提高甘草种子萌发率的无菌播种方法的筛选方法与流程

文档序号:12299654阅读:来源:国知局

技术特征:

1.提高甘草种子萌发率的无菌播种方法的筛选方法,其特征在于,其包括以下步骤:

步骤S10确定初步筛选范围,检索查阅相关文献资料,对比其他植物物种无菌播种中的种子预处理操作,确定预处理操作的初步筛选范围;

步骤S20选择外植体,选择健康、生长环境一致并且生长状态相似的甘草种子作为外植体,对外植体进行统一的消毒灭菌处理;

步骤S30对照培养,其以MS培养基为基础培养基,酪蛋白的浓度为0.5g/L、活性炭的浓度为0.15 mg/L、硝酸铈的浓度为3g/L,琼脂粉的浓度为10g/L、白砂糖的浓度为7g/L,配制成测试用培养基,分别接种相同量的甘草种子,并进行常规组织培养作为对照组,在常规培养的基础条件在添加进行种子预处理操作作为实验组,对照组和实验组都设置多个平行组;

步骤S40记录检测参数,培养7天后统计每个实验组和对照组的萌发的数量和褐化的数量,并计算萌发率和褐化率;

步骤S50生长量计算,分别将相同实验组或者对照组的甘草幼苗取出,用清水冲洗干净,擦干表面水分并对甘草幼苗进行称重,记录重量;

步骤S60计算评估因数,将重量数值缩小10倍,再加上萌发率减去褐化率计算出评估因数,对比不同浓度梯度的评估因数,挑选出数值最大的评估因数对应的种子预处理操作;

步骤S70缩小筛选范围,使用步骤S60中挑选出的预处理操作范围重复进行步骤S10-S60筛选预处理操作的时间范围;

步骤S80方向筛选基础培养基,使用步骤S70确定的最适预处理操作和时间搭配不同基础培养基,重复步骤S40和步骤S50,并使用步骤S60的计算方法计算评估因数,确定最适基础培养基。

2.根据权利要求1所述的提高甘草种子萌发率的无菌播种方法的筛选方法,其特征在于,所述的步骤S30中每个实验组或者对照组设置5-15个平行组。

3.根据权利要求1所述的提高甘草种子萌发率的无菌播种方法的筛选方法,其特征在于,所述的步骤S70中重复的次数是2-3次。

4.根据权利要求1所述的提高甘草种子萌发率的无菌播种方法的筛选方法,其特征在于,所述的步骤S80中不同的基础培养基包括MS培养基、N6培养基、B5培养基、Nitsh培养基、White培养基和Miller培养基。

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