选择性机制，发现有效霉素/井闪霉素干扰丝核菌肌醇和海藻糖代谢，从而破坏细胞壁的构 造，阻止丝核菌侵染植物，具有良好的保护作用。数十年来该抗生素一直被局限于用来防治 农作物丝核菌病害，尤其是水稻纹枯病。
[0038] 众所周知，作用单一的专化性杀菌剂极易筛选出抗药性病原菌，在广泛应用后不 久便会失去应用价值。本发明人自20世纪80年代研究丝核菌对选择性井闪霉素的抗药性风 险，发现井闪霉素不同于抗性风险极高的其它任何选择性抗生素和化学杀菌剂，在实验室 和田间条件下均无法筛选到井闪霉素抗性丝核菌。由此推断，井闪霉素除干扰已知的肌醇 和海藻糖生物合成以外，可能还存在其他特殊的抗病作用机制。
[0039]本发明人在研究镰刀菌DON毒素生物合成途径及调控机制的基础上，开展了抑制 DON毒素生物合成的大量化合物筛选。在筛选过程中，令人惊讶地发现井闪霉素在一定处理 剂量下，能够强烈抑制小麦赤霉病菌DON毒素生物合成早期途径中的生物化学反应。因此， 提供一种降低DON污染的井闪霉素与氟环唑组合物防治麦类赤霉病技术，成为本发明的重 要目的。
[0040] 本发明人在国际上首次开展了井冈霉素/有效霉素抑制镰刀菌致病因子DON合成， 及其与其他各种杀菌剂的混合物在田间防治麦类赤霉病的增效配方筛选，创造性地发现井 冈霉素与氟环唑组合物防治麦类作物赤霉病具有显著增效、降低DON毒素污染和大幅度减 少氟环唑用量的有益效果。
[0041] 在本发明的农药组合物中，如果井冈霉素的量在1~150重量份范围内，而氟环唑 的量小于1重量份时，则会降低对赤霉病的防治效果;氟环唑的量大于20重量份时，则会对 小麦生长具有抑制作用。因此，氟环唑的量为1~20重量份是合理的。
[0042]同样地，如果氟环唑的量在1~20重量份范围内，而井闪霉素的量小于1重量份时， 则会失去与氟环唑协同防治赤霉病、降低毒素污染水平的增效作用;井闪霉素的量大于150 重量份时，则会增加成本，降低与氟环唑协同防治赤霉病和降低毒素污染的增效作用；因 此，井闪霉素的量为1~150重量份是恰当的。
[0043]优选地，所述的农药组合物是由井闪霉素与氟环唑按照重量比5~65:3~18组成 的。
[0044]更优选地，所述的农药组合物是由井闪霉素与氟环唑按照重量比10~20:6~16组 成的。
[0045]本发明使用的井冈霉素与氟环唑都是目前市场上销售的产品，例如由浙江钱江生 物化学股份有限公司3 %、5 % A、20 %、40 % A、60 % A井闪霉素粉剂和水剂；由德国巴斯夫公 司生产的氟环唑。
[0046] 本发明还涉及一种用于防治麦类赤霉病的农用杀菌剂制剂。所述的农用杀菌剂含 有以重量计0.1~90.0%所述的农药组合物，余量为在农药中可接受的载体和/或助剂。
[0047] 在本发明中，农药载体或助剂应该理解是在农药制剂加工或使用中用于改善药剂 理化性质，提高药效，便于运输贮藏等性能的辅助物质，例如润湿剂、乳化剂、分散剂、粘着 剂、稳定剂或增效剂。根据本发明，凡是具有这些性能且对本发明的农用杀菌剂没有任何负 面影响的化学物质都可以用于本发明，它们都在本发明的保护范围之内。
[0048]本发明使用的载体例如是一种或多种选自水、凹凸棒土、高岭土或轻质碳酸钙。除 此之外，本发明也可以使用符合本发明要求的在本技术领域里通常使用的其它载体。
[0049]本发明使用的助剂例如选自乙醇、甲醇、乙二醇、丙二醇、NN0-1 (化学名称:萘磺酸 甲醛缩合物钠盐）、NN0-7(化学名称：萘磺酸甲醛缩合物钙盐）、黄原胶、聚乙二醇、甘油、拉 开粉、十二烷基硫酸钠、十二烷基苯磺酸钠、硫酸铵、烷基酚聚氧乙烯醚、烷基酚聚氧乙烯基 醚磷酸酯、脂肪酸聚氧乙烯酯、苯甲酸、木质素磺酸钠、羧甲基纤维素或聚乙烯醇。本发明使 用的助剂是目前市场上广泛销售的产品，例如由新沂市飞皇化工有限公司以商品名NN0-1、 NN0-7销售的扩散剂、由湖北兴银河化工有限公司以商品名拉开粉销售的丁基萘磺酸钠乳 化、扩散和渗透剂、由上海忠诚精细化工有限公司销售的烷基酚聚氧乙烯醚、由广州市西陆 化工有限公司销售的烷基酚聚氧乙烯基醚磷酸酯、由山东省梁山宏泰环氧大豆油有限公司 销售的脂肪酸聚氧乙烯酯、由江西省萍乡麻山助剂厂销售的羧甲基纤维素。除此之外，本发 明也可以使用符合本发明要求的在本技术领域里通常使用的其它助剂。
[0050] 在本发明中，在所述的农用杀菌剂中，所述的农药组合物的量小于0.1%时，则会 降低防病效果或失去增效作用;所述的农药组合物的量大于90.0 %时，则会失去增效作用 或降低防病效果；因此，所述农药组合物的量为〇. 1~90.0%是合理的。
[0051] 优选地，所述的农用杀菌剂含有以重量计10~75.0%所述的农药组合物，余量为 在农药中可接受的载体和/或助剂。
[0052]更优选地，所述的农用杀菌剂含有以重量计26~58.0%所述的农药组合物，余量 为在农药中可接受的载体和/或助剂。
[0053] 在实际应用中，可以按照本领域技术人员熟知的方法将本发明的杀菌组合物与载 体和/或助剂配制成在农业上通常采用的剂型，例如悬浮剂、水乳剂、微乳剂、可湿性粉剂或 水分散粒剂。
[0054] 在制备悬浮剂时，可以使用的载体或助剂例如是选自烷基萘磺酸盐、聚羧酸盐或 木质素磺酸盐的分散剂;选自烷基酚聚氧乙烯基醚磷酸酯、苯乙基酚聚氧乙烯基醚磷酸酯、 烷基硫酸盐、烷基磺酸盐或萘磺酸盐的润湿剂;选自黄原胶、硅酸镁铝、膨润土的增稠剂;选 自苯甲酸或苯甲酸钠的防腐剂;有机硅类消泡剂;选自甘油、尿素、乙二醇或丙二醇的防冻 剂。
[0055] 在制备水乳剂时，可以使用的载体或助剂例如是选自农乳700、农乳2201、Span-60 或乳化剂T-60的乳化剂;选自二甲苯、甲苯或环己酮的溶剂;选自亚磷酸三苯酯或环氧氯丙 烷的稳定剂;选自乙二醇、丙二醇、甘油或尿素的防冻剂;选自硅酸镁铝、膨润土或黄原胶的 增稠剂;选自苯甲酸或苯甲酸钠的防腐剂。
[0056] 在制备微乳剂时，可以使用的载体或助剂例如是选自十二烷基苯磺酸钙（农乳 500)、农乳700、农乳2201、斯盘-60、吐温-80或TX-10的乳化剂;选自甲醇、异丙醇、正丁醇或 乙醇的助溶剂;选自二甲苯、甲苯、环己酮或N-甲基吡咯烷酮的溶剂;选自亚磷酸三苯酯或 环氧氯丙烷的稳定剂。
[0057] 在制备可湿性粉剂时，可以使用的载体或助剂例如是选自聚羧酸盐、木质素磺酸 盐或烷基萘磺酸盐的分散剂;选自烷基磺酸盐、烷基硫酸盐或萘磺酸盐的润湿剂;选自轻质 碳酸钙、滑石粉、硅藻土、高岭土或凹凸棒土的填料。
[0058] 在制备水分散粒剂时，可以使用的载体或助剂例如是选自聚羧酸盐、木质素磺酸 盐或烷基萘磺酸盐的分散剂;选自烷基硫酸盐、聚氧乙烯醇、烷基磺酸盐或萘磺酸盐的润湿 剂;选自柠檬酸、硫酸铵、葡萄糖、尿素或碳酸氢钠的崩解剂;选自玉米淀粉、微晶纤维素类 或硅藻土粘结剂;选自轻质碳酸钙、海泡石、硅藻土、高岭土、凹凸棒土或滑石粉的填料。
[0059] 下面将分别进行详细说明其研究结果。
[0060] I、抑制镰刀菌生长的活性化合物筛选
[0061] 本发明采用杀菌剂生物测定的常规方法，将井闪霉素和氟环唑分别用灭菌水及甲 醇配制成2mg/mL母液，对照药剂多菌灵原药溶于0.1M/L盐酸溶液、氰烯菌酯溶于甲醇，制成 2mg/mL母液。在马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)冷却至温度约45°C时，分别加入井闪霉素和 氟环唑至设计浓度(见表1)，然后倒入培养皿制成不同药剂处理的平板，每处理3皿重复，接 种引起麦类赤霉病的常见禾谷镰刀菌Fusarium graminearum和亚洲镰刀菌Fusarium asiaticum野生敏感菌株(简称敏感菌株)及多菌灵和氰烯菌酯抗性菌株(简称抗药性菌株） 的菌丝块，在温度25°C下培养4天，十字交叉法量取菌落直径，计算不同处理抑制病菌生长 50%的有效中剂量(EC 5Q值），并比较抗菌活性。
[0062] 试验结果表明，井闪霉素在离体下无论是单剂还是与氟环唑混用对引起赤霉病的 这两种镰刀菌敏感菌株和抗药性菌株的生长基本没有抑制活性，只有井闪霉素高达50yg/ mL浓度时，对两种镰刀菌生长才有6.5%~7.8%的抑制作用。但氟环唑对两种镰刀菌的敏 感菌株及抗药性菌株的菌丝生长具有相似的强烈抑制作用，0.25yg/mL氟环唑处理对菌丝 生长的抑制作用即可超过50%。井闪霉素在离体条件下对氟环唑抑制菌丝生长没有增效作 用(参见表1)。
[0063] 根据亚洲镰刀菌和禾谷镰刀菌野生敏感菌株及多菌灵和氰烯菌酯抗性菌株在氟 环唑不同剂量处理下的生长抑制率，计算氟环唑对不同药敏性菌株生长抑制的有效中剂量 (EC 5Q)，结果发现敏感菌株、多菌灵抗性菌株、氰烯菌酯抗性菌株对氟环唑的敏感性相似， EC5Q为0.1~0.28yg/mL，试验结果列于表2中。
[0064] 以药剂EC5Q为参数，比较不同杀菌剂抑制镰刀菌生长的活性，发现氟环唑的活性约 是多菌灵对敏感菌株活性(对两种镰刀菌EC5Q均为0.45g/mL)的3倍，与氰烯菌酯对敏感菌株 活性(对两种镰刀菌EC5Q均为0.165g/mL)相当。该结果说明氟环唑具有强烈抑制野生敏感菌 株和多菌灵及氰烯菌酯抗性镰刀菌生长的活性，利于降低侵染谷物的DON毒素污染水平和 防治抗药性病害。
[0065]表1:井闪霉素和氟环唑在离体条件下对两种镰刀菌敏感菌株生长的影响
[0068] *F.g和F.a分别是Fusarium graminearum和Fusarium asiaticum的缩写，下同。
[0069] 表2:氟环唑对两种镰刀菌敏感及多菌灵和氰烯菌酯抗性菌株的生长抑制活性
[0070]
[0071] II.井冈霉素对镰刀菌毒素生物合成能力的抑制活性
[0072] 由于禾谷镰刀菌与亚洲镰刀菌对井闪霉素和氟环唑的药敏性相同，本发明人选用 毒素合成能力（单位菌量合成DON重量，ygDON/g干重菌丝）较强的亚洲镰刀菌Fusarium asiaticum作为进一步研究毒素合成的材料。将引起麦类赤霉病的多菌灵抗性亚洲镰刀菌 接种于灭菌的3%绿豆汤中，在温度25°C和12/24小时散射光下摇培10天，离心收集分生孢 子。将分生孢子按最终为10%L接种于含井冈霉素不同剂量的马铃薯蔗糖(PS)培养液中在 温度25 °C和12/24小时散射光下摇培，在7和14天后，过滤培养物，分别检测培养液中的毒素 含量和测量菌丝干重，分析毒素合成能力(单位重菌丝产生的毒素量）。