香气物质的产酯假丝酵母进行二 次发酵；特别在二次发酵期间增加了补料工艺，通过实验发现，该工艺不仅促使酵母混菌二 次生长，使发酵饲料每100g干基中所含粗蛋白含量高达46. 2g，而且使制备的饲料中含有 更为丰富的维生素、氨基酸、矿物质、香气等成分；使最终制备的饲料中营养更加全面，诱食 性更强，更容易被动物消化吸收和利用。
[0035] 本发明提供的制备方法成本低，工艺简单，可操作性强，便于推广应用，得到的发 酵芦苇饲料蛋白含量高，附加值高，不仅能够真正将大量芦苇茎叶资源实现高效转化，变废 为宝，而且对于有一定数量苇田的苇农而言，利用自家住房和院落就可以发酵芦苇饲料，随 时采割随时发酵，节省大量运输储存成本，大大降低了生产成本，增加经济效益。
【具体实施方式】
[0036] 下面实施例用于进一步详细说明本发明，但不以任何形式限制本发明。
[0037] 实施例1 (1) 将绿色木霉菌株转接在无菌PDA斜面培养基上，30 °C通气培养72h，活化，长满绿色 木霉孢子；PDA斜面培养基其按以下组分比例及工艺条件配制：马铃薯200g、葡萄糖20g、琼 脂18-20g、水lOOOmL，自然pH值，采用0.1 OMPa灭菌20min，混匀后摆斜面即得（以下实施例 中用到的PDA斜面培养基与此相同）； (2) 将活化好的绿色木霉孢子按质量的10%的接种量转接到豆柏麸皮培养基，30°C培 养36h，翻曲，继续培养至96h即得绿色木霉种曲；其中豆柏麸皮培养基是将豆柏和麸皮按 质量比为1:9混合，再加入干料1倍的水混匀、经过灭菌得到的培养基； (3) 分别将产朊假丝酵母和产酯假丝酵母按质量的10%的接种量转接在PDA培养基上， 30°C培养30h ;分别得活化的产朊假丝酵母和产酯假丝酵母； (4) 将活化的产朊假丝酵母和产酯假丝酵母分别以10%的接种量接种到三角瓶PDA液 体培养基中，30°C，摇床转速150rpm，培养24h，即得产朊假丝酵母一级种子和产酯假丝酵 母一级种子；分别以10%接种量将一级种子接种到发酵罐中PDA液体培养基中30°C培养 24h (其他实施例的继续扩大培养与此相同)，即得产朊假丝酵母扩培液和产酯假丝酵母扩 培液；其中PDA液体培养基按以下组分比例及工艺条件配制：马铃薯200g、葡萄糖20g、水 1000 mL ;自然pH值，采用0.1 OMPa灭菌20min即得(其他实施例中PDA液体培养基与此相 同）； (5) 将新鲜芦苇茎叶用粉碎机粉碎至2-5mm，以质量比9:1比例与麸皮混勾，加入总料 量1:1的水，混匀，121°c灭菌20min (灭菌条件其他实施例与此相同）；得发酵原料； (6) 在发酵原料中按发酵原料总质量5%的接种量接种绿色木霉种曲，充分混匀，堆成 IOcm厚度的料层，表面盖上湿布，30°C发酵48h，得绿色木霉发酵料； (7) 将氯化钙溶解于0. 05mol/L稀盐酸溶液中，使氯化钙的总浓度为0. 1%，喷洒于绿色 木霉发酵料中，调节发酵料的pH在6. 0,此时发酵料的含水量约为55%，将发酵料装于密闭 的塑料桶中，45 °C酶解24h，得酶解物料； (8) 按酶解物料质量的5%添加尿素，接种假丝酵母混菌(产酯假丝酵母扩培液与产朊 假丝酵母扩培液的质量比为3:7)，总接种量为酶解物料的15%，充分混匀，在35°C下开始发 酵，在发酵34h时补加发酵料总质量5%的葡萄糖和5%磷酸氢二铵，发酵至72h结束，即得 芦苇发酵高蛋白饲料。
[0038] 实施例2 (1) 将康宁木霉菌株转接在无菌PDA斜面培养基上，30°C通气培养72h，活化，长满康宁 木霉孢子； (2) 将活化好的康宁木霉孢子转接到豆柏麸皮培养基，扩大培养，即得康宁木霉种曲； 其中豆柏麸皮培养基是将豆柏和麸皮按质量比为2:8混合，再加入干料I. 1倍的水混匀、经 过灭菌得到的培养基； (3) 分别将产朊假丝酵母和产酯假丝酵母转接在PDA液体培养基上，28°C培养30h ;分 别得活化的产朊假丝酵母和产酯假丝酵母； (4) 将活化的产朊假丝酵母和产酯假丝酵母分别转接到三角瓶PDA液体培养基中， 30°C，摇床转速180rpm，培养24h，即得产朊假丝酵母一级种子和产酯假丝酵母一级种子； 分别继续扩大培养，即得产朊假丝酵母扩培液和产酯假丝酵母扩培液； (5) 将新鲜芦苇茎叶用粉碎机粉碎至2-5mm，以质量比8:2比例与麸皮混勾，加入总料 量1:1. 1的水，混匀，灭菌；得发酵原料； (6) 在发酵原料中按发酵原料总质量8%的接种量接种康宁木霉种曲，充分混匀，堆成 15cm厚度的料层，表面盖上湿布，30°C发酵56h，得康宁木霉发酵料； (7) 将氯化钙、硫酸镁和磷酸钙溶解于0. 05mol/L稀盐酸溶液中，使氯化钙、硫酸镁和 磷酸钙的总浓度为0. 15%，且氯化钙、硫酸镁和磷酸钙的质量比为1: 1:1 ;喷洒于康宁木霉 发酵料中，调节发酵料的pH在5. 0,此时发酵料的含水量约为65%，将发酵料装于密闭的塑 料桶中，45 °C酶解36h，得酶解物料； (8) 按酶解物料质量的5%添加尿素和硫酸铵，尿素和硫酸铵的质量比为1:1 ;接种假丝 酵母混菌(产酯假丝酵母扩培液与产朊假丝酵母扩培液的质量比为2:8)，总接种量为酶解 物料的10%，充分混匀，在30°C下开始发酵，在发酵24h时补加发酵料总质量3%的糖蜜和3% 磷酸氢二铵，发酵至96h结束，即得芦苇发酵高蛋白饲料。
[0039] 实施例3 (1) 将里氏木霉菌株转接在无菌PDA斜面培养基上，28 °C通气培养72h，活化，长满里氏 木霉孢子； (2) 将活化好的里氏木霉孢子转接到豆柏麸皮培养基，扩大培养，即得里氏木霉种曲； 其中豆柏麸皮培养基是将豆柏和麸皮按质量比为1:9混合，再加入干料I. 0倍的水混匀、经 过灭菌得到的培养基； (3) 分别将产朊假丝酵母和产酯假丝酵母转接在PDA液体培养基上，28°C培养28h ;分 别得活化的产朊假丝酵母和产酯假丝酵母； (4) 将活化的产朊假丝酵母和产酯假丝酵母分别转接到三角瓶PDA液体培养基中， 30°C，摇床转速200rpm，培养30h，即得产朊假丝酵母一级种子和产酯假丝酵母一级种子； 分别继续扩大培养，即得产朊假丝酵母扩培液和产酯假丝酵母扩培液； (5) 将新鲜芦苇茎叶用粉碎机粉碎至2-5mm，以质量比9:1比例与麸皮混勾，加入总料 量1:1. 2的水，混匀，灭菌；得发酵原料； (6) 在发酵原料中按发酵原料总质量10%的接种量接种里氏木霉种曲，充分混匀，堆成 18cm厚度的料层，表面盖上湿布，30°C发酵60h，得里氏木霉发酵料； (7) 将氯化钙、硫酸镁和磷酸钙溶解于0. 05mol/L稀盐酸溶液中，使三种盐的总浓度为 0. 1%，三种盐的质量比为1:1:1 ;喷洒于绿色木霉发酵料中，调节发酵料的pH在4. 8,此时发 酵料的含水量约为58%，将发酵料装于密闭的塑料桶中，45°C酶解48h，得酶解物料； (8) 按酶解物料质量的5%添加尿素和氯化铵(尿素和氯化铵的质量比为1:1)，接种假 丝酵母混菌(产酯假丝酵母扩培液与产朊假丝酵母扩培液的质量比为2:8)，总接种量为酶 解物料的15%，充分混匀，在30°C下开始发酵，在发酵24h和48h分两次翻料并补加发酵料 总质量5%的糖蜜和5%磷酸氢二铵，发酵至96h结束，即得芦苇发酵高蛋白饲料。
[0040] 实施例4 (1) 将绿色木霉菌株和里氏木霉菌株分别转接在无菌PDA斜面培养基上，28°C通气培 养96h，活化，长满绿色木霉孢子和里氏木霉孢子； (2) 将活化好的绿色木霉孢子和里氏木霉孢子种转接到豆柏麸皮培养基，扩大培养，即 得绿色木霉种曲和里氏木霉种曲；其中豆柏麸皮培养基是将豆柏和麸皮按质量比为2:8混 合，再加入干料〇. 9倍的水混匀、经过灭菌得到的培养基； (3) 分别将产朊假丝酵母和产酯假丝酵母转接在PDA液体培养基上，28°C培养28h ;分 别得活化的产朊假丝酵母和产酯假丝酵母； (4) 将活化的产朊假丝酵母和产酯假丝酵母分别转接到三角瓶PDA液体培养基中， 30°C，摇床转速150rpm，培养24h，即得产朊假丝酵母一级种子和产酯假丝酵母一级种子； 分别继续扩大培养，即得产朊假丝酵母扩培液和产酯假丝酵母扩培液； (5) 将新鲜芦苇茎叶用粉碎机粉碎至2-5mm，以质量比9:1比例与麸皮混勾，加入总料 量1:1. 2的水，混匀，灭菌；得发酵原料； (6) 在发酵原料中按发酵原料总质量10%的接种量接种绿色木霉种曲和里氏木霉种 曲，其绿色木霉种曲和里氏木霉种曲的质量比为1:1 ;充分混匀，堆成15cm厚度的料层，表 面盖上湿布，30°C发酵48h，得木霉发酵料； (7) 将氯化钙和硫酸镁溶解于0.0 lmol/L稀盐酸溶液中，两种盐的质量比为1: 1，使盐 的总浓度为0. 1%，喷洒于绿色木霉发酵料中，调节发酵料的pH在5. 0,此时发酵料的含水量 为60%，将发酵料装于密闭的塑料桶中，45 °C酶解36h，得酶解物料； (8) 按酶解物料质量的3%添加尿素和磷酸氢二铵，尿素和磷酸氢二铵的质量比为1:1， 接种假丝酵母混菌(产酯假丝酵母扩培液与产朊假丝酵母扩培液的质量比为3:7)，总接种 量为酶解物料的15%，充分混匀，在30°C下开始发酵，在发酵24h时补加发酵料总质量5%