专利名称：一种用于生产棘白菌素b的培养基的制作方法
技术领域：
本发明属于生物技术领域，特别涉及一种用于生产棘白菌素B的培养基以及采用所述培养基的棘白菌素B生产方法。
背景技术：
20世纪70年代，人们由真菌(Aspergillus nidulans)的发酵液中获得第一个天然脂肽类化合物棘白菌素B(echin0candin B，以下简称ECB)，研究发现它是β_1，
3-D-葡聚糖合成酶的非竞争性抑制剂，主要作用于念珠菌属(Candidas)和曲霉菌属(Aspergillus)。ECB通过抑制真菌体内的β-1, 3-D-葡聚糖合成酶,使真菌不能合成葡聚糖，从而使细胞壁结构异常，致使细胞破裂，细胞内容物渗漏，导致真菌死亡。ECB对细胞色素Ρ450无作用，不良反应少，与两性霉素B和唑类抗真菌药物无交叉耐药性，但由于具有毒性，尤其是溶血性，而未能用于临床。以天然产物ECB为原料，通过侧链修饰获得的抗真菌药物阿尼芬净(anidulafungin)是由礼来公司和Vicuron Pharmaceuticals公司联合研制开发，已完成III期临床，处于注册前 阶段，给药途径为静脉滴注。动物实验研究表明，同抗真菌药物卡泊芬净和米卡芬净相比，阿尼芬净对烟曲霉菌活性更强。在一项对食管念珠菌感染患者进行的双盲对照试验中，静脉滴注阿尼芬净的有效率与氟康唑基本一致，为97.2 %，氟康唑的有效率为98.8%，而阿尼芬净的不良反应发生率低，为10%，对照组为13%，因此具有良好的市场前景。ECB结构式如下:
权利要求
1.一种用于生产棘白菌素B的培养基,所述的培养基含有碳源、有机氮源和无机盐,其特征在于，所述的碳源包括葡萄糖、淀粉和油脂。
2.如权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述的培养基包括:葡萄糖2-10%、淀粉2-6%和油脂0.1_2%，所述的百分比为占培养基的质量百分比。
3.如权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述的淀粉选自以下的一种或多种:马铃薯淀粉、玉米淀粉和变性淀粉；所述的油脂选自以下的一种或多种:豆油、玉米油、葵花籽油、鱼油和卵磷脂。
4.如权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述的培养基包括:葡萄糖2-10%、淀粉2-6%、有机氮源1-5 %、油脂0.1-2%和无机盐0.04-0.8% 0
5.如权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述的有机氮源选自以下的一种或多种:鱼粉蛋白胨、大豆蛋白胨、玉米浆干粉、花生柏、黄豆饼、棉籽粉和豆柏；所述的无机盐选自以下的一种或多种:KC1，MgSO4, FeSO4和CaC03。
6.如权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述的培养基包括:葡萄糖2-10%、淀粉 2-6 %、有机氮源 1-5 %、油脂 0.1-2%, MgSO4.7H200.01-0.1 %、KCl 0.01-0.1 %、FeSO4.7H20 0.001-0.1%和 CaCO3 0.02-0.5%。
7.如权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述的培养基的pH值为pH4-8。
8.如权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述的曲霉菌(Aspergillusnidulans)为 Aspergillus nidulans ATCC 58396ο
9.如权利要求1所述的培养基的用途，其特征在于，用于棘白菌素B的发酵生产。
10.一种利用权利要求1-8任一项所述的培养基生产棘白菌素B的方法,其特征在于，所述的方法包括: (1)在适合曲霉菌(Aspergillusnidulans)生长的条件下,在权利要求1所述的培养基中发酵培养曲霉菌(Aspergillus nidulans);和 (2)从曲霉菌(Aspergillusnidulans)培养物中分离获得棘白菌素B。
全文摘要
本发明公开了一种用于生产棘白菌素B的培养基以及采用所述培养基的棘白菌素B(ECB)生产方法。所述的培养基含有碳源、有机氮源和无机盐，其中所述的碳源包括葡萄糖、淀粉和油脂。采用本发明的培养基利用曲霉菌(Aspergillus nidulans)生产ECB的产率高，效价较现有的培养基提高了3～4倍，达到750～900μg/ml。
文档编号C12R1/66GK103205479SQ20121001596
公开日2013年7月17日 申请日期2012年1月17日 优先权日2012年1月17日
发明者胡海峰, 闵涛玲, 郑玉果 申请人:上海医药工业研究院, 中国医药工业研究总院