专利名称：室内鉴定向日葵品种对菌核病抗性水平的方法
技术领域：
本发明涉及向日葵病菌鉴定方法，具体而言涉及一种室内鉴定向日葵品种对菌核病抗性水平的方法。
背景技术：
核盘菌(Sclerotiniasclerotiorum(Lib.) de Bary)是一种寄主非常广泛的病原真菌，世界上有超过400种的作物和杂草如向日葵、油菜、大豆、花生、菜豆、胡萝卜、拟南芥等都可以受到不同程度的侵染。由核盘菌引起的菌核病是目前影响向日葵产量的主要病害之一。筛选耐/抗菌核病的育种材料是控制菌核病发生的重要的农业措施。室内鉴定不同向日葵品种对菌核病抗性水平是向日葵抗病育种的前提，但是利用常规的PDA培养基培养核盘菌其生长速度快，仅用很小的接种量就可以在极短的时间内使所用的供试品种的叶片腐烂，因此给抗性鉴定带来一定的困难。
发明内容
因此本发明的目的正是针对上述缺陷，提供一种能够在室内区分不同向日葵品种的抗性水平的方法。为了实现本发明的目的，采用如下技术方案本发明一方面涉及鉴定向日葵品种对菌核病抗性水平的方法，包括如下步骤将活化好的核盘菌菌株接种在M培养基上，黑暗培养，用接菌针挑取单个菌丝琼脂块，准确接种在向日葵叶片主叶脉的两侧，置于20-25°C自然光下保湿培养，用十字交叉法量取病斑直径大小以鉴定向日葵的抗性水平，所述的M-培养基每IOOOmL含有NaOH 0. 5-2g、DL-苹果酸 2-4g、NH4NO3 l_3g、MgSO4 0. 05-0. 2g、琼脂粉 30_50g。在本发明的一个优选实施方式中，所述的M培养基每IOOOmL含有NaOHlg、DL-苹果酸 3g、NH4NO3 2g、MgS04 0. lg、琼脂粉 37_40g。在本发明的一个优选实施方式中，所述的M-培养基不包括除水之外其它营养成分。本发明的方法利用M-培养基培养的核盘菌接种向日葵叶片，能够区分不同品种的抗性，为向日葵抗性育种材料的的选育提供参考。
图1 核盘菌菌株在PDA和M-培养基上生长活力测定；图2 :X-8菌株在不同培养条件下致病力测定结果；图3 食葵品种资源对菌核病抗性的室内筛选结果。
具体实施例方式实施例1 1.配置培养基，培养基的成分为
PDA 马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂粉13g、定容至1000mL。M-培养基(M-medium) =NaOH lg、DL_malic acid (苹果酸)3g、NH4N032g、MgS04. 7H20 0. lg、39g Bacto-agar (琼脂粉)、定容至 IOOOmL02.将核盘菌在两种培养基上分别培养，比较核盘菌生长速度和菌核形成速度，结果如图1和表1所示表1核盘菌菌株在不同培养基上生长活力测定
权利要求
1.鉴定向日葵品种对菌核病抗性水平的方法，包括如下步骤将活化好的核盘菌菌株接种在M培养基上，黑暗培养，用接菌针挑取单个菌丝琼脂块， 准确接种在向日葵叶片主叶脉的两侧，置于20-25°C自然光下培养，用十字交叉法量取病斑直径大小以鉴定向日葵的抗性水平，所述的M-培养基每IOOOmL含有NaOH 0. 5_2g、DL-苹果酸 2-4g、NH4NO3 l-3g、MgS04 0 . 05-0 . 2g、琼脂粉 30_50g。
2.根据权利要求1所述的鉴定向日葵品种对菌核病抗性水平的方法，所述的M-培养基每 IOOOmL 含有 NaOH lg、DL-苹果酸 3g、NH4NO3 2g、MgSO4O. lg、琼脂粉 39g。
3.根据权利要求1或2所述的鉴定向日葵品种对菌核病抗性水平的方法，其特征在于所述的M-培养基不包 括除水之外其它营养成分。
全文摘要
本发明公开了一种鉴定向日葵品种对菌核病抗性水平的鉴定方法，包括如下步骤将活化好的核盘菌菌株接种在Minum培养基上(简称M培养基)，黑暗培养.然后用接菌针挑取单个菌丝琼脂块，准确接种在向日葵叶片主叶脉的两侧，置于20-25℃自然光下保湿培养，用十字交叉法量取病斑直径大小以鉴定向日葵的抗性水平，所述的M培养基含有NaOH、DL-苹果酸、NH4NO3、MgSO4、琼脂粉。本发明的方法利用M-培养基培养核盘菌接种向日葵叶片，能够区分不同向日葵品种的抗性，为向日葵新品种的选育和抗病育种奠定基础。
文档编号C12Q1/18GK102433372SQ201110397710
公开日2012年5月2日 申请日期2011年12月5日 优先权日2011年12月5日
发明者侯亚光, 周洪友, 娜仁, 张之为, 景兰, 王玉杰, 石必显, 赵君, 雷中华 申请人:内蒙古农业大学