对昆虫害虫具有抗性的植物的制作方法

文档序号:510865阅读:276来源:国知局
对昆虫害虫具有抗性的植物的制作方法
【专利摘要】本发明涉及使用干扰核糖核酸(RNA)分子对昆虫害虫物种的侵扰进行的遗传控制,特别是对植物害虫侵扰的预防和/或控制。本发明提供了(i)表达或能够表达本发明的干扰RNA并且(ii)对昆虫害虫物种的侵扰具有抗性的转基因植物。
【专利说明】对昆虫害虫具有抗性的植物
发明领域[0001] 本发明总体上涉及对昆虫害虫物种的侵扰的遗传控制,特别是对植物的害虫侵扰的预防和/或控制。更具体地说,本发明涉及通过干扰核糖核酸(RNA)分子下调昆虫害虫物种中靶基因的表达。本发明还提供了(i)表达或能够表达本发明的干扰RNA并且(ii)对昆虫害虫物种的侵扰具有抗性的转基因植物。
_2] 发明背景
[0003]存在大量能够侵染或侵扰多种环境和宿主生物体的昆虫害虫物种。昆虫害虫包括以下昆虫目中的多个物种:半翅目(Hemiptera)(蝽类昆虫)、鞘翅目(Coleoptera)(甲虫)、蚤目(Siphonaptera)(跳蚤)、网翅目(Dichyoptera)(蟑螂和虫堂螂)、鳞翅目(Lepidoptera)(蛾和蝴蝶)、直翅目(Orthoptera)(例如蚱由孟)以及双翅目(Diptera)(苍蝇)。害虫侵扰会导致严重的损害。侵扰植物物种的昆虫害虫在农业上特别成问题,因为它们会对作物造成严重损害并且显著降低植物产量。多种不同类型的植物都对害虫侵扰敏感,包括经济作物,如水稻、棉花、大豆、马铃薯以及玉米。
[0004]传统上,通过使用化学杀虫剂来预防或控制昆虫害虫的侵扰。然而,这些化学品不总是适用于处理作物,因为它们可能对其他物种有毒并且会造成显著的环境损害。在最近几十年中,研究者已经开发出控制害虫侵扰的更环境友好的方法。举例来说,已经使用了天然地表达对昆虫害虫有毒的蛋白质的微生物,如苏云金芽孢杆菌(Bacillusthuringiensis)细菌。科学家还分离出编码这些杀虫蛋白的基因并使用它们来产生对昆虫害虫具有抗性的转基因作物,例如基因工程化为产生Cry家族蛋白质的玉米和棉花植物。虽然细菌毒素在控制某些类型的害虫方面一直非常成功,但是它们并非对所有的害虫物种都有效。因此,研究者们已经寻找到其他更有针对性的害虫控制方法,特别是将RNA干扰或‘基因沉默’作为在遗传水平上控制害虫的手段的方法。
[0005]RNA干扰或‘RNAi’是用以在细胞或整个生物体环境下以序列特异性方式下调基因表达的一种方法。RNAi是目前本领域中用于抑制或下调多种生物体(包括害虫生物体,如真菌、线虫以及昆虫)中的基因表达的一种成熟的技术。此外,之前的研究已经显示,下调昆虫害虫物种中的靶基因可以被用作控制害虫侵扰的一种手段。
[0006]W0 2007/074405描述了抑制无脊椎动物害虫(包括科罗拉多马铃薯甲虫)中靶基因的表达的方法。另外,W0 2009/091864描述了用于抑制昆虫害虫物种(包括来自草盲蝽(Lygus)属的害虫)中的靶基因的组合物和方法。
[0007]虽然使用RNAi来下调害虫物种中的基因表达在本领域中是已知的,但是将这种技术用作害虫控制措施的成功取决于选择最适当的靶基因,即功能缺失导致必需生物过程严重破坏和/或生物体死亡的那些基因。因此,本发明针对将下调害虫中的特定靶基因作为一种手段来实现昆虫害虫侵扰,特别是植物的昆虫害虫侵扰的更有效预防和/或控制。

【发明内容】

[0008]本发明人试图使用遗传方法来鉴定用于预防和/或控制昆虫害虫侵扰的改良的手段。具体来说,他们研究了使用RNAi按以下方式来下调基因:削弱昆虫害虫存活、生长、进展通过昆虫生命周期的不同阶段(例如从蛹变态成为成虫)、定殖特定环境和/或侵扰宿主生物体的能力并且由此限制由害虫造成的损害。
[0009]因此,根据本发明的一个方面,提供了一种转基因植物、或用于转基因植物的生殖或繁殖材料、或培养的转基因植物细胞,它表达或能够表达至少一种干扰核糖核酸(RNA或双链RNA),该干扰核糖核酸在被一种昆虫咅虫物种摄入后起到下调所述昆虫咅虫中的一种靶基因的表达的作用,其中该RNA包含至少一个沉默元件,其中该沉默元件是包含退火的互补链的一个双链RNA区域,其中一条链包含与该靶基因内的一个靶核苷酸序列至少部分地互补的一个核苷酸序列或由其组成,并且其中该靶基因
[0010](i)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、
175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31到 34、139、5、6、35 到38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58、322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、
144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、
125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、
185,234到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、
162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389或其互补序列中的任一个的一种核苷酸序列,或具有一种核苷酸序列以使得当最佳地比对并且比较两种序列时,该核苷酸序列与SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、
121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、
179,210到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237、302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中的任一个至少75%,优选至少80%、85%、90%、95%、98%或99%—致,或
[0011](ii)选自以下基因的组,这些基因具有由SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、
181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、
140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、
185,234到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、
162、164、266到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389或其互补序列中的任一个组成的一种核苷酸序列,或
[0012](iii)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、
175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31到 34、139、5、6、35 到38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、
26,75到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、
122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、
163、162、164、266到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中任一个的一个至少 21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、35、40、45、50、55、60、70、80、90、100、110、125、150、175、200、225、250、300、350、400、450、500、550、600、700、800、900、1000、1100、1200、1300、1400、1500、2000 或 3000 个连续核苷酸的片段的一种核苷酸序列,或具有一种核苷酸序列使得当将包含所述片段的所述基因与SEQ ID NO 1、
174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到
289,298到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到321、386、387、388、389中的任一个最佳地比对并且比较时,所述核苷酸序列与SEQ ID NO
1、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、
4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、
`14,51到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209、286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278到281、200、201、314到317、402、186、202、187、203、306 到 309、318到321、386、387、388、389或其互补序列中的任一个至少75%,优选至少80%、85%、90%、95%、98%或 99%—致,或
[0013](iv)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、
175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31到 34、139、5、6、35 到38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、
26,75到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、
122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、
146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、
163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中任一个的一个至少 21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、35、40、45、50、
55、60、70、80、90、100、110、125、150、175、200、225、250、300、350、400、450、500、550、600、700、800、900、1000、1100、1200、1300、1400、1500、2000 或 3000 个连续核苷酸的片段的一种核苷酸序列,并且其中当将所述片段与SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到
325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、
121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、
179,210到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237、302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 中的任一个中的相应片段最佳地比对并且比较时,所述片段的所述核苷酸序列与SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、
16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206到209、286 到 289、298 到 301、
145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234到237、302到305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246到 249、154、155,250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389或其互补序列中的任一个的所述相应片段至少75 %,优选至少80 %、85 %、90 %、95 %、98%或99%—致,或
[0014](v)为一种基因的一种昆虫害虫直向同源物,该基因具有包含SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到
34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到
289,298到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、
124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318到321、386、387、388、389或其互补序列中的任一个的一种核苷酸序列,其中两种直向同源基因在序列方面的相似程度使得当最佳地比对并且比较这两种基因时,该直向同源物所具有的序列与 SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30、282 到 285、294 至lj297、310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、
11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、
20,63到 66、21、22、67 `到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、
187、203、306到309、318到321、386、387、388、389所表示的序列中的任一个至少75%,优选至少 80%、85%、90%、95%、98%或 99%—致,或
[0015](vi)选自以下基因的组,这些基因具有编码一种氨基酸序列的一种核苷酸序列,当最佳地比对并且比较两种氨基酸序列时,该氨基酸序列与由SEQ ID NO 1、174、404、180、
188、2、175、181、189、27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、
5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67到 70、23、24、71到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、
153,246到 249、154、155、250到253、156、157、254到257、158、159、258到261、160、161、262到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173,278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、
387、388、389中的任一个所编码的氨基酸序列至少70%,优选至少75%、80%、85%、90%、95%、98%或 99%—致 。
[0016]在本发明的一个具体方面,由本发明的植物表达的干扰RNA分子包含至少一个双链区,典型地是该干扰RNA的沉默元件,它包含通过与一个反义RNA链互补碱基配对而退火的一个有义RNA链,其中dsRNA分子的有义链包含与位于该靶基因的RNA转录物内的一个核苷酸序列互补的一个核苷酸序列。
[0017]在一个实施例中,本发明涉及一种转基因植物、或用于转基因植物的生殖或繁殖材料、或培养的转基因植物细胞,它表达或能够表达一种干扰RNA分子,该干扰RNA分子包含至少一个双链区,典型地是该干扰RNA分子的沉默元件,它包含通过与一个反义RNA链互补碱基配对而退火的一个有义RNA链,其中dsRNA分子的有义链包含一个至少17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、35、40、45、50、55、60、70、80、90、100、110、125、150、175、200、225、250、300、350、400、450、500、550、600、700、800、900、1000、1100、1200、1300、1400,1500,2000或3000个连续核苷酸的序列,该序列与位于来自肌钙蛋白/肌丝复合物的靶基因的RNA转录物内的一个核苷酸序列至少75 %,优选至少80 %、85 %、90 %、95 %、98%、99% 或 100% 互补。
[0018]在一个实施例中,该革巴基因编码一种昆虫wings up A(肌|丐蛋白I)蛋白(例如CG7178Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 1、2、174、404、175、
180、181、188和189表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与SEQ ID NO 79、349、405,352 或 356 中的一个或多个具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%
的氨基酸序列一致性。
[0019]在一个实施例中,该靶基因编码一种支持蛋白(upheld protein)(例如CG7107 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 121、130、142、143、176、177、182和183表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与SEQ ID NO 330、350或353中的一个或多个具有至少85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或100%的氨基酸序列一致性。
[0020]在一个实施例中,该靶基因编码原肌球蛋白1蛋白(例如CG4898 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)或原肌球蛋白2蛋白(例如CG4843 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 123和132表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与SEQ ID NO 332 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的氨基酸序列一致性。在一个实施例中,该靶基因编码肌球蛋白重链(例如CG17927 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 122、131、144、145、178和179表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与SEQ ID NO 331或351中的一个或多个具有至少85%、90%、92 %、94 %、96 %、98 %、99 %或100 %的氨基酸序列一致性。
[0021]在一个实施例中,该靶基因编码肌球蛋白轻链细胞质蛋白(例如CG3201 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 124和133表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与SEQ ID NO 333具有至少85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或100%的氨基酸序列一致性。
[0022]在一个实施例中,该靶基因编码鱼翅瓜蛋白(例如CG3595 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 125和134表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID NO 334 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的一致性。
[0023]在一个实施例中,该靶基因编码拉链蛋白(例如CG15792 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 126和135表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID NO 335 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100% 的一致性。
[0024]在一个实施例中,该靶基因编码肌钙蛋白C (例如CG2981、CG7930、CG9073、CG6514、CG12408、CG9073、CG7930、CG2981、CG12408 或 CG6514 Dm 蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 127和136、或128和137、或184和185表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与SEQ ID NO 336、337和354中的一个或多个具有至少85%、90%、92%、94%、96%、98%、99% 或 100% 的氨基酸序列一致性。
[0025]根据另一个方面,本发明涉及一种转基因植物、或用于转基因植物的生殖或繁殖材料、或培养的转基因植物细胞,它表达或能够表达一种干扰RNA分子,该干扰RNA分子包含至少一个双链区,典型地是该干扰RNA分子的沉默元件,它包含通过与一个反义RNA链互补碱基配对而退火的一个有义RNA链,其中dsRNA分子的有义链包含一个至少17、18、19、
20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、35、40、45、50、55、60、70、80、90、100、110、125、150、175、200、225、250、300、350、400、450、500、550、600、700、800、900、1000、1100、1200、1300、1400、1500、2000或3000个连续核苷酸的序列,该序列与位于编码一种昆虫核糖体蛋白的一种靶基因的RNA转录物内的一个核苷酸序列至少75 %,优选至少80 %、85 %、90 %、95 %、98%、99% 或 100% 互补。
[0026]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白S3A(例如CG2168 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 11、12和141表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与SEQ ID NO 84`或328中的一个或两个具有至少85%、90%、92%、94%、96 %、98 %、99 %或100 %的氨基酸序列一致性。
[0027]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白LP1 (例如CG4087 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 3和4表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID NO 80 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的氨基
酸序列一致性。
[0028]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白S3 (例如CG6779 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 7和8表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID NO 82 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的氨基
酸序列一致性。
[0029]在一个实施例中,由SEQ ID NO 9和10表示的靶基因编码核糖体蛋白LlOAb (例如CG7283Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与SEQID NO 83具有至少85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或100%的氨基酸序列一致性。
[0030]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白S18(例如CG8900 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 13和14表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID NO 85 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的氨基酸序列一致性。
[0031]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白L4(例如CG5502Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 5和6表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID NO 81 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的氨基酸
序列一致性。
[0032]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白S27(例如CG10423 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 15和16、204和205表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与SEQ ID NO 86和359中的一个或两个具有至少85%、90%、92%、94 %、96 %、98 %、99 %或100 %的氨基酸序列一致性。
[0033]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白L6(例如CG11522 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 17和18表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID NO 87 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的氨
基酸序列一致性。
[0034]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白S13(例如CG13389 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 19和20表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID NO 88 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的
氨基酸序列一致性。
[0035]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白L12(例如CG3195 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 21和22表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID NO 89 具 有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的氨
基酸序列一致性。
[0036]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白L26(例如CG6846 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 158和159表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID NO 343 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的
氨基酸序列一致性。
[0037]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白L21 (例如CG12775 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 165、166以及167表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与SEQ ID NO 347和348具有至少85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或100%的氨基酸序列一致性。
[0038]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白S12(例如CG11271 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 156和157表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID NO 342 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%
的氨基酸序列一致性。
[0039]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白S28b (例如CG2998 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 160和161表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID NO 344 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%
的氨基酸序列一致性。
[0040]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白L13(例如CG4651 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 154和155表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID NO 341 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的
氨基酸序列一致性。
[0041]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白L10 (例如CG17521 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 163和164表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID NO 345 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%
的氨基酸序列一致性。
[0042]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白L5(例如CG17489 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 152和153表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID NO 340 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的
氨基酸序列一致性。
[0043]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白S15Aa(例如CG2033 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 150和151表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID NO 339 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%
的氨基酸序列一致性。
[0044]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白L19(例如CG2746 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 200和201表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID NO 357 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的
氨基酸序列一致性。
[0045]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白L27(例如CG4759 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 386表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID NO 390 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100% 的氨基酸
序列一致性。
[0046]在一个实施例中,该靶基因编码线粒体细胞色素c氧化酶亚单位II蛋白(例如CG34069Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 25和26表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与SEQ ID NO 91具有至少85%、90%、92%、94%、96 %、98 %、99 %或100 %的氨基酸序列一致性。
[0047]在一个实施例中,该靶基因编码ATP合酶链(例如CG7610 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N0129和138表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQIDN0338 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的氨
基酸序列一致性。
[0048]在一个实施例中,该靶基因编码泛素-5E(例如CG32744 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 186和187、202和203表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与SEQ ID NO 355和358中的一个或两个具有至少85%、90%、92%、94%、96 %、98 %、99 %或100 %的氨基酸序列一致性。
[0049]在一个实施例中,该靶基因编码蛋白酶体β型亚单位(例如CG17331 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 387表示。。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID NO 391 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%
的氨基酸序列一致性。
[0050]在一个实 施例中,该靶基因编码作为CG13704 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物的蛋白质,所述靶基因是由SEQ ID NO 388表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与SEQ ID NO 392 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的氨基酸序列一致性。
[0051]在一个实施例中,该靶基因编码Rpnl2蛋白(例如CG4157 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 389表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID NO 393 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100% 的氨基酸序
列一致性。
[0052]根据本发明的另一个方面,提供了一种分离的多核苷酸,该多核苷酸选自下组,该组由以下各项组成:
[0053].(i)包含如由 SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30、282 到
285,294到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、
176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、
126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273`、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中的任一个所表示的一种核苷酸序列的至少21个,优选至少22、23、24、25、26、27、28、29、30、35、40、45、50、55、60、70、80、90、100、110、125、150、175、200、225、250、300、350、400、450、500、550、600、700、800、900、1000、1100、1200、1300、1400、1500、2000 或 3000 个连续核苷酸的一种多核苷酸,或.[0054](ii)由如 SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30、282 到 285、294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到62、19、20、63到66、21、22、67到70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209、286 到 289、298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213、290到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、
138,238到 241、150、151、242到245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306到309、318到321、386、387、388、389或其互补序列中的任一个所表示的一种核苷酸序列的至少 21 个,优选至少 22、23、24、25、26、27、28、29、30、35、40、45、50、55、60、70、80、90、100、110、125、150、175、200、225、250、300、350、400、450、500、550、600、700、800、900、1000、1100、1200、1300、1400、1500、2000 或 3000 个连续核苷酸组成的一种多核苷酸,或[0055](iii)包含如在 SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30、282 到285.294到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、
176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、
126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中的任一个中所表示的一种核苷酸序列的至少21个,优选至少22、23或24、25、26、27、28、29、30、
35、40、45、50、55、60、70、80、90、100、110、125、150、175、200、225、250、300、350、400、450、500、550、600、700、800、900、1000、1100、1200、1300、1400、1500、2000 或 3000 个连续核苷酸的一种多核苷酸,当最佳地比对并且比较两个序列时,所述多核苷酸与SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到
34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到
289,298到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、
124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318到321、386、387、388、389或其互补序列中的任一个至少75%,优选至少80%、85%、90%、95%、98%或 99%—致,或
[0056](iv)包含如在 SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30、282 到
285.294到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、
176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、
126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中的任一个中所表示的一种核苷酸的一个至少21个,优选至少22、23或24、25、26、27、28、29、30、35、40、45、50、55、60、70、80、90、100、110、125、150、175、200、225、250、300、350、400、450、500、550、600、700、800、900、1000、1100、1200、1300、1400、1500、2000 或 3000 个连续核苷酸的片段的一种多核苷酸,并且其中所述片段或所述互补序列具有一种核苷酸序列,当将所述片段与 SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27到30、282 到 285、294到 297、310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、
11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、
20,63到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、
177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187,203,306到309、318到321、386、387、388、389中的任一个中的相应片段最佳地比对并且比较时,所述核苷酸序列与 SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30、282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、
9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、
17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、
142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、
147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302到 305、129、138、238 到 241、150`、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中的任一个的所述相应片段至少75 %,优选至少80 %、85 %、90 %、95 %、98 %或99 % —致,或
[0057](v)由如在 SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30、282 到 285、294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到62、19、20、63到66、21、22、67到70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、
130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213、290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、
135,226到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、
129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、
157,254到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中的任一个中所表示的一种核苷酸的一个至少21个,优选至少22、23或24、25、26、27、28、29、30、35、
40、45、50、55、60、70、80、90、100、110、125、150、175、200、225、250、300、350、400、450、500、550、600、700、800、900、1000、1100、1200、1300、1400、1500、2000 或 3000 个连续核苷酸的片段组成的一种多核苷酸,并且其中所述片段或所述互补序列具有一种核苷酸序列,当将所述片段与 SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27到30、282到 285、294到 297、310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、
11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、
20,63到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、
177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187,203,306到309、318到321、386、387、388、389或其互补序列中的任一个中的相应片段最佳地比对并且比较时,或
[0058](vi)编码一种氨基酸序列的一种多核苷酸,当最佳地比对并且比较两种氨基酸序列时,该氨基酸序列与 SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30、282 至lj
285,294到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50 、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、
176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、
126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 中的任一个所编码的氨基酸序列至少70%,优选至少75%、80%、85%、90%、95%、98%或99% —致并且
[0059]其中所述多核苷酸不长于10000、9000、8000、7000、6000、5000、4000、3000、2000或1500个核苷酸。
[0060]由本发明的靶基因编码的氨基酸序列是由SEQ ID NO 79、349、405、352、356、80、
326、81、327、82、83、328、84、329、85、86、359、87 到 91、330、350、353、331、351、332 到 336、337、354、338 到 344、346、345、347、348、357、355、358、390 到 393 表示。
[0061]在本发明的一个具体方面,该分离的多核苷酸是干扰RNA分子的一部分,典型地是沉默元件的一部分,它包含至少一个双链区,该双链区包含通过与一个反义RNA链互补碱基配对而退火的一个有义RNA链,其中dsRNA分子的有义链包含与位于该靶基因的RNA转录物内的一个核苷酸序列互补的一个核苷酸序列。更具体地说,该分离的多核苷酸是在有义和反义方向克隆到一种DNA构建体中使得有义和反义多核苷酸转录后形成一个dsRNA分子,该分子在被害虫摄入后起到抑制或下调所述害虫内的靶基因的表达的作用。
[0062]在某些方面中,本发明涉及多种分离的多核苷酸,该多核苷酸是在有义和反义方向克隆到一种DNA构建体中使得有义和反义多核苷酸转录后形成一个dsRNA分子,该分子在被昆虫摄入后起到抑制或下调肌钙蛋白/肌丝复合物内的靶基因的表达的作用。在一个实施例中,该靶基因编码一种昆虫wings up A(肌钙蛋白I)蛋白(例如CG7178 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 1、2、174、404、175、180、181、188和189表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与SEQ ID NO 79、349、405、352或356中的一个或多个具有至少85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或100%的氨基酸序列一致性。[0063]在一个实施例中,该靶基因编码一种支持蛋白(例如CG7107 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N0121、130、142、143、176、177、182和183表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与SEQ ID NO 330、350或353中的一个或多个具有至少85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或100%的氨基酸序列一致性。
[0064]在一个实施例中,该靶基因编码原肌球蛋白1蛋白(例如CG4898 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)或原肌球蛋白2蛋白(例如CG4843 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 123和132表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与SEQ ID NO 332 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的氨基酸序列一致性。
[0065]在一个实施例中,该靶基因编码肌球蛋白重链(例如CG17927 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 122、131、144、145、178和179表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与SEQ ID NO 331或351中的一个或多个具有至少85%、90%、92%、94%、96%、98%、99% 或 100% 的氨基酸序列一致性。
[0066]在一个实施例中,该靶基因编码肌球蛋白轻链细胞质蛋白(例如CG3201 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 124和133表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与SEQ ID NO 333具有至少85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或100%的氨基酸序列一致性。
[0067]在一个实施例中,该靶基因编码鱼翅瓜蛋白(例如CG3595 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 125和134表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID NO 334 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的一致性。
[0068]在一个实施例中,该靶基因编码拉链蛋白(例如CG15792 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 126和135表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID NO 335 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100% 的一致性。
[0069]在一个实施例中,该靶基因编码肌钙蛋白C (例如CG2981、CG7930、CG9073、CG6514、CG12408、CG9073、CG7930、CG2981、CG12408 或 CG6514 Dm 蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 127和136、或128和137、或184和185表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与SEQ ID NO 336、337和354中的一个或多个具有至少85%、90%、92%、94%、96%、98%、99% 或 100% 的氨基酸序列一致性。
[0070]根据其他实施例,本发明涉及一种分离的多核苷酸,该多核苷酸是在有义和反义方向克隆到一种DNA构建体中使得有义和反义多核苷酸转录后形成一个dsRNA分子,该分子在被昆虫摄入后起到抑制或下调一种编码昆虫核糖体蛋白的靶基因的表达的作用。
[0071]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白S3A(例如CG2168 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 11、12和14表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与SEQ ID NO 84或328中的一个或两个具有至少85%、90%、92%、94%、96 %、98 %、99 %或100 %的氨基酸序列一致性。在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白LP1 (例如CG4087 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 3和4表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与SEQ ID NO 80具有至少85%、90%、92%、94 %、96 %、98 %、99 %或100 %的氨基酸序列一致性。
[0072]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白S3 (例如CG6779 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 7和8表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID NO 82 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的氨基
酸序列一致性。
[0073]在一个实施例中,由SEQ ID NO 9和10表示的靶基因编码核糖体蛋白LlOAb (例如CG7283Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与SEQID NO 83具有至少85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或100%的氨基酸序列一致性。
[0074]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白S18(例如CG8900 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 13和14表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID NO 85 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的氨基酸序列一致性。
[0075]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白L4(例如CG5502 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由`SEQ ID NO 5和6表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID NO 81 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的氨基
酸序列一致性。
[0076]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白S27(例如CG10423 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 15和16、204和205表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与SEQ ID NO 86和359中的一个或两个具有至少85%、90%、92%、94 %、96 %、98 %、99 %或100 %的氨基酸序列一致性。
[0077]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白L6(例如CG11522 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 17和18表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID NO 87 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的氨
基酸序列一致性。
[0078]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白S13(例如CG13389 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 19和20表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID NO 88 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的
氨基酸序列一致性。
[0079]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白L12(例如CG3195 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 21和22表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID NO 89 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的氨
基酸序列一致性。[0080]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白L26(例如CG6846 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 158和159表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID NO 343 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的
氨基酸序列一致性。
[0081]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白L21(例如CG12775 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 165、166以及167表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与SEQ ID NO 347和348具有至少85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或100%的氨基酸序列一致性。
[0082]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白S12(例如CG11271 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 156和157表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID NO 342 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%
的氨基酸序列一致性。
[0083]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白S28b (例如CG2998 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 160和161表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID NO 344 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%
的氨基酸序列一致性。
[0084]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白L13(例如CG4651 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 154和155表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID NO 341 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的
氨基酸序列一致性。
[0085]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白L10 (例如CG17521 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 163和164表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID NO 345 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%
的氨基酸序列一致性。
[0086]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白L5(例如CG17489 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 152和153表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID NO 340 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的
氨基酸序列一致性。
[0087]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白S15Aa(例如CG2033 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 150和151表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID NO 339 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%
的氨基酸序列一致性。
[0088]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白L19(例如CG2746 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 200和201表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID NO 357 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的
氨基酸序列一致性。
[0089]在一个实施例中, 该靶基因编码核糖体蛋白L27(例如CG4759 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID NO 386表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID NO 390 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100% 的氨基酸序列一致性。
[0090]优选地,本发明的方法可实际应用于预防和/或控制昆虫害虫侵扰,特别是控制以下作物植物的害虫侵扰:例如(但不限于)棉花、马铃薯、水稻、草莓、苜蓿、大豆、番茄、卡诺拉、向日葵、高粱、珍珠粟、玉米、茄子、胡椒以及烟草。此外,可以通过常规遗传工程技术将本发明的干扰RNA弓丨入到有待保护的植物中。
[0091]因此,根据本发明的另一个方面,提供了一种用于产生对昆虫害虫物种的侵扰具有抗性的转基因植物的方法,包括:
[0092](a)用包含编码一种干扰核糖核酸(RNA)的一种多核苷酸序列的一种DNA构建体转化植物细胞,该干扰核糖核酸在被昆虫害虫物种摄入后起到下调所述昆虫害虫中的一种靶基因的表达的作用,其中该靶基因
[0093](i)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31到 34、139、5、6、35 到38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、
26,75到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、
122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、
146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、
163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389或其互补序列中的任一个的一种核苷酸序列,或具有一种核苷酸序列,当最佳地比对并且比较两种序列时,该核苷酸序列与SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、
121、142、176、182、 130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、
179,210到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237、302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中的任一个至少75%,优选至少80%、85%、90%、95%、98%或99%—致,或
[0094](ii)选自以下基因的组,这些基因具有由SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、
181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、
140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、
125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、
185,234到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、
162、164、266到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389或其互补序列中的任一个组成的一种核苷酸序列,或 [0095](iii)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、
205,55到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、
145、122、144、178、131、179、210到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、
388,389中任一个的一个至少 20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、35、40、45、50、55、60、70、80、90、100、110、125、150、175、200、225、250、300、350、400、450、500、550、600、700、800、900、1000、1100、1200、1300、1400、1500、2000或3000个连续核苷酸的片段的一种核苷酸序列,或具有一种核苷酸序列,当将包含所述片段的所述基因与SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、
6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、
16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206到209、286 到 289、298 到 301、
145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234到237、302到305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246到 249、154、155、250 到 253、156、157、254到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、
163、162、164、266到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389中的任一个最佳地比对并且比较时,所述核苷酸序列与SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、
6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、
16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206到209、286 到 289、298 到 301、
145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、
388、389或其互补序列中的任一个至少75%,优选至少80%、85%、90%、95%、98%或99%一致,或
[0096](iv)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、
205,55到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、
25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、
145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、
388,389或其互补序列中任一个的一个至少 20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、35、40、
45、50、55、60、70、80、90、100、110、125、150、175、200、225、250、300、350、400、450、500、550、600、700、800、900、1000、1100、1200、1300、1400、1500、2000 或 3000 个连续核苷酸的片段的一种核苷酸序列,并且其中当将所述片段与SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、
189,27到 30,282 到 285,294` 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、
7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58、322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、
143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、
131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234到 237、302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201,314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 中的任一个中的相应片段最佳地比对并且比较时,所述片段的所述核苷酸序列与SEQ ID NO 1-26、121-205、386-389、394、400或其互补序列中的任一个的所述相应片段至少75%,优选至少80%、85%、90%、95%、98% 或 99%—致,或
[0097](v)为一种基因的一种昆虫害虫直向同源物,该基因具有包含SEQ IDN01U74、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、
23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到289,298到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、
124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318到321、386、387、388、389或其互补序列中的任一个的一种核苷酸序列,其中两种直向同源基因在序列方面的相似程度使得当最佳地比对并且比较这两种基因时,该直向同源物所具有的序列与 SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30、282 到 285、294 至lj297、310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、
11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、
20,63到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、
177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、
187、203、306到309、318到321、386、387、388、389所表示的序列中的任一个至少75%,优选至少 80%、85%、90%、95%、98%或 99%—致,或
[0098](vi)选自以下基因的组,这些基因具有编码一种氨基酸序列的一种核苷酸序列,当最佳地比对并且比较两种氨基酸序列时,该氨基酸序列与由SEQ ID NO 1、174、404、180、
188、2、175、181、189、27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、
5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、
153,246到 249、154、155、250到253、156、157、254到257、158、159、258 到 261、160、161、262到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、
173,278到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389中的任一个所编码的氨基酸序列至少70%,优选至少75%、80%、85%、90%、95%、98%或 99%—致;
[0099](b)从该转化的植物细胞再生一种植物;并且
[0100](c)在适合从该重组DNA构建体表达该干扰RNA的条件下使该转化的植物生长,因此与一种未转化的植物相比,所述植物对所述害虫具有抗性。
[0101]在另一个方面,在此提供的是一种用于预防和/或控制作物植物田地中的昆虫害虫侵扰的方法,所述方法包括在所述植物中表达一种有效量的一种干扰核糖核酸(RNA),该干扰核糖核酸在被昆虫害虫物种摄入后起到下调所述昆虫害虫物种中的一种靶基因的表达的作用,其中该RNA包含至少一个沉默元件,其中该沉默元件是包含退火的互补链的一个双链RNA区域,其中一条链包含与该靶基因内的一种靶核苷酸序列至少部分地互补的一种核苷酸序列或由其组成,并且其中该靶基因
[0102](i)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31到 34、139、5、6、35 到38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58、322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、
144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、
125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、
185,234到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、 156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、
162、164、266到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389或其互补序列中的任一个的一种核苷酸序列,或具有一种核苷酸序列以使得当最佳地比对并且比较两种序列时,该核苷酸序列与SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、
121、142、176、182、130、177、183、206到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、
179,210到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237、302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中的任一个至少75%—致,或
[0103](ii)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31到 34、139、5、6、35 到38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、
26,75到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、
122、144、178、131、179、210到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、
146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、
163、162、164、266到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389或其互补序列中任一个的一个至少21个连续核苷酸的片段的一种核苷酸序列,或具有一种核苷酸序列以使得当将包含所述片段的所述基因与SEQ ID NO 1、174、404、180、188、
2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、
205,55到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、
145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234到237、302到305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、
163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389中的任一个最佳地比对并且比较时,所述核苷酸序列与SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、
6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、
16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209、286 到 289、298 到 301、
145、122、144、178、131、179、210到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234到237、302到305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、
163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389或其互补序列中的任一个至少75%—致,或
[0104](iii)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、
175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31到 34、139、5、6、35 到
38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、
26,75到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、
122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、
146、125、134、222到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、
163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389或其互补序列中任一个的一个至少21个连续核苷酸的片段的一种核苷酸序列,并且其中当将所述片段与 SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30、282 到 285、294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到
46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到62、19、20、63到66、21、22、67到70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、
130、177、183、206 到 209、286 到 289、298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213、290到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、
138,238到 241、150、151、242到245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306到309,318到321、386、387、388、389中的任一个中的相应片段最佳地比对并且比较时,所述片段的所述核苷酸序列与SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、
189,27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、
7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58、322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、
178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、
134,222到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、
155,250到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、
164,266到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中的任一个的所述相应片段至少75%一致,或
[0105](iv)为一种基因的一种昆虫害虫直向同源物,该基因具有包含SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到
289,298到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、
124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到321、386、387、388、389或其互补序列中的任一个的一种核苷酸序列,其中两种直向同源基因在序列方面的相似程度使得当最佳地比对并且比较这两种基因时,该直向同源物所具有的序列与 SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27到30、282 到 285、294到297、310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、
12,47到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、
183,206到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、
123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203,306到309、318到321、386、387、388、389所表示的序列中的任一个至少75%—致,或
[0106](v)选自以下基因的组,这些基因具有编码一种氨基酸序列的一种核苷酸序列,当最佳地比对并且比较两种氨基酸序列时,该氨基酸序列与由SEQ ID NO 1、174、404、180、
188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、
6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、
16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209、286 到 289、298 到 301、
145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234到237、302到305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246到 249、154、155,250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、
163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389中的任一个所编码的氨基酸序列至少85%—致。
[0107]在本发明的所有方面,在优选实施例中,该靶基因
`[0108](i)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、
175、181、189、27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、121、142、176、182、130、177、
183.206到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、
123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到229、127、148、136、230到233或其互补序列中的任一个的一种核苷酸序列,或具有一种核苷酸序列以使得当最佳地比对并且比较两种序列时,该核苷酸序列与SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、121、142、
176、182、130、177、183、206到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、
126、135、226到229、127、148、136、230到233或其互补序列中的任一个至少75%,优选至少 80%、85%、90%、95%、98% 或 99%—致,或
[0109](ii)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、
175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、121、142、176、182、130、177、
183.206到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、
123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到229、127、148、136、230到233或其互补序列中任一个的一个至少21个连续核苷酸的片段的一种核苷酸序列,或具有一种核苷酸序列以使得当将包含所述片段的所述基因与SEQ IDNO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、
121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、
179,210到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到225、147、126、135、226到229、127、148、136、230到233中的任一个最佳地比对并且比较时,所述核苷酸序列与 SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30、282 到 285、294 到 297,310 到 313、401、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233 或其互补序列中的任一个至少75 %,优选至少80 %、85 %、90 %、95 %、98 %或99 % —致,或
[0110](iii)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、
175、181、189、27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、121、142、176、182、130、177、
183,206到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、
123、132、214到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到229、127、148、136、230到233或其互补序列中任一个的一个至少21个连续核苷酸的片段的一种核苷酸序列,并且其中当将所述片段与SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、
189、27到30、282到285、294到297、310到313、401、121、142、176、182、130、177、183、206到
209,286到 289、298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213、290 到 293、123、132、214到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136,230到233中的任一个中的相应片段最佳地比对并且比较时,所述片段的所述核苷酸序列与 SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30、282 到 285、294 到 297、310 到 313、401、121 、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、
122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、
146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233 或其互补序列中的任一个的所述相应片段至少75%,优选至少80%、85%、90%、95%、98%或99%—致,或
[0111](iv)为一种基因的一种昆虫害虫直向同源物,该基因具有包含SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、121、142、
176、182、130、177、183、206到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126,135,226到229、127、148、136、230到233或其互补序列中的任一个的一种核苷酸序列,其中两种直向同源基因在序列方面的相似程度使得当最佳地比对并且比较这两种基因时,该直向同源物所具有的序列与 SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30、282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到
289,298到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、
124、133、218到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230到 233所表示的序列中的任一个至少75%,优选至少80%、85%、90%、95%、98%或99% —致,或
[0112](v)选自以下基因的组,这些基因具有编码一种氨基酸序列的一种核苷酸序列,当最佳地比对并且比较两种氨基酸序列时,该氨基酸序列与由SEQ ID NO 1、174、404、180、
188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、121、142、176、182、
130、177、183、206到209、286 到 289、298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213、290到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226到229、127、148、136、230到233中的任一个所编码的氨基酸序列至少85%,优选至少90%、95%、98%或 99%—致。
[0113]在一个优选实施例中,靶基因编码一种选自肌钙蛋白/肌丝复合物的昆虫蛋白,该复合物选自下组,该组包括肌钙蛋白I蛋白(例如CG7178 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、支持蛋白(例如CG7107 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、原肌球蛋白I蛋白(例如CG4898 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、原肌球蛋白2蛋白(例如CG4843 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、肌球蛋白重链(例如CG17927 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、肌球蛋白轻链细胞质蛋白(例如CG3201 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、鱼翅瓜蛋白(例如CG3595 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、拉链蛋白(例如CG15792 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、以及肌钙蛋白 C 蛋白(例如 CG2981、CG7930、CG9073、CG6514、CG12408、CG9073、CG7930、CG2981、CG12408或CG6514 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)。
[0114]在本发明的所有方面,在优选实施例中,该靶基因
[0115]⑴选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQ ID NO 3、4、31到34、139、5、6、35到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、
205.55到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、150、151、242 到245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273 或其互补序列中的任一个的一种核苷酸序列,或具有一种核苷酸序列以使得当最佳地比对并且比较两种序列时,该核苷酸序列与 SEQ ID NO 3、4、31 到 34、139、5、6、35到38、140、7、8、39到42、9、10、43到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266到269、165、167、166、270到273或其互补序列中的任一个至少75%,优选至少80%、85%、90%、95%、98% 或 99%—致,或
[0116](ii)选自以下基因的组`,这些基因具有包含SEQ ID NO 3、4、31到34、139、5、6、35到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、
205.55到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、150、151、242 到245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273 或其互补序列中任一个的一个至少21个连续核苷酸的片段的一种核苷酸序列,或具有一种核苷酸序列以使得当将包含所述片段的所述基因与SEQ ID NO 3、4、31到34、139、5、6、35到38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、150、151、242 到 245、152、153、246到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266到269、165、167、166、270到273中的任一个最佳地比对并且比较时,所述核苷酸序列与 SEQ ID NO 3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 至Ij46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到269、165、167、166、270到273或其互补序列中的任一个至少75%,优选至少80%、85%、90%、95%、98% 或 99%—致,或
[0117](iii)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQ ID NO 3、4、31到34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58 ,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、150、151、242到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273 或其互补序列中任一个的一个至少21个连续核苷酸的片段的一种核苷酸序列,并且其中当将所述片段与SEQID NO 3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270到273中的任一个中的相应片段最佳地比对并且比较时,所述片段的所述核苷酸序列与 SEQ ID NO 3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、
12,47到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58、322 至Ij 325、17、18、59 到 62、19、20、63到 66、21、22、67 到 70、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、
157,254到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167,166,270到273或其互补序列中的任一个的所述相应片段至少75 %,优选至少80 %、85%、90%、95%、98% 或 99%—致,或
[0118](iv)为一种基因的一种昆虫害虫直向同源物,该基因具有包含SEQ ID NO 3、4、31到 34、139、5、6、35到38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、
159.258到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273 或其互补序列中的任一个的一种核苷酸序列,其中两种直向同源基因在序列方面的相似程度使得当最佳地比对并且比较这两种基因时,该直向同源物所具有的序列与SEQ ID NO 3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到70、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、
159.258到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273 所表示的序列中的任一个至少75%,优选至少80%、85%、90%、95%、98%或99%—致,或
[0119](V)选自以下基因的组,这些基因具有编码一种氨基酸序列的一种核苷酸序列,当最佳地比对并且比较两种氨基酸序列时,该氨基酸序列与由SEQ ID NO 3、4、31到34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58、322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273 中的任一个所编码的氨基酸序列至少85 %,优选至少90 %、95 %、98 %或99 % —致。
[0120]在一个优选实施例中,靶基因编码一种昆虫核糖体蛋白,该昆虫核糖体蛋白选自下组,该组包括核糖体蛋白S3A(例如CG2168 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、核糖体蛋白LPl (例如CG4087 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、核糖体蛋白S3(例如CG6779 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、核糖体蛋白LlOAb (例如CG7283 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、核糖体蛋白S18(例如CG8900 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、核糖体蛋白L4(例如CG5502 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、核糖体蛋白S27(例如CG10423 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、核糖体蛋白L6(例如CGl 1522 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、核糖体蛋白S13(例如CG13389 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)以及核糖体蛋白L12 (例如CG3195 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、核糖体蛋白L26(例如CG6846 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、核糖体蛋白L21 (例如CG12775 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、核糖体蛋白S12(例如CG11271 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、核糖体蛋白S28b (例如CG2998 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、核糖体蛋白L13(例如CG4651 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、核糖体蛋白LlO (例如CG17521 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、核糖体蛋白L5 (例如CG17489 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、核糖体蛋白S15Aa (例如CG2033 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、核糖体蛋白L19 (例如CG2746 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、以及核糖体蛋白L27(例如CG4759 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)
[0121]在本发明的所有方面,在优选实施例中,该靶基因
[0122](i)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27到30,282到285,294到297,310到313,401或其互补序列中的任一个的一种核苷酸序列,或具有一种核苷酸序列以使得当最佳地比对并且比较两种序列时,该核苷酸序列与 SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30、282 到 285、294 至Ij297,310到313、401或其互 补序列中的任一个至少75%,优选至少80%、85%、90%、95%、98%或99%—致,或
[0123](ii)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313,401 或其互补序列中任一个的一个至少21个连续核苷酸的片段的一种核苷酸序列,或具有一种核苷酸序列以使得当将包含所述片段的所述基因与 SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27到30、282 到285、294到297、310到313、401中的任一个最佳地比对并且比较时,所述核苷酸序列与SEQID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27到30、282到285、294到297、310到313、401或其互补序列中的任一个至少75 %,优选至少80 %、85 %、90 %、95 %、98 %或99 % —致,或
[0124](iii)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、
175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313,401 或其互补序列中任一个的一个至少21个连续核苷酸的片段的一种核苷酸序列,并且其中当将所述片段与SEQ ID NO 1、
174、404、180、188、2、175、181、189、27到30、282到285、294到297、310到313、401中的任一个中的相应片段最佳地比对并且比较时,所述片段的所述核苷酸序列与SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313,401 或其互补序列中的任一个的所述相应片段至少75%,优选至少80%、85%、90%、95%、98%或99% —致,或
[0125](iv)为一种基因的一种昆虫害虫直向同源物,该基因具有包含SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27到30、282到285、294到297、310到313、401或其互补序列中的任一个的一种核苷酸序列,其中两种直向同源基因在序列方面的相似程度使得当最佳地比对并且比较这两种基因时,该直向同源物所具有的序列与SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313,401 所表示的序列中的任一个至少75%,优选至少80%、85%、90%、95%、98%或99%—致,或
[0126](V)选自以下基因的组,这些基因具有编码一种氨基酸序列的一种核苷酸序列,当最佳地比对并且比较两种氨基酸序列时,该氨基酸序列与由SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313,401 中的任一个所编码的氨基酸序列至少85 %,优选至少90 %、95 %、98 %或99 % —致。
[0127]在优选实施例中,该靶基因可以编码一种昆虫肌钙蛋白I蛋白(例如CG7178Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)。该昆虫肌钙蛋白I蛋白可以具有与如SEQ ID NO 79、349、405、352或356中的任一个中所存在的氨基酸序列至少85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%一致(当最佳地比对所述编码的蛋白质时)的一个氨基酸序列。
[0128]表格和附图的简要i兑明
[0129]表1由第一次筛选鉴定的豆荚草盲蝽(Lygus hesperus)新颖革巴。
[0130]表1B在Lh594途径中的豆荚草盲蝽新颖靶。
[0131]表1C由第二轮筛选鉴定的豆荚草盲蝽新颖靶。
[0132]表2在豆荚草盲蝽中鉴定的靶基因的多核苷酸序列。
[0133]表3在豆荚草盲蝽中鉴定的靶基因的氨基酸序列。
[0134]表4相应于豆荚草盲蝽靶基因的dsRNA(由等效DNA序列表示的有义链)和用于产生这些dsRNA的引物。
[0135]表5根据剂量反应曲线(DRC)并且与基准靶Lh423和Lhl05相比较进行分级的豆
荚草盲蝽靶。
[0136]表6来自第二轮筛选的豆荚草盲蝽靶-根据DRC并且与基准靶Lh423和Lh594相比较进行分级。
[0137]表7有关携带豆荚草盲蝽发夹的转基因马铃薯的测试的综述。
[0138]表8用于qRT-PCR的靶基因和两种看家基因的扩增子的序列。
[0139]表9在科罗拉多马铃薯甲虫(CPB)中鉴定的靶基因的多核苷酸序列。
[0140]表10在CPB中鉴定的靶基因的氨基酸序列。
[0141]表11相应于CPB靶基因的dsRNA(由等效DNA序列表示的有义链)和用于产生这些dsRNA的引物。
[0142]表12在褐色飞虱(BPH)中鉴定的靶基因的多核苷酸序列。
[0143]表13在BPH中鉴定的靶基因的氨基酸序列。
[0144]表14相应于BPH靶基因的dsRNA(由等效DNA序列表示的有义链)和用于产生这些dsRNA的引物。
[0145]表15基于豌豆蚜基因组序列而用于扩增蚜虫cDNA的引物。
[0146]表16在蚜虫中鉴定的靶基因的多核苷酸序列。
[0147]表17在蚜虫中鉴定的靶基因的氨基酸序列。
[0148]表18相应于蚜虫靶基因的dsRNA(由等效DNA序列表示的有义链)和用于产生这些dsRNA的引物。[0149]表19用于扩增CPB Ld594cDNA的简并引物
[0150]表20用于扩增BPH cDNA的简并引物
[0151]表21:来自该筛选的马铃薯叶甲(Leptinotarsa decemlineata)新颖革巴。
[0152]表22:褐飞風(Nilaparvata Iugens)的新颖鉴定的革巴。
[0153]表23:豌豆姆(Acyrthosiphon pi sum)的新颖鉴定的革巴。
[0154]图1:板Lh001_009的第二次确认测定。暗条:在第3天到第6天的死亡率;亮条:在第6天到第8天的死亡率。使用“Lygxxx”筛选代码和“Lhxxx”靶命名代码将候选克隆命名。
[0155]图2 -M Lh010_020的第二次确认测定。暗条:在第3天到第6天的死亡率;亮条:在第6天到第8天的死亡率。使用“Lygxxx”筛选代码和“Lhxxx”靶命名代码将候选克隆命名。
[0156]图3:来自板LhOOl到Lh009的草盲蝽新颖靶的死亡率分析,以在10天的时间段内的死亡率%表示。对照以虚线表示。阳性对照:Lh423 dsRNA(RpL19)。阴性对照:GFP dsRNA和仅饲料(对照)。
[0157]图4:来自板LhOlO到Lh020的草盲蝽新颖靶的死亡率分析,以在10天的时间段内的死亡率%表示。对照以虚线表示。阳性对照:Lh423(RpL19)。阴性对照:GFP和仅饲料(对照)。
[0158]图5含有豆荚草盲蝽hpRNA盒的植物表达载体的示意性图示。RB:右边界;LB:左边界;P35S:花椰菜花叶病毒35S`启动子;T35S:花椰菜花叶病毒35S终止子;TN0S:胭脂碱合成酶终止子;GFP:绿色荧光报告基因;NPT I1:新霉素磷酸转移酶II基因的编码序列;KmR:卡那霉素抗性基因;pBR322 ori:pBR322 复制起点;pBR322 bom:pBR322 动员;pVSlrep:pVSl 复制子;pVSlsta:pVSl 稳定元件。
[0159]图6马铃薯-草盲蝽植物体内(in planta)测定设置。白色箭头表示昆虫损害。
[0160]图7到11豆荚草盲蝽新颖靶-在从0.4到0.025 μ g/ μ I范围内的纯化的合成dsRNA浓度下的剂量反应曲线(在该图中,单位“yg/μ I”未示出)。使用GFPdsRNA和millQ水作为阴性对照。靶的dsRNA是使用如实例部分1.1中所描述的引物产生。
[0161]图12在从0.05到0.001 μ g/ μ I范围内的dsRNA浓度下的Lh594剂量反应曲线。使用GFP dsRNA和millQ水作为阴性对照。
[0162]图13A在不存在tRNA的情况下在豆荚草盲蝽生物测定中的dsRNA活性:Lh594(5y g/μ I);阳性对照:Lh423 (5 μ g/μ I);阴性对照=GFPdsRNA (5 μ g/μ I)和 mi IIQ水使用递减浓度的dsRNA(从5 μ g到0.25 μ g)的Lh594活性极限的鉴定。阴性对照:GFP dsRNA (5 μ g/μ I)和 mi IIQ 水。
[0163]图14第二次筛选靶的板LhOlO到Lh020的第二次确认测定。暗条:在第4天到第8天的死亡率;亮条:在第4天到第6天的死亡率。使用“Lygxxx”筛选代码和“Lhxxx”靶命名代码将候选克隆命名。
[0164]图15在固定的0.5 μ g/μ I下测试的草盲蝽肌钙蛋白途径靶的测定结果。
[0165]图16Α-Β来自肌钙蛋白途径的豆荚草盲蝽新颖靶-在从0.4到0.025 μ g/ μ I范围内的纯化的合成dsRNA浓度下的剂量反应曲线(在该图中,单位“ μ g/μ I”并不总是示出)。使用GFP dsRNA和millQ水作为阴性对照。[0166]图17A-D第二次筛选靶的豆荚草盲蝽新颖靶-在从0.5到0.05 μ g/ μ I范围内的纯化的合成dsRNA浓度下的剂量反应曲线。使用GFP dsRNA和millQ水作为阴性对照。[0167]图18A-B GUS转基因事件的测试和选择。在豆荚草盲蝽单盆测定中测试GUS发夹转基因系(P001)的八个独立事件并且与WT小植株相比较。所有小植株都经历相同的处理。将一日龄的豆荚草盲蝽若虫添加到每一个盆中并且检查在9天内的存活率。
[0168]图19Lh423转基因事件的测试:在豆荚草盲蝽单盆测定中测试28个独立的转基因事件(P006系)。将Lh423转基因小植株与WT小植株并且与⑶S转基因事件(P001系)相比较。将单个一日龄的豆荚草盲蝽若虫添加到每一个盆中并且检查在9天内的存活率。
[0169]图20Lh423转基因事件的测试:示出了导致> 60%的存活率的6个独立的转基因事件(P006)。将Lh423转基因小植株与WT小植株并且与⑶S转基因系(P001)相比较。将单个一日龄的豆荚草盲蝽若虫添加到每一个盆中并且检查在9天内的存活率。
[0170]图21Lh594转基因事件的测试:在豆荚草盲蝽单盆测定中测试25个独立的转基因事件(P007)。将Lh594转基因小植株与WT小植株并且与⑶S转基因事件(P001)相比较。将单个一日龄的豆荚草盲蝽若虫添加到每一个盆中并且检查在11天内的存活率。
[0171]图22Lh594转基因事件的测试:示出了导致60%的存活率的6个独立的转基因事件(P007)。将Lh594转基因小植株与WT小植株并且与⑶S转基因系(P001)相比较。将单个一日龄的豆荚草盲蝽若虫添加到每一个盆中并且检查在11天内的存活率。
[0172]图23在饲喂含有GUS发夹或Lh423发夹的转基因植物5天之后的昆虫中的Lh423mRNA水平的相对值。用扩增Lh423的引物来分析样品。使用GeNorm,用2种看家基因Lh425和Lh427使数据归一化。
[0173]图24用I μ g的dsRNA Ld594、Ld619以及Ld620处理的CPB幼虫的存活率分析。阳性对照包括基准靶Ld513和Ld049的I μ g的dsRNA。阴性对照包括millQ水和FP。
[0174]图25相比于未处理的对照(UTC),Ld594、Ld619以及Ld620 dsRNA对CPB 4龄幼虫化蛹的作用。向虫子饲喂分配在马铃薯叶盘中的I μ g的dsRNA,然后饲喂未处理的马铃薯叶(A)持续4天,然后放在蛭石上。为了评估dsRNA的作用,从蛭石中挖出死昆虫(因为Ld594 dsRNA所诱导的强烈作用,不能从蛭石中回收到蛹,并且因此,没有获得此靶dsRNA的图像)(B)。
[0175]图26CPB Ld594、619以及620 dsRNA对CPB成虫的存活率和健康的作用。在第4、6、7、8、11以及13天进行评估。对照MQ:millQ水。
[0176]图27来自N1594途径的dsRNA在褐色飞虱中的活性。在0.1 %的CHAPSO存在下测试 0.5 μ g/ μ I 的 DsRNA。阳性对照:NI537 dsRNA (0.5 μ g/ μ I);阴性对照:GFPdsRNA (0.5 μ g/ μ I)和仅饲料。
[0177]图28来自Αρ594、Αρ423、Αρ537以及Αρ560的dsRNA对豌豆蚜的活性。在5 μ g/μ I 的 tRNA 存在下测试 0.5 μ g/ μ I 的 DsRNA。阴性对照=GFPdsRNA (0.5 μ g/ μ I)。
[0178]图29马铃薯叶甲幼虫关于用dsRNA处理的人工饲料的死亡率百分比。Ld583、Ld584、Ld586以及Ld588表示靶克隆。阳性对照:Ld513 ;阴性对照=FP0
[0179]发明详细说明
[0180]本发明人已发现,通过RNAi下调昆虫害虫物种中特定靶基因的表达可以用于有效地预防和/或控制所述昆虫害虫的侵扰。使用RNAi下调昆虫害虫物种中靶基因的表达在此适用于产生对昆虫害虫的侵扰具有抗性的植物。
[0181]因此,在一个第一方面,本发明提供了对昆虫害虫物种的侵扰具有抗性的转基因植物。具体来说,在此提供了表达或能够表达至少一种干扰核糖核酸(RNA)的转基因植物,如在此其他地方所描述,该干扰核糖核酸在被昆虫害虫物种摄入后起到下调所述害虫内靶基因的表达的作用。该干扰RNA可以是如下文所披露的那些中的任一个。优选地,该干扰RNA包含至少一个沉默元件或由其组成,并且所述沉默元件是包含退火的互补链的一个双链RNA区域,其中一条链(有义链)包含与靶基因内的靶核苷酸序列至少部分地互补的核苷酸序列。下调害虫靶基因可以用于破坏害虫中的必需生物过程或功能,其中‘必需’是指以下事实:该过程或功能是引发或维持害虫侵扰所必需的。
[0182]如在此所使用的,术语‘植物’可以包括植物的任何生殖或繁殖材料。提到植物还可以包括植物细胞、植物原生质体、植物组织培养物、植物愈伤组织、植物丛以及在植物或植物的部分中完好的植物细胞(如胚、花粉、胚珠、种子、叶、花、枝、果实、核、穗、穗轴、外壳、茎、根、根尖等)。在此描述的任一种转基因植物的后代、变体以及突变体都在本发明的范围内。还包括由所述转基因植物中的任一种产生的种子。
[0183]如在此所使用的,术语“控制”害虫侵扰是指对害虫产生的用来限制和/或减少害虫生物体的数目和/或由害虫引起的损害的任何作用。因此,优选的靶基因是控制或调控昆虫害虫内的一种或多种必需生物功能的必需基因,这些生物功能为例如细胞分裂、生殖、能量代谢、消化、神经功能等。通过RNAi技术下调这些必需基因可以导致昆虫的死亡,或者以另外的方式显著地延缓生长和发育或者削弱害虫在环境中定殖或侵扰宿主生物体的能力。
[0184]诸位发明人现已鉴定出属于草盲蝽属、马铃薯叶甲属、褐飞虱属以及豌豆蚜属的昆虫害虫物种的优良靶基因,这些靶被设想单独地或组合用作RNAi介导性控制农艺学上重要作物的昆虫侵扰的一种有效手段。这些新鉴定的靶基因的直向同源物可以用于其他昆虫物种中以控制相应的相关作物的害虫侵扰。
[0185]更具体来说,诸位发明人在`此描述了编码肌钙蛋白/肌丝复合物的蛋白质的基因形成了供通过RNA抑制机构进行抑制`的极佳靶基因。这些靶基因中的一种编码昆虫肌钙蛋白I蛋白(wings up A),它是果蝇CG7178蛋白的一种直向同源物。此蛋白质涉及于肌肉收缩中并且属于一种生理途径,该生理途径并未针对通过RNA抑制进行(昆虫)害虫控制而加以完全地探索。此外,因为这种蛋白质复合物具有动物特异性,并无已知的植物基因同源物或直向同源物,所以在植物中表达革G dsRNA时,降低了异型株(off-type plant)表型的风险。另外,在果蝇中,肌钙蛋白I被描述为一种单倍不足的基因,在杂合子状态中呈现一种突变体表型。这类基因对mRNA表达水平的降低特别敏感并且因此可以被视为理想的RNAi 靶。
[0186]以下列出了这种肌钙蛋白/肌丝复合物中其他感兴趣的靶基因并且针对在豆荚草盲蝽和其他昆虫害虫物种中的RNAi控制进行进一步研究:
[0187]
注释ID I细胞学IDm标识符
支持蛋白CG7107
【权利要求】
1.一种转基因植物、或用于转基因植物的生殖或繁殖材料、或培养的转基因植物细胞,它表达或能够表达至少一种干扰核糖核酸(RNA),该干扰核糖核酸在被一种昆虫害虫物种摄入后起到下调所述害虫内的一种靶基因的表达的作用,其中该RNA包含至少一个沉默元件,其中该沉默元件是包含退火的互补链的一个双链RNA区域,其中一条链包含与该靶基因内的一个靶核苷酸序列至少部分地互补的一个核苷酸序列或由其组成,并且其中该靶基因(i)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQID NO 1、174、404、180、188、2、175、.181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185,234到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389或其互补序列中的任一个的一种核苷酸序列,或具有一种核苷酸序列以使得当最佳地比对并且比较两种序列时,该核苷酸序列与SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179,210到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237、302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中的任一个至少75%—致,或(ii)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQID NO .1、.174、.404、.180、.188、.2、.175、.181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47到50、13、14、51到54、15、204、16、205、55到58,322到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134,222到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、.155.250到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、.164.266到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、.200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中任一个的一个至少21个连续核苷酸的片段的一种核苷酸序列,或具有一种核苷酸序列以使得当将包含所述片段的所述基因与SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、.181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、.140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、.205、55到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、.26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、.137、 .185,234到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、.154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、.162、164、266到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到.281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389中的任一个最佳地比对并且比较时,所述核苷酸序列与SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、.175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31到 34、139、5、6、35 到.38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、.16、205、.55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、.26,75到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、.122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、.146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、.184、.137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到.249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、.163、162、164、266到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、.173、278到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、.389或其互补序列中的任一个至少75%—致,或(iii)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、.181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、.140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47到50、13、14、51到54、15、204、16、.205、55到.58,322到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、.26、75 到.78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、.178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、.134,222到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、.185、.234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、.155.250到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、.164.266到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、.200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中任一个的一个至少21个连续核苷酸的片段的一种核苷酸序列,并且其中当将所述片段与 SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30、282 到 285、294 至lj.297,310到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 .46、141、.11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、.19、.20,63到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、.182、130、 .177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到.293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、.226到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、.238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到.257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、.270到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、.202、.187,203,306到309、318到321、386、387、388、389中的任一个中的相应片段最佳地比对并且比较时,所述片段的所述核苷酸序列与SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、.27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、.39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 .58,322到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 .78、.143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、.178、.131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、.222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、.234到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246到 249、154、155、.250 到 253、156、157、254到257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、.266到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、.201、.314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中的任一个的所述相应片段至少75%—致,或(iv)为一种基因的一种昆虫害虫直向同源物,该基因具有包含SEQ ID NO 1、174、404、.180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、.139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 .54、.15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、.23、.24,71到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 .289、.298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、.133,218到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到.233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到.245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、.160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、.274到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到.321、386、387、388、389或其互补序列中的任一个的一种核苷酸序列,其中两种直向同源基因在序列方面的相似程度使得当最佳地比对并且比较这两种基因时,该直向同源物所具有的序列与 SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27到30、282 到 285、294到 297、.310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、.141、11、.12,47到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、.20、.63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183,206到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238到 241、150、151、242到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203,306到309、318到321、386、387、388、389所表示的序列中的任一个至少75%—致,或(v)选自以下基因的组,这些基因具有编码一种氨基酸序列的一种核苷酸序列,当最佳地比对并且比较两种氨基酸序列时,该氨基酸序列与由SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31到 34、139、5、6、35 到38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26,75到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389中的任一个所编码的氨基酸序列至少85%—致。
2.如权利要求1所述的转基因植物、用于转基因植物的生殖或繁殖材料、或培养的转基因植物细胞,其中该RNA的沉默元件包含与该靶基因内的一个靶核苷酸序列互补或至少部分地互补的一个至少21个连续核苷酸的序列或由其组成。
3.如权利要求1或权利要求2所述的转基因植物、用于转基因植物的生殖或繁殖材料、或培养的转基因植物细胞,其中该RNA包含至少两个沉默元件,其中每一个沉默元件包含与一种祀基因内的一个祀核苷酸序列至少部分地互补的一个核苷酸序列或由其组成。
4. 如权利要求3所述的转基因植物、用于转基因植物的生殖或繁殖材料、或培养的转基因植物细胞,其中这些沉默元件各自包含与一个不同的靶核苷酸序列互补的一个不同的核苷酸序列或由其组成。
5. 如权利要求4所述的转基因植物、用于转基因植物的生殖或繁殖材料、或培养的转基因植物细胞,其中这些不同的靶核苷酸序列来源于单一靶基因或不同的靶基因。
6.如权利要求5所述的转基因植物、用于转基因植物的生殖或繁殖材料、或培养的转基因植物细胞,其中这些不同的靶基因来源于相同的昆虫害虫物种或来源于不同的昆虫害虫物种。
7.如权利要求1到6中任一项所述的转基因植物、用于转基因植物的生殖或繁殖材料、或培养的转基因植物细胞,其中该昆虫害虫物种选自属于以下目的昆虫物种:鞘翅目、半翅目、鳞翅目、双翅目、网翅目、直翅目以及蚤目。
8.如权利要求7所述的转基因植物、用于转基因植物的生殖或繁殖材料、或培养的转基因植物细胞,其中该昆虫害虫物种选自下组,该组由以下各项组成:马铃薯叶甲属(例如马铃薯叶甲(科罗拉多马铃薯甲虫)、伪马铃薯叶甲(伪马铃薯甲虫)或胡颓子叶茄叶甲(德克萨斯伪马铃薯甲虫));褐飞虱属(例如褐飞虱(褐色飞虱));草盲蝽属(例如牧草盲蝽(无泽盲蝽)或豆荚草盲蝽(西方无泽盲蝽));瘤蚜属(例如桃蚜(绿桃蚜));根萤叶甲属(例如西方玉米根萤叶甲(西方玉米根虫)、巴氏根萤叶甲(北方玉米根虫)、黄瓜十一星叶甲食根亚种(南方玉米根虫)、墨西哥玉米根萤叶甲(墨西哥玉米根虫))。
9.如权利要求1到8中任一项所述的转基因植物、用于转基因植物的生殖或繁殖材料、或培养的转基因植物细胞,其中该靶基因编码选自下组的一种昆虫蛋白质,该组包括(i)来自肌钙蛋白/肌丝复合物的一种蛋白质,该复合物选自下组,该组包括肌钙蛋白1(例如CG7178 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、支持蛋白(例如CG7107 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、原肌球蛋白1蛋白(例如CG4898 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、原肌球蛋白2蛋白(例如CG4843 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、肌球蛋白重链(例如CG17927 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、肌球蛋白轻链细胞质蛋白(例如CG3201 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、鱼翅瓜蛋白(例如CG3595 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、拉链蛋白(例如CG15792 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、肌钙蛋白C(例如CG2981、CG7930、CG9073、CG6514、CG12408、CG9073、CG7930、CG2981、CG12408 或 CG6514 Dm 蛋白的一种昆虫直向同源物);(ii)选自下组的一种昆虫核糖体蛋白,该组包括核糖体蛋白S3A(例如CG2168 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、核糖体蛋白LP1 (例如CG4087 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、核糖体蛋白S3(例如CG6779 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、核糖体蛋白LlOAb (例如CG7283 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、核糖体蛋白S18(例如CG8900 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、核糖体蛋白L4(例如CG5502 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、核糖体蛋白S27(例如CG10423 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、核糖体蛋白L6(例如CG11522Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、核糖体蛋白S13(例如CG13389 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)以及核糖体蛋白L12(例如CG3195 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、核糖体蛋白L26(例如CG6846 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、核糖体蛋白L21 (例如CG12775 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、核糖体蛋白S12(例如CG11271 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、核糖体蛋白S28b (例如CG2998 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、核糖体蛋白L13 (例如CG4651 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、核糖体蛋白L10 (例如CG17521 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、核糖体蛋白L5 (例如CG17489 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、核糖体蛋白S15Aa (例如CG2033 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、核糖体蛋白L19 (例如CG2746Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、核糖体蛋白L27 (例如CG4759 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)线粒体细胞色素c氧化酶亚单位II蛋白(例如CG34069 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物);(iv)ATP合酶-y链(例如CG7610 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物);(v)泛素-5E (例如CG32744 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物);(vi)蛋白酶体β型亚单位(例如CG17331 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物);(vii)作为CG13704 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物的蛋白质;以及(viii)Rpnl2蛋白(例如CG4157 Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)。
10.如权利要求9所述的转基因植物、用于转基因植物的生殖或繁殖材料、或培养的转基因植物细胞,其中与暴露于一种靶向非必需基因的干扰RNA或一种不下调该害虫物种内的任何基因的干扰RNA的害虫物种相比, 该害虫靶基因表达的下调引起该害虫的生长、发育、生殖或存活下降。
11.如权利要求1到10中任一项所述的转基因植物、用于转基因植物的生殖或繁殖材料、或培养的转基因植物细胞,其中该转基因植物、由其得到的材料或植物细胞另外地包含一种异源基因。
12.如权利要求11所述的转基因植物、用于转基因植物的生殖或繁殖材料、或培养的转基因植物细胞,其中该异源基因编码对一种植物害虫物种有毒的一种蛋白质。
13.如权利要求12所述的转基因植物、用于转基因植物的生殖或繁殖材料、或培养的转基因植物细胞,其中该蛋白质选自下组,该组由以下各项组成:一种马铃薯块茎特异蛋白、一种苏云金芽孢杆菌杀虫蛋白、一种致病杆菌杀虫蛋白、一种光杆状菌杀虫蛋白、一种侧孢芽孢杆菌杀虫蛋白以及一种球形芽孢杆菌杀虫蛋白。
14.如权利要求13所述的转基因植物、用于转基因植物的生殖或繁殖材料、或培养的转基因植物细胞,其中所述苏云金芽孢杆菌杀虫蛋白选自下组,该组由以下各项组成:Cryl, Cry3、TIC851、CryET170、Cry22、TIC901、TIC201、TIC407、TIC417、二元杀虫蛋白CryET80和CryET76、二元杀虫蛋白TIC100和TIC101、杀虫蛋白ET29或ET37与杀虫蛋白TIC810或TIC812的组合、以及二元杀虫蛋白PS149B1。
15.如权利要求11所述的转基因植物、用于转基因植物的生殖或繁殖材料、或培养的转基因植物细胞,其中该异源基因编码一种赋予除草剂耐受性的蛋白质。
16.如权利要求15所述的转基因植物、用于转基因植物的生殖或繁殖材料、或培养的转基因植物细胞,其中该蛋白质选自一种草甘膦不敏感型式的5-烯醇丙酮酰莽草酸-3-磷酸合成酶(EPSPS);能够分解麦草畏的一种分解代谢酶,如麦草畏单加氧酶;或能够使草铵膦分解代谢的一种草丁膦乙酰转移酶基因。
17.由如权利要求1到16``中任一项所述的转基因植物产生的种子。
18.一种用于产生对昆虫害虫物种的侵扰具有抗性的转基因植物的方法,包括:(a)用包含编码一种干扰核糖核酸(RNA)的一种多核苷酸序列的一种DNA构建体转化植物细胞,该干扰核糖核酸在被一种昆虫害虫物种摄入后起到下调所述昆虫害虫物种中的一种靶基因的表达的作用,其中该RNA包含至少一个沉默元件,其中该沉默元件是包含退火的互补链的一个双链RNA区域,其中一条链包含与该靶基因内的一个靶核苷酸序列至少部分地互补的一个核苷酸序列或由其组成,并且其中该靶基因(i)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、`181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、`140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、`75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、`144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、`125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、`185,234到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、`154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、.162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到.281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389或其互补序列中的任一个的一种核苷酸序列,或具有一种核苷酸序列以使得当最佳地比对并且比较两种序列时,该核苷酸序列与SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到.325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到78、143、.121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、.179,210到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134222 到.225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237、.302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到.253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到.269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中的任一个至少75%—致,或(ii)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、.181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、.140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47到50、13、14、51到54、15、204、16、205、55到.58,322到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到.78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134,222到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、.155,250到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、.164,266到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 .281、.200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中任一个的一个至少21个连续核苷酸的片段的一种核苷酸序列,或具有一种核苷酸序列以使得当将包含所述片段的所述基因与SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、.181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、.140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、.75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、.144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、.125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、.185,234到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 .249、.154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、.162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到.281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389中的任一个最佳地比对并且比较时,所述核苷酸序列与SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、
19.如权利要求18所述的方法,其中该转基因植物是如权利要求1到16中任一项所定义的。
20.如权利要求18或权利要求19所述的方法,其中该方法另外地包括以下步骤:从该转化的植物产生一个或多个子代并且测试该后代对该昆虫害虫的抗性。
21.一种用于产生对昆虫害虫物种的侵扰具有抗性的转基因植物的方法,包括:(i)使通过如权利要求18或权利要求19所述的方法获得的一种转基因植物与一种第二植物杂交,(ii)选择对所述害虫具有抗性的后代。
22.如权利要求21所述的方法,另外包括以下步骤:使对一种昆虫害虫物种的侵扰具有抗性的后代植物与该第二植物回交,并且进一步选择对所述害虫具有抗性的后代。
23.—种产生对昆虫害虫物种的侵扰具有抗性的转基因植物的方法,包括:(i)使通过如权利要求18或权利要求19所述的方法获得的一种转基因植物与缺乏对昆虫侵扰的抗性的一种第二植物有性杂交,从而产生多株后代植物;(ii)选择对所述昆虫害虫物种具有抗性的一种第一后代植物;(iii)使所述第一后代植物自交,从而产生多株第二后代植物;(iv)使所述后代重复自交1、2、3、4、或5代以上;并且(v)从这些后代植物的任一个中选择对一种昆虫害虫物种的侵扰具有抗性的一种植物。
24.如权利要求21到23中任一项所述的方法,其中该抗昆虫的后代是通过检测一种编码干扰核糖核酸(RNA)的多核苷酸序列或一种干扰RNA的存在而被鉴定的,其中该干扰RNA在被一种昆虫害虫物种摄入后起到下调所述昆虫害虫物种中的一种靶基因的表达的作用,其中该靶基因(i)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、.181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、.140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、.16、205、55到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、.25、26、.75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、.122、.144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、.146、.125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、.184、137、.185,234到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、.246 到 249、.154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、.163、
25.如权利要求21到24中任一项所述的方法,其中该第二植物另外地包含一种异源基因。
26.如权利要求25所述的方法,其中该异源基因编码对一种植物害虫物种有毒的一种蛋白质。
27.如权利要求26所述的方法,其中该蛋白质选自下组,该组由以下各项组成:一种马铃薯块茎特异蛋白、一种苏云金芽孢杆菌杀虫蛋白、一种致病杆菌杀虫蛋白、一种光杆状菌杀虫蛋白、一种侧孢芽孢杆菌杀虫蛋白以及一种球形芽孢杆菌杀虫蛋白。
28.如权利要求27所述的方法,其中苏云金芽孢杆菌杀虫蛋白选自下组,该组由以下各项组成:Cryl、Cry3、TIC851、CryET170、Cry22、TIC901、TIC201、TIC407、TIC417、二元杀虫蛋白CryET80和CryET76、二元杀虫蛋白TIC100和TIC101、杀虫蛋白ET29或ET37与杀虫蛋白TIC810或TIC812的组合、以及二元杀虫蛋白PS149B1。
29.如权利要求25所述的方法,其中该异源基因编码一种赋予除草剂耐受性的蛋白质。
30.根据权利要求18到29中任一项所述的方法,其中对昆虫害虫的侵扰具有抗性的该植物选自棉花、马铃薯、水稻、卡诺拉、向日葵、高粱、珍珠粟、玉米、草莓、大豆、苜蓿、番茄、茄子、胡椒以及烟草。
31.一种通过如权利要求18到30中任一项所述的方法产生的转基因植物。
32.由如权利要求31所述的植物产生的种子。
33.通过使第一近交植物与第二不同近交植物杂交所产生的杂交种子,其中这些近交植物的至少之一是如权利要求31所述的转基因植物,并且其中该植物选自棉花、马铃薯、水稻、卡诺拉、向日葵、高粱、珍珠粟、玉米、草莓、大豆、苜蓿、番茄、茄子、胡椒以及烟草。
34.一种用于产生如权利要求33所述的杂交种子的方法,其中杂交包括以下步骤:(i)种植第一和第二近交植物的种子;(ii)将所述第一和第二近交植物的种子培养成开花植物;(iii)防止该第一或该第二近交植物的至少之一的自花授粉;(iv)允许该第一近交植物与该第二近交植物之间发生异花授粉;并且(v)在该第一或该第二近交植物的至少之一上收获种子,所述种子由所述异花授粉产生。
35.一种用于预防和/或控制作物植物田地中的昆虫害虫侵扰的方法,所述方法包括在所述植物中表达一种有效量的一种干扰核糖核酸(RNA),该干扰核糖核酸在被一种昆虫害虫物种摄入后起到下调所述昆虫害虫物种中的一种靶基因的表达的作用,其中该RNA包含至少一个沉默元件,其中该沉默元件是包含退火的互补链的一个双链RNA区域,其中一条链包含与该靶基因内的一个靶核苷酸序列至少部分地互补的一个核苷酸序列或由其组成,并且其中该靶基因(i)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQID NO 1、174、404、180、188、2、175、.181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、.140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、.144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、.125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、.185,234到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 .249、.154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、.162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到.281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389或其互补序列中的任一个的一种核苷酸序列,或具有一种核苷酸序列以使得当最佳地比对并且比较两种序列时,该核苷酸序列与SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到.325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、.121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、.179,210到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到.225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237、.302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到.253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到.269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中的任一个至少75%—致,或(ii)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQID NO 1、174、404、180、188、2、175、.181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、.140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47到50、13、14、51到54、15、204、16、205、55到.58,322到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到.78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、.178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、.134,222到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、.234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、.155,250到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、.164,266到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 .281、.200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中任一个的一个至少21个连续核苷酸的片段的一种核苷酸序列,或具有一种核苷酸序列以使得当将包含所述片段的所述基因与SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、.181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、.140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、.75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、.144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、.125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、.185,234到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、.154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、.162、164、266到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到.281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389中的任一个最佳地比对并且比较时,所述核苷酸序列与SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、.175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31到 34、139、5、6、35 到.38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、.55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、.26,75到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、.122、1 44、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、.146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、.137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到.249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、.163、162、164、266到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、.389或其互补序列中的任一个至少75%—致,或(iii)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、.181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、..140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47到50、13、14、51到54、15、204、16、205、55到.58,322到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到.78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、.178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、.134,222到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、.234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、.155,250到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、.164,266到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、.200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中任一个的一个至少21个连续核苷酸的片段的一种核苷酸序列,并且其中当将所述片段与 SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30、282 到 285、294 至lj.297,310到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、.11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、.20,63到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、.177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到.293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 .305、.129、138、.238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 .253、.156、.157、254 到.257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 .269、.165、.167、166、270到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 .317、.402、.186、202、.187,203,306到309、318到321、386、387、388、389中的任一个中的相应片段最佳地比对并且比较时,所述片段的所述核苷酸序列与SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、.175、.181、.189、.27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 .38、140、7、8、.39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 .54、.15、.204、.16、.205、55 到 58,322到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 .74、.25、.26、75 到 78、.143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 .301、.145、.122、.144、178、.131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 .221、.146、.125、134、.222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 .233、.128、.149、.184、.137、185、234到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246到 .249、.154、155、.250 到 253、156、157、254到257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 .265、.163、.162、164、266到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 .281、.200、201、.314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中的任一个的所述相应片段至少75%—致,或(iv)为一种基因的一种昆虫害虫直向同源物,该基因具有包含SEQ ID NO 1、174、404、.180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 .313、.401、.3、.4、.31 到 34、.139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 .50、.13、14、51 到 54、.15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 .66、.21、.22、.67 到 70、23、.24,71到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 .209,286 到 289、.298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 .217、124、.133,218到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 .229、.127、.148、136、230 到.233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 .241、.150、.151、242 到.245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 .257、.158、.159、.258 到 261、.160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 .273、.168、.170、169、274到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 .309,318 到.321、386、387、388、389或其互补序列中的任一个的一种核苷酸序列,其中两种直向同源基因在序列方面的相似程度使得当最佳地比对并且比较这两种基因时,该直向同源物所具有的序列与 SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27到30、282 到 285、294到 297、310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 .42.9、10、43 到 46、141、11、.12,47到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、.63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71到 74、25、26、75 到 .78、.143、.121、.142、.176、.182、130、177、.183,206到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 .213,290 到 293、.123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 .225、.147、.126、.135、226 到.229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 .305、.129、138、238到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 .253、.156、.157、.254到 257、.158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 .269、.165、.167、.166、270 到.273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、.186、202、187、.203,306到309、318到321、386、387、388、389所表示的序列中的任一个至少75%—致,或(v)选自以下基因的组,这些基因具有编码一种氨基酸序列的一种核苷酸序列,当最佳地比对并且比较两种氨基酸序列时,该氨基酸序列与由SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、.175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31到 34、.139、.5、6、35 到38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、.13、14、51 到 54、15、204、16、205、.55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、.24、.71 到 74、25、26,75到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、.123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、.126、.135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、.137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、.153、246 到.249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、.262 到 265、.163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、.172、173、278到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、.387、388、389中的任一个所编码的氨基酸序列至少85%—致。
36.一种选自下组的分离的多核苷酸,该组由以下各项组成:(i)包含如由SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30、282 到 .285、294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到62、19、20、63到66、21、22、67到70、23、24、71 到 74、.25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、.130、177、183、206 到 209、286 到 289、298 到 301、145、122、144、178、131、179、.210 到 213、290到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、.126、135、.226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 ..305、129、.138.238到 241、150、151、242到245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 .253、156、157、254到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、.167、166、.270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、.402、186、.202、187、203、306到309、318到321、386、387、388、389或其互补序列中的任一个所表示的一种核苷酸序列的至少21个连续核苷酸的一种多核苷酸,或(ii)包含如SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30、282 到 .285、294到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、.10、43 到 46、.141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、.18、59 到 62、.19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、.142、176、182、.130、177、183、206 到 209、286 到 289、298 到 301、145、122、144、178、131、179、.210 到 213、290到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、.126、135、.226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 .305、129、.138.238到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 .253、156、157、.254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、.165、167、.166,270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 .317、402、.186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中的任一个中所表示的一种核苷酸序列的至少21个连续核苷酸的一种多核苷酸,由此使得当最佳地比对并且比较两种序列时,所述多核苷酸与SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179,210到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237、302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中的任一个至少75%—致,或(iii)包含如 SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30、282 到 285、294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到62、19、20、63到66、21、22、67到70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213、290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135,226到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157,254到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中的任一个中所表不的一种核苷酸序列的至少21个连续核苷酸的片段的一种多核苷酸,并且其中所述片段或所述互补序列具有一种核苷酸序列,当将所述片段与SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67到 70、23、24、71到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153,246到 249、154、155、250到253、156、157、254到257、158、159、258 到 261、160、161、262到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173,278到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389中的任一个中的相应片段最佳地比对并且比较时,所述核苷酸序列与SEQ IDNO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、.14,51到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209、286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234到237、302到305、129、138、238 到 241、150、151、242到 245、152、153、246到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到321、386、387、388、389或其互补序列中的任一个的所述相应片段至少75%—致,或(iv)编码一种氨基酸序列的一种多核苷酸,当最佳地比对并且比较两种氨基酸序列时,该氨基酸序列与 SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30、282 到 285、294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到62、19、20、63到66、21、22、67到70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209、286 到 289、298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213、290到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138,238到 241、150、151、242到245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306到309、318到321、386、387、388、389中的任一个所编码的氨基酸序列至少85%—致,并且其中所述多核苷酸不长于10000个核苷酸。
37.如权利要求36所述的多核苷酸,该多核苷酸被包含在一种DNA构建体中。
38.如权利要求37所述的DNA构建体,该DNA构建体是一种表达构建体,其中该多核苷酸序列被可操作地连接到至少一个能够驱动该多核苷酸序列的表达的调控序列。
39.一种宿主细胞,包含如权利要求36所述的多核苷酸或如权利要求37或38所述的DNA构建体。
40.如权利要求39所述的宿主细胞,其中该宿主细胞是一种原核细胞或一种真核细胞。
41.如权利要求40所述的宿主细胞,其中该宿主细胞是一种细菌细胞或一种植物细胞。
42.如权利要求1到16中任一项所述的转基因植物,如权利要求17或权利要求32所述的种子,如权利要求18到30或34到35中任一项所述的方法,如权利要求33所述的杂交种子,如权利要求36或权利要求37所述的分离的多核苷酸,如权利要求38所述的DNA构建体,或如权利要求39到41中任一项所述的宿主细胞,其中该靶基因(i)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27到30、282到285、294到297、310到313、401、121、142、176、182、130、177、183、206到.209,286到 289、298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213、290 到 293、123、132、214到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、.136,230到233或其互补序列中的任一个的一种核苷酸序列,或具有一种核苷酸序列以使得当最佳地比对并且比较两种序列时,该核苷酸序列与SEQ ID NO 1、174、404、180、188、.2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、121、142、176、182、130、.177、183、206到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到.293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226到229、127、148、136、230到233或其互补序列中的任一个至少75%,优选至少80%、85%、.90%、95%、98% 或 99%—致,或 (ii)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQID NO 1、174、404、180、188、2、175、.181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、121、142、176、182、130、177、183、.206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、.132.214到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、.127、148、136、230到233或其互补序列中任一个的一个至少21个连续核苷酸的片段的一种核苷酸序列,或具有一种核苷酸序列以使得当将包含所述片段的所述基因与SEQ ID NO.1、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、121、.142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、.210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、.147、126、135、226到229、127、148、136、230到233中的任一个最佳地比对并且比较时,所述核苷酸序列与 SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30、282 到 285、294到 297,310 到 313、401、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、.145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到.221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233 或其互补序列中的任一个至少75 %,优选至少80 %、85 %、90 %、95 %、98 %或99 % —致,或(iii)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQID NO 1、174、404、180、188、2、175、.181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、121、142、176、182、130、177、183、.206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、.132.214到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、.127、148、136、230到233或其互补序列中任一个的一个至少21个连续核苷酸的片段的一种核苷酸序列,并且其中当将所述片段与SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209、.286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到.217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、.230到233中的任一个中的相应片段最佳地比对并且比较时,所述片段的所述核苷酸序列与 SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30、282 到 285、294 到 297、310 到.313、401、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、.178、131、179、210到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、.134,222到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233 或其互补序列中的任一个的所述相应片段至少75 %,优选至少80 %、85 %、90 %、95 %、98 %或99 % —致,或(iv)为一种基因的一种昆虫害虫直向同源物,该基因具有包含SEQID NO 1、174、404、.180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、121、142、.176、.182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到.213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、.147、.126,135,226到229、127、148、136、230到233或其互补序列中的任一个的一种核苷酸序列,其中两种直向同源基因在序列方面的相似程度使得当最佳地比对并且比较这两种基因时,该直向同源物所具有的序列与 SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30、.282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到.289,298到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、.214 到 217、.124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、.136、230到 233所表示的序列中的任一个至少75%,优选至少80%、85%、90%、95%、98%或99% —致,或(v)选自以下基因的组,这些基因具有编码一种氨基酸序列的一种核苷酸序列,当最佳地比对并且比较两种氨基酸序列时,该氨基酸序列与由SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、.175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、121、142、176、182、130、.177、.183,206到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 .213,290 到 293、.123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到.229、127、148、136、230到233中的任一个所编码的氨基酸序列至少85%,优选至少90%、.95%、98%或 99%—致。
43.如权利要求1到16中任一项所述的转基因植物,如权利要求17或权利要求32所述的种子,如权利要求18到30或34到35中任一项所述的方法,如权利要求33所述的杂交种子,如权利要求36或权利要求37所述的分离的多核苷酸,如权利要求38所述的DNA构建体,或如权利要求39到41中任一项所述的宿主细胞,其中该靶基因(i)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQID NO 3、4、31到34、139、5、6、35到.38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51到 54、15、204、.16、205、.55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、150、151、242 到 245、.152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、.160、.161,262到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273 或其互补序列中的任一个的一种核苷酸序列,或具有一种核苷酸序列以使得当最佳地比对并且比较两种序列时,该核苷酸序列与 SEQ ID NO 3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、.43 至lj.46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、.18、59 到.62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、.155、250到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、.266 到.269、165、167、166、270到273或其互补序列中的任一个至少75%,优选至少80%、85%、.90%、95%、98% 或 99%—致,或(ii)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQID NO 3、4、31到34、139、5、6、35到.38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、.204、16、205、.55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、150、151、242 到 245、.152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、.160、.161.262到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273 或其互补序列中任一个的一个至少21个连续核苷酸的片段的一种核苷酸序列,或具有一种核苷酸序列以使得当包含所述片段的所述基因与SEQ ID NO 3、4、31到34、139、5、6、35到38、140、7、8、39到42、.9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、.17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、.154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、.162、164、266到269、165、167、166、270到273中的任一个最佳地比对并且比较时,所述核苷酸序列与 SEQ ID NO 3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、.11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、.20、63 到 66、21、22、67 到 70、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 .253、.156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、.165、167、166、270到273或其互补序列中的任一个至少75%,优选至少80%、85%、90%、.95%、98%或 99%—致,或 (iii)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQID NO 3、4、31到34、139、5、6、35到.38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、.204、.16、.205、.55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、150、151、242 到 245、.152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、.161.262到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273 或其互补序列中任一个的一个至少21个连续核苷酸的片段的一种核苷酸序列,并且其中当将所述片段与SEQ IDNO 3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 .50、.13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、.22,67 到 70、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、.270到273中的任一个中的相应片段最佳地比对并且比较时,所述片段的所述核苷酸序列与 SEQ ID NO 3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、.12,47到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58、322 到 325、17、18、59 到 62、.19、.20、63到 66、21、22、67 到 70、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、.157,254到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、.167,166,270到273或其互补序列中的任一个的所述相应片段至少75 %,优选至少80 %、.85%、90%、95%、98% 或 99%—致,或(iv)为一种基因的一种昆虫害虫直向同源物,该基因具有包含SEQID NO 3、4、31到.34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到.54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、.150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、.159,258到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273 或其互补序列中的任一个的一种核苷酸序列,其中两种直向同源基因在序列方面的相似程度使得当最佳地比对并且比较这两种基因时,该直向同源物所具有的序列与SEQ ID NO 3、4、.31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、.13、.14、.51到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到.70、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、.159,258到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273 所表示的序列中的任一个至少75%,优选至少80%、85%、90%、95%、98%或99%—致,或(v)选自以下基因的组,这些基因具有编码一种氨基酸序列的一种核苷酸序列,当最佳地比对并且比较两种氨基酸序列时,该氨基酸序列与由SEQ ID NO 3、4、31到34、139、5、6、.35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、.16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、150、151、242到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、.160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273 中的任一个所编码的氨基酸序列至少85 %,优选至少90 %、95 %、98 %或99 % —致。
44.如权利要求1到16中任一项所述的转基因植物,如权利要求17或权利要求32所述的种子,如权利要求18到30或34到35中任一项所述的方法,如权利要求33所述的杂交种子,如权利要求36或权利要求37所述的分离的多核苷酸,如权利要求38所述的DNA构建体,或如权利要求39到41中任一项所述的宿主细胞,其中该靶基因(i)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQID NO 1、174、404、180、188、2、175、.181、189、27到30,282到285,294到297,310到313,401或其互补序列中的任一个的一种核苷酸序列,或具有一种核苷酸序列以使得当最佳地比对并且比较两种序列时,该核苷酸序列与 SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30、282 到 285、294 到 297、.310到313、401或其互补序列中的任一个至少75%,优选至少80%、85%、90%、95%、98%或99%—致,或(ii)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQID NO 1、174、404、180、188、2、175、.181,189,27到30、282到285、294到297、310到313、401或其互补序列中任一个的一个至少.21个连续核苷酸的片段的一种核苷酸序列,或具有一种核苷酸序列以使得当将包含所述片段的所述基因与 SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30、282 到 285、294到297、310到313、401中的任一个最佳地比对并且比较时,所述核苷酸序列与SEQ ID NO.1、174、404、180、188、2、175、181、189、27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313,401 或其互补序列中的任一个至少75 %,优选至少80 %、85 %、90 %、95 %、98 %或99 % —致,或(iii)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQID NO 1、174、404、180、188、2、175、.181、189、27 到30,282到285,294到297,310到313,401或其互补序列中任一个的一个至少21个连续核苷酸的片段的一种核苷酸序列,并且其中当将所述片段与SEQ ID NO 1、174、.404、180、188、2、175、181、189、27到30、282到285、294到297、310到313、401中的任一个中的相应片段最佳地比对并且比较时,所述片段的所述核苷酸序列与SEQ ID NO 1、174、404、.180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313,401 或其互补序列中的任一个的所述相应片段至少75 %,优选至少80 %、85 %、90 %、95 %、98 %或99 % —致,或(iv)为一种基因的一种昆虫害虫直向同源物,该基因具有包含SEQID NO 1、174、404、.180、188、2、175、181、189、27到30、282到285、294到297、310到313、401或其互补序列中的任一个的一种核苷酸序列,其中两种直向同源基因在序列方面的相似程度使得当最佳地比对并且比较这两种基因时,该直向同源物所具有的序列与SEQ ID NO 1、174、404、180、188、.2、175、181、189、27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313,401 所表示的序列中的任一个至少 75%,优选至少 80%、85%、90%、95%、98%或 99%—致,或 (v)选自以下基因的组,这些基因具有编码一种氨基酸序列的一种核苷酸序列,当最佳地比对并且比较两种氨基酸序列时,该氨基酸序列与由SEQ ID NO 1、174、404、180、188、2、.175、181、189、27到30,282到285,294到297,310到313,401中的任一个所编码的氨基酸序列至少85%,优选至少90%、95%、98%或99%—致。
【文档编号】C12N15/82GK103687951SQ201280035328
【公开日】2014年3月26日 申请日期:2012年5月2日 优先权日:2011年7月18日
【发明者】米里昂·贝吉恩, 蒂埃里·博盖尔特, 帕斯卡莱·费尔德曼, 罗曼·雷马克斯 申请人:德福根有限公司
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