本发明涉及消毒液技术领域，特别涉及季铵盐消毒液技术领域，具体是指一种复合双链季铵盐消毒液及其使用方法和应用。
背景技术：
口腔是一个多细菌的生态体系，印模由于直接接触患者的唾液、血液，其携带的病毒、微生物可在模型制作过程中引起交叉感染。但由于印模材料如藻酸盐等在水中吸水膨胀，空气中溢水收缩的特点，使得印模采用水蒸汽、消毒液浸泡、紫外线消毒后极易变形。因此近年来对于印模的消毒成为口腔医务工作者面临的重要问题。
季铵盐消毒剂是一类阳离子表面活性剂，其结构通式为：
其中R1～R4代表有机根，它们与氮原子结合成一阳离子基团，为杀菌有效部分，因氮原子与4个有机根结合，因此称“季铵盐”，X为阴离子，如卤素，硫酸根或其它类似的阴离子。用作消毒剂的季铵盐，在R1～R4中一般有一个碳键长达8～18的烷基，短或长于碳链者杀菌力差。单链季铵盐(如1227即十二烷基二甲基苄基氯化铵为代表)只能杀灭某些细菌繁殖体和亲脂病毒，属低效杀菌剂，双链季铵盐(如D-C8～C10烷基二甲基氯化铵为代表)可杀灭多种微生物，包括细菌繁殖体，某些真菌和病毒。
但是对于单一双链季铵盐来说，其可杀灭的微生物的种类还是不够全面，消毒效果还是不够理想，因此希望提供一种复合双链季铵盐消毒液，其杀菌快速，消毒效果好，卫生安全无毒副作用，稳定性良好，并对牙科印模基本无变形作用，保证牙科印模尺寸稳定性。
技术实现要素：
为了克服上述现有技术中的缺点，本发明的一个目的在于提供一种复合双链季铵盐消毒液，其杀菌快速，消毒效果好，适于大规模推广应用。
本发明的另一个目的在于提供一种复合双链季铵盐消毒液，其卫生安全无毒副作用，稳定性良好，适于大规模推广应用。
本发明的另一个目的在于提供一种复合双链季铵盐消毒液，其对牙科印模基本无变形作用，保证牙科印模材料尺寸稳定性，适于大规模推广应用。
本发明的另一个目的在于提供一种复合双链季铵盐消毒液的制备方法，其制备简单，易操作，制成的复合双链季铵盐消毒液杀菌快速，消毒效果好，适于大规模推广应用。
本发明的另一个目的在于提供一种复合双链季铵盐消毒液的制备方法，其制备简单，易操作，制成的复合双链季铵盐消毒液卫生安全无毒副作用，稳定性良好，适于大规模推广应用。
本发明的另一个目的在于提供一种复合双链季铵盐消毒液的制备方法，其制备简单，易操作，制成的复合双链季铵盐消毒液对牙科印模基本无变形作用，保证牙科印模材料尺寸稳定性，适于大规模推广应用。
本发明的另一个目的在于提供一种复合双链季铵盐消毒液在牙科印模消毒中的应用，从而能够对牙科印模进行快速有效杀菌，适于大规模推广应用。
本发明的另一个目的在于提供一种复合双链季铵盐消毒液在牙科印模消毒中的应用，从而对牙科印模消毒，卫生安全无毒副作用，稳定性良好，适于大规模推广应用。
本发明的另一个目的在于提供一种复合双链季铵盐消毒液在牙科印模消毒中的应用，从而对牙科印模消毒，对牙科印模基本无变形作用，保证牙科印模尺寸稳定性，适于大规模推广应用。
为达到以上目的，在本发明的第一方面，提供一种复合双链季铵盐消毒液，其特点是，所述复合双链季铵盐消毒液包括双链季铵盐和单链季铵盐，所述双链季铵盐是双辛烷基二甲基氯化铵或双癸基二甲基氯化铵，所述单链季铵盐是十二烷基二甲基苄基氯化铵。
所述双链季铵盐和所述单链季铵盐的重量百分含量可以根据需要确定，较佳地，所述双链季铵盐的重量百分含量为0.04％～0.06％，所述单链季铵盐的重量百分含量为0.20％～0.30％。
为了实现更好的消毒效果，较佳地，所述复合双链季铵盐消毒液还包括非离子表面活性剂、无机抗干扰剂和增效剂中的一种或几种。
其中非离子表面活性剂主要用于改变消毒液表面张力，使消毒液与微生物细胞膜更易接触；无机抗干扰剂主要用于稳定消毒液的酸碱度，提高消毒液的稳定性；增效剂主要用于溶解微生物细胞膜上的脂溶性物质，加速细胞膜破裂，提高消毒效果。
所述非离子表面活性剂、所述无机抗干扰剂和所述增效剂可以是任何合适的试剂，更佳地，所述非离子表面活性剂是脂肪醇聚氧乙烯醚-9或脂肪醇聚氧乙烯醚-10，所述无机抗干扰剂是EDTA二钠、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、柠檬酸或柠檬酸钠，所述增效剂是癸基糖苷、壬基酚聚醚-10或壬基酚聚醚-14。
所述非离子表面活性剂、所述无机抗干扰剂和所述增效剂的重量百分含量可以根据需要确定，更佳地，所述非离子表面活性剂的重量百分含量为1％～5％，所述无机抗干扰剂的重量百分含量为0.01％～0.5％，所述增效剂的重量百分含量为1％～5％。
在本发明的第二方面，提供一种上述的复合双链季铵盐消毒液的使用方法，其特点是，将所述复合双链季铵盐消毒液对待消毒物品进行喷雾处理，然后将所述待消毒物品置于无菌环境一段时间，再将所述待消毒物品上的所述复合双链季铵盐消毒液洗脱。
所述喷雾处理可以采用任何合适的方法实现雾化，所述喷雾处理的处理时间可以根据需要确定，较佳地，所述喷雾处理采用喷嘴实现雾化，所述喷雾处理的处理时间为30秒～60秒。
所述一段时间可以根据需要确定，较佳地，所述一段时间为5分钟～10分钟。
在本发明的第三方面，提供一种上述的复合双链季铵盐消毒液在物品喷雾消毒中的应用。
所述物品即为上述待消毒物品，可以是任何合适的物品，较佳地，所述物品是牙科模型。
本发明的有益效果主要在于：
1、本发明的复合双链季铵盐消毒液包括双链季铵盐和单链季铵盐，双链季铵盐是双辛烷基二甲基氯化铵或双癸基二甲基氯化铵，单链季铵盐是十二烷基二甲基苄基氯化铵，杀菌快速，消毒效果好，适于大规模推广应用。
2、本发明的复合双链季铵盐消毒液包括双链季铵盐和单链季铵盐，双链季铵盐是双辛烷基二甲基氯化铵或双癸基二甲基氯化铵，单链季铵盐是十二烷基二甲基苄基氯化铵，卫生安全无毒副作用，稳定性良好，适于大规模推广应用。
3、本发明的复合双链季铵盐消毒液包括双链季铵盐和单链季铵盐，双链季铵盐是双辛烷基二甲基氯化铵或双癸基二甲基氯化铵，单链季铵盐是十二烷基二甲基苄基氯化铵，对牙科印模基本无变形作用，保证牙科印模材料尺寸稳定性，适于大规模推广应用。
本发明的这些和其它目的、特点和优势，通过下述的详细说明和权利要求得以充分体现，并可通过所附权利要求中特地指出的手段、装置和它们的组合得以实现。
具体实施方式
为了能够更清楚地理解本发明的技术内容，特举以下实施例详细说明。除非特别说明，这里的百分比均为重量百分比。其中
双辛烷基二甲基氯化铵 厦门市先端科技有限公司 20kg/桶
双癸基二甲基氯化铵 厦门市先端科技有限公司 20kg/桶
十二烷基二甲基苄基氯化铵 上海金山经纬化工有限公司 20kg/桶
脂肪醇聚氧乙烯醚-9 江苏省海安石油化工厂 200kg/桶
脂肪醇聚氧乙烯醚-10 江苏省海安石油化工厂 200kg/桶
EDTA二钠 天津光复科技发展有限公司 250g/瓶
磷酸二氢钾 国药集团化学试剂有限公司 500g/瓶
柠檬酸钠 国药集团化学试剂有限公司 500g/瓶
癸基糖苷 济宁宏明化学试剂有限公司 200kg/桶
壬基酚聚醚-10 江苏省海安石油化公司 200kg/桶
壬基酚聚醚-14 上海恒远生物科技有限公司 500g/瓶
实施例1复合双链季铵盐消毒液1的配制
将0.05g双辛烷基二甲基氯化铵、0.3g十二烷基二甲基苄基氯化铵置于99.65g水中搅拌溶解，制成复合双链季铵盐消毒液1。
实施例2复合双链季铵盐消毒液2的配制
将0.04g双辛烷基二甲基氯化铵、0.2g十二烷基二甲基苄基氯化铵、5g脂肪醇聚氧乙烯醚-9、0.5g EDTA二钠和1g癸基糖苷置于93.26g水中搅拌溶解，制成复合双链季铵盐消毒液2。
实施例3复合双链季铵盐消毒液3的配制
将0.05g双癸基二甲基氯化铵、0.3g十二烷基二甲基苄基氯化铵、3g脂肪醇聚氧乙烯醚-10、0.28g磷酸氢二钾、0.02g磷酸二氢钾和3g壬基酚聚醚-10置于93.35g水中搅拌溶解，制成复合双链季铵盐消毒液3。
实施例4复合双链季铵盐消毒液4的配制
将0.06g双辛烷基二甲基氯化铵、0.2g十二烷基二甲基苄基氯化铵、1g脂肪醇聚氧乙烯醚-9、0.01g柠檬酸钠和5g壬基酚聚醚-14置于93.73g水中搅拌溶解，制成复合双链季铵盐消毒液4。
实施例4杀菌试验
杀菌试验一(精细雾化喷嘴：丹弗斯、030F0616)
对细菌繁殖体的定量杀菌试验
1、设备与材料
(1)印模消毒机：易路牌ESS-1型牙科模型消毒机(杭州易路医疗器械有限公司)。
(2)备选配套用消毒液：
2％戊二醛消毒液(购自杭州朗索医用消毒剂有限公司)
1％复合季铵盐消毒液、2％复合季铵盐消毒液(购自杭州朗索医用消毒剂有限公司)
1％～5％过氧化氢消毒液(1％、2％、3％、4％、5％)(分别由上海哈勃有限公司提供的高浓度过氧化氢稀释而成)
洁力佳表面消毒液(75％乙醇+0.2％季铵盐，购自杭州朗索医用消毒剂有限公司)
实施例1-4制备的复合双链季铵盐消毒液1-4。
2、试验菌株。金黄色葡萄球菌(ATCC6538)、大肠杆菌(8099)、铜绿假单胞菌(ATCC15442)、白色念珠菌(ATCC10231)，均由中国微生物菌种保藏管理会普通微生物中心提供。
3、中和剂：D/E中和肉汤，B/D公司购买。
4、染菌用载体：无菌脱脂布片：用白平纹棉布制作。在剪开前，先将脱脂的布块按载体规定的大小(10mm*10mm)，抽去边缘一周的经纬纱各一根，再按抽纱痕剪开。此法制成的载体大小一致，且无毛边。
5、菌片：染菌后载体置入净化工作台内吹干备用。
6、满载用印模：大号弹性硅橡胶印模(浙江省口腔医院)、藻酸盐材质印模(浙江省口腔医院)、橡皮碗(浙江省口腔医院)、调刀(浙江省口腔医院)、牙科模型石膏(浙江省口腔医院)。每次8件，消毒机内载物架上均匀布放。
二、方法
1、检验依据:：中和剂鉴定试验、定量杀菌试验分别参照卫生部《消毒技术规范》2.1.5.6、2.1.1.7.6条进行。
2、菌片布放：菌片置于消毒机里、中、外各处的印模表面。
3、中和剂鉴定试验：消毒液作用一周期(6分45秒，喷洒45秒后静置6分钟)，试验菌株为大肠杆菌、白色念珠菌，试验重复3次，3次实验表明该中和剂适用于该消毒液对白色念珠菌的杀灭试验。
4、杀菌试验：消毒液作用一周期(6分45秒，喷洒45秒后静置6分钟)后，以无菌手续取出载体，放入中和剂中，经震荡洗脱后，对残留菌进行回收计数，同时以室温下放置相同时间的菌片做阳性对照回收计数。试验重复3次。
5、作用环境温度23℃～25℃，相对湿度35％～45％。
三、结果
表1
表2
模拟现场消毒效果
一、器材
1、试验菌株：白色念珠菌ATCC10231
2、中和剂：D/E中和肉汤
3、消毒机：易路牌ESS-1型牙科模型消毒机
4、备选配套用消毒液：同上述“对细菌繁殖体的定量杀菌试验”中所用的消毒液。
5、染菌用载体：无菌脱脂布片
6、满载用印模：大号弹性印模(浙江省口腔医院)、硅橡胶材质(浙江省口腔医院)、藻酸盐印模(浙江省口腔医院)、普通义齿(浙江省口腔医院)。每次放置8件染菌印模。
7、染菌载体：染菌载体置入净化工作台内吹干备用。
二、方法
1、卫生部《消毒技术规范》(2002年版)2.1.2.2条。
2、杀菌试验：染菌载体置入消毒机内，消毒液工作一周期(6分45秒，喷洒45秒后静置6分钟)后，以无菌手续取出载体，放入中和剂中，经震荡洗脱后，对残留菌进行回收计数，同时以室温下放置相同时间的染菌载体作阳性对照回收计数。
3、作用环境温度23℃～25℃，相对湿度35％～45％。
三、结果
经30件印模(大号弹性印模6个、普通义齿6个、硅橡胶印模9个、藻酸盐印模9个)重复试验表明，不同消毒液经消毒机作用一周期对染于印模表面的白色念珠菌杀灭对数值结果见下表：
表3
杀菌试验二(超声波雾化)
模拟现场消毒效果
按以上杀菌实验一的模拟现场消毒效果的方法进行，但是消毒液采用超声波雾化，复合双链季铵盐消毒液1-4超声波雾化2分钟，经30件印模重复试验表明，作用一周期对染于印模表面的白色念珠菌杀灭对数值＜3.00。
表4
实施例5理化性能检测
pH值：
一、器材
1、试验样品：实施例1-4制备的复合双链季铵盐消毒液1-4，季铵盐含量(分子量按354计)，分别为0.348％、0.235％、0.348％、0.256％。
2、校正用标准缓冲液：磷酸盐缓冲溶液 0.025mol/L pH6.86
邻苯二甲酸氢钾 0.05mol/L pH4.00
硼砂 0.01mol/L pH9.18
3、酸度计METTLER PE20型。
二、方法
1、检验依据：卫生部《消毒技术规范》(2002年版)2.2.1.4条。
2、检验条件：实验环境温度25℃，相对湿度45％。
三、结果
经测试结果表明，四种消毒液的pH分别为7.80、7.89、7.85、7.65。
季铵盐含量：
一、器材
1、试验样品：实施例1-4制备的复合双链季铵盐消毒液1-4，有效成分为季铵盐。
2、仪器设备：电子分析天平METTER AB204N。
3、标准溶液：四苯硼钠0.01968mol/L。
二、方法
1、检测依据：卫生部《消毒技术规范》(2002年版)2.2.1.2.13条、Q/HLS055《杭州朗索医用消毒剂有限公司企业标准易路牌ESS-1型牙科模型消毒机专用消毒液》4.2.2条：季铵盐总含量测定：按消毒技术规范有关规定测定，复合季铵盐的平均分子量为354，在产品有效含量计算时，依此分子量作为计算系数。
三、结果
该四种试样季铵盐含量(分子量按354计)分别为0.348％、0.235％、0.348％、0.256％。
稳定性：
一、器材
1、试验样品：实施例1-4制备的复合双链季铵盐消毒液1-4，季铵盐含量(分子量按354计)，分别为0.348％、0.235％、0.348％、0.256％。
2、仪器设备：电子分析天平METTER AB204N。
3、标准溶液：四苯硼钠0.01612mol/L。
二、方法
1、检查依据：检测依据：卫生部《消毒技术规范》(2002年版)2.2.1.2.13条、Q/HLS055《杭州朗索医用消毒剂有限公司企业标准易路牌ESS-1型牙科模型消毒机专用消毒液》4.2.2条：季铵盐总含量测定：按消毒技术规范有关规定测定，复合季铵盐的平均分子量为354，在产品有效含量计算时，依此分子量作为计算系数。
2、保存条件：取试样置于塑料瓶中置于37℃培养箱保存90天。
3、检测条件：实验环境温度22℃-24℃，相对湿度45％-60％。
三、结果
复合双链季铵盐消毒液1经37℃存放后，季铵盐含量为0.316％，下降率＜10％。存放前后，试样外包装及外观无明显差异，有效期可定为24个月。
对于复合双链季铵盐消毒液2、复合双链季铵盐消毒液3和复合双链季铵盐消毒液4，具有与复合双链季铵盐消毒液1类似的实验结果。
毒性试验
根据卫生部《消毒技术规范》2002年版，对复合双链季铵盐消毒液1-4进行了毒理学试验，试验结果表明：
对于复合双链季铵盐消毒液1：
1、急性经口毒性试验(小鼠)：雌雄两性别小鼠急性经口LD50均大于5.0g/kg体重，属实际无毒。
2、一次完整皮肤刺激试验(家兔)：为轻刺激性。
3、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验：无致微核作用。
表5受试物小鼠急性经口毒性实验结果
结论：雌雄两性别小鼠急性经口LD50均大于5.0g/kg体重，根据急性毒性分级标准属实际无毒。
表6一次接触家兔完整皮肤后刺激反应
结论：复合双链季铵盐消毒液1一次接触家兔完整皮肤后刺激试验最高皮肤刺激指数为1.7，属轻刺激性。
表7受试物小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验结果
u检验：与阴性对照组比较#P＜0.001
结论：对小鼠骨髓细胞嗜多染红细胞无致微核作用。
对于复合双链季铵盐消毒液2、复合双链季铵盐消毒液3和复合双链季铵盐消毒液4，具有与复合双链季铵盐消毒液1类似的实验结果。
实施例6印模精度检测
1、实验材料
藻酸盐印模材料(Heraeus)(翡翠齿科藻酸盐印模材料，普通凝固型，登士柏牙科(天津)有限公司)，超硬石膏(Heraeus)(超硬石膏，1.5kg/包，贺利氏古莎齿科有限公司)，川木粉液配比机(厂家：Amanngirrbach(阿曼吉尔巴赫)，smartbox X2石膏配比机)，川木真空搅拌机(厂家：Amanngirrbach(阿曼吉尔巴赫)，规格型号：smartmix X2真空搅拌机)，silfraden振荡器(石膏振荡器，VIB24，赛法登特)，日进树脂材质制作的标准上、下颌模型(型号500A)(STUDY MODEL,NISSIN DENTAL PROPUCTS INC)、橡皮碗、调刀，托盘，易路牌ESS-1型牙科模型消毒机，实施例1制备的复合双链季铵盐消毒液1。
2、取模方法
按生产厂家使用说明的水粉比例要求调制印模材料，按照水、粉比21g：57ml的比例取材，搅拌机调和1min，取模3min后脱出印模，上、下颌分别制取24个印模。将48个印模分成消毒组和对照组，每组上颌12个、下颌12个印模，消毒组印模消毒后灌注石膏模型，对照组未经消毒立即灌注石膏模型，2组均在灌注石膏30min后脱模。每次取2个印模，消毒、未消毒循环进行。
3、消毒方法
印模制取后立即放入易路牌ESS-1型牙科模型消毒机，经雾化的复合双链季铵盐消毒液1作用一周期(总时间为6分钟45秒，其中喷洒45秒、消毒6分钟)，取出后冲洗印模表面残留消毒液，灌注石膏模型。
4、印模变型检测
采用丹麦3shape A/S公司生产(型号D700)的三维激光分别将标准模型、实验组石膏模型及对照组石膏模型进行扫描，先用六维牙种植设计软件将石膏模型对齐(实验组及对照组每个石膏模型分别与标准模型进行拟合)，然后用Geomagic Studio进行数据处理，分别取齿面偏差0.05mm、0.1mm及0.2mm的偏差分析，计算得到拟合面积与总面积，计算拟合率。
5、统计方法
采用spss 17.0软件分析，数据采用独立样本t检验。
6、结果
实验组与对照组与标准模型拟合，均存在偏差，拟合面积与齿面偏差值成正比，2组间上、下颌模型取齿面偏差0.05mm、0.1mm、0.2mm时，p值均大于0.05，没有统计学差异(表8)；将模型按实验组数据与对照组数据进行统计分析，取齿面偏差0.05mm、0.1mm、0.2mm时，p值均大于0.05，无统计学差异(表9)。
表8实验组与对照组上下颌模型拟合面积比较
表9实验组与对照组模型拟合面积比较
7、结论
采用易路牌ESS-1型牙科模型消毒机对藻酸盐印模进行消毒，经消毒的模型与未经消毒的模型与标准模型均存在偏差，但消毒与未消毒没有统计学差异。
总结论：口腔诊疗中的取模、灌模等操作均有可能将患者口腔内的细菌带到印模和模型上造成交叉感染，因此美国牙医协会和疾病预防控制中心要求印模材料在口腔中取出后应立即消毒，以防传染性疾病的发生。目前临床上用于口腔印模的方法较多，但是印模材料如藻酸盐其溢水收缩、吸水膨胀的这个特点，消毒必须将印模保存在密封100％湿度的容器中，才能避免变型。经过以上试验结果比对，可以认为复合双链季铵盐消毒液1在牙科模型消毒机密闭的条件下对牙科印模进行精细喷嘴雾化消毒，可以控制印模引起的交叉感染，且能保持印模的精确性。
对于复合双链季铵盐消毒液2、复合双链季铵盐消毒液3和复合双链季铵盐消毒液4，具有与复合双链季铵盐消毒液1类似的实验结果。
本发明使用的消毒液是一种复合型消毒液，通过将双辛基/癸基二甲基氯化铵和十二烷基二甲基苄基氯化铵组合，以及非离子表面活性剂，无机抗干扰剂、增效剂等复配而成的。
通过对消毒液的卫生学安全性、杀菌效果、有效含量、pH值、稳定性、腐蚀性等进行了实验室考核，并结合现场使用，对其干扰性(采用三维光学数字技术评价变形性)、模拟现场消毒效果等进行了验证。结果显示，该季铵盐消毒液具有快速的杀菌作用、卫生安全无毒副作用、稳定性良好，与专用的印模消毒机配套使用，具有良好的消毒效果，对印模基本无变形作用，可为临床提供一种方便、有效并保证印模材料尺寸稳定性的消毒方法。
综上所述，本发明的复合双链季铵盐消毒液杀菌快速，消毒效果好，卫生安全无毒副作用，稳定性良好，并对牙科印模基本无变形作用，保证牙科印模尺寸稳定性，适于大规模推广应用。
本领域的技术人员应理解，上述描述所示的本发明的实施例只作为举例而并不限制本发明。
由此可见，本发明的目的已经完整并有效的予以实现。本发明的功能及结构原理已在实施例中予以展示和说明，在不背离所述原理下，实施方式可作任意修改。所以，本发明包括了基于权利要求精神及权利要求范围的所有变形实施方式。