本发明涉及一种具有促进葡萄生长过程中转色的药剂，特别涉及一种用于葡萄转色的苯并异脱落酸制剂及其应用。
背景技术：
近10年来，我国葡萄生产逐渐向资源禀赋优、产业基础好、出口潜力大和比较效益高的区域集中，促进葡萄优势产业带的形成。在葡萄的外观品质评价标准中外观颜色不仅是重要的品质指标，也是果实商品性优劣的重要体现，所以葡萄生长过程中着色期特别重要，着色剂使用恰当，葡萄不仅能提早上色、改善品相、增加糖度，还能提前上市、实现更大的经济价值。
目前关于果实着色的研究应用，主要集中在乙烯利、脱落酸等植物生长调节剂和多功能肥料上。葡萄的着色剂一般是含有微量元素、大量元素以及生物材料的肥料，如专利cn104030809公开了一种促进葡萄着色增糖的生物肥料，其中包括发酵蘑菇渣，发酵葡萄皮渣，草木灰，尿素，硫酸钾，磷酸二铵，钙镁磷肥，硫酸锌，硼砂以及复合微生物菌株；专利cn104094971a公开了一种促进葡萄果实着色的栽培方法中在葡萄开花前8-12天使用由过氧化氢、冰乙酸、十二烷基硫酸钠组成的催熟剂喷施葡萄叶片和花穗，每隔2-3天喷施一次，共3-4次有利于葡萄着色；专利cn102057953a公开的果实增色剂中含有光合细菌、花青素液、甲壳素、壳聚糖、磷酸二氢钾、硫酸钾及润湿剂。另外有研究表明丁酸钠、芸苔素内酯也具有促进苹果着色的报道。
以上物质或肥料虽然能起到转色作用，但是经大量试验研究发现：在葡萄的转色过程中单独使用乙烯利制剂容易造成葡萄树落叶、裂果、果粒脱落以及果实不耐储藏等现象；脱落酸直接在葡萄、苹果等水果着色较快，但因脱落酸对光敏感，在使用过程中不稳定易分解，且容易代谢而在实际使用时不好把握。为了改变脱落酸不稳定的结构性质，中国农业大学研究创制出了一种脱落酸的新型类似物(cn103435472)，克服了它的这个缺陷，经大量试验证明，它的活性比天然脱落酸的活性高，药效更强。在葡萄转色的应用中效果比天然脱落酸更好，用量更小，着色更均匀，果实更圆润，其组合物具有更好的田间应用效果。
技术实现要素：
本发明提供了一种稳定性好，着色效果好，着色期短，无副作用的葡萄着色剂，特别是能使葡萄提早增糖增色、上市，获得更大经济效益。
本发明目的是提供一种含有脱落酸新型类似物的高活性物质，具体技术方案是，一种含苯丙异脱落酸的转色剂，其特征在于，含有苯丙异脱落酸和稳定剂，其中苯丙异脱落酸的含量为1～2ppm，优选2ppm，苯丙异脱落酸和稳定剂重量比为1：1～1：5。
本发明涉及的转色剂还包括含有增效剂。可有效促进作物对营养的吸收，促进根茎均匀生长，对作物抗病性有有效的提高，加速作物新陈代谢，对植株生长起到很好的促进调节作用，对葡萄转色提前效果创造优良的增效作用，本发明涉及的增效剂，为下列组分中的至少一种：蔗糖、维生素、氨基酸、有机肥料、营养元素、某些矿物元素等。增效剂的含量为1～20g/l
本发明所涉及的稳定剂，可有效保障主成分苯丙异脱落酸功能的发挥，稳定剂可为柠檬酸、维生素c、乙酰水杨酸、谷胱甘肽、聚乙二醇等。稳定剂的含量为0.5～10mg/l
本发明转色剂的使用方法可为果实/叶面喷施/涂抹，也可为灌根，每次叶面喷施量、根部灌溉量平均为1～2ppm。施用量的变化范围取决于转色时间、栽培植物的品种、植物的生长期、气候条件等，施用类型包括但不仅限于叶面喷施、涂抹以及灌根等。
本发明苯丙异脱落酸使用时采用常规形式，使用在制剂加工技术中通常采用的辅助剂，如乳油、直接可喷雾或可稀释溶液、可稀释乳液、可湿性粉剂、粉剂、可溶性粉剂、颗粒剂或微胶囊剂。施用方法如喷雾、弥雾、喷粉、润湿、撒施或浇泼，可根据作物生长环境和所要达到的目的效果进行适当的选择。施用时期可选在作物苗期或成株期的任何适宜时期，例如，加速葡萄转色可在转色期来临前，进行叶面喷施或灌根，可有效加快葡萄转色并且着色完全，并提高其产品与品质。
本发明的优点：
在植物生长发育过程中起调节作用。所以葡萄可能会由于长势过旺而造成营养缺乏症。而在葡萄生长过程中微量元素很重要，如钙、镁、硼、锌等，其中缺硼容易造成葡萄产生大小粒、幼叶出现油浸状的黄白色斑点、种子发育不良，果实变形等现象；缺锰时新梢、叶片生长缓慢，果实成熟晚，红色葡萄品种的果穗中常夹部分绿色果粒；钙对叶绿素的形成和促进根系的发育与吸收有重要作用，钙对糖的形成，对固定二氧化碳以及生成芳香物质都起着直接和间接的作用。因此，在钙质充足的情况下，可提高浆果的香味和葡萄酒的风味，特别对白葡萄酒和香槟酒更为明显。本发明的增效剂中含有以上微量元素的一种或几种根据不同地区不同品种可进行均可满足生长过程营养供给。
苯丙异脱落酸对多个地区葡萄均可达到的转色作用，效果显著，可塑性强，用量微小，成本低廉，在转色的同时，促进果树生长、保证果实品质并且作用持久。不同浓度作用效果均优于脱落酸或达到与脱落酸相同水平，生产合成工艺利于大规模推广。本发明的转色剂对果树生长安全。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进一步详细说明。
实施例1：河北省葡萄转色试验
本发明所述的转色制剂，配制以下测试溶液，每1l中含有以下成分：
(1)2mg苯丙异脱落酸，5mg柠檬酸，20g氨基酸；
(2)1mg苯丙异脱落酸，5mg维生素c，20g氨基酸；
(±)-aba(脱落酸)溶液每1l中含有以下成分：
(1)2mg(±)-aba，5mg柠檬酸，20g氨基酸；
(2)1mg(±)-aba，5mg维生素e，20g氨基酸；
称取一定量的苯丙异脱落酸，分别溶于0.5ml的dmso(二甲基亚砜)溶液中，制备成10mg/l的母液，制备好的溶液于-20℃下避光保存，配制转色制剂是用移液枪移取一定量母液，加入一定量的稳定剂与增效剂，用蒸馏水稀释到所需浓度。对照为含有0.5％dmso的蒸馏水溶液。
葡萄品种为巨峰，试验地点河北，在葡萄转色开始7d后进行喷施处理，处理15d后进行测定，每单株为一个小区，3次重复，测定指标分别为单果重，花色苷含量，总糖量，可滴定酸含量，以及着色等级的评定。
具体采样方法：分别从同一株葡萄不同果穗的上、中、下3个部位采摘果实，选取整串葡萄用于评价着色指标，其中着色指标评价标准如下：
ⅰ大约整串葡萄的20％以下着色
ⅱ大约整串葡萄的20-40％着色
ⅲ大约整串葡萄的40-60％着色
ⅳ大约整串葡萄的60-80％着色
ⅴ大约整串葡萄的80％以上着色
选择大小均匀一致、无损伤的单粒果实，每株每个部位随机采摘，每次采集的的果实用清水洗净并用蒸馏水再次清洗，擦干，一部分用于测果粒的平均单果粒重。另一部分果实用液氮迅速冷冻后，将冷冻的果实用粉碎机松碎并将其放入-80℃的超低温冰箱中保存，用于测定花色苷含量总糖量，可滴定酸含量。
具体测定方法：
(1)单果重量
每个处理随机选取葡萄果粒20粒，并用电子天平称取其重量，重复3次，求得平均单果粒重。
(2)可溶性总糖测定
称取0.5g葡萄果实，加入2.5ml80％的乙醇后快速倒入研钵中磨碎，将其转到容量为10ml的离心管中，然后加5ml80％的乙醇将研体清洗，清洗后将其全部转入离心管中，当水浴锅中的温度为80℃时，放入离心管，计时30min后从水浴锅中取出，放置常温下等其冷却，冷却后调平并在3500r/min的条件下离心10min，取上清液定容至100ml。
从上清液中取0.2ml，加入干净试管中后依次加5ml蒽酮硫酸和蒸馏水，摇匀，100℃水浴中反应10min，取出冷却后测定其波长，并依据标准曲线计算可溶性糖的含量。
(3)可滴定酸测定
先称取0.5g葡萄果实，用10ml蒸馏水将葡萄果实研磨均匀并转入离心管，然后将清洗研体的10ml蒸溜水全部转入离心管中，在80℃水浴锅中水浴0.5h。拿出来后进行冷却并调平，将离心机调至4000r/min下进行10min的离心，取上清液定容至100ml。向干净的三角瓶中加20ml的上清液，用0.05mol/l的naoh溶液进行滴定，并根据公式计算可滴定酸酸含量。
tta(％)＝(a×0.1×k×c)/(w×d)×100
其中：k：酒石酸克数的系数(k＝0.075)a：消耗naoh量；c：稀释总量；w：样品重量10g；d：测定取样量10ml。
(4)花色苷含量的测定
花色苷的提取：向试管中加入1.0g的葡萄样品后,加入15ml1％hcl-无水甲醇溶液，在黑暗条件下提取一天一夜。
缓冲液的制备：ph1.0缓冲液：使用电子分析天平准确称量1.86g氯化钾，加蒸馏水约980ml，用盐酸和酸度计调至ph1.0，再用蒸馏水定容至1000ml。
ph4.5缓冲液：使用电子分析天平准确称量32.81g无水醋酸钠，加蒸馏水约980ml，用盐酸和酸度计调至ph4.5，再用蒸馏水定容至1000ml。
花色苷的测定：用ph1.0、ph4.5的缓冲液，将样液稀释到适当的倍数,放在暗处，平衡15min。用光路直径为1cm的比色皿在可见分光光度计的510nm和700nm处，分别测定吸光度，以蒸馏水做空白对照。按下式计算花色苷的含量：a＝[(a510-a700)ph1.0-(a510-a700)ph4.5]
花色苷浓度c(mg/l)＝a×mw×df×1000/(ε×l)
两式中：
(a510-a700)ph1.0＝加ph1.0缓冲液的样液在510nm和700nm波长下的吸光值之差；
(a510-a700)ph4.5＝加ph4.5缓冲液的样液在510nm和700nm波长下的吸光值之差；
mw＝449.2(矢车菊—3—葡萄糖苷的分子量，mg/mol)；
df＝样液稀释的倍数；
ε＝26900(矢车菊—3—葡萄糖苷的摩尔消光系数，mol-1)；
l＝比色皿的光路直径，为1cm
各指标测定结果如下：
表1苯丙异脱落酸和(±)-aba对葡萄转色的影响对比
结果表明，使用本发明的苯丙异脱落酸溶液处理后，葡萄的着色时间明显缩短，7天内60-80％的葡萄能着色；采摘时葡萄的糖度能提高到18％，明显比对照组的糖度大；可滴定酸度明显比对照组降低；应用本发明后，葡萄与对照组相比有一定的增产作用；经过本发明苯丙异脱落酸处理后的葡萄没有影响其储存性能，和对照组60-70天后的储存效果相同。
实施例2：陕西葡萄转色试验
本发明所述的转色制剂，配制以下测试溶液，每1l中含有以下成分：
(1)2mg苯丙异脱落酸，5mg抗坏血酸，20g有机肥料；
(2)1mg苯丙异脱落酸，3mg聚乙二醇，20g有机肥料；
(±)-aba溶液每1l中含有以下成分：
(1)2mg(±)-aba，5mg抗坏血酸，20g有机肥料；
(2)1mg(±)-aba，3mg聚乙二醇，20g有机肥料；
称取一定量的苯丙异脱落酸，分别溶于0.5ml的dmso溶液中，制备成10mg/l的母液，制备好的溶液于-20℃下避光保存，配制转色制剂是用移液枪移取一定量母液，加入一定量的稳定剂与增效剂，用蒸馏水稀释到所需浓度。对照为含有0.5％dmso的蒸馏水溶液。
葡萄品种为巨峰，试验地点陕西，在葡萄转色开始7d后进行灌根处理，在处理20d后进行测定，每单株为一个小区，3次重复，测定指标分别为单果重，花色苷含量，总糖量，可滴定酸含量以及着色等级的评定，具体采样方法及测定方法同实施例1。
各指标测定结果如下：
表2苯丙异脱落酸和(±)-aba对葡萄转色的影响对比
结果表明，结果表明，使用本发明的苯丙异脱落酸处理后，葡萄的着色以及成熟时间时间明显缩短，20天内80-100％的葡萄能着色；采摘时葡萄的糖度能提高到25％，明显比对照组的糖度大；可滴定酸度明显比对照组降低；应用本发明后，葡萄与对照组相比有一定的增产作用；经过本发明苯丙异脱落酸处理后的葡萄没有影响其储存性能，和对照组的储存效果相同。
上述实施例对本发明的技术方案进行了详细说明。显然，本发明并不局限于所描述的实施例。基于本发明中的实施例，熟悉本技术领域的人员还可据此做出多种变化，但任何与本发明等同或相类似的变化都属于本发明保护的范围。