本发明涉及动物饲料
技术领域：
，具体涉及一种能提高育肥猪生长性能、改善肉质的β-葡聚糖(salecan)及其在生长肥育猪饲粮中的应用。
背景技术：
：自1950年以来，亚治疗水平的抗生素饲料添加剂已经广泛用于猪饲料中用来改善生长速率和饲料效率，维持猪在亚临床疾病存在时能有较好的生产性能。抗生素饲料添加剂在育肥猪日粮中应用有较好的作用。在15年前，zimmerman(1986)从239个独立试验和报告中总结的数据显示，抗生素饲料添加剂在前期料中添加使用可以改善其性能，可以使生长速率和饲料转化率平均分别提高15％和6％；对于后期生长育肥猪来说，抗生素饲料添加剂可使生长速率和饲料转化率分别提高4％和2％。但是使用抗生素饲料添加剂的其中一个忧虑是添加使用抗生素可能造成抗生素在动物肉品中的残留，随着人们生活水平的提高以及对抗生素滥用后的结果的深刻认识，人类已经开始注重减少或者禁止抗生素在人畜中的应用。与此同时，人们对猪肉品质的重视程度越来越高，优质猪肉的生产越来越引起消费者的关注，对于猪种研究者和养猪者来说，如何通过科学手段改善肥育猪肉质是需要解决的重要问题。现有研究表明，品种、饲料营养和饲养环境是决定猪肉产品质量的三大主要因素。猪肉是经过饲料营养直接转化而来的。一旦肉猪饲养品种确定后，饲料营养就是影响肌肉品质最直接的环境因素。研究还发现，很多饲料营养因子和生物活性物质对于动物基因表达的调控或控制引起肉质变化的代谢和生化过程起着重要的作用，概括起来这些饲料营养因子主要有日粮能量、蛋白质水平、日粮氨基酸平衡，饲料微量元素和维生素及生物活性物质肉碱、甜菜碱和益生素等。由此可见要全面改善肉质除了常规饲料原料外，还必须依赖多种因素进行综合调控。因此，在肥育猪生产中，寻找一种不含抗生素，能够改善生长肥育猪生长性能、养分消化率和肉质等的营养因子，是亟待解决的问题。而β-葡聚糖最初的发现是从细菌的细胞壁中分离得到，从细菌细胞壁分离得到的β-葡聚糖的纯度一般只有20％左右，且分离得到的β-葡聚糖分子量大，不溶于水，在应用上受到极大的限制。技术实现要素：本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种能明显改善生长肥育猪的生长性能、养分消化率和肉质，增加肥育猪胴体长的β-葡聚糖(salecan)添加剂。本发明一种能提高育肥猪生产性能、改善肉质的β-葡聚糖，所述β-葡聚糖为索拉胶，是土壤杆菌agrobacteriumsp.zx09的发酵产物。上述β-葡聚糖在生长肥育猪饲粮中的应用。上述β-葡聚糖在生长肥育猪饲粮中的应用，所述β-葡聚糖在生长肥育猪饲粮中的有效添加量为25～200mg/kg；其中所述β-葡聚糖在断奶生长肥育猪饲粮中的有效添加量＝β-葡聚糖的添加量×β-葡聚糖的纯度。进一步的，上述β-葡聚糖在生长肥育猪饲粮中的应用，所述β-葡聚糖在生长肥育猪饲粮中的有效添加量为50mg/kg。进一步的，上述β-葡聚糖在生长肥育猪饲粮中的应用，所述β-葡聚糖在生长肥育猪饲粮中的有效添加量为100mg/kg。进一步的，上述β-葡聚糖在生长肥育猪饲粮中的应用，所述β-葡聚糖在生长肥育猪饲粮中的有效添加量为200mg/kg。进一步的，上述β-葡聚糖在生长肥育猪饲粮中的应用，所述β-葡聚糖能够提高生长肥育猪25～110kg阶段平均日增重量，并降低料肉比。进一步的，上述β-葡聚糖在生长肥育猪饲粮中的应用，所述β-葡聚糖能够改善生长肥育猪对干物质、能量和粗蛋白的消化利用率。进一步的，上述β-葡聚糖在生长肥育猪饲粮中的应用，所述β-葡聚糖能够有效抑制结肠和盲肠大肠杆菌数量，同时能够增加双歧杆菌和乳酸杆菌数量。进一步的，上述β-葡聚糖在生长肥育猪饲粮中的应用，所述β-葡聚糖显著增加猪血液中葡萄糖的含量，降低料肉比，提高干物质、能量和粗蛋白消化率，提高平均日增重，增长猪胴体长；增强肌肉系水力，提高肉中肌苷酸和不饱和脂肪酸的含量，显著改善肉质。进一步的，上述β-葡聚糖在生长肥育猪饲粮中的应用，所述β-葡聚糖为索拉胶，是土壤杆菌agrobacteriumsp.zx09(又称普沙根瘤菌)的发酵产物。本发明β-葡聚糖(salecan)为索拉胶，索拉胶是一种土壤杆菌agrobacteriumsp.zx09(又称普沙根瘤菌)的发酵产物，是一种由葡萄糖以1.3键形成多糖，纯度最高可达99％；。索拉胶(salecan)具有强大的吸水能力和良好的水溶性。本发明的有益效果是：本发明β-葡聚糖(salecan)能显著影响生长育肥猪生长性能，显著提高25～110kg阶段生长育肥猪的平均日增重，降低料肉比；对生长育肥猪饲粮养分消化率有明显的影响，能够改善生长肥育猪对饲粮干物质、能量和粗蛋白的消化利用率；β-葡聚糖(salecan)显著提高生长育肥猪血液中葡萄糖的含量；改善生长育肥猪肠道菌群结构；增加生长育肥猪胴体长；降低猪肉滴水损失，肌肉系水力增强，改变猪肉肉色；β-葡聚糖(salecan)还可以提高十六烯酸、亚油酸、花生酸、顺-11-二十烯酸和二十碳二烯酸的比例，显著提高了肉中肌苷酸和不饱和脂肪酸的含量，从而改善肉的风味。具体实施方式下面结合具体实施例进一步详细描述本发明的技术方案，但本发明的保护范围不局限于以下所述。1、试验设计及饲粮本试验采用单因子试验设计，设4个处理，每个处理6个重复，每个重复4头猪。试验基础饲粮根据nrc(2012)配制的玉米-豆粕型饲粮，实施例1组饲喂基础饲粮+50mg/kgβ-葡聚糖，实施例2组为基础饲粮+100mg/kgβ-葡聚糖，实施例3组为基础饲粮+200mg/kgβ-葡聚糖，实施例4组饲喂不添加β-葡聚糖的基础饲粮。2、试验动物和饲养管理试验在四川眉山丹棱猪场进行。选用96头20kg左右的健康dly猪，按体重随机分为4个处理，每个处理6个重复，每个重复4头猪(公母各半)。预饲期为7天。实验分为3个阶段，25～50kg饲喂35天；50～75kg饲喂28天；75～110kg饲喂40天，共103天。实验动物的饲喂时间为每天的8:00，14:00，20:00。试验期间严格控制温湿度，每天进行圈舍打扫，保证猪自由采食、饮水。每天记录采食量、浪费量、余料量，实验每个阶段最后4天都采用内源指示剂法进行消化试验，每个阶段对猪进行称重。具体地，基础日粮原料配比及营养水平如表1所示：表1基础日粮原料配比及营养水平其中多维为每千克饲粮提供va17500iu、vd35000iu、ve37.5iu、vk35mg，vb15mg，vb212.5mg，vb67.5mg，vb120.05mg，烟酸50mg，叶酸2.5mg和生物素0.2mg；矿添为每千克饲粮提供：铁100mg、铜8mg、锰4mg、锌100mg、硒0.3mg和碘0.3mg。3、样品采集及处理实验结束时，每个重复选择一头接近平均体重的猪进行屠宰。采取背最长肌肌肉样于冻存管放置液氮罐中，剩余肉样采取一部分放置4℃冰箱用于肌肉剪切力的测定，其余部分用于蒸煮损失、滴水损失、肌肉ph、肉色、肌苷酸和脂肪酸的测定。4、考察指标及测定方法(1)生产性能分别计算试验期各重复的adg、adfi和f/g。(2)养分消化利用率测定饲料和粪样中的干物质(dm)、粗蛋白(cp)和能值，计算dm、cp和总能的表观消化率。(3)血液生化指标试验结束时每个重复选择接近平均体重的1头生长肥育猪采血制备血清，检测血清中甘油三酯、葡萄糖、尿素氮和胆固醇的含量。(4)肠道菌群试验结束时每个重复选择接近平均体重的1头生长肥育猪屠宰，采集盲肠和结肠食糜，检测食糜中的总细菌、乳酸杆菌和大肠杆菌的数量。(5)胴体性状和肉质胴体重、胴体长、背膘厚、屠宰率。眼肌面积、肌肉ph和肉色、蒸煮损失、滴水损失、剪切力。眼肌面积：在胸腰椎结合处垂直切下用游标卡尺测定眼肌的宽度和高度，计算眼肌面积。眼肌面积(cm2)＝眼肌高度(cm)×眼肌宽度(cm)×0.7肌肉ph：用ph-star(sfk-technology，denmark)测定猪只屠宰后45min和24h背最长肌的ph值。肉色：用日本美能达生产的cr-400(minolta)色差计对最末胸椎与第一腰椎结合处背最长肌的横断面进行肉色评分。滴水损失：取第2～3腰椎处背最长肌，去掉肌外膜上附着的脂肪，横切成2cm厚的薄片，休整成长5cm，宽3cm的长方体后称重，然后用铁丝钩住肉样的一段，使肌纤维垂直向上，装入冲气的塑料薄膜袋中，肉样不与袋壁接触，扎好袋口，吊挂于4℃的冰箱中，贮藏24h后称重，按下面的公式计算肌肉的滴水损失：滴水损失(％)＝(贮藏前重-贮藏后重)/贮藏前重×100％蒸煮损失：将样品用电子天平称重(蒸前重，w1)，在铝锅的蒸格上用沸水蒸30min。取出后，置于室内无风阴凉处晾15min后再称重(蒸后重，w2)。计算公式为：蒸煮损失(％)＝(w1-w2)/w1×100％肌肉嫩度(剪切力)：采用国际通用的测定嫩度的华纳～布莱之勒尔剪切力(warner-bratzlershearforcewbsf)值进行计量。具体如下：采集回实验室的猪肉切2.54cm厚度的一片，放入水浴锅至肉块中心温度达到71℃。用内径为1.27cm的取样器，从肉样上沿肌肉纤维方向取至少3个肉柱，再用剪切力测定仪(textureanalyser)测定每个肉柱的剪切力值。最后求出其平均值，即为样品的剪切力值。肌苷酸：采用高效液相色谱法测定肌苷酸含量。脂肪酸：采用气相-质谱联用法测定脂肪酸含量。5、统计分析所有数据均采用spss17.0软件进行统计，用单因素方差分析进行差异显著性检验，并用lsd法进行多重比较。结果用平均数±sem表示，以p<0.05为显著水平。6、结果分析(1)β-葡聚糖(salecan)对生长育肥猪生长性能的影响表2β-葡聚糖对生长育肥猪生长性能的影响注：实施例1组为基础饲粮+50mg/kgβ-葡聚糖(salecan)，实施例2组为基础日粮+100mg/kgβ-葡聚糖(salecan)，实施例3组为基础日粮+200mg/kgβ-葡聚糖(salecan)，实施例4组为基础饲粮组；*adfi——平均日采食量，adg——平均日增重，f/g——料肉比*同行数据上标字母不同表明差异显著(p<0.05)。β-葡聚糖(salecan)显著影响生长育肥猪生长性。从表2看出，β-葡聚糖(salecan)不影响25～50kg阶段猪的生产性能，但饲粮中添加100mg/kgβ-葡聚糖(salecan)显著提高50～75kg阶段平均日增重，显著降低料肉比(p<0.05)，其余各组生产性能无明显改善；饲粮中添加50mg/kg和100mg/kgβ-葡聚糖(salecan)显著提高75～110kg阶段平均日增重，显著降低料肉比(p<0.05)，其余各实施例与实施例4相比差异不显著。从全期来看，实施例2显著提高25～110kg阶段平均日增重，并显著降低料肉比(p<0.05)，其余各实施例与实施例4相比差异不显著。(2)β-葡聚糖(salecan)对生长育肥猪养分消化利用率的影响测定饲料和粪样中的干物质(dm)、粗蛋白(cp)和能值，计算dm、cp和总能的表观消化率，同行数据上标字母不同表明差异显著(p<0.05)：表3β-葡聚糖(salecan)对生长育肥猪养分消化率的影响(％)β-葡聚糖(salecan)对生长育肥猪饲粮养分消化率有明显的影响，从表3可看出：β-葡聚糖(salecan)添加量为100mg/kg能够显著改善饲粮干物质、能量和粗蛋白消化率。第一阶段(25～50kg)：与基础饲粮组相比，添加β-葡聚糖(salecan)不影响干物质、能量和粗蛋白消化率。第二阶段(50～75kg)：基础饲粮中添加100mg/kgβ-葡聚糖(salecan)显著提高干物质、能量和粗蛋白消化率(p<0.05)。第三阶段(75～110kg)：基础饲粮中添加50mg/kg和100mg/kgβ-葡聚糖(salecan)显著提高干物质消化率(p<0.05)，但能量和粗蛋白消化率并没有发生显著变化。(3)β-葡聚糖(salecan)对生长育肥猪血液生化指标的影响检测血清中甘油三酯、葡萄糖、尿素氮和胆固醇的含量，同行数据上标字母不同表明差异显著(p<0.05)：表4β-葡聚糖对生长育肥猪血液生化指标的影响β-葡聚糖(salecan)对生长育肥猪血液生化指标除葡萄糖含量外，对其余生化指标不产生明显影响。第一阶段(25～50kg)：饲粮添加β-葡聚糖(salecan)显著增加血液葡萄糖含量，但不同添加组之间葡萄糖含量无差异。第二阶段(50～75kg)和第三阶段(75～110kg)饲粮中添加β-葡聚糖(salecan)对生长育肥猪血液甘油三酯、葡萄糖、尿素氮和胆固醇指标影响不大。(4)β-葡聚糖对生长育肥猪肠道菌群的影响采集各实施例中屠宰的猪的盲肠和结肠的食糜，检测食糜中的总细菌、乳酸杆菌和大肠杆菌的数量，同行数据上标字母不同者表示差异显著(p<0.05)：表5β-葡聚糖对生长育肥猪肠道菌群的影响β-葡聚糖(salecan)对生长育肥猪肠道菌群有一定的影响，但差异不显著。从表格5中看出，基础饲粮中添加50mg/kg和100mg/kgβ-葡聚糖(salecan)的实施例中盲肠双歧杆菌含量要高于基础饲粮组，而200mg/kgβ-葡聚糖(salecan)组盲肠双歧杆菌含量低于基础饲粮组，虽然差异不显著，但表现出逐渐降低的趋势。各组之间大肠杆菌含量差异不显著。添加β-葡聚糖(salecan)组的乳酸杆菌含量均要高于基础饲粮组，但差异不显著。添加β-葡聚糖(salecan)的实施例中结肠的乳酸杆菌和双歧杆菌含量均要高于基础饲粮组，差异不显著，但表现出先增加后减少的规律，100mg/kgβ-葡聚糖(salecan)组的添加效果均要好于50mg/kg和200mg/kgβ-葡聚糖(salecan)组。(5)β-葡聚糖(salecan)对生长育肥猪肉质的影响a、各实施例中屠宰的猪的胴体重、胴体长、背膘厚、屠宰率如表格6所示，同行数据上标字母不同者表示差异显著(p<0.05)：表6β-葡聚糖(salecan)对生长育肥猪胴体性状的影响从表6可以看出，β-葡聚糖(salecan)显著影响胴体长。表现为100mg/kg和200mg/kgβ-葡聚糖组猪胴体长显著高于实施例4(对照组)，虽然50mg/kgβ-葡聚糖(salecan)组胴体长数值高于实施例4，但并未表现出显著差异。不同添加剂量组表现为100mg/kgβ-葡聚糖(salecan)的实施例2中猪胴体长显著高于50mg/kgβ-葡聚糖(salecan)的实施例1，但与200mg/kgβ-葡聚糖(salecan)的实施例3之间没有显著差异。饲喂β-葡聚糖(salecan)对育肥猪胴体重、背膘厚、屠宰率没有显著的影响。b、各实施例中屠宰的猪的眼肌面积、肌肉ph如表格7所示，同行数据上标字母不同者表示差异显著(p<0.05)：眼肌面积：在胸腰椎结合处垂直切下用游标卡尺测定眼肌的宽度和高度，计算眼肌面积。眼肌面积(cm2)＝眼肌高度(cm)×眼肌宽度(cm)×0.7肌肉ph：用ph-star(sfk-technology，denmark)测定猪只屠宰后45min和24h背最长肌的ph值。表7β-葡聚糖对生长育肥猪肉质的影响β-葡聚糖(salecan)对肥猪肉的ph有一定的影响，表现为100mg/kgβ-葡聚糖(salecan)组猪肉ph显著高于实施例4，50mg/kg和200mg/kgβ-葡聚糖(salecan)组猪肉ph与实施例4之间没有显著差异。c、各实施例中屠宰的猪的肉色如表格8所示，肉色用日本美能达生产的cr-400(minolta)色差计对最末胸椎与第一腰椎结合处背最长肌的横断面进行肉色评分，l值代表肉的亮度，越低越好；a值代表红度，越高越好；b值代表黄度，越低越好。同行数据上标字母不同者表示差异显著(p<0.05)：表8β-葡聚糖对生长育肥猪肉色的影响β-葡聚糖(salecan)显著改变肉色。β-葡聚糖(salecan)虽然不影响45min肉色l值，但显著影响45min肉色a值和b值。表现为：实施例2中45min肉色a值显著高于实施例4(p<0.05)，实施例1和实施例3中45min肉色a值与实施例4水平差异不显著；饲粮中添加β-葡聚糖(salecan)显著降低45min肉色l值，实施例1～3之间45min肉色l值无明显差异，β-葡聚糖(salecan)对24h肉色l、a、b值并没有产生显著影响。d、各实施例中屠宰的猪的滴水损失、蒸煮损失和剪切力如表格9所示，同行数据上标字母不同者表示差异显著(p<0.05)：滴水损失：取第2～3腰椎处背最长肌，去掉肌外膜上附着的脂肪，横切成2cm厚的薄片，休整成长5cm，宽3cm的长方体后称重，然后用铁丝钩住肉样的一段，使肌纤维垂直向上，装入冲气的塑料薄膜袋中，肉样不与袋壁接触，扎好袋口，吊挂于4℃的冰箱中，贮藏24h后称重，滴水损失(％)＝(贮藏前重-贮藏后重)/贮藏前重×100％。蒸煮损失：将样品用电子天平称重(蒸前重)，在铝锅的蒸格上用沸水蒸30min。取出后，置于室内无风阴凉处晾15min后再称重(蒸后重)。蒸煮损失(％)＝(蒸前重-蒸后重)/蒸前重×100％。肌肉嫩度(剪切力)：采用国际通用的测定嫩度的华纳-布莱之勒尔剪切力(warner-bratzlershearforcewbsf)值进行计量。具体如下：采集回实验室的猪肉切2.54cm厚度的一片，放入水浴锅至肉块中心温度达到71℃。用内径为1.27cm的取样器，从肉样上沿肌肉纤维方向取至少3个肉柱，再用剪切力测定仪(textureanalyser)测定每个肉柱的剪切力值。最后求出其平均值，即为样品的剪切力值。表9β-葡聚糖(salecan)对生长育肥猪滴水损失、蒸煮损失和剪切力的影响饲粮中添加β-葡聚糖(salecan)可以显著降低猪肉滴水损失，说明肌肉系水力增强。实施例2低于实施例4(对照组)，实施例1和实施例3中对猪肉滴水损失并没有产生明显影响。e、β-葡聚糖(salecan)对生长育肥猪肌苷酸和脂肪酸组成比例的影响(％)如表10示，肌苷酸：采用高效液相色谱法测定肌苷酸含量，脂肪酸：采用气相-质谱联用法测定脂肪酸含量，同行数据上标字母不同者表示差异显著(p<0.05)：表10β-葡聚糖(salecan)对生长育肥猪肌苷酸和脂肪酸组成比例的影响(％)脂肪酸组成实施例1实施例2实施例3实施例4肌苷酸(mg/g)1.451±0.024a1.465±0.026a1.385±0.045ab1.221±0.035b葵酸0.126±0.0100.132±0.0050.136±0.0120.134±0.011月桂酸0.086±0.0060.090±0.0040.067±0.0090.093±0.005肉豆蔻酸1.522±0.0491.618±0.0651.550±0.0791.594±0.097棕榈酸27.484±0.50627.558±0.29827.405±0.15327.523±1.101十六烯酸4.020±0.3533.966±0.1983.736±0.1653.590±0.312十七酸0.244±0.018a0.299±0.015a0.241±0.010a0.203±0.108b十七烯酸0.088±0.015a0.069±0.008b0.074±0.005a0.083±0.009a硬脂酸13.357±0.95614.123±0.30413.320±0.56713.901±0.898油酸45.543±0.89545.315±0.37145.679±0.78746.675±0.674亚油酸5.460±0.377a5.470±0.352a5.161±0.253a4.781±0.406b花生酸0.153±0.008a0.168±0.012a0.130±0.014ab0.125±0.023b顺-11-二十烯酸0.593±0.017a0.591±0.021a0.643±0.039a0.462±0.035b二十碳二烯酸0.152±0.008a0.144±0.011a0.151±0.081a0.113±0.009b花生四烯酸0.245±0.0230.193±0.0190.215±0.0240.186±0.029饱和脂肪酸42.972±1.17643.918±0.62742.849±0.65243.271±0.683不饱和脂肪酸56.110±0.94655.744±0.56955.677±0.67755.890±0.834单不饱和脂肪酸50.244±1.20949.941±0.65450.150±0.61050.810±0.798多不饱和脂肪酸5.866±0.4115.803±0.3175.527±0.1975.080±0.240总脂肪酸99.082±0.336ab99.662±0.085a98.526±0.679b99.161±0.533abβ-葡聚糖(salecan)改变猪肉肌苷酸含量和脂肪酸组成。肌苷酸是肉质鲜味特性的主要物质基础。从表10可见，β-葡聚糖(salecan)添加水平为50～100mg/kg时，肌苷酸含量显著增加。与对照组(实施例4)相比，添加β-葡聚糖(salecan)组猪肉中的葵酸、月桂酸、肉豆蔻酸、棕榈酸、硬脂酸和油酸组成比例差异不显著(p>0.05)。添加不同水平的β-葡聚糖(salecan)可以提高十六烯酸的比例，当添加量为50mg/kg时，十六烯酸的比例提高了11.98％，但差异不显著。当β-葡聚糖(salecan)的添加量为100mg/kg时，肉中亚油酸和花生酸的比例分别显著提高了14.4％和25.6％(p<0.05)。同时，β-葡聚糖(salecan)可以提高顺-11-二十烯酸和二十碳二烯酸的比例。生长育肥猪饲粮添加β-葡聚糖(salecan)提高了肉中肌苷酸和不饱和脂肪酸的含量，从而改善肉的风味。综上可知：在饲粮中添加β-葡聚糖(salecan)可以明显改善生长育肥猪的生长性能、养分消化，胴体性状和肉质。在本试验条件下，推荐生长育肥猪饲粮中β-葡聚糖(salecan)的最适添加量为100mg/kg。以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当理解本发明并非局限于本文所披露的形式，不应看作是对其他实施例的排除，而可用于各种其他组合、修改和环境，并能够在本文所述构想范围内，通过上述教导或相关领域的技术或知识进行改动。而本领域人员所进行的改动和变化不脱离本发明的精神和范围，则都应在本发明所附权利要求的保护范围内。当前第1页12