有机铁皮石斛的培育种植方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种有机铁皮石斛的培育种植方法。
【背景技术】
[0002]铁皮石斛，是我国兰科石斛属植物中最为珍贵的品种之一。因其具有增强机体免疫力、抗肿瘤、抗衰老和有效减轻肝损伤等作用，在2010年版《中华人民共和国药典》中被单独列为一味药材，由于人为过度采挖和生态环境的破坏，加之其自身繁殖率低，野生铁皮石斛资源日渐枯竭，已被国家列为二级重点保护的珍稀濒危植物。现在，人工栽培种植铁皮石斛已成为满足巨大市场需求的主要途径。铁皮石斛系兰科石斛属植物，种子极小、无胚乳，自然条件下需与某些真菌共生才能萌发，自然情况下发芽率仅万分之一，且栽培品种存在退化现象。
[0003]近年来，我国的一些科研机构和企业单位对铁皮石斛的组培和人工栽培技术进行了大量的探索和试验，取得了一些成绩，也使得近年来人工栽培铁皮石斛产量有所增加。但是，铁皮石斛的人工培育仍然存在种苗扩繁速度慢、组培苗炼苗及移栽成活率低、人工种植产品有效成分含量低的问题，严重制约了铁皮石斛的产业化、规模化发展。此外，铁皮石斛的一般大田种植会伴随生长杂草，并易受到病虫害。
[0004]公开号为CN102057867A的专利文献公开了一种铁皮石斛种苗的组织培养的光调控方法，包括由铁皮石斛果实消毒后取得粉末状种子，粉末状种子通过种子萌发培养基培养，萌发形成原球茎的过程，其特征在于铁皮石斛种苗的组织培养过程中，以LED (半导体发光二极管)植物生长照明系统作为光源，根据铁皮石斛组织培养的不同阶段，实施不同的光照处理。通过采用不同生长阶段实施不同光照处理，使铁皮石斛种苗能最大限度地利用光能供其光合作用，从而获得最大生长量。
[0005]公开号为CN102119655A的专利文献公开了一种铁皮石斛自然光快繁育苗方法，包括下列步骤完成:(I)将成熟的铁皮蒴果或储存的种子经过消毒处理程序，播入1/2MS基本培养基+ 土豆汁15% (V/V) +琼脂5g/L的培养基里，进行种子萌发培养，培养温度22?25V。通过双层遮阳控制系统，光照度控制在800?15001x，每日光照10?12小时，约15?20天种胚膨大、萌发形成绿色的原球茎；(2)将原球茎转入MS基本培养基+BA (6-苄基腺嘌呤)0.01 ?0.5mg/L+NAA(a-萘乙酸)0.01 ?0.5mg/L+土豆汁 20% (V/V) +琼脂 5g/L的培养基里进行原球茎增殖、分化培养。通过双层遮阳控制系统，光照度控制在1500?25001x，每日光照10?12小时，约I?1.5月可观察到瓶内原球茎重叠堆积在培养基中，并有叶原茎和小苗出现，小苗高度I?2cm。将小苗转入同样的培养基和同样的光照条件，继续培养1.5月，将小苗培养成中苗，苗高3?4cm左右；(3)将中苗转入MS基本培养基+NAA(a-萘乙酸)0.01 ?0.5mg/L+香蕉汁 15% (V/V) +土豆汁 10% (V/V) + 琼脂 6g/L 的壮苗培养基。通过双层遮阳控制系统，光照度控制在2000?40001x，每日光照10?12小时，约1.5个月可培养出5cm高以上的大苗，大苗可出瓶炼苗、移栽。
[0006]但是，现有技术在规模化生产中，从种子到生根成品苗的铁皮石斛种苗的培育时间为150天时，合格苗仅占总苗量的50%左右；到180天时，合格苗占总苗量的80%左右；并且需要较长的炼苗时间才能有90%以上的移栽成活率。
【发明内容】
[0007]为了解决上述的技术问题，本发明的目的是提供一种有机铁皮石斛的培育种植方法，组培种苗扩繁速度快、合格率高，组培苗炼苗及移栽成活率高，并能避免病虫害发生，使铁皮石斛的生长环境更接近自然环境，从而保证铁皮石斛的品质，并且营养成份接近野生铁皮石斛，药用价值高。
[0008]为了达到上述的目的，本发明采用了以下的技术方案:
[0009]一种有机铁皮石斛的培育种植方法，包括下述步骤:
[0010]I)选择品种特性纯正、生长健壮的植株留种，留种地方圆I千米内无其它种类石斛；在6月份盛花期，进行授粉，母本在授粉后立即摘除唇瓣，及时挂牌标志；授粉当年10月份以后，蒴果开始转黄时，选择饱满的果实连茎一起采收；
[0011]2)采收的蒴果经后熟，采用酒精+次氯酸钠消毒后进行无菌播种；选用组培瓶进行接种，培养基为1/2MS基本培养基+ 土豆汁15% +琼脂5g/L ;将接种后的组培瓶放入LED灯光培养箱内，LED灯光培养箱内温度控制在23°C，每天分为光照12小时和黑暗12小时，光质为红蓝混合光，红光:蓝光为1:1，光照强度控制在1500-25001ux ；18天后，98%以上的种胚膨大萌发形成绿色的原球茎；
[0012]3)将原球茎转接至MS基本培养基+6-苄基腺嘌呤0.01?0.5mg/L+ α -萘乙酸0.01?0.5mg/L+ 土豆汁20% +琼脂5g/L的培养基里进行原球茎增殖、分化培养；转接后的组培瓶放入LED灯光培养箱内，LED灯光培养箱内温度控制在23°C，以光照12小时和黑暗6小时为一个周期，三天四个周期，光质为红蓝混合光，红光:蓝光为4:3，光照强度控制在2000-25001ux ；33天后，98%以上的原球茎有叶原茎和小苗出现，小苗高度I?2cm ;
[0013]4)将小苗转接至MS基本培养基+6-苄基腺嘌呤0.01?0.5mg/L+a-萘乙酸0.01?0.5mg/L+ 土豆汁20% +琼脂5g/L的培养基里继续培养，360ml的组培瓶中每瓶放入150株，转接后的组培瓶放入LED灯光培养箱内，LED灯光培养箱内温度控制在23°C，以光照8小时和黑暗4小时为一个周期，每天两个周期，光质为红蓝混合光，红光:蓝光为7:1，光照强度控制在2200-30001ux ；50天后，98%以上的小苗生长为植株健壮、叶片平展、叶色绿色或深绿的中苗，中苗高度3?4cm ；
[0014]5)将中苗转接至MS基本培养基+a-萘乙酸0.01?0.5mg/L+香蕉汁15 % +土豆汁10% +琼脂6g/L的壮苗培养基，360ml的组培瓶中每瓶放入30株，转接后的组培瓶放入LED灯光培养箱内，LED灯光培养箱内温度控制在23 °C，以光照6小时和黑暗6小时为一个周期，每天两个周期，光质为红蓝混合光，红光:蓝光为9:1，光照强度控制在2500-35001ux ;60天后，97%以上的中苗生长为优质大苗，该优质大苗:有3条以上根系，根系长度3cm以上，叶片4片以上、正常展开、叶色绿色或深绿，高度5cm以上；
[0015]6)将上述优质大苗的密闭组培瓶放在有自然光的培苗室，自然光光照强度控制在1500-40001UX，温度为15?25°C，放置一周后，打开组培瓶的瓶盖炼苗5?8天；
[0016]7)在进行移植前，需要对组培瓶内的组培苗进行充分的清洗:用镊子将3至5株苗逐步从瓶中拉出，动作轻缓防止伤苗；取3至5株苗在清水中漂洗掉琼脂，用手指轻轻揉洗根部，确保无琼脂残留；逐瓶清洗，防止过多苗长时间浸泡水中，每清洗30瓶后更换清水；漂洗掉琼脂的苗过二次清水后竖直放置在筐中待移栽，表面覆盖潮湿的无纺布保湿；
[0017]8)将清洗后的组培苗移栽至大棚种植:大棚选址在海拔300?600米的山顶凹陷通风处，大棚配有遮阳网和喷灌设备，大棚内搭建多个宽约1.2?1.5米、高80cm的竹制或钢架的苗床，苗床间配有40?50cm宽的通道，苗床底层铺一层10?12cm厚的栽培基质，栽培基质为发酵处理过的松树皮和松木肩，栽培基质内混合羊粪；选择无病、健壮、大小均匀的组培苗进行定植，按每丛3?5株，株距10cm、行距13cm的规格种植于栽培基质上，定植时以栽培基质完全覆盖根部为宜；移栽7天内，大棚内:光照强度控制在1000?lOOOOLux，温度控制在15?25°C，空气相对湿度控制80%?90%，采用叶片喷雾和地面洒水来补充水分，水的PH值在5?6 ;移栽7天后的生长期，大棚内:光照强度控制在10000?15000Lux，白天温度控制在16?21°C，夜间温度控制在10?15°C，空气相对湿度控制70%?80%，采用叶片喷雾和地面洒水来补充水分，水的PH值在5?6。
[0018]作为优选，所述步骤8)中，栽培基质的发酵处理过程为:在夏季高温季节，在大棚中把基质堆成1.2m高、2.5m宽的基质堆，将基质喷湿，使基质含水量超过80 %，然后用塑料薄膜覆盖基质堆，密闭于大棚内，每隔10天揭开薄膜翻堆一次，翻堆5-6次，待基质变为褐色后，将基质摊开冷却后装袋备用；栽培基质使