专利名称：一种利用活性海藻寡糖素作为动物性饲料添加剂的应用的制作方法
技术领域：
动物性饲料添加剂背景技术 糖作为构成生命体的最基本物质之一，在生命过程中起着极为重要的作用。最近30年来，随着分子生物学、特别是细胞生物学的高速发展，糖类物质在储能之外的其它诸多生物学功能不断被人们揭示，尤其是寡糖的特殊功能引起学术界的重视，新型功能性寡糖的开发应用已成为生物技术研究领域的新热点之一。
在新型寡糖研究开发及应用，尤其是饲料添加剂开发方面，功能性寡糖作为抗生素的替代品，近年来被逐渐应用到饲料工业，它具有用量少、无毒害作用、无残留、稳定性强等特点。动物营养学界称之为微生态促进剂，饲料工业则称之为化学益生素。目前欧盟已经开始了限用抗生素的进程，丹麦自98年在35Kg以上的猪饲料中不添加抗生素促生长剂，德国也将可能颁布有关法令，禁止在动物饲料中添加抗生素。受此影响，美国FDA禁止饲料中使用抗生素的范围也正在扩大。美国已利用其在糖生物学方面的优势，在特殊寡糖的研究开发上进展迅速，多种寡糖药物、寡糖疫苗等正在开发，以酵母甘露寡糖为代表的寡糖饲料添加剂已经广泛推广。欧盟在1994～1998年的研究计划中启动“欧洲糖研究开发网络”计划。
Peter等(1998)研究表明，甘露寡糖能促进双岐杆菌、干酪乳杆菌、嗜酸乳杆菌、德尔布吕克乳杆菌等有益菌的生长，而对于沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、肉毒梭状芽孢杆菌、生腐梭状芽孢杆菌等病原菌却能起到很好的抑制作用。Alltel等(1993)和Stutton等(1994)以及Fukuya等(1998)都曾报道过，在饲料中添加寡糖均可不同程度的提高动物的生产性能。其机理与寡糖调节机体内分泌机能、促进肠道菌群平衡、改善机体新陈代谢等方面有关。此外由于寡糖稍具甜味，其诱食作用也可能是促进生长原因之一。在寡糖对动物机体免疫刺激方面果寡糖可以提高白细胞介素-2(IL-2)的水平(Spring和Privulescu，1995)，促进细胞的增殖、分化；果寡糖能显著提高T淋巴细胞转化功能和NK细胞的杀伤力，增强雏鸡细胞免疫功能。
本申请中所提到的经褐藻胶裂合酶通过β-消去反应裂解褐藻酸的糖苷键所得到的非还原性末端具有4，5-不饱和双键褐藻寡糖在动物饲料添加剂应用方面没有相关报道和研究。
发明内容
本发明涉及利用非还原性末端具有4，5-不饱和双键褐藻寡糖，将其运用于动物饲料中促进动物个体发育并提高动物免疫力的方法。本发明选用重均分子量＜5000Da的褐藻寡糖做为动物饲料添加剂，该寡糖的特点是利用生物技术修饰，将褐藻胶裂合酶作用于褐藻胶，催化底物分子开裂成两部分，其中之一含有不饱和双键。褐藻胶裂合酶通过β-消去反应裂解褐藻酸的糖苷键并在产物的非还原性末端产生含有4，5-不饱和双键的寡聚糖醛酸。该寡糖在C5上失去对称性，因此不论是D-甘露糖醛酸或者L-古罗糖醛酸都生成不饱和衍生物产生一系列寡糖，该寡糖在230～240nm有强吸收。
在制备饲料时，称取饲料量0.01-10％的免疫多糖加入基础饲料中研磨、混匀，或将该寡糖制成0.1-30％浓度的溶液经喷洒吸附于饲料表面。该法制备得到的饲料具有以下优点1、该寡糖素添加剂具有改善肠道内环境并促进对营养物质的吸收，进而增加动物对饲料的摄入量，提高动物个体发育的特点，对动物养殖具有提高产量的效果。
2、此外该添加剂具有提高动物非特异性免疫力，增进动物机体细胞免疫及体液免疫力。尤其是食用该饲料添加剂能够提高机体吞噬细胞对外源病原体或异物的识别、吞噬。同时该寡糖素能够提高动物机体体液免疫因子活力，如超氧化物歧化酶、过氧化物酶、酸性磷酸酶及碱性磷酸酶等。
3、该活性海藻寡糖素具有抗氧化作用，具有高效去除羟自由基的能力。对沙门氏菌、创伤弧菌、溶藻胶弧菌、哈维氏弧菌、志贺氏杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌等致病菌有很强的抑菌效果，此外该寡糖还具有抗病毒活性。
4、具有使用方便、剂量低的特点，可作为各类不同动物饲料添加剂而广泛应用。
具体实施例方式
选用分子量＜5000Da的褐藻寡糖配成1‰的添加剂的两种不同方法。
方法一首先称取一定重量的寡糖，溶于自来水制成20％的水溶液，再添加食用级乙醇(纯度≥95％)制成10％的寡糖溶液(终浓度含50％乙醇)。用寡糖溶液对饲料进行均匀喷雾，饲料重量与寡糖重量比为1000∶1的量进行，即100Kg的饲料使用寡糖溶液1升。将饲料烘干或凉干后保存备用。用本方法得到的饲料，活性寡糖可以快速有效的粘附于饲料表面，且有利于饲料的干燥。
方法二称取饲料量0.1％的免疫多糖加入基础饲料中，经研磨、搅拌、混匀后，保存备用。通过本方法得到的饲料，适用于水产类动物养殖，其寡糖包埋于饲料内部能够减缓寡糖在水体中的溶解速率，从而能够在最大程度上提高寡糖的利用效率。
权利要求
1.对一种利用活性海藻寡糖素作为动物性饲料添加剂的应用实施专利保护。该活性海藻寡糖素特点是，对褐藻胶进行生物技术处理得到的分子量小于5000Da的低聚糖，该低聚糖非还原性末端含有4，5-不饱和双键，该低聚糖在230～240nm有强吸收。作为动物性饲料添加剂的应用按寡糖素与饲料重量比在1∶10000-1∶10的范围内予以施用。
全文摘要
本发明的应用领域为活性动物饲料添加剂。本方法涉及的活性海藻寡糖素是将褐藻胶进行生物技术处理得到的一种分子量小于5000Da的低聚糖，在该低聚糖非还原性末端具有特异性不饱和双键。本发明将这种活性寡糖素应用于动物饲料中，按寡糖素与饲料重量比在1∶10000－1∶10的范围内予以施用。该活性海藻寡糖素，具有改善肠道内环境并促进对营养物质的吸收，对动物养殖具有提高产量的效果。同时该活性海藻寡糖素具有抗氧化作用，具有高效去除羟自由基的能力。对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌均有很强的抑菌效果。此外该添加剂具有提高动物非特异性免疫力，增进动物机体细胞免疫及体液免疫力，同时具有抗病毒活性。本发明涉及的活性海藻寡糖素具有使用方便、剂量低的特点，可作为各类不同动物饲料添加剂而广泛应用。
文档编号A23L1/337GK1843153SQ20051006533
公开日2006年10月11日 申请日期2005年4月6日 优先权日2005年4月6日
发明者江晓路, 王鹏 申请人:中国海洋大学