用于制备低亚硝胺含量烟草的方法

用于制备低亚硝胺含量烟草的方法
【专利摘要】用于制备烟草的方法提供了使用栗子(欧洲板栗(Castanea sativa Mill.))单宁提取物或其级分来减少烟草亚硝胺，通过土壤或直接地在收获前的烟叶上，或在用于制造成品的烟草收获后的步骤中，将栗子单宁提取物或其级分应用到田地上的烟草作物，因此，除了减少亚硝胺之外，该方法还增加了抗氧化性和抗自由基的次级代谢物；该方法应用于所有烟草类型，例如烟熏处理的、风干处理的、明火烘烤处理的和日晒处理的烟草。
【专利说明】用于制备低亚硝胺含量烟草的方法
[0001] 发明背景
[0002] 本发明涉及用于制备烟草的方法。
[0003] 更具体地，本发明涉及用于减少烟草特有亚硝胺浓度（TSNA =烟草特有亚硝胺） 的方法。
[0004] 如已知的，亚硝胺被认为是致癌物质（IARC专题论文第89卷），且亚硝胺浓度的减 少是用于减少通常由于烟草消费和特别是来自抽吸的烟草的伤害的研宄和调查的主要目 标。
[0005] 研宄的烟草特有亚硝胺（TSNA)主要有四种：NNN(N2-亚硝基去甲烟碱）、 NNK(4-(甲基亚硝氨基）-1-(3-吡啶基）-1- 丁酮）、NAB(N2-亚硝基假木贼碱）和 NAT (N2-亚硝基新烟碱）。
[0006] 本发明不限制于以上特有亚硝胺，而是通过相似考虑在收获后期间、通过若干形 成机制、以绿色状态（green state)或新形成的状态（neoformed state)存在于烟草中的 所有亚硝胺，所述收获后期间即从烟草收获和处理（curing)、和从烟草处理、其发酵或陈化 (ageing)和储存，直到用于直接消费的熏制的产品或基于烟草的产品的制造阶段的期间。
[0007] 由于受温度、湿度和是在缺氧条件下烟草硝酸盐还原酶活性原因的细菌控制的在 烟草生物碱和若干氮化合物（硝酸盐、亚硝酸盐、NOx)之间的反应形成了以上亚硝胺。
[0008] 亚硝胺问题影响所有烟草类型：风干处理的（air-cured)如白肋（Burley)、 烟熏处理的（flue-cured)如弗吉尼亚淡色（Virginia Bright)和明火烘烤处理的 (fire-cured)如肯塔基（Kentucky)，且这仅提到主要烟草类型并没有排除其他类型。
[0009] 然而，上述问题已主要在白肋烟草和深色烟草中，作为倾向于引起TSNA的积累的 遗传因素（所谓的"转化株"株系，其中烟碱倾向于转化为去甲烟碱）、农艺学（过量的氮施 肥）、处理条件（特别是在变黄和干燥之间）和储存（温度、从叶上除去茎杆等等）的结果 而被研宄。
[0010] 在用于在烟草中减少亚硝胺的产生的可能方法的范围之内，已经提出了适合于 刺激内源性抗氧化剂物质产品的产生的机械应力诱导方法诸如根的切割[Qi Li等，在 J.Agronomy&Crop Science 192, 267-277 (2006)]，或木质部的环形切口 [Krauss 等，美国 专利 US 2003/0056801]。
[0011] 然而，由于取得的结果的不一致性和与技术方案有关的操作成本，以上调查的结 果没有发现有用的应用
[0012] 可选地，在（风干处理的）白肋烟草上，通过由UV处理所述烟草已经取得了良好 结果[Krauss等，US 2006/0016125]，所述处理可能旨在提供特定程度的烟叶的清洗以去 除是硝酸盐还原酶作用原因的细菌。
[0013] 然而，即使在以上情况下，操作和经济的不实用性阻碍了其传播。
[0014] 在一些情况下，基于操作的若干方式，还提出了外源性起源抗氧化物质的其他应 用。
[0015] 以上抗氧化物质被认为通过作为相对于亚硝酸盐的"清洁者"操作来抑制亚硝胺 形成，所述亚硝酸盐形成于烟草处理和储存中并促进生成亚硝胺的反应。
[0016] 在这一点上，应当指出绿色烟叶包含可限制TSNA形成的显著量的生育酚和多酚。
[0017] 例如，在弗吉尼亚淡色烟草中，28. 7%的全部抗氧化能力由绿原酸组成而11. 5% 由芦丁组成，然而在白肋中，以上比例分别减少到13. 4%和6. 2%。
[0018] 然而，以上物质倾向于在烟草处理中损失：在最初14天在白肋中损失从50 %到 80%，其中绿原酸和芦丁含量减少到相对于在收获时含量的少于15% (Li等，2006)。
[0019] 在外源性抗氧化物质的范围内，专利文献检查了与碳酸氢钠、抗坏血酸、谷胱甘肽 和硒（Krauss等，在2003年3月27日的US 2003/0056801 Al)或阿魏酸及其酯类（Thomas 等，在2012年7月20日的US7, 757, 697B2)组合的未指明的性质的抗氧化混合物，所述抗 氧化混合物在醇溶液和表面活性剂混合物中应用于烟草收获前的操作和烟草收获后的操 作两者中。
[0020] 然而，专利发明到目前为止没有产生商业化工艺，这是由于应用制备方式和其成 本，还涉及药物程度的抗氧化物质的使用，还不能提供从技术和经济结果的观点上可开发 的处置工艺。
[0021] 该实践性结果在第242届ACS国家会议中得到进一步强调，该会议在美国丹 佛（科罗拉多州）于2011年8月28日用题目为"Carcinogenic nitrosamines in U. S. cigarettes: Three decades of remarkable neglect by the tobacco industry (在 美国香烟中的致癌性亚硝胺：烟草工业明显忽视的三十年）"的文献启动了其工作，其中特 别提到 "apparent lack of effort to control the levels of these carcinogens in cigarette tobacco and smoke by the cigarette manufacturers (香烟制造商明显缺少 控制在香烟烟草和烟雾中的这些致癌物的水平的努力）"。
[0022] 发明概述
[0023] 本发明的目的在于提供用于制备克服了以上提及的现有技术缺点的烟草的方法。
[0024] 在上述目标的范围内，本发明的主要目的在于提供具有抗氧化特征的基于使用植 物性质提取物或其标准化的级分的这样的烟草制备方法。
[0025] 根据本发明的一个方面，通过下述用于制备烟草的方法实现以上提及的目的和目 标以及将在下文中变得更加明显的其他目标：所述方法的特征在于所述方法包括使用栗子 (chestnut)单宁提取物或其级分来减少烟草亚硝胺形成。
[0026] 附图简述
[0027] 从优选的，但不是排他性的本发明的实施方案的以下详细公开内容中，本发明的 另外的特征和优势将变得明显，所述本发明的实施方案是以指示性但并非限制性实例的方 式被说明在附图中，其中：
[0028] 图1显示了与在280nm下记录的栗子木材级分6液体提取物相关的色谱图谱；
[0029] 图2显示了与在280nm下记录的栗子木材喷雾干燥的提取物水溶液相关的色谱图 谱；
[0030] 图3是显示在实施例2中通过其将源自第四收获的弗吉尼亚淡色栽培变种 VFC-ITB678 栽培（Virginia Bright cv. VFC-ITB678cultivation)的顶叶分为具有两个重 复的7个样品的方法的表；
[0031] 图4显示了在实施例2中涉及第一分析系列（L系列）的样品中的一个的亚硝胺 含量的数据；
[0032] 图5显示了与在254nm下（在顶部）和在330nm下（在底部）获得的CHVOl样品 (试样）的水醇（hydroalcoholic)提取物相关的色谱图谱；
[0033] 图6是存在于从实施例4的样品中取得的水醇提取物中的单独的次级代谢物和烟 碱的定性-定量分析表；
[0034] 图7显示了 CHV系列的弗吉尼亚淡色烟草样品的全部黄酮醇（fIavonolic)衍生 物和全部轻基肉桂酸（hydroxycinnamic)衍生物的含量的柱形图；
[0035] 图8显示了 PV系列的弗吉尼亚淡色烟草样品的全部黄酮醇衍生物和全部羟基肉 桂酸衍生物的含量的柱形图；
[0036] 图9显示了 RB系列的白肋烟草样品的全部黄酮醇衍生物和全部羟基肉桂酸衍生 物的含量的柱形图；
[0037] 图10显示了 BEB系列的白肋烟草样品的全部黄酮醇衍生物和全部羟基肉桂酸衍 生物的含量的柱形图；
[0038] 图11是显示如对实施例2的样品所测量的TSNA含量的表；和
[0039] 图12是显示如对实施例4的样品所测量的TSNA含量的另外的表。
[0040] 优选实施方案的描述
[0041 ] 如已知的，栗子单宁提取物以可水解的单宁的存在为特征，所述可水解的单宁大 体上由部分地或完全地用D-葡萄糖分子酯化的酚基诸如没食子酸或鞣花酸组成：通过 FRAP测试（三卩比啶基三嘆（tripiridylt;riazine)/Fe(ni)络合物还原为蓝色亚铁形式，且 在593nm下吸光度增加）确定的水提取物的抗氧化活性是大于每毫克的提取物3, 500纳摩 当量的抗坏血酸。产物和其标准化的级分还提供了微弱的抗真菌作用和抗微生物作用。
[0042] 意外地已经发现了在以下时期进行的、将在水中的栗子单宁提取物或其标准化 的级分应用于烟草减少了 TSNA形成而不改变烟草的其他外在特征（例如烟叶颜色、硬度 (consistency)和芳香）和内在特征（例如烟碱和还原糖含量），成熟程度是一样的：所述 时期为在烟草作物（plant)的田地上生长直到其收获期间、或在其收获之后、在其中（通过 烟熏处理方法）处理弗吉尼亚淡色烟草的篮子中包装时、或在烟草风干处理棚中的整个白 肋烟草叶或作物行（plant string)形成时、或紧接肯塔基烟草烤干处理前或其处理期间以 及在从处理到成品的制造的连续的时间期间。通过在Li等在J. Agronomy&Crop Science 192, 267 - 277 (2006)中公开的方法确定TSNA。
[0043] 不同于到目前为止提出的其他抗氧化物质，栗子单宁提取物或其标准化的级分还 以不改变烟草的天然味道的芳香为特征，这具有很大的技术优势。此外，该提取物是在农业 烟草栽培中已经使用的产品，虽然用于其他目的，例如用于调整土地和灌溉用水pH和作为 生长刺激剂，如例如在以下文献中公开的：分别在Nuova Rivart S.p. A(目前加入到本申请 人中）名下和在Sadepan Chimica S. P. A名下（属于Saviola控股）的在2003年8月26 日的EP 1，464, 635 (Al)和2011年1月14日的EP 2, 345, 628 (Al)。本专利申请对于所有 预期效果是上述专利申请的继续和发展。
[0044] 不限制进一步可能的用途，在本发明中以1%到37%、优选地以13%单宁和其级 分的液体形式使用栗子单宁提取物。这些产品可被递送：1)在苗床和田地上的后续生长阶 段中，通过灌溉用水或特别地制备的施肥材料被递送到接近烟草作物的土地上；2)在全部 收获之前的时期中和更具体地在作物剪切操作期间和在从收获之前10天到紧接完全收获 之前的时期中，且更具体地从在收获之前的3天到1天，被递送到烟草作物（作为整体收获 的作物）或递送到烟叶（在冠部收获的）。在后续的收获冠部的收获的情况下，应用次数将 对应于收获操作次数。对于整个作物收获，执行单次递送；3)被递送到作为用于后续烟草 处理的收获的整个烟草作物或烟叶，所述后续烟草处理基于不同类型：烟熏处理的、风干处 理的、烘烤处理的和日晒处理的（sun-cured)(东方烟草（oriental tobaccos))。在一些烟 草类型中，例如弗吉尼亚淡色、白肋和肯塔基，处置还可通过连续工序来执行，即从处理到 成品制造，例如在所谓的"击打（beating)"步骤中（从叶肋（leaf rib)上分离叶片（leaf sheet)或叶网（web))。
[0045] 如果直接或者通过灌溉用水或肥料材料应用于接近烟草作物的土壤，则通过在烟 草生长周期期间以若干次处置施用多至50千克/公顷（kg/ha)单宁，来以从0. 1%到50% 且优选地从5%到10%的浓度应用在13%溶液中的栗子单宁提取物或其级分。
[0046] 对于收获前在整个烟草作物或烟叶的应用，通过在单次收获操作之前的连续处置 中递送多至20千克/公顷单宁，使用了从0. 1 %到5%且优选地从1 %到3%的浓度。
[0047] 最后，如果在收获的烟草上执行应用，浓度是从0.5%到10%且优选地从1 %到 5%。在该情况下，应用了每平方米叶面多至相应于约0. 65克单宁或其级分的50ml溶液。
[0048] 对于向土壤的应用，栗子单宁提取物或其级分优选通过传统混合装置被溶解于灌 溉用水或液体肥料中，并且例如通过微灌溉（micro-irrigating)方法被递送。
[0049] 如果载体包含固体肥料，后者优选地涂抹于烟草作物上，以增加其吸收。
[0050] 对于向烟叶的应用，在收获前和收获后操作两者中，通过在农场中使用的常规喷 洒设备喷洒栗子单宁提取物和其级分，所述喷洒设备通过将其雾化来喷洒液体产品，因此 增加液滴和叶面之间的接触面。
[0051] 公开了以下实施例仅用于阐述本发明且其不限制由所附的权利要求书所限定的 发明范围。
[0052] 实施例1
[0053] 涉及栗子单宁提取物的分级和其有用的级分的实例
[0054] 已分析了通过膜法从栗子木材热水提取和冷分级系统获得的样品。
[0055] 特别地，已经检查了以下级分：
[0056] 过滤的单宁汤（tannic broth);
[0057] 纳滤渗透物I ;
[0058] 纳滤浓缩物I ;
[0059] 纳滤浓缩物II ;
[0060] 纳滤渗透物II ;
[0061] 纳滤浓缩物III;
[0062] 渗透渗透物（osmosis permeate);
[0063] 渗透浓缩物；
[0064] 澄清沉淀物。
[0065] 为了执行HPLC分析，已经使用了具有由H2O (ρΗ3· 2因为HCOOH) (A)和CH3CH⑶组 成的流动相的 Luna C18250x4. 60mm, 5 μπι柱（Phenomenex, Torrance, CA)。已经应用 了持续 55分钟的具有0. 8mL/min流速的4阶段的线性梯度。所用的洗脱图谱如下：在起始100% A，然后在20分钟内使溶剂A达到85 %，同时保持其恒定5分钟，在10分钟内减少到75 %， 进一步保持恒定8分钟，最终在5分钟内恢复到0% (100% B)并保持恒定4分钟，以在3 分钟内恢复到起始条件。已经通过没食子酸将没食子衍生物校准到280nm，且已经通过鞣花 酸将鞣花衍生物校准到254nm。
[0066] 通过实例的方式，图1和图2显示了与两个级分相关的色谱图谱：通过纳滤浓缩物 (级分6)获得的具有1. 06的比重的第一级分，液体级分（图1)，通过喷雾干燥该第一级分 获得的第二级分（图2)。
[0067] 图1中显示的参考数字涉及以下组分：1.没食子酸；2.单没食子酰基葡萄糖 (monogalloyl glucose) ;3·没食子单宁（gallotannin)m/z 677 ;4·五没食子酰基葡萄糖； 5.没食子酰基-HHDP葡萄糖；6. HHDP葡萄糖；7.鞣花单宁m/z 925 ;8.栗木鞣花素/栎木 親花素（vescalagin) ;9.親花单宁m/zl，085;10.親花酸。
[0068] 图2中显示的参考数字涉及以下组分：1.单没食子酰基葡萄糖；2.没食子酸； 3.二没食子酰基葡萄糖；4.三没食子酰基葡萄糖；5.四没食子酰基葡萄糖；6.英国栎鞣花 酸同分异构体（Pedunculagin isomer) ;7·親花单宁m/z 683 ;8·親花单宁m/z 925 ;9·栗 木鞣花素/栎木鞣花素；10.鞣花单宁m/z 613 ;11.没食子酰基-HHDP葡萄糖；12.鞣花酸。
[0069] 除以上两个级分之外，分析了源自相同膜制备方法的其他级分。
[0070] 实施例2
[0071] 在位于意大利 Cittdidi Castello (PG)的 Fattoria Autonoma Tabacchi (在 "Citt^di Castello"地区的栽培者）进行的在对弗吉尼亚淡色（V. Bright)烟草的收获后 操作中的应用
[0072] 如图3的表中所显示的，已经将从第四次收获获得的弗吉尼亚淡色栽培变种 VFC-ITB678栽培的顶叶分为具有两个重复的7个样品，所述顶叶经受了所公开的实验性处 置并通过如本领域技术人员所公知的适合的处理方法处理。
[0073] 茶维力（Teavigo)，一种在生物医药领域和功能性食品中所用的绿茶的浓缩的提 取物，基本上由具有97% (HPLC)的浓度的单宁没食子酸酯单体缩合物组成；因此，5g/l的 浓度相当于约IOmM单宁。
[0074] 由于其对于生物医学和食品所关注的微生物的公知的抗微生物活性和抗真菌活 性，为这些实验特别地选择了茶维力。
[0075] 栗子单宁是具有4. 6% (HPLC)的单宁滴定度或单宁含量的1-8级分的混合物；因 此，115g/l的浓度相当于约IOmM单宁。
[0076] 以下将公开用于制备分析或测试样品的方法。
[0077] 对热水洗涤物和提取物称重：
[0078] CHV01 :752. Img
[0079] CHV02 :752. 6mg
[0080] CHV03 ：752. Omg
[0081] CHV04 ：749. 8mg
[0082] CHV05 ：751. 4mg
[0083] CHV06 ：749. 6mg
[0084] CHV07 ：750. 6mg
[0085] CHV05,用于煎煮而没有洗涤：751. 7mg
[0086] 将称重的样品切成小尺寸块。
[0087] 洗涤物：
[0088] 已经将样品1-7放入烧瓶中并通过用10. OmL Millipore水手动搅拌约2分30秒 来洗涤。通过吸管吸出了洗涤水，且然后将精确体积的洗涤溶液浓缩5:1，离心并放入小瓶。
[0089] 热水提取物：
[0090] 洗涤的样品已被放干，且然后用50. OmL Millipore水在搅拌下被保持在沸腾条件 持续15分钟。如此获得的提取物已被冷却，在减压下过滤，达到精确体积，离心并被放入小 瓶用于 HPLC/DAD/ESI-MS 分析。
[0091] 没有洗涤的热水提取物：
[0092] 将没有洗涤的样品8号（另外的CHAV05称重）放入有50. OmL Millipore水的烧 瓶并保持沸腾条件下持续15分钟，且然后冷却并在减压下过滤。然后，使其达到精确体积 并放入小瓶中。
[0093] 水醇提取物：
[0094] 对每个样品（CHVOI - CHV07)，已经称重了 I. 0克的植物材料。已经将称重的材料 切成小块并在因为甲酸的PH3. 2下的50. OmL Et0H/H20 70:30中搅拌。
[0095] 在20小时后，样品在减压下过滤，达到精确体积并被放入小瓶。
[0096] 通过以上制备方法，制备了以下样品：
[0097] 洗涤物：CHV01L、CHV02L、CHV03L、CHV04L、CHV05L、CHV06L、CHV07L (L 系列）。
[0098] 在洗涤之后的热水提取物：CHV01D、CHV02D、CHV03D、CHV04D、CHV05D、CHV06D、 CHV07D(D 系列）。
[0099] 没有洗涤的热水提取物：CHV05DT。
[0100] 水醇提取物：CHV01E、CHV02E、CHV03E、CHV04E、CHV05E、CHV06E、CHV07E (E 系列）。
[0101] HPLC/DAD 和 HPLC/DAD/MS 定性-定量分析
[0102] 进行了这些分析以评估加工的烟叶的烟碱、亚硝胺且特别是TSNA(烟草特有亚硝 胺）和由烟草作物产生的次级代谢物的含量。
[0103] 通过使用 Luna C18250x4. 60mm, 5 μ m 柱（Phenomenex, Torrance, CA)已经执行了 HPC/DAD/MS HPLC分析。在此使用的流动相由因为HCOOH而酸化到pH 3.2的H2O(A)和 CH3CN⑶组成。在此已经应用了具有0. 8mL/min流速（flow-rate)持续55分钟的4个坡 度或阶段的线性梯度。已经使用了以下洗脱图谱：在起始100% A，然后在20分钟内使A溶 剂达到85%，保持恒定5分钟，在10分钟内减少到75%，保持恒定8分钟，最终在5分钟 内恢复到0% (100% B)。已经将羟基肉桂酸衍生物校准到330nm，将黄酮醇衍生物校准到 350nm且烟碱及相关的衍生物校准到254nm。
[0104] 通过实例的方式，图4显示了与第一分析系列（L系列）的样品之一相关的烟碱和 亚硝胺含量的数据。
[0105] 对于化学参数，扩展的不确定性数值（extended uncertainty value)是指95%置 信范围。
[0106] 测定限（determining limit) (LOD)等于 1/10L0Q*3〇
[0107] N. D.=少于 LOQ(定量限）。
[0108] 由于多酚抗氧化物质羟基肉桂酸和类黄酮具有高定性-定量含量，没有形成亚硝 胺前体亚硝酸盐。所用的程序由评估在处理时间期间被每个样品消耗的、通过应用表面处 理（processing)的分子数量和当前抗氧化代谢物的总含量和单独的分子所组成。通常，未 加工的样品具有更少含量的保护性抗氧化物质，其定性-定量含量对于不同加工的样品随 着不同处置水平而增加。
[0109] 已经发现了所有样品具有低于法定阀值的卫生学上安全的亚硝胺含量，因此根据 本发明的方法提供了样品随时间流逝的非常高质量的和卫生的特征。此外，可以说通过阻 止亚硝胺含量在烟草储存期间增加，天然地存在于烟草中的抗氧化物质的正增加通过协同 类型的作用提供了随时间推移对烟草样品的保护。
[0110] 通过实例的方式，图5显示了在没有加入单宁溶液下处理的烟叶的水醇提取物 (参考样品CHV01)的色谱图谱，其中的词语是指鉴定的化合物。
[0111] 在图5中的参考数字显示了以下组分：1.烟碱；2.单咖啡酰奎尼酸I ;3.单咖啡 酰奎尼酸II ;4.单咖啡酰奎尼酸III ;5.鼠李糖基（ramnosyl)-葡萄糖苷槲皮素；6.鼠李 糖基-葡萄糖苷山柰酚。
[0112] 如在图5和图6中的表所显示的，所公开的分析方法允许鉴定和定量在烟叶中存 在的生物碱以及具有抗氧化和抗自由基活性的多酚提取物。通过根据以上公开的方法特别 设计的校准曲线校准了单独的衍生物，因此提供了涉及单独的化合物和化学亚类两者的定 量数据。
[0113] 在图6的表中显示了源自检查的样品的水醇提取物的单独的次级代谢物和烟碱 的定性-定量分析，数据被表达为每克采样的植物材料的毫克数。
[0114] 图7-图10中的柱状图显示了对四个系列样品评估的全部黄酮醇衍生物和全部羟 基肉桂酸衍生物含量，其前两个（CHV系列和PV系列）由弗吉尼亚淡色烟叶组成，而其他两 个（RB和BEB系列）由白肋烟叶组成。
[0115] 已通过对在处理过程之后的烟叶水醇提取物所公开的相同方法进行了分析或测 试，且结果以每克植物材料多酚毫克数表示。
[0116] 四个被检查的系列的每一个都是对其通过栗子单宁溶液、茶维力和绿茶溶液（分 别为1(^凡、10(^/1、20(^/1和0.58/1、5.(^/1、10.(^/1)已经进行了6次不同处置的烟草 样品系列。除了"RB"系列样品以外，在所有样品中都出现了黄酮醇衍生物和羟基肉桂酸衍 生物两者，在所述"RB"系列样品中仅出现了痕量的羟基肉桂酸衍生物。在4个分析的系列 中，烟碱含量从12mg/g到43mg/g植物材料变化。
[0117] TSNA含量-由Li等，2006公开的方法
[0118] 在图11中的表显示了取得的结果，所述结果表明通过进行处置，已经获得相对于 参考样品总TSNA含量的减少。
[0119] 实施例3
[0120] 由在Citt^di Castello地区的3位农夫（称为F、B和S)在弗吉尼亚淡色烟草上 进行收获后的应用
[0121] 在该试验中所用的栗子单宁是浓缩的液体提取物（级分6,从如实施例1中的纳滤 III中浓缩的），其被稀释到IOmM多酚的浓度。
[0122] 这里以下的表显示了用于表征单独的烟草组分执行的定性-定量分析。
[0123]
【权利要求】
1. 一种用于制备烟草的方法，其特征在于所述方法包括使用栗子单宁提取物或其级分 以减少烟草亚硝胺的形成。
2. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于通过物理方法专门地浓缩所述栗子单宁提 取物或其级分而没有使用化学添加剂。
3. 根据权利要求2所述的方法，其特征在于所述物理方法由反渗透和纳滤组成。
4. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于将通过灌溉水或施肥材料运送的所述栗子 单宁提取物或其级分应用于接近烟草作物的土壤。
5. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于在收获前操作中将所述栗子单宁提取物或 其级分应用于整个烟草作物或烟叶。
6. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于在收获后操作中将所述栗子单宁提取物或 其级分应用于整个烟草作物或烟叶。
7. 根据权利要求4所述的方法，其特征在于在烟草生长周期期间的若干操作中，将所 述栗子单宁提取物或其级分作为具有从〇. 1%到50%、优选地从5%到10%的浓度的水溶 液应用。
8. 根据权利要求5所述的方法，其特征在于在每次烟草收获操作前的连续处置中，将 所述栗子单宁提取物或其级分作为具有从〇. 1%到5%、且优选地从1%到3%的浓度的水 溶液应用。
9. 根据权利要求6所述的方法，其特征在于在烟草收获后，将所述栗子单宁提取物或 其级分作为具有从〇. 5%到10%、优选地从1%到5%的浓度的水溶液应用。
10. 根据权利要求8和9所述的方法，其特征在于所述方法包括应用每平方米烟叶表面 多至50ml的所述水溶液的步骤。
11. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述烟草是烟熏处理的、风干处理的、明 火烘烤处理的和日晒处理的类型或其混合物。
12. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述方法包括收获后步骤，所述收获后步 骤包括制备待处理的烟草、处理制备的烟草、保存处理的烟草和执行所有制造加工步骤以 提供基于烟草本身或与其他组分的混合物的商品。
13. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于相对于未加工的烟草，所述栗子单宁提取 物或其级分使加工的烟草的亚硝胺含量减少了 10%到50%。
14. 一种用于制备烟草的方法，其特征在于所述方法包括使用茶维力以减少烟草亚硝 胺形成的步骤。
15. 根据权利要求1和14所述的方法，其特征在于所述方法允许控制加工前的和加工 后的烟草质量，所述控制是通过定性地检测和单独地定量生物碱类和具有显著抗氧化和抗 自由基性质的多酚特性的次级代谢物，且特别是黄酮醇衍生物和羟基肉桂酸衍生物。
【文档编号】A24B15/30GK104519759SQ201380042038
【公开日】2015年4月15日 申请日期:2013年7月31日 优先权日:2012年8月8日
【发明者】塞尔吉奥·米勒, 安娜莉萨·罗马尼, 艾瑞卡·巴尔贾基, 玛格利塔·坎波 申请人:格鲁普莫罗萨维奥拉股份责任有限公司, 法托里亚奥托罗玛塔巴基公司