用于检测子宫内膜癌的dna探针、基因芯片及其应用的制作方法
【专利摘要】本发明属于生物【技术领域】，公开了一种检测子宫内膜癌的DNA探针。本发明所述检测子宫内膜癌的DNA探针具有序列表SEQ ID No.1至SEQ ID No.26所示的核苷酸序列，其检测子宫内膜癌特异性强，灵敏度高。本发明还提供包含所述DNA探针的基因芯片。采用本发明所述基因芯片可实现对可能患子宫内膜癌的样品的高通量、自动化及快速检测，特异性强，可保证检测结果的精确性，具有广泛的应用前景。
【专利说明】用于检测子宫内膜癌的DNA探针、基因芯片及其应用
【技术领域】
[0001]本发明属于生物【技术领域】，具体涉及用于检测子宫内膜癌的DNA探针、基因芯片 及其应用。
【背景技术】
[0002] 子宫内膜癌，又称为子宫体癌，是指原发于子宫内膜的一组上皮性恶性肿瘤，多 数起源于内膜腺体，称子宫内膜腺癌或子宫内膜样腺癌，是女性生殖道最常见的三大恶性 肿瘤之一，占女性全身恶性肿瘤7%，占女性生殖道恶性肿瘤的20%?30%，多见于老年 妇女。近年来发病率在世界范围内有上升趋势，仅次于子宫颈癌，而5年生存率却逐年下 降。子宫内膜癌主要是根据病史、临床检查、病理检查及各种辅助检查结果确定诊断及临床 分期，现今主要检测方法包括B超检查、诊断性刮宫、宫腔镜检查和淋巴造影，检出率不高， 而且容易给病人造成痛苦。目前，子宫内膜癌尚没有有效早期诊断与预后指标。
[0003] 基因芯片（GeneChip)是将大量的寡核苷酸分子固定于固相载体上形成DNA微点 阵，借助核苷酸分子杂交配对的特性对DNA样品的序列信息进行高效解读和分析。
[0004]基因芯片起源于20世纪80年代，近年来得到了迅猛的发展，但主要是应用于医药 和研究领域，应用于子宫内膜癌的早期检测在我国尚属首次，这将会极大促进子宫内膜癌 早期诊断的发展。
【发明内容】
[0005]本发明提供了用于检测子宫内膜癌的DNA探针、基因芯片及其应用，应用该探针 和基因芯片检测子宫内膜癌特异性好、灵敏度高、准确率高。
[0006] 本发明的用于检测子宫内膜癌的DNA探针包括27个基因片段，参见序列表中SEQ ID No. 1至SEQ ID No. 27所示序列，其中第27种基因片段为质控基因。这27个基因片段 是针对子宫内膜癌的27个指标而设计的，利用27个基因片段共同来检测子宫内膜癌基因 表达谱的改变，进而对子宫内膜癌进行侦检和预后监控。表1为27个基因片段的名称以及 对应的特异性引物。
[0007] 表1 27个基因片段及其对应的特异性引物
[0008]
【权利要求】
1. 一种用于检测子宫内膜癌的DNA探针，具有SEQ ID No. 1至SEQ ID No. 26所示序 列。
2. -种用于子宫内膜癌检测的基因芯片，通过将寡核苷酸探针固定在固相载体表面 形成，其特征在于，所述寡核苷酸探针包含权利要求1所述的DNA探针。
3. 根据权利要求2所述的基因芯片，其特征在于，所述寡核苷酸探针还包括阳性对照 探针和阴性对照探针。
4. 根据权利要求3所述的基因芯片，其特征在于，所述阳性对照探针为人的GAPDH， ACTIN基因片段。
5. 根据权利要求3所述的基因芯片，其特征在于，所述阴性对照不含任何基因序列。
6. -种用于检测子宫内膜癌的试剂盒，包含权利要求1所述DNA探针。
7. 权利要求1所说的DNA探针、权利要求2-5任一所述的基因芯片、权利要求6所述的 试剂盒在制备检测子宫内膜癌的试剂中的应用。
8. -种对可能含子宫内膜癌的样品进行检测的方法，包含以下步骤： 步骤1 :提取并扩增样品的核酸序列，所述扩增将信标分子标记到扩增产物； 步骤2 :取步骤1所得扩增产物与固定于权利要求2-6任一项所述基因芯片上的探针 进行杂交； 步骤3 :根据所述信标分子采用相应的检测方法对基因芯片进行扫描分析。
9. 根据权利要求8所述的方法，其特征在于，步骤1所述扩增步骤的引物为5'- AAG CAG TGG TAA CAA CGC AGA GT -3，。
10. 根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述信标分子可以为放射性核素、生物 素、地高辛、荧光素、胶体铁、胶体金以及联合标记。
【文档编号】C12Q1/68GK104450887SQ201410636655
【公开日】2015年3月25日 申请日期:2014年11月12日 优先权日:2014年11月12日
【发明者】车团结, 文惠方, 陈小兰, 李琳, 张尚弟, 蔡传勇 申请人:兰州百源基因技术有限公司