本发明涉及一种缓解视疲劳的组合物及其制备方法，属于医药保健领域。
背景技术：
：虾青素是一种类胡萝卜素，也是类胡萝卜素合成的最高级别产物，其广泛存在于生物界，特别是虾、蟹、鱼、藻体、酵母和鸟类的羽毛中含量最高，是海洋生物体内主要的类胡萝卜素之一。虾青素是世界上最强的抗氧化剂之一，有效清除细胞内的氧自由基，增强细胞再生能力，维持机体平衡和减少衰老细胞的堆积，从而保护皮肤健康、促进毛发生长、抗衰老、增强免疫力、缓解视力疲劳。技术实现要素：本发明的目的在于提供一种缓解视疲劳的组合物及制备方法。作为本发明的一个方面，本发明提供一种缓解视疲劳的组合物，所述组合物由虾青素和橄榄油按重量比1：(0.4～40)组成。优选的，所述组合物由虾青素和橄榄油按重量比1：(0.4～4)组成。进一步优选的，所述组合物由虾青素和橄榄油按重量比1：0.4或1:4组成。本发明组合物可加入常规辅料、按常规制剂工艺制成口服剂型，包括颗粒剂、片剂、软胶囊剂、滴丸剂、口服液、混悬液、乳浊液等。所述常规辅料包括：填充剂、崩解剂、润滑剂、助悬剂、粘合剂、甜味剂、矫味剂、防腐剂、基质等。填充剂包括：淀粉、预胶化淀粉、乳糖、甘露醇、甲壳素、微晶纤维素、蔗糖等；崩解剂包括：淀粉、预胶化淀粉、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、低取代羟丙纤维素、交联羧甲基纤维素钠等；润滑剂包括：硬脂酸镁、十二烷基硫酸钠、滑石粉、二氧化硅等；助悬剂包括：聚乙烯吡咯烷酮、微晶纤维素、蔗糖、琼脂、羟丙基甲基纤维素等；粘合剂包括：淀粉浆、聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基甲基纤维素等；甜味剂包括：糖精钠、阿斯帕坦、蔗糖、甜蜜素、甘草次酸等；矫味剂包括：甜味剂及各种香精；防腐剂包括：尼泊金类、苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸及其盐类、苯扎溴铵、醋酸氯乙定、桉叶油等；基质包括：peg6000，peg4000，虫蜡等。作为本发明的另一个方面，本发明提供所述组合物在制备缓解视疲劳或干眼症的药物或保健品中的应用。作为本发明的第三个方面，本发明提供一种缓解视疲劳的软胶囊，所述软胶囊的内容物由虾青素和橄榄油组成，所述虾青素和橄榄油的重量比为1：(0.4～40)。优选的，所述虾青素和橄榄油的重量比为1：(0.4～4)。进一步优选的，所述软胶囊内容物由如下原料组成：虾青素80-130重量份，橄榄油350-430重量份；囊皮由如下原料组成：明胶470-540重量份、甘油220-280重量份、纯化水470-540重量份。更进一步优选的，所述软胶囊内容物由如下原料组成：虾青素90-120重量份，橄榄油370-420重量份；其囊皮由如下原料组成：明胶480-520重量份、甘油230-270重量份、纯化水480-520重量份；或，所述软胶囊内容物由如下原料组成：虾青素95-110重量份，橄榄油380-410重量份；其囊皮由如下原料组成：明胶490-510重量份、甘油240-260重量份、纯化水490-510重量份。最优选的，所述软胶囊内容物由如下原料组成：虾青素100重量份，橄榄油400重量份；其囊皮由如下原料组成：明胶500重量份、甘油250重量份、纯化水500重量份。作为本发明的第四个方面，本发明提供所述组合物软胶囊的制备方法，所述方法包括如下步骤：步骤a，内容物的制备：将虾青素、橄榄油混合，得到内容物料液，备用；步骤b，溶胶：按比例称量，先加入纯化水、甘油升温搅拌，再加入明胶，待明胶完全溶解，备用；步骤c，压丸：将步骤a制备的内容物和步骤b制备的胶液经过压丸、定型制成软胶囊。优选的，步骤b纯化水和甘油混合后，于70-80℃加入明胶；优选的，所述制备方法还包括步骤d，干燥，干燥温度为22-28℃，湿度为20-30％，干燥时间为24-48小时。本发明研究表明，本发明组合物能有效改善眼酸痛、眼胀、畏光、视物模糊、眼干湿、异物感、流泪等症状，显著提高明视持久度，总有效率为70.2％，显著高于对照组。具体实施方式实施例1配方：制备方法：步骤a，内容物的制备：将虾青素、橄榄油混合，搅拌均匀，抽真空(真空度-0.06～-0.08mpa),脱尽气泡，100目筛过滤。得到内容物料液，置容器内备用；步骤b，溶胶：按比例称量，先加入纯化水、甘油升温搅拌，70—80℃加入明胶，待明胶完全溶解。搅拌1小时左右，抽真空(真空度-0.06～-0.08mpa)，脱尽气泡，100目筛过滤，60±5℃保温，备用；步骤c，压丸：将步骤a制备的内容物和步骤b制备的胶液经过压丸、定型制成软胶囊；步骤d，干燥：将定型好的软胶囊置于干燥间内，室内温度控制在22-28℃，湿度控制在20-30％，干燥时间约24小时。实施例2配方：制备方法同实施例1。实施例3配方：制备方法同实施例1。实施例4配方：制备方法同实施例1。实施例5配方：制备方法同实施例1。实施例6油类的筛选食用油对脂溶性成分具有较好的溶解性，且具有较高的蒸气压、挥发性较小、食用安全等特点，适合作为软胶囊基质成分。分别以大豆油、橄榄油、peg400作为溶剂，按实施例1方法和配方制备软胶囊，考察虾青素在大豆油、橄榄油、peg400中的溶解度。对照品溶液的配制和线性关系考察：准确称取2mg虾青素对照品，用无水乙醇溶解并定容至20ml量瓶中，分别准确移0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0、1.2ml，用无水乙醇稀释并定容至10ml瓶中，于478nm处测定其吸光值，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线，得到回归方程y＝83.64x+0.0054，r2＝0.9985，虾青素对照品在浓度1-12μg/ml范围内，线性关系良好。准确称取适量虾青素分别加入等量大豆油、橄榄油、peg400中溶解，室温超声30min，离心分离上清液和沉淀，所得上清液为虾青素溶解液，测定并计算虾青素提取率。结果见表1。表1不同溶剂虾青素提取率检测结果大豆油橄榄油peg400虾青素提取率(％)69.6575.4248.33对比三种溶剂对虾青素的溶解性，确定大豆油与橄榄油作为溶剂对虾青素的溶解效果较好，相同量的溶剂溶解度越高，虾青素成分在胶囊中混合更均匀，析出风险更低，考虑到橄榄油营养丰富，功能价值更高，选用橄榄油作为虾青素的溶剂。实施例7橄榄油与虾青素配比验证脂肪酸在空气中会发生氧化而变质，影响其品质，尤其是橄榄油含有较多的多不饱和脂肪酸(pufa)，更易受到氧的影响，因此，利用虾青素抑制橄榄油中脂肪酸氧化酸败作用，通过测定其不同时间的过氧化值，可确定虾青素的最佳添加比例保证抗氧化活性最佳。取30ml橄榄油，置于50ml锥形瓶中，编号1、2、3、4、5、6，其中1号为对照，2-6号分别加入0.0075、0.075、0.75、7.5、75g虾青素油。将各样品置于60℃烘箱中，每天(24h)测定过氧化值。结果见表2。表2橄榄油与虾青素配比验证实验结果显示，第5组(30ml橄榄油中添加7.5克虾青素油)可达最佳抗氧化结果，继续添加，抗氧化效果增加不明显，且会增加成本，意义不大。固确定天然虾青素：橄榄油为1:4。实施例8效果实验1材料和方法1.1样品：组合物软胶囊(按实施例1制备)。每日2次，每次1粒，口服。1.2受试对象：按自感原则选择18-65岁，具有视疲劳症状的受试者。1.2.1纳入者标准：18-65岁成人，长期用眼，视力易疲劳者。1.2.2排除者标准1.2.2.1患有感染性，外伤性眼部疾患者。进行眼部手术不足3个月者。1.2.2.2患有角膜、品体、玻璃体、眼底病变等内外眼疾患者。1.2.2.3患有心血管、脑血管、肝、肾、造血系统等疾病者。1.2.2.4妊娠或哺乳期妇女、过敏体质患者。1.2.2.5短期内服用与受试功能有关的物品，影响到对结果的判定者。1.2.2.6长期服用有关治疗视力的药物，保健品或使用其他治疗方法未能终止者。1.2.2.7不符合纳入标准，未按规定食用受试物者，或资料不全等影响功效或安全性判断者。1.3试验设计与分组采用自身和组间两种对照设计。根据随机、双盲的要求进行分组，分组时根据症状及视力检查情况，使试食组和对照组的症状及视力水平均衡。同时要考虑年龄、性别等因素，使两组具有可比性。试食试验结束时每组受试者人数不少于50例。1.4食用剂量及时间试食组服用实施例1制备的软胶囊，每日2次，每次1粒，口服。对照组服用安慰剂。受试物服用时间为连续60天。受试者在试食期间停止服用有关改善视力的药物或其他保健品。1.5仪器与试剂日立7180全自动生化分析仪(德国centronic公司)；diruih-300尿八项分析仪(长春迪瑞公司)；sysmex-k21三分类血液分析仪(sysmex公司)；sysmex血细胞分析稀释液(sysmex公司)；dirui尿分析试剂带(长春迪瑞公司)；利德曼生化试剂盒(北京利德曼生化股份有限公司)、日本协和生化试剂盒(日本协和医药株式会社)、日本化生化试剂盒(日本第化学药品株氏会社)。2观察指标2.1功效性指标2.1.1问卷调查：症状询问、用眼(用电脑、看电视、看书报等)情况。2.1.2眼科检查：包括眼底检查、视力检查(近视、远视、散光等)。2.1.3明视持久度检测明视持久度测定方法:在检查表上绘制“品”字形立体方块图，方块每边长厘米，局部照明100-150lx(可使用专门制作的灯箱)。检查表与眼睛的距离应按照受试者视物习惯保持在适当距离不动，规定受试者看到“品”字视为明视，倒“品”字时为不明视，测定时间为3分钟。明视持久度＝(明视时间/注视总时间)*100％2.2安全性指标2.2.1血液、尿常规及便常规检查红细胞计数，血红蛋白，白细胞计数，尿十项检测，大便镜检。2.2.2生化指标测定血清白蛋白(aib)、总蛋白(tp)、肝肾功能(谷草转氨酶(ast)、谷丙转氨酶(alt)、尿素(urea)、肌酐(cre)、血糖(giu)、血脂(总胆固醇(tc)、甘油三脂(tg)。2.2.3腹部b超，心电图，x线胸部透视(于试食前检查一次)。2.3功效判定2.3.1症状改善有效率眼酸痛、眼胀、畏光、视物模糊、眼干湿、异物感、流泪，全身不适8种症状中有3种改善，且其他症状无恶化即判定症状改善。计算两组症状改善例数和两组症状改善有效率。症状改善有效率(％)计算方法为症状改善例数试食例数*100。将两组症状改善有效率进行统计学检验。2.3.2症状平均积分计算每位试食者试食前后的症状积分，分别计算两组的平均积分值，并进行统计学检验。评分标准见表3。表3视疲劳症状判定方法注：“偶感”是指1-2次/天；“时有”是指1-3次/天；“经常”是指＞3次/天2.3.3明视持久度试食组自身比较或试食组与对照组组间比较，明视持久度差异有显著性(p<0.05)，且平均明视持久度提高大于等于10％为有效。2.4数据统计分析计量资料可用t检验进行分析。自身对照采用配对t检验，两组均数比较采用成组t检验。对非正态分布或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待满足正态方差齐后，用转换的数据进行t检验:若转换数据仍不能满足正态方差齐要求，改用t检验或秩和检验。在试食前组间比较差异无显著性的前提下，可进行试验后组间比较。计数资料可用χ2检验。四格表总例数小于40，或总例数等于或大于40但出现理论频数等于或小于1时，应改用确切概率法。2.5结果判定2.5.1试食组自身比较或试食组与对照组组间比较，症状改善有效率或症状总积分差异有显著性(p<0.05)。2.5.2试食组自身比较或试食组与对照组组间比较，明视持久度差异有显著性(p<0.05)，且平均明视持久度提高大于等于10％。具备2.5.1及2.5.2且视力改善率不明显降低，可判定该受试物具有有助于缓解视疲劳功能的作用。3实验结果3.1功效观察结果3.1.1一般状况纳入受试者118例，随机分为试食组和对照组。脱失受试者试食组、对照组各2例，有效受试者114例，试食组57例，对照组57例，受试者试验前血常规、尿常规、大便常规、肝肾功能、胸透、心电图、b超等检查均在正常范围，试食前两组受试者年龄、性别、明视持久度、视力、症状总积分和用眼时间均无明显差异(p>0.05)，具有可比性。试食者试食前后精神、睡眠、饮食、大小便等无明显变化。3.1.2症状总积分的变化结果见表4。表4试食前后症状总积分变化组别例数试食前试食后试食组5716.19±2.1612.93±2.90***###对照组5716.04±2.1615.81±2.29***自身比较p＜0.001，###组间比较p＜0.001结果表明，试食组试食前后自身比较及试食后与对照组比较症状总积分明显改善(p<0.001)。3.1.3主要症状改善情况结果见表5。表5主要症状改善情况3.1.4明视持久度变化结果见表6。表6试食前后明视持久度变化***自身比较p＜0.001，###组间比较p＜0.001试食组试食前后自身比较及试食后与对照组比较，明视持久度提高，均有显著差异(p<0.001)；试食组试食后平均明视持久度提高10.1％，高于对照组，有显著差异(p<0.001)。3.1.5症状改善有效率结果见表7。表7试食前后症状改善总有效率结果组别例数有效例数无效例数有效率(％)试食组57401770.2###对照组571561.8###组间比较p＜0.001试食后症状总有效40例，总有效率70.2％，与对照组比较有显著差异(p<0.001)。3.2安全性观察结果试食前后血常规、尿常规、便常规及血生化指标、心电图，x线胸部透视均正常，两组均未见不良反应。4小结4.1118例符合要求的视疲劳受试者，随机分为试食组和对照组，有效受试者114例，试食组57例，对照组57例。对照组服用安慰剂。试食组按要求口服实施例1制备的组合物软胶囊60天后，试食组试食前后自身比较及试食后与对照组比较症状总积分明显改善(p<0.001)。试食后症状总有效40例，总有效率70.2％，与对照组比较有显著差异(p<0.001)。试食组试食前后自身比较及试食后与对照组比较，明视持久度提高，均有显著差异(p<0.001)；试食组试食后平均明视持久度提高10.1％，高于对照组，有显著差异(p<0.001)。根据国家食品药品监督管理局国食药监保化[2012]107号附件4中缓解视疲劳功能判定标准，结果显示本发明制备的组合物软胶囊有缓解视疲劳的作用。4.2试食者胸透、腹部b超、心电图、血常规、尿常规、便常规及血生化指标均无明显变化，说明本品对受试者身体健康无不良影响。4.3试食本发明组合物软胶囊过程中未见过敏及其它不良反应。当前第1页12