一类海洋真菌来源的Berkeleyones化合物及其制备方法和应用的制作方法
【专利摘要】本发明属于药物化合物【技术领域】，具体涉及一种海洋真菌来源的Berkeleyones化合物及其制备方法和应用。所述Berkeleyones化合物的结构如式（I）所示，该新化合物具有抑制癌细胞增殖的作用，可用于制备抗癌药物。本发明所述Berkeleyones化合物是从一种海洋真菌菌核青霉Penicilliumsclerotiorum.SJ0167中分离得到，海洋微生物种类繁多，数量庞大，从微生物提取的方法简单，步骤简便，使得Berkeleyones化合物来源丰富，成本低廉；对癌细胞抑制活性高，应用前景广阔。
【专利说明】—类海洋真菌来源的Berkeleyones化合物及其制备方法
和应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于药物化合物【技术领域】,具体涉及一类海洋真菌来源的Berkeleyones化合物及其制备方法和应用。
【背景技术】
[0002]红树林是热带、亚热带海湾、河口泥滩上特有的常绿灌木和小乔木群落，具有呼吸根或支柱根，一般分布于高潮线与低潮线之间的潮间带。在中国，红树林主要分布在海南岛、广西、广东和福建。作为海洋真菌中的第二大类群，红树林真菌由于生长条件独特,活性代谢产物非常丰富，在海洋资源开发方面有着重要的意义。目前科学家已从其里面的各种内生真菌代谢产物中分离出很多结构新颖、有显著活性的化合物，许多已进入临床试验阶段。
[0003]Berkeleyones化合物最初来源于从伯克利的矿井湖分离的青霉菌,这种菌株在恶劣的环境下依然可以存活，其代谢产物很可能有活性物质，因此研究人员进行了深入研究并发现了新结构的Berkeleyones化合物，并认为这类化合物在真菌体内发挥着重要作用(Donald B.Stierle, etal.0rg.Lett., 2004,6,1049-1052)。目前这类结构的化合物已报道的只有 15 个(Donald B.Stierle, etal.J.Nat.Prod., 2007，70，1820-1823; Donald Β.Stierle, etal.J.Nat.Prod., 2011，74，2273-2277; MotooIidaj etal.0rg.Lett., 2008，10，845-848; Yi Zhang, etal.J.Nat.Prod., 2012，75， 1888-1895)。
[0004]癌症是严重威胁人类生命的常见病和多发病。研发高效、低毒、特异性强的新型抗癌药物是当今抗肿瘤药物研究的重要方向。海洋天然产物作为药物先导化合物的重要来源之一，对新型药物的研发有着重要的作用。
【发明内容】
[0005]本发明的目的在于提供一类新的海洋真菌来源的Berkeleyones化合物。所述BerkeIeyones化合物是从一种南海红树林内生真菌菌核青霉ciIliuni sclerotiorum.SJ 0167中分离得到的，该化合物对乳腺癌细胞(MDA-MB-435)、肝癌细胞(HepG2)、结肠癌细胞(HCT-116)和肺腺癌细胞(A549)均表现出较好的抗癌活性，可应用于制备抗癌药物。
[0006]本发明的另一个目的是提供上述Berkeleyones化合物的制备方法。
[0007]本发明还有一个目的是提供上述Berkeleyones化合物的应用。
[0008]本发明的上述目的通过如下技术方案予以实现:
一类Berkeleyones化合物,其结构式如式(I)所示:
【权利要求】
1.一种Berkeleyones化合物,其特征在于,其结构式如式(I)所示:
2.权利要求1所述Berkeleyones化合物的制备方法,其特征在于,包括如下步骤: 51.将海洋真菌菌核青霉scyeroiiorttT?.SJ 0167菌株接入种子培养基，摇床培养，得到种子培养液； 52.将种子培养液接入发酵培养基中，静置培养得发酵物； 53.将发酵物用甲醇浸泡提取，甲醇提取液浓缩后经乙酸乙酯萃取、浓缩，得到浸膏，浸膏再经层析分离，得到式(I)所示的化合物I和化合物2 ； 所述菌核青霉sclerotiorum.SJ 0167菌株已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)保藏，保藏日期是2013年12月23日，保藏号是CGMCCNO: 8628。
3.根据权利要求2所述Berkeleyones化合物的制备方法,其特征在于,步骤SI所述种子培养基的组分为:葡萄糖18~23g，蛋白胨4~5g，酵母膏I~2g，海盐55~65g，水1.5~2L。
4.根据权利要求2所述Berkeleyones化合物的制备方法,其特征在于,步骤SI所述摇床培养是室温下，摇床转速10(Tl50rpm，培养时间为5~7天。
5.根据权利要求2所述Berkeleyones化合物的制备方法,其特征在于,步骤S2所述发酵培养基的组分为:大米5(T70g，海盐1.5~2g，水5(T70mL。
6.根据权利要求2所述Berkeleyones化合物的制备方法,其特征在于,步骤S2所述静置培养的时间为广2月，静置培养的温度为室温。
7.根据权利要求2所述Berkeleyones化合物的制备方法,其特征在于,步骤S3所述甲醇的用量为与发酵物等体积；乙酸乙酯的用量为甲醇用量的1/3 ;所述浸膏用硅胶柱层析分离，硅胶柱进行层析分离时分别用10:0、9:1、8:2、7:3、6:4、5:5、4:6、3:7、2:8、1:9和O:10的石油醚-乙酸乙酯梯度淋洗。
8.根据权利要求7所述Berkeleyones化合物的制备方法,其特征在于,将7:3、6:4及5:5的石油醚-乙酸乙酯洗脱部分合并,经过葡聚糖凝胶Sephadex LH-20层析,用体积比为2:1:1的石油醚-二氯甲烷-甲醇为洗脱剂进一步洗脱，再经过HPLC，用体积比为6:4的甲醇-水为洗脱剂纯化，即得式(I)所示的化合物I和化合物2。
9.权利要求1所述Berkeleyones化合物在制备抗癌药物中的应用。
10.根据权利要求9所述Berkeleyones化合物在制备抗癌药物中的应用,其特征在于，所述抗癌包 括抗乳腺癌、抗肝癌、抗结肠癌或抗肺腺癌。
【文档编号】C12R1/80GK103910746SQ201410072112
【公开日】2014年7月9日 申请日期:2014年2月28日 优先权日:2014年2月28日
【发明者】刘岚, 杨鑫, 李静, 林永成, 岑颖洲, 陆勇军, 何磊, 黎孟枫, 朱勋, 何建国 申请人:中山大学