本发明涉及一种铁皮石斛的栽培方法，特别是一种石斛碱含量高的铁皮石斛的栽培方法。
背景技术：
铁皮石斛别称铁皮兰、吊兰、云南铁皮、铁皮吊兰，是兰科石斛属多年生草本植物，铁皮石斛是石斛类药材的上品，素有“中华仙草-药中黄金”之美称，以茎入药，含有多糖、石斛碱、生物碱等有效成分，具有滋阴清热、生津益胃、润喉明目等功效，在抗肿瘤、提高人体免疫力、治疗胃肠道疾病、抗衰老、抗氧化、抗血小板聚集、降低血糖、治疗白内障等方面均有良好疗效。
现代药理学研究表明，铁皮石斛对非特异性及特异性免疫均有增强作用，在抗肿瘤、抗氧化、降低血糖以及白内障的治疗等方面，药理作用显著。其化学成分较复杂，已确定的化合物类型主要有：生物碱类、多糖类、菲类、联苄母核类，其中生物碱类、多糖类药理活性较为显著。石斛碱型倍半萜类生物碱为石斛属植物特有，其中石斛碱是最早发现，研究最多的生物碱；金钗石斛碱与非甾体类抗炎药药理作用相似，具有免疫调节、抗炎、扩张血管等作用。
随着铁皮石斛的保健功效被人们广泛的认识和接受，野生铁皮石斛已远远不能满足人们的需求。人们已经开始采用人工栽培铁皮石斛，铁皮石斛的栽培方法中，培养基是铁皮石斛赖以生存的条件，不同的培养原料和配方可对铁皮石斛的生长、产量和活性成分等产生重要的影响。现有技术中铁皮石斛用的培养基及现有栽培方法，不利于产出的铁皮石斛的品质保证。特别是不能保证铁皮石斛中石斛碱含量，使得最终得到的铁皮石斛中石斛碱含量低。
技术实现要素：
本发明的目的，是提供一种石斛碱含量高的铁皮石斛的栽培方法，本发明方法培养铁皮石斛时，最终产出的铁皮石斛品质好，有效成分含量高，特别是石斛碱的含量的高。
本发明是这样实现的。
一种石斛碱含量高的铁皮石斛的栽培方法，包括以下步骤：
(1)选苗：选择肉质茎有3～4个节间、长有4～5片叶，根长3cm以上，有4-5条根，根皮色白中带绿，无黑色根，无畸形，无变异的铁皮石斛幼苗；
(2)幼苗处理：将铁皮石斛幼苗根部进行清洗3-4次后，将幼苗根部置于1000mg/l的吲哚乙酸中浸泡20-30min后，得处理后的铁皮石斛幼苗；
(3)大棚建设：搭建宽6-8米，长28-32米，棚肩高110-120米，棚顶高3-4min的种植大棚，棚顶覆盖塑料无滴薄膜好70-80％遮阴度的遮阴网，棚内安装自来水管，大棚四周和入口装有30-40目的防虫网；棚内搭建畦底架空的种植畦，用木架作为种植畦的框架，然后铺设孔径为0.3-0.5cm的塑料平板作为基质支撑面，畦底架空高度为30-50cm，然后在畦面上铺设8-12cm的基质；
(4)移栽：移栽时间为3月，在种植畦的基质上挖2-3cm深的小洞，取铁皮石斛移栽幼苗，用0.3-0.5％的高锰酸钾稀释液浸根消毒后，将幼苗根部放入小洞内，然后用基质盖好，栽培密度为100-200丛/平方米，每丛2-5株，丛距为5-10cm；
(5)温湿度控制：保证大棚内温度白天保持在18-22℃，夜晚15-20℃，湿度控制在80％-90％，移栽后移栽后10-15天喷施0.4-0.6％尿素水溶液；
(6)肥水管理：控制基质正常含水量在30-40％，空气湿度保持60％-70％，每10-15天喷1次水，可每15-20天喷1次0.5％～0.8％磷酸二氢钾水溶液；
(7)病虫害防治：每月用40％乐果乳油1000倍水溶液或50％马拉硫磷1000倍水溶液喷施进行叶面防治，防虫采用防虫网；
(8)采收：11月至次年4月份间进行采收，剪大留小，剪老留嫩。
前述的石斛碱含量高的铁皮石斛的栽培方法，所述步骤(3)中，所述基质主要由按重量份计算的土豆泥10-20份、尿素1-5份、五氧化二磷1-5份、磷酸氢二胺1-5份、四硼酸钠1-3份、肉桂10-20份、巴戟天10-20份、半边莲20-30份、姜夏15-25份、黄连15-25份、麦冬10-20份、生地10-20份、山茱萸15-25份、丹参15-25份、西洋参10-20份、桃仁20-30份、牡丹皮20-30份和葛根20-30份按下述方法制备：取肉桂、巴戟天、半边莲、姜夏、黄连、麦冬、生地、山茱萸、丹参、西洋参、桃仁、牡丹皮和葛根，加8-12倍量的水煎煮3-5h后，过滤，取滤渣，干燥后，粉碎成粗颗粒，粗颗粒与土豆泥、尿素、五氧化二磷、磷酸氢二胺和四硼酸钠混匀，即得。
前述的石斛碱含量高的铁皮石斛的栽培方法，所述基质主要由按重量份计算的土豆泥12-18份、尿素2-4份、五氧化二磷2-4份、磷酸氢二胺2-4份、四硼酸钠2-3份、肉桂12-18份、巴戟天12-18份、半边莲22-28份、姜夏17-23份、黄连17-23份、麦冬12-18份、生地12-18份、山茱萸17-23份、丹参17-23份、西洋参12-18份、桃仁23-27份、牡丹皮23-27份和葛根23-27份按下述方法制备：取肉桂、巴戟天、半边莲、姜夏、黄连、麦冬、生地、山茱萸、丹参、西洋参、桃仁、牡丹皮和葛根，加8-12倍量的水煎煮3-5h后，过滤，取滤渣，干燥后，粉碎成粗颗粒，粗颗粒与土豆泥、尿素、五氧化二磷、磷酸氢二胺和四硼酸钠混匀，即得。
前述的石斛碱含量高的铁皮石斛的栽培方法，所述基质主要由按重量份计算的土豆泥15份、尿素3份、五氧化二磷3份、磷酸氢二胺3份、四硼酸钠2.5份、肉桂15份、巴戟天15份、半边莲25份、姜夏20份、黄连20份、麦冬15份、生地15份、山茱萸20份、丹参20份、西洋参15份、桃仁25份、牡丹皮25份和葛根25份按下述方法制备：取肉桂、巴戟天、半边莲、姜夏、黄连、麦冬、生地、山茱萸、丹参、西洋参、桃仁、牡丹皮和葛根，加8-12倍量的水煎煮3-5h后，过滤，取滤渣，干燥后，粉碎成粗颗粒，粗颗粒与土豆泥、尿素、五氧化二磷、磷酸氢二胺和四硼酸钠混匀，即得。
申请人对本发明进行了大量的实验研究，部分实验如下：
实验例1石斛碱含量考察.
1材料与方法
1.1材料
1.1.1铁皮石斛1：按实施例1进行栽培，采收得到铁皮石斛1。
1.1.2铁皮石斛2：栽培时，基质中不含肉桂、巴戟天、半边莲、姜夏、黄连、麦冬、生地、山茱萸、丹参、西洋参、桃仁、牡丹皮和葛根，其余方法同实施例1进行栽培后，采收得到铁皮石斛2。
1.2仪器和试剂
石斛碱标准品：成都曼思特生物技术有限公司，must-12080608。ae240电子天平：瑞士meitler；hh-s数控恒温水浴锅：金华市文华科教实验仪器厂；bm510旋转蒸发仪：日本yamato公司；6890n气相色谱仪：美国安捷伦公司；uv-2450紫外分光光度计：日本岛津公司；甲醇(色谱纯)：天津市科密欧化学试剂有限公司；其余试剂均为分析纯；苯酚：上海凌峰化学试剂有限公司；硫酸：上海凌峰化学试剂有限公司。
2方法
2.1供试品溶液的制备
2.1.1供试品溶液1的制备：
取本发明铁皮石斛(铁皮石斛1)样品，置烘箱中50℃，干燥，粉碎，过三号筛，取过滤后药材粉末3.34g，加200ml90％乙醇，回流1小时，过滤，倾出上清液，再加100ml90％乙醇，回流1小时，倾出上清液，合并上述2次上清液，置旋转蒸发仪浓缩，水浴锅50℃蒸干，干燥品加甲醇溶解，定容至25ml，即得供试品溶液1。
2.1.2供试品溶液2的制备
取铁皮石斛2样品，置烘箱中50℃，干燥，粉碎，过三号筛，取过滤后药材粉末3.34g，加200ml90％乙醇，回流1小时，过滤，倾出上清液，再加100ml90％乙醇，回流1小时，倾出上清液，合并上述2次上清液，置旋转蒸发仪浓缩，水浴锅50℃蒸干，干燥品加甲醇溶解，定容至25ml，即得供试品溶液2。
2.2对照品溶液的制备
精密称取石斛碱对照品50.01lmg至100ml量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，得500.1mg/l石斛碱对照品母液。50.01mg/l溶液，作为对照品溶液，备用。
2.3色谱条件
色谱柱：db-1毛细管柱(30mm×0.25mm，0.25um)；程序升温：初始温度为80℃，以10℃/min的速率升温至250℃，保持5分钟；进样口温度为250℃，检测器温度为250℃，进样量10ul，理论塔板数按石斛碱计，不低于10000。
2.4标准曲线制备
精密量取对照品溶液0.2、0.5、0.8、1.0、2.0、4.0ml分别置于10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀。按上述色谱条件测定。以峰面积积分为纵坐标，对照品进样量为横坐标进行线性回归，回归方程为a＝0.7522c-0.0252，r＝0.9997，表明石斛碱在0.10-2.00ug范围内具有良好的线性关系。
2.5精密度试验
精密吸取石斛碱对照品溶液l0ul，连续6次进样，记录峰面积，石斛碱峰面积的rsd为1.58％，表明仪器精密度良好。
2.6重复性试验
按上述方法制备6份供试品溶液1和供试品溶液2，按上述色谱条件进行测定。石斛碱峰面积的rsd分别为2.05％和2.06％。
2.7稳定性试验
取同一供试品溶液1，在室温下放置，分别于0、2、4、6、8、l2小时进样，记录石斛碱峰面积，rsd为2.88％。结果表明，供试品溶液1在12小时内稳定。
取同一供试品溶液2，在室温下放置，分别于0、2、4、6、8、l2小时进样，记录石斛碱峰面积，rsd为2.89％。结果表明，供试品溶液2在12小时内稳定。
2.8回收率试验
取已知含量0.46mg/g)的铁皮石斛粉末6份，每份约1.65g，精密称定。准确加入石斛碱对照品母液2ml，按上述方法制备供试品溶液1和供试品溶液2，在上述色谱条件下进行测定，计算回收率。结果平均回收率为97.1％和96.8％，rsd分别为2.5％和2.6％。
2.9样品含量测定
按上述供试品溶液1和供试品溶液2的制备方法和测定条件，分成6份，测定6份铁皮石斛1样品和6份铁皮石斛2样品中石斛碱的含量，记录结果，结果取平均值，结果见表1。
表1石斛碱含量测定结果
由表可知，本发明方法栽培得到的铁皮石斛，最终采收的铁皮石斛中石斛碱的含量较高。铁皮石斛的品质好。
与现有技术相比，本发明方法培养铁皮石斛时，最终产出的铁皮石斛品质好，有效成分含量高，特别是石斛碱的含量的高。
具体实施方式
实施例1。
一种石斛碱含量高的铁皮石斛的栽培方法，包括以下步骤：
(1)选苗：选择肉质茎有3～4个节间、长有4～5片叶，根长3cm以上，有4-5条根，根皮色白中带绿，无黑色根，无畸形，无变异的铁皮石斛幼苗；
(2)幼苗处理：将铁皮石斛幼苗根部进行清洗3次后，将幼苗根部置于1000mg/l的吲哚乙酸中浸泡25min后，得处理后的铁皮石斛幼苗；
(3)大棚建设：搭建宽6-8米，长30米，棚肩高115米，棚顶高3.5min的种植大棚，棚顶覆盖塑料无滴薄膜好75％遮阴度的遮阴网，棚内安装自来水管，大棚四周和入口装有40目的防虫网；棚内搭建畦底架空的种植畦，用木架作为种植畦的框架，然后铺设孔径为0.3-0.5cm的塑料平板作为基质支撑面，畦底架空高度为30-50cm，然后在畦面上铺设8-12cm的基质；所述基质由土豆泥15kg、尿素3kg、五氧化二磷3kg、磷酸氢二胺3kg、四硼酸钠2.5kg、肉桂15kg、巴戟天15kg、半边莲25kg、姜夏20kg、黄连20kg、麦冬15kg、生地15kg、山茱萸20kg、丹参20kg、西洋参15kg、桃仁25kg、牡丹皮25kg和葛根25kg按下述方法制备：取肉桂、巴戟天、半边莲、姜夏、黄连、麦冬、生地、山茱萸、丹参、西洋参、桃仁、牡丹皮和葛根，加10倍量的水煎煮4h后，过滤，取滤渣，干燥后，粉碎成粗颗粒，粗颗粒与土豆泥、尿素、五氧化二磷、磷酸氢二胺和四硼酸钠混匀，即得；
(4)移栽：移栽时间为3月，在种植畦的基质上挖2-3cm深的小洞，取铁皮石斛移栽幼苗，用0.4％的高锰酸钾稀释液浸根消毒后，将幼苗根部放入小洞内，然后用基质盖好，栽培密度为100-200丛/平方米，每丛2-5株，丛距为5-10cm；
(5)温湿度控制：保证大棚内温度白天保持在18-22℃，夜晚15-20℃，湿度控制在80％-90％，移栽后移栽后13天喷施0.4-0.6％尿素水溶液；
(6)肥水管理：控制基质正常含水量在30-40％，空气湿度保持60％-70％，每10-15天喷1次水，可每15-20天喷1次0.5％～0.8％磷酸二氢钾水溶液；
(7)病虫害防治：每月用40％乐果乳油1000倍水溶液喷施进行叶面防治，防虫采用防虫网；
(8)采收：11月至次年4月份间进行采收，剪大留小，剪老留嫩。
实施例2.
一种石斛碱含量高的铁皮石斛的栽培方法，包括以下步骤：
(1)选苗：选择肉质茎有3～4个节间、长有4～5片叶，根长3cm以上，有4-5条根，根皮色白中带绿，无黑色根，无畸形，无变异的铁皮石斛幼苗；
(2)幼苗处理：将铁皮石斛幼苗根部进行清洗4次后，将幼苗根部置于1000mg/l的吲哚乙酸中浸泡30min后，得处理后的铁皮石斛幼苗；
(3)大棚建设：搭建宽8米，长32米，棚肩高120米，棚顶高4min的种植大棚，棚顶覆盖塑料无滴薄膜好80％遮阴度的遮阴网，棚内安装自来水管，大棚四周和入口装有40目的防虫网；棚内搭建畦底架空的种植畦，用木架作为种植畦的框架，然后铺设孔径为0.3-0.5cm的塑料平板作为基质支撑面，畦底架空高度为30-50cm，然后在畦面上铺设8-12cm的基质；所述基质由土豆泥18kg、尿素4kg、五氧化二磷4kg、磷酸氢二胺4kg、四硼酸钠3kg、肉桂18kg、巴戟天18kg、半边莲28kg、姜夏23kg、黄连23kg、麦冬18kg、生地18kg、山茱萸23kg、丹参23kg、西洋参18kg、桃仁27kg、牡丹皮27kg和葛根27kg按下述方法制备：取肉桂、巴戟天、半边莲、姜夏、黄连、麦冬、生地、山茱萸、丹参、西洋参、桃仁、牡丹皮和葛根，加8-12倍量的水煎煮3-5h后，过滤，取滤渣，干燥后，粉碎成粗颗粒，粗颗粒与土豆泥、尿素、五氧化二磷、磷酸氢二胺和四硼酸钠混匀，即得；
(4)移栽：移栽时间为3月，在种植畦的基质上挖2-3cm深的小洞，取铁皮石斛移栽幼苗，用0.5％的高锰酸钾稀释液浸根消毒后，将幼苗根部放入小洞内，然后用基质盖好，栽培密度为100-200丛/平方米，每丛2-5株，丛距为5-10cm；
(5)温湿度控制：保证大棚内温度白天保持在18-22℃，夜晚15-20℃，湿度控制在80％-90％，移栽后移栽后15天喷施0.6％尿素水溶液；
(6)肥水管理：控制基质正常含水量在30-40％，空气湿度保持60％-70％，每10-15天喷1次水，可每20天喷1次0.8％磷酸二氢钾水溶液；
(7)病虫害防治：每月50％马拉硫磷1000倍水溶液喷施进行叶面防治，防虫采用防虫网；
(8)采收：11月至次年4月份间进行采收，剪大留小，剪老留嫩。
实施例3.
一种石斛碱含量高的铁皮石斛的栽培方法，包括以下步骤：
(1)选苗：选择肉质茎有3～4个节间、长有4～5片叶，根长3cm以上，有4-5条根，根皮色白中带绿，无黑色根，无畸形，无变异的铁皮石斛幼苗；
(2)幼苗处理：将铁皮石斛幼苗根部进行清洗3次后，将幼苗根部置于1000mg/l的吲哚乙酸中浸泡20min后，得处理后的铁皮石斛幼苗；
(3)大棚建设：搭建宽6米，长28米，棚肩高110米，棚顶高3min的种植大棚，棚顶覆盖塑料无滴薄膜好70％遮阴度的遮阴网，棚内安装自来水管，大棚四周和入口装有30目的防虫网；棚内搭建畦底架空的种植畦，用木架作为种植畦的框架，然后铺设孔径为0.3-0.5cm的塑料平板作为基质支撑面，畦底架空高度为30-50cm，然后在畦面上铺设8-12cm的基质；所述基质由土豆泥12kg、尿素2kg、五氧化二磷2kg、磷酸氢二胺2kg、四硼酸钠2kg、肉桂12kg、巴戟天12kg、半边莲22kg、姜夏17kg、黄连17kg、麦冬12kg、生地12kg、山茱萸17kg、丹参17kg、西洋参12kg、桃仁23kg、牡丹皮23kg和葛根23kg按下述方法制备：取肉桂、巴戟天、半边莲、姜夏、黄连、麦冬、生地、山茱萸、丹参、西洋参、桃仁、牡丹皮和葛根，加8倍量的水煎煮3h后，过滤，取滤渣，干燥后，粉碎成粗颗粒，粗颗粒与土豆泥、尿素、五氧化二磷、磷酸氢二胺和四硼酸钠混匀，即得；
(4)移栽：移栽时间为3月，在种植畦的基质上挖2-3cm深的小洞，取铁皮石斛移栽幼苗，用0.3％的高锰酸钾稀释液浸根消毒后，将幼苗根部放入小洞内，然后用基质盖好，栽培密度为100-200丛/平方米，每丛2-5株，丛距为5-10cm；
(5)温湿度控制：保证大棚内温度白天保持在18-22℃，夜晚15-20℃，湿度控制在80％-90％，移栽后移栽后10天喷施0.4％尿素水溶液；
(6)肥水管理：控制基质正常含水量在30-40％，空气湿度保持60％-70％，每10天喷1次水，可每15天喷1次0.5％磷酸二氢钾水溶液；
(7)病虫害防治：每月用40％乐果乳油1000倍水溶液喷施进行叶面防治，防虫采用防虫网；
(8)采收：11月至次年4月份间进行采收，剪大留小，剪老留嫩。