一种以高吸附性稻壳粉为载体的刺参专用特异性卵黄液添加剂的低成本制备方法与流程

本发明属于饲料技术领域，涉及一种新的防治刺参腐皮综合征及其它细菌性疾病的特异性卵黄饲料添加剂及制备方法。

背景技术：

刺参(Apostichopus japonicas)又称仿刺参，属于棘皮动物门(Echinodermate)、海参纲(Holothrioider)，刺参科(Stichopodidae)，仿刺参属(Apostichopus)。在我国主要产于辽宁省、山东省等北方沿海。因其较高的营养价值和药用价值，目前已成为北方地区最重要的名贵养殖品种之一，随着养殖规模的不断扩大，刺参病害问题日趋严重，目前常见的疾病主要包括腐皮综合征、口围肿胀症、烂边症、烂胃病和化板症等。其中腐皮综合征已成为刺参养殖业最常见也是危害最严重的疾病，严重制约着刺参养殖业的健康发展。

目前刺参养殖业滥用抗生素和化学药物情况普遍，抗生素和化学药物反复使用容易产生耐药性，存在药物残留，在倡导绿色农业的今天必将退出历史舞台。卵黄抗体具有无毒、无残留、不产生抗药性等优点，发展前景备受瞩目。此外卵黄抗体产出率高，并具有耐热、稳定性好等优点，已经被广泛地制成产品来进行动物疾病的预防和治疗。

当前卵黄抗体产品大都为卵黄粉和全蛋粉，但是传统生产工艺中中需经过冷冻干燥或喷雾干燥，成本较高。基于以上考虑我们尝试选择以冰冻胀剥技术处理后的稻壳粉作为高效载体包裹卵黄制备饲料添加剂，省去卵黄经冷冻干燥或喷雾干燥脱水这一过程，仅需置于室温阴凉处干燥3-5天即可得到成品，使生产工艺大为简化，成本大为降低。

技术实现要素：

稻壳粉具有独特的物理构造，其横截面为板层结构，具有较大的比表面积。本发明利用稻壳粉这一结构特点，采用冰冻胀剥技术，在稻壳粉中加入蒸馏水直接冰冻，板层间隙吸水后冰冻形成冰晶，体积增大使其结构出现裂缝，多次冻融后，致使裂缝不断向宽度和深度方向延展并形成更大裂缝，最终使板层结构解体，比表面积进一步增大，吸附性进一步增强。又由于稻壳粉主要成分为纤维素，对刺参无毒副作用，辅以刺参病原菌相应卵黄抗体，使卵黄抗体在刺参健康养殖和快速增产方面发挥独特作用。

本发明又从卵黄抗体制备工艺简化的目的出发，改变了制备卵黄抗体产品的传统方法，不再使用冷冻干燥或喷雾干燥技术，而是直接将高吸附性稻壳粉包裹蛋黄液进行加工，自然晾干后粉碎，制成刺参饲料添加剂。这样不但减少了冻干过程中对卵黄抗体的损失，而且还简化了生产工艺，同时鸡蛋里其它的营养成分也得到了很有效的利用，很大程度上的降低了产品的成本。

本发明的技术方案由载体和特异性卵黄液组成。载体为经冰冻胀剥技术处理后获得的高吸附性稻壳粉，特异性卵黄液由刺参细菌性疾病相应病原菌免疫蛋鸡获得。高吸附性稻壳粉与特异性卵黄液的质量比为3/7-3/2。

该刺参用特异性卵黄添加剂中不同组分质量百分比如下：含特异性卵黄抗体的卵黄液40％-70％，高吸附性稻壳粉30％-60％，上述原料的质量百分比之和为100％，所采用的特异性卵黄液不含有卵清液。优选方式下，组分中还包括山梨酸钾，山梨酸钾加入量为上述两种组分质量和的0.05％-0.1％。

刺参专用特异性卵黄液添加剂的低成本制备方法为：

(1)将30-60目干燥稻壳粉放入超微粉碎机中粉碎10-15min，粉碎后过200目筛网；

(2)在步骤(1)粉碎后得到的稻壳粉中添加2-3倍质量蒸馏水，并于-20℃冰冻1-2天，冰冻后再于室温解冻；

(3)重复步骤(2)1-3次，将所得稻壳粉均匀平铺并置于室温干燥3-5天，即得高吸附性稻壳粉；

(4)将高免鸡蛋的蛋黄和蛋清分离，取蛋黄打入容器中，搅拌；

(5)将蛋黄液搅拌到体积膨胀，颜色变浅，呈浓稠状，并称量质量；

(6)将蛋黄液质量的3/7-3/2的高吸附性稻壳粉分少量多次添加，边加入边搅拌，使高吸附性稻壳粉与蛋黄液完全混合；

(7)将混合均匀的蛋黄液与高吸附性稻壳粉混合物置于饲料颗粒机中压制成直径为2-10mm颗粒，并置于室内阴凉处自然晾干，至水分含量降低至10％以下；

(8)将阴干后的颗粒置于粉碎机中二次粉碎，粉碎的颗粒过60-100目筛网，即得成品。

本发明的刺参饲料添加剂的使用方法为：刺参饲料添加剂与饲料的质量比为(1-5)％∶(95-99)％，将添加剂加到饲料中混合均匀，往育苗池中施用。

本发明具有如下优点：(1)稻壳粉来源广泛，价格低廉；(2)特异性卵黄液中的特异性IgY可以防止刺参相应细菌性疾病；(3)特异性卵黄中的其他营养成分可有效促进刺参生长，并明显增强海刺参的机体免疫力和抗病力；(4)减少抗生素和化学药物使用量；(5)安全无毒，使用方便；(6)天然的稻壳粉载体解决了以往卵黄抗体生产提纯过程中需要大量消耗能源的难题,极大的降低了成本。

表1 各种方法生产IgY制剂综合比较

从表1可以看出，在不考虑人工成本及设备折旧等因素的情况下，本方法前期投入的设备成本最低，单位能耗降到了原来的1/5甚至更多，节能效果显著，而且生产过程简单，生产方式灵活，制约因素较少，具有很大的商业价值。

附图说明

图1为普通稻壳粉横截面；

图2为冰冻胀剥技术处理后稻壳粉横截面；

图3为刺参专用特异性卵黄液添加剂中IgY含量测定图。

具体实施方式

以下结合技术方案详细叙述本发明的实施例

实施例1

刺参专用抗黄海希瓦氏菌特异性卵黄液添加剂的制备方法，包括如下步骤：

(1)将抗黄海希瓦氏菌高免鸡蛋的蛋黄和蛋清分离，取蛋黄打入容器中，搅拌；

(2)将蛋黄液搅拌到体积膨胀，颜色变浅，呈浓稠状，并称量质量；

(3)将蛋黄液质量的3/7-3/2的高吸附性稻壳粉分少量多次添加，边加入边搅拌，使高吸附性稻壳粉与蛋黄液完全混合；

(4)将混合均匀的蛋黄液与稻壳粉混合物置于饲料颗粒机中压制成直径为2-10mm颗粒，并置于室内阴凉处自然晾干，至水分含量降低至10％以下；

(5)将阴干后的颗粒置于粉碎机中二次粉碎，粉碎的颗粒过60-100目筛网，即得成品。

实施例2

刺参专用抗灿烂弧菌特异性卵黄液添加剂的制备方法，包括如下步骤：

(1)将抗灿烂弧菌高免鸡蛋的蛋黄和蛋清分离，取蛋黄打入容器中，搅拌；

(2)将蛋黄液搅拌到体积膨胀，颜色变浅，呈浓稠状，并称量质量；

(3)将蛋黄液质量的3/7-3/2的高吸附性稻壳粉分少量多次添加，边加入边搅拌，使高吸附性稻壳粉与蛋黄液完全混合；

(4)将混合均匀的蛋黄液与稻壳粉混合物置于饲料颗粒机中压制成直径为2-10mm颗粒，并置于室内阴凉处自然晾干，至水分含量降低至10％以下；

(5)将阴干后的颗粒置于粉碎机中二次粉碎，粉碎的颗粒过60-100目筛网，即得成品。

实施例3

刺参专用特异性卵黄液添加剂中IgY含量测定

将标准IgY包被液倍比稀释成一定梯度(1-0.015625ug/ml),将特异性添加剂样品也稀释成一定梯度,每孔加100ul包被96孔酶标板,4℃过夜。用洗涤液洗涤酶标板3次,每孔加100ul封闭液,37℃温育后甩干、洗涤3次,再向各孔加兔抗鸡IgG-HRP 100ul,37℃反应1h；洗涤液洗涤各孔5次,每孔加100ulTMB底物溶液,室温下显色20min,每孔加50ul终止液终止反应,用酶标仪测OD_450/630。以标准IgY的OD值对IgY浓度作标准曲线,从标准曲线中查得待测样品的浓度。