一种丁香精油抑菌混合液及其应用

一种丁香精油抑菌混合液及其应用
1.技术领域：本发明属于生物防治技术领域，具体涉及一种丁香精油抑菌混合液及其应用。
2.

背景技术：
香蕉(musa nana lour.)属于芭蕉科(musaceae)芭蕉属(musa),原产于热带亚热带地区，广东、广西、福建、台湾、云南以及海南均有栽培，是世界四大水果之一，其产量仅次于苹果、柑橘、梨，也被联合国粮农组织定义为第四大粮食作物。香蕉枯萎病是香蕉生产的头号“杀手”，该病原菌为尖孢镰刀菌古巴专化型[fusarium oxyporum f.sp.cubense(foc)）]，是导致香蕉维管束坏死的毁灭性土传真菌病害。该病害传播途径广泛，可通过水、土壤等介质传播，蕉园一旦染菌，若不采取措施，会受到毁园打击。已有研究发现韭菜提取物会通过影响尖孢镰刀菌孢子营养代谢抑制孢子萌发；黄花蒿叶甲醇提取物能够降低尖孢镰刀菌的孢子萌发率和孢子活力。
[0003]
丁香种类繁多，在我国种植面积较广，丁香花除了作为日常观赏花之外，其精油制品因无污染、安全、有抑菌性的特点被广泛应用在食品、医药等行业。丁香精油是从丁香植物的花蕾、茎或叶片中提取出来的天然植物油，主要成分为丁香酚、乙酰丁香酚、β-丁香烯以及水杨酸甲酯等，其中丁香酚被认为是抑菌的主要有效成分。丁香精油具有高效的抑菌活性，研究发现丁香精油对青霉菌和灰霉菌的生长抑制时间可达9d 和8d。
[0004]
因此，开发一种利用丁香精油抑制尖孢镰刀菌的方法是开辟生物防治香蕉枯萎病的新途径，拓展无公害防治的思路。


技术实现要素：

[0005]
本发明的目的在于，针对上述问题，提供一种丁香精油抑菌混合液及其应用。
[0006]
一种丁香精油抑菌混合液按质量百分比之和为100%含量计，包括以下组分：丁香精油1-2
ꢀ‰
；醇溶剂5-10 %；助溶剂0.5-1
ꢀ‰
；余量为水。所述醇溶剂包括丙二醇、乙醇、丁二醇中的一种或多种；所述助溶剂为吐温80。
[0007]
（2）上述丁香精油抑菌混合液的制备方法，包括以下步骤：将醇溶剂与丁香精油混合后，加入助溶剂，再加入水，混合液于50-100 rpm/min下独立搅拌5-10 min，制备成丁香精油抑菌混合液。
[0008]
一种包含上述丁香精油抑菌混合液的杀菌剂。
[0009]
上述丁香精油抑菌混合液在尖孢镰刀菌防治中的应用。
[0010]
上述杀菌剂在在尖孢镰刀菌防治中的应用。
[0011]
本发明的优点在于：本发明提供了一种丁香精油抑菌混合液，丁香精油能有效抑制尖孢镰刀菌菌丝的生长和尖孢镰刀菌孢子的萌发。本发明制备的含有丁香精油的抑菌混合液，能有效抑制尖孢镰刀菌的活性，用于防治尖孢镰刀菌的杀菌剂。本发明基于植物具有抑菌活性的特性，拓展无公害防治的思路。
[0012]
附图说明：图1 不同浓度丁香精油对尖孢镰刀菌生理小种4号菌丝生长的抑制情况。
[0013]
图2 丁香精油对尖孢镰刀菌生理小种4号孢子萌发的影响。
具体实施方式
[0014]
下面结合具体实施例对本发明作进一步的详细说明，以下实施例有助于本领域的技术人员进一步理解本发明，但不以任何形式限制本发明。
[0015]
实施例1 ：室内抑菌率测定及结果本实验中所用的尖孢镰刀菌生理小种4号[fusarium oxyporum f.sp.cubense （foc4）]为实验室4 ℃保存的菌种，采用菌丝生长法，培养基均为马铃薯琼脂葡萄糖培养基(简称pda)。pda培养基配方：马铃薯(去皮)200 g，葡萄糖20 g，琼脂15-20 g，蒸馏水1000 ml，自然ph。
[0016]
pda培养基配制方法：将200 g马铃薯洗净去皮，切成片状，加水煮沸20-30 分钟，用4层纱布过滤于烧杯中，定容至1000ml，加入15-20g琼脂，加入20 g葡萄糖，搅拌防止粘锅，煮沸后分装于250 ml三角瓶中，每瓶装150-200 ml, 121 ℃高压灭菌20分钟，冷却后备用。
[0017]
实验方法 ：采用菌丝生长速率法1、先将尖孢镰刀菌生理小种4号（foc4）接种于pda平板上，25 ℃-28 ℃培养5-7天。
[0018]
2、将pda培养基加热熔化，冷却至45-50℃，在超净工作台中，无菌培养皿中分别加入不同浓度丁香精油，倒入25 ml pda培养基，左右平推混合均匀，制成带药平板。
[0019]
3、在超净工作台中无菌条件下，用直径8mm打孔器在培养的5-7天foc4菌丝边缘，打取圆形菌饼，再用接菌针接种到含药pda平板中央，然后将培养皿倒置于培养箱 25 ℃-28 ℃中培养。 实验组准备不同浓度的丁香精油含药平板，分别为0.02 ul/ml、0.04 ul/ml、0.06 ul/ml、0.08 ul/ml、0.10 ul/ml、0.12 ul/ml，连续观察6天并测菌丝直径。待空白对照组ck长满平板后（约7天），观察菌丝的生长情况（见图1），采用十字交叉法测得直径，统计数据，计算抑制率。每个处理重复3次。
[0020]
对照菌丝直径d0，含药平板上菌丝直径d1,抑制率(％)＝[（d
0-0.8）-（d1ꢀ‑
0.8）]/（d
0-0.8）
×ꢀ
100%4、植物病原真菌活性测定结果见表1。
[0021]
表1丁香精油对尖孢镰刀菌生理小种4号的抑菌率注:每个处理设3次重复，表中数据为3次重复的平均值。
[0022]
实施例2：悬滴法测丁香精油对尖孢镰刀菌生理小种4号（foc4）的孢子萌发影响1、将foc4供试菌株接种于马铃薯葡萄糖琼脂(pda) 培养基，25 ℃-28 ℃恒温光
0.8ml，水约为1l。
[0036]
各处理配置的丁香精油混合液100ml灌根施用于已接菌的4-6叶的香蕉（巴西蕉）小苗，间隔2d灌根施用100ml各处理配置的丁香精油抑菌混合液1次。之后浇清水以补充香蕉生长所需水分 ，20天后调查统计发病率和相对防效。
[0037]
发病率（%）=发病株数/调查总株数
×
100相对防效%=（接菌阳性对照发病率-处理组发病率）/接菌阳性对照发病率
×
1005、抑菌混合液发病率统计


技术特征：
1.一种丁香精油抑菌混合液，其特征在于：所述丁香精油抑菌混合液按质量百分比之和为100%计，包括以下组分：丁香精油1-2
‰
；醇溶剂5-10 %；助溶剂0.5-1
ꢀ‰
；余量为水。2.根据权利要求1所述的一种丁香精油抑菌混合液，其特征在于：所述醇溶剂包括丙二醇、乙醇、丁二醇中的一种或多种；所述助溶剂为吐温80。3.一种包含权利要求1所述丁香精油抑菌混合液的杀菌剂。4.权利要求1所述丁香精油抑菌混合液在尖孢镰刀菌防治中的应用。5.权利要求3所述杀菌剂在在尖孢镰刀菌防治中的应用。

技术总结
本发明公开了一种丁香精油抑菌混合液及其应用，属于生物防治技术领域。所述丁香精油抑菌混合液按质量比计，包括以下组分：丁香精油1-2


技术研发人员：李海明 洪佳敏 吴妙鸿 吴水金 邱珊莲 张帅 林宝妹 李跃森
受保护的技术使用者：福建省农业科学院亚热带农业研究所（福建省农业科学院蔗麻研究中心）
技术研发日：2022.03.24
技术公布日：2022/9/13