、生长健壮、无污染的继代培养的瓶苗作为生根培养的种苗，放到无菌的铅垫板上用摄子钳住愈伤组织，用剪刀把苗上的叶子剪掉，再按一芽一段剪断，要求基部比顶部长，然后按照基部、茎段、顶芽分别均匀插到不同培养瓶的培养基中进行培养，每瓶接10株；
[0048]生根苗的培养前期:25°C，暗培养5d，湿度85% ;中期:28°C，光照1800LX，每天光照12h，湿度85% ;后期:25°C，光照1500LX，每天光照12匕湿度85%。1d后均可陆续生根；
[0049](6)炼苗:
[0050]组培生根苗长出约0.5cm长后，搬到大棚内进行练苗；初搬到大棚前2d不能让强光直射小苗；2?3d后把瓶盖打开，开盖后马上喷水保湿以防萎蔫，喷水后用湿报纸盖上。2d后把报纸适当掀开，但仍然要避免强光直射，1d后即可移栽；
[0051](7)移栽
[0052]①大棚采用生石灰粉进行地面消毒，大棚四壁及棚顶采用吡虫啉、菊脂类农药、甲基托布津三种农药混合溶液喷洒；
[0053]②营养土装杯用塘泥作培养基质，装入7cmX6cm的营养杯中，然后用500倍的多菌灵溶液淋透消毒；
[0054]③洗苗将选出来的正常苗放到水里，清洗粘附在基部的培养基，把洗好的苗放到500倍的多菌灵液中浸泡5s，再用800倍生根粉液浸泡15min。
[0055]④种植用勺子把泥土挖起来后，把处理好的苗基部放进坑里再把泥土盖回来，立即淋透水，然后盖上薄膜成小拱棚以保温保湿。
[0056](8)大棚育苗
[0057]①杀菌成活前要对小苗进行杀菌，每个早上揭膜喷洒多菌灵水溶液，给小苗杀菌补水，以抑制杂菌滋生；
[0058]②保温2月份室外气温低，需要大棚保温，在大棚内再搭小拱棚保温；
[0059]③光照2月份阳光不是很强烈，但小苗受不了阳光的强烈照射，出太阳时要盖遮阳网以防灼伤小苗。初期管理要特别细心、认真，随时观察天气的变化和小苗的生长况状，及时采取适当措施管理；
[0060]④揭膜小苗成活后便进入生长中期，温度相对稳定的白天，可以把膜揭开让其逐步适应大棚内环境，晚上再将膜盖起来；而到天气较温暖时晚上也不需要盖膜；
[0061]⑤施肥用多得富尔露，磷酸二氢钾，复合肥等肥料进行追肥；
[0062](9)出棚
[0063]组培苗叶色浓绿、茎粗壮、高6cm以上时就可以开始出圃；用硬竹筐或塑料筐装运。
[0064]实验证明，本发明的罗汉果组培苗繁育方法在无菌的条件下，通过扦插技术培育出的组培苗，具有带病少、繁殖快、适应性广、当年种当年收获且产量高的特点。
【主权项】
1.一种罗汉果组培苗繁育方法，其特征在于:该繁育方法包括以下步骤: (1)采集繁殖材料: 选择在生长健壮、来花及时、易挂果、果大整齐的品种和单株上采集枝条； (2)消毒处理: 剪取约50cm的嫩梢，在组培室工作台上用无菌水冲洗后浸入75%酒精溶液中消毒5s，然后浸入0.1 %升汞溶液中消毒lOmin，取出后再用无菌水冲洗干净； (3)莖尖脱毒培养: 配制培养基基本培养基用MS+BA1.0mg/L+IAA0.lmg/L+琼脂0.35% +蔗糖3%，pH值调至6，把配制好的培养基进行分装，每瓶装约2cm高，拧紧盖子，高压灭菌后让其自然冷却备用; 切取茎尖分生组织切取0.5?1_的茎尖分生组织，然后接种到培养基中进行培养； (4)切段继代培养: 配制培养基继代培养基用 MS+BA0.5mg/L+IAA0.lmg/L+IBA0.5mg/L ； 切段继代培养当茎尖分生组织培养出的小苗长至6cm高时进行切段，每段带一个节间约0.5cm，接种到继代培养基上进行继代培养。如此反复继代5?6次，然后转入生根培养基上诱导生根。培养室温度为24?29°C，光照强度800?1200Lx，每天光照12h ； (5)诱导生根培养: 配制培养基诱导生根培养基用MS+BA0.03mg/L+NAA0.3mg/L+0.01%活性炭； 接种挑选已培养了 20d以上、生长健壮、无污染的继代培养的瓶苗作为生根培养的种苗，放到无菌的铅垫板上用摄子钳住愈伤组织，用剪刀把苗上的叶子剪掉，再按一芽一段剪断，要求基部比顶部长，然后按照基部、茎段、顶芽分别均匀插到不同培养瓶的培养基中进行培养，每瓶接10株； 生根苗的培养前期:25°c，暗培养5d，湿度85% ;中期:28°C，光照1800LX，每天光照12h，湿度85% ;后期:25°C，光照1500LX，每天光照12h，湿度85%。1d后均可陆续生根； (6)炼苗: 组培生根苗长出约0.5cm长后，搬到大棚内进行练苗；初搬到大棚前2d不能让强光直射小苗；2?3d后把瓶盖打开，开盖后马上喷水保湿以防萎蔫，喷水后用湿报纸盖上。2d后把报纸适当掀开，但仍然要避免强光直射，1d后即可移栽； (7)移栽 ①大棚采用生石灰粉进行地面消毒，大棚四壁及棚顶采用吡虫啉、菊脂类农药、甲基托布津三种农药混合溶液喷洒； ②营养土装杯用塘泥作培养基质，装入7cmX6cm的营养杯中，然后用500倍的多菌灵溶液淋透消毒； ③洗苗将选出来的正常苗放到水里，清洗粘附在基部的培养基，把洗好的苗放到500倍的多菌灵液中浸泡5s，再用800倍生根粉液浸泡15min。 ④种植用勺子把泥土挖起来后，把处理好的苗基部放进坑里再把泥土盖回来，立即淋透水，然后盖上薄膜成小拱棚以保温保湿。 (8)大棚育苗 ①杀菌成活前要对小苗进行杀菌，每个早上揭膜喷洒多菌灵水溶液，给小苗杀菌补水，以抑制杂菌滋生； ②保温2月份室外气温低，需要大棚保温，在大棚内再搭小拱棚保温； ③光照2月份阳光不是很强烈，但小苗受不了阳光的强烈照射，出太阳时要盖遮阳网以防灼伤小苗。初期管理要特别细心、认真，随时观察天气的变化和小苗的生长况状，及时采取适当措施管理； ④揭膜小苗成活后便进入生长中期，温度相对稳定的白天，可以把膜揭开让其逐步适应大棚内环境，晚上再将膜盖起来；而到天气较温暖时晚上也不需要盖膜。 ⑤施肥用多得富尔露，磷酸二氢钾，复合肥等肥料进行追肥。 (9)出棚 组培苗叶色浓绿、茎粗壮、高6cm以上时就可以开始出圃；用硬竹筐或塑料筐装运。
【专利摘要】本发明公开了一种罗汉果组培苗繁育方法，该繁育方法包括以下步骤：（1）采集繁殖材料、(2)消毒处理、(3)茎尖脱毒培养、(4)切段继代培养、(5)诱导生根培养、(6)移栽、(7)大棚育苗、(8)出棚；本发明的罗汉果组培苗繁育方法在无菌的条件下，通过扦插技术培育出组培苗，本发明组培苗种植有产量高，病害少的繁殖快、适应性广、当年种当年收获且产量高的特点，以往的种薯种植正逐渐被组培苗所替代。
【IPC分类】A01H4/00
【公开号】CN104920212
【申请号】CN201510290985
【发明人】农守枫
【申请人】广西大学
【公开日】2015年9月23日
【申请日】2015年6月1日