍珠岩、草炭土的混合基质中定植;轻基质由以下重量份数的各组分组成:熟田土40~60份、稻草灰15~30份、树皮粉末25~35份、膨化珍珠岩6~10份、发酵稻壳15~20份、椰糠10~20份;沼渣8~12份、长效复合缓释肥2~5份。

将生根试管苗置于自然环境中6~10 天,取出洗净根部,用500~600 倍托布津水溶液浸泡数秒,移栽到草炭土、珍珠岩的混合基质中,起始6~10 天内保持苗的叶面湿润并适当遮阳,其后按干透湿透的原则浇水,逐渐加强光照至全光照,进行栽种。

本发明以考来木的带腋芽枝条为外植体,通过外植体消毒、愈伤组织诱导、增殖、丛生芽诱导、生根诱导等过程实现考来木的离体培养,为考来木的工厂化生产和推广应用提供了技术支持。本发明提供的繁殖方法,极大加快了考来木的繁殖速度,一旦得到无菌苗后,可以利用无菌苗诱导增殖出大量不定芽,不定芽生根和移栽成活后,即再生为完整植株,形成了一个良好的生产体系,且不受季节限制,环境易控,适合全国各地,解决了考来木引种费用高的问题。

最后应说明的是:以上所述仅为本发明的优选实施例而已,并不用于限制本发明,尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明,对于本领域的技术人员来说,其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改,或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。

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