专利名称：一种抗病毒复方中药及制备方法
技术领域：
本发明涉及中药技术领域，确切地说它是一种以中草药为原料的纯中药制剂——一种抗病毒复方中药及制备方法。
病毒性疾病在全球呈逐步上升趋势，如肝炎病毒、疱疹病毒、流感病毒、呼吸道病毒以及人免疫缺陷病毒(HIV)既艾滋病病毒等。因此，世界抗病素药物总需求呈前所未有的坚挺，近几年世界抗病毒药物销量猛增，我国也是一样。抗病毒药物的年增长率超过10％，但其中绝大部分为合成类药，中药制剂且较少，而注射剂就更为少见，只有双黄连注射剂一种。我国中药资源丰富，这为我们寻找中药抗病毒药物提供了保障。
本发明的目的是提供一种疗效确切的抗病毒复方中药及制备方法，它具有良好的抗病毒、抗菌、抗炎等医药用途，并可制成注射剂、胶囊剂、冲剂、口服液等药用剂型，并且工艺稳定，易于实现。
本发明的目的是通过如下方案实现的，它包括黄芩、苦参提取物和辅料，其特征在于黄芩提取物与苦参提取物的重量比为2～6∶0.5～2.0，其余为辅料。所说的辅料是甘露醇、乳糖、糊精、淀粉、糖粉。本发明的制备工艺如下a.制取黄芩提取物，取黄芩，粉碎成最粗粉，加水煎煮二次，第一次加10倍量水煎煮2小时，第二次加8倍量水煎煮1小时，滤过，合并煎液，加盐酸调pH值至1-2，80℃保温1小时，室温放置24小时，滤过，沉淀物与药材等量水搅匀，用40％氢氧化钠调pH值至7，充分搅拌，加1倍量95％乙醇，混合均匀，抽滤，滤液再加盐酸调pH值至1-2，80℃保温1小时，室温放置24小时，滤过，沉淀用5倍量95％乙醇抽洗三次，抽干，于60℃真空干燥2小时，粉碎即得；b.制取苦参提取物，取苦参药材，粉碎成最粗粉，按《中国药典》(2000年版)一部附录IO流浸膏与浸膏剂项下，渗漉法的要点要求进行渗漉，渗漉溶剂为0.1％盐酸，渗漉液通过阳离子交换树脂柱，交换完毕后，将树脂倾入容器中，用水洗涤至水液澄清，抽干，再将树脂置盘中风干，风干后树脂加入浓氨水适量，拌匀，闷置30分钟，使碱化完全，挥尽多余氨，装入索氏提取器中，用氯仿回流提取3小时，氯仿提取液加入无水硫酸钠进行脱水，搅拌后放置30分钟，过滤，回收氯仿至近干，加入丙酮—乙醚(1∶1)混合溶剂少量，放置，析晶，析出粗晶置垂熔漏斗中，用少量丙酮—乙醚(1∶1)混合溶剂洗涤数次，抽滤，然后于60℃真空干燥2小时即得；c.将黄芩提取物与苦参提取物按2～6∶0.5～2.0的重量比混合加入甘露醇混匀制成药用剂型。以黄芩提取物与苦参提取物混合制成的抗病毒、抗菌和抗炎的药物。
本发明的优点是提供了一种疗效比较确切的中药抗病毒制剂，它可以制成多种剂型，包括注射剂，为黄芩和苦参的应用提供了一条新的途径。生产工艺比较稳定，易于实现。
下面结合附图和实施例对本发明作进一步详细的描述。
图1为本发明验证药物抗病毒复方中药体内抗流感病毒药效实验表。
图2为本发明抗病毒复方中药和阳性对照药双黄连粉针对小鼠感染不同浓度的FM1病毒的治疗结果表。
图3为本发明验证药物抗病毒复方中药体内抗流感到遗憾病毒药效实验表。
图4为本发明抗病毒复方中药对89株致病菌的抑菌作用表。
图5为本发明抗病毒复方中药对金黄色葡萄球菌感染小白鼠的保护作用表。
图6为本发明抗病毒复方中药对肺炎链球感染小白鼠的保护作用表。
图7为本发明抗病毒复方中药对A型溶血性链球菌感染小白鼠的保护作用表。
图8为本发明抗病毒复方中药对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响表。
图9为本发明抗病毒复方中药对大鼠琼脂肉芽肿形成的影响表。
图10为本发明抗病毒复方中药对大鼠琼脂肉芽肿形成的影响图。
图11为本发明注射用效荣对肺炎链球菌感染小白鼠的保护作用图。
图12为本发明注射用效荣对A型溶血性链球菌感染小白鼠的保护作用图。
图13为本发明注射用效荣对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响图。
图14为本发明注射用效荣对大鼠琼脂肉芽肿形成的影响图。
发明人在研制过程中为了证明本发明的抗病毒、抗菌和抗炎作用作了下述的实验研究1、抗病毒(一)抗病毒复方中药抗病毒作用的试验(1)病毒毒力的测定将制备的新鲜病毒悬液(甲1型FM1鼠肺适应株)用生理盐水10倍连续稀释5个稀释度(10-1～10-5)。将已稀释的病毒液接种于小鼠(用乙醚轻度麻醉，滴鼻接种)，每个稀释度接种10只，每只接种量0.03ml。逐日观察小鼠发病及死亡情况，同时设正常小鼠对照。以Reed-Muench法计算其半数致死量(LD50)。
(2)药物毒性测定将抗病毒复方中药对小鼠静脉注射的最大无毒浓度为360mg/kg。口服用药的最大无毒浓度为4g/kg。阳性药物最大无毒剂量基本同验证药物。
(3)小鼠抗流感到遗憾病毒感染的疗效测定(观察小鼠死亡数和平均生活日)①固定病毒稀释药物组小鼠分组感染，随机分组，每组10只。给药前2～4小时滴鼻感染病毒，病毒感染量为10LD50。验证药物和阳性对照药物均以尾静脉缓慢注射和口服给药，每浓度接种10只小鼠。尾静脉注射选用以最大无毒浓度320mg/kg二倍稀释4个浓度，口服给药以最大无毒浓度4g/kg二倍稀释4个浓度。每日二次，连续给药6天。记录小鼠死亡数和平均生活日，观察14天。同时设药物对照(小鼠不感染病毒照常给药)、病毒对照(小鼠感染病毒后不给药)及正常小鼠对照。
重复实验三次。
②固定药物稀释病毒组小鼠分组感染昆明种小鼠，按性别随机分组，每组10只。小鼠滴鼻感染FM1病毒液0.03ml/只，按不同浓度的病毒量分别为12LD50、1.2LD50、0.12LD50接种小鼠。2小时后小鼠尾静脉缓慢注射验证药物和阳性对照药物，320mg/kg，每日二次，共6天。记录小鼠死亡数和平均生活日，观察14天。
同时设药物对照(小鼠不感染病毒照常给药)、病毒对照(小鼠感染病毒后不给药)及正常小鼠对照。
(二)抗病毒复方中药抗病毒作用的试验结果(1)药物对动物毒性的测定抗病毒复方中药药物对小鼠的毒性实验结果。
①小鼠尾静脉注射的最大无毒浓度为360mg/kg，实验选用320mg/kg。
②小鼠灌胃的最大无毒浓度为4g/kg。
③阳性药物实验结果基本相同。
(2)甲1型流感病毒鼠肺适应株(FM1)经小鼠滴鼻感染测定其半数致死量(LD50)为(10-3.68)。
(3)抗病毒复方中药抗呼吸道病毒治疗结果①小鼠尾静脉缓慢注射抗病毒复方中药(观察小鼠死亡数和平均生活日)固定病毒稀释药物组小鼠经滴鼻感染FM1病毒量10LD50，2小时后静脉注射验证药物和阳性药物，分别为320mg/kg、160mg/kg、80mg/kg、40mg/kg，每日2次，共6天。观察小鼠发病和死亡情况，记录死亡率，平均生活日及治疗指数。三次实验结果见附图1。试验其死亡率的ED50均为80mg/kg，生活日数的ED50分别为81mg/kg和84.7mg/kg。两种药物经统计学处理无显著差异，P值＜0.01，说明抗病毒复方中药具有抗流感病毒的作用。与病毒对照比较，其结果显著。依据上述结果，抗病毒复方中药的治疗指数＞8。
固定药物稀释病毒组小鼠经滴鼻感染0.12、1.2和12LD50病毒量的病毒，感染2小时后小鼠尾静脉注射验证药物和阳性药物，浓度为320mg/kg，每日2次，共6天。观察小鼠发病和死亡情况，记录死亡率、平均生活日数及治疗指数。实验结果见附图2。结果表明两种药物均可降低小鼠死亡率，延长生活日数。药物效果与病毒感染量有关，病毒量越小，抗病毒效果越好，病毒感染量大，效果降低。FM1病毒量12LD50感染小鼠，病毒对照组小鼠死亡率为100％，给药组死亡率分别为20％和30％。FM1病毒1.2LD50和0.12LD50感染小鼠，病毒对照组小鼠死亡率为40％和20％，给药组死亡率分别为0％，保护率为100％。
与阳性药物结果相似。
②小鼠灌胃给予抗病毒复方中药(观察小鼠死亡数和平均生活日)小鼠经滴鼻感染FM1病毒量10LD50，2小时后小鼠灌胃给予验证药物和阳性药物，浓度分别为4000mg/kg、2000mg/kg、1000mg/kg、500mg/kg，每日2次，共6天。观察小鼠发病和死亡情况，记录死亡率ED100，生活日数及治疗指数。三次实验结果见附图3。实验结果表明，验证药物和阳性药物死亡率的ED50均为983mg/kg和500mg/kg，生活日数的ED50分别为982.6mg/kg和539.1mg/kg。两种药物经统计学处理无显著差别，但比静脉注射比较有显著差异。说明静脉注射抗病毒复方中药具有非常显著的抗流感病毒的作用。
2、抗菌
(一)抗病毒复方中药抗菌作用的试验(1)抗病毒复方中药体外抗菌作用最低抑菌浓度(MIC)测定将一定量菌液接种于含不同浓度药物的M-H琼脂培养基上，同时设不加药的空白对照组，只接种菌液，将接种菌液的培养基置于37℃、5％CO2环境培养24小时阅读结果如附图4如示。抗病毒复方中药体外对临床分离呼吸道常见细菌有一定抑菌作用，肺炎链球菌MIC50为1000mg/L，A型溶血性链球菌MIC50为2000mg/L，B型链球菌MIC50为1000mg/L，金黄色葡萄球菌MIC50为2000mg/L。
(2)抗病毒复方中药动物体内抗菌作用将受试小鼠随机分成7组，每组10只，雌雄各半，每天静脉注射给药1次，连续7天，对照组静注生理盐水，抗病毒复方中药设3个剂量组分别为40.0mg/kg、80.0mg/kg、160.0mg/kg，另设80.0mg/kg灌胃给药组、双黄连冻干粉针组剂量为900.0mg/kg。琥乙红霉素组剂量为260.0mg/kg。于染菌后1h、6h灌胃给药。给药容积均为0.2ml/10g。
经予试验确定各种感染菌液含菌量，每只小鼠腹腔注射0.5ml。染菌后观察7天，记录每组动物死亡数，以各组小鼠生存率与对照组比较，X2检验(简化直接概率法)做显著性测定。试验结果如附图5、6、7及附图10、11、12所示，表明高中剂量组对染菌小白鼠有一定保护作用，与对照组比较有显著差异。
3、抗炎(一)抗病毒复方中药抗炎的药效试验(1)抗病毒复方中药对二甲苯小鼠耳肿胀的影响将受试小鼠随机分成7组，给药方案如表7所示，于给药后半小时，每组每只鼠右耳壳内外涂二甲苯0.05ml/只，1小时后，将受试小鼠脱颈处死，沿耳廓基缘前下双耳，用直径为0.9cm打孔器在双耳同一部位打下两耳片，称重，以左右耳差值(肿胀度)进行比较，显著性测定。试验结果如附图8、附图13所示，中高剂量组对小鼠耳肿胀有明显抑制作用，与对照组比较有显著差异。附图8中与对照组比较*P＜0.05。
(2)抗病毒复方中药对琼脂致大鼠肉芽肿的影响将受试大鼠随机分组，设对照组、抗病毒复方中药30.0mg/kg、60.0mg/kg、120.0mg/kg3剂量组iv给药，抗病毒复方中药60.0mg/kg ig给药；及两对照药组双黄连粉针650.0mg/kg，醋酸泼尼松3mg/kg。
在乙醚浅麻下消毒后在每只鼠背中线皮下注射2％琼脂溶液2ml后开始给药每天1次，连续15天，于末次给药后处理动物，取出肉芽肿称重，以肉芽肿重为指标进行组间比较显著性测定，试验结果如附图9、附图14所示，抗病毒复方中药144mg/kg组大鼠琼脂肉芽肿形成明显小于对照组其间有显著差异。
实施例1、抗病毒复方中药(注射用粉针剂)处方黄芩提取物 88g(相当于黄芩苷80g)苦参提取物 20g(相当于氧化苦参碱15g)甘露醇 100g制成冻干粉针1000支制法在无菌条件下(或超净台内操作)将处方量提取物和支持剂甘露醇，加注射用水，加热溶解，加注射用活性炭，加热滤过，-40℃分装1000支，冷冻后，升温、冻干。
性状本品为黄白色无定形粉末或疏松固体状物、味苦、涩、有引湿性。
功能与主治消热解毒、杀虫。用于外感风热、邪在肺卫、急性上呼吸道感染、急性支气管炎、急性扁桃体炎、轻型肺炎见上述症状者。
用法与用量静脉滴注。每次每千克20mg。一日一次或遵医嘱。临用前，先以适量灭菌注射用水溶解，再以生理盐水或5％葡萄糖注射液500ml稀释静滴。
注意本品与氨基糖苷类(庆大霉素、卡那霉素、链霉素)及大环内酯类(红霉素、白霉素)等配伍易产生浑浊或沉淀，请勿配伍使用。
规格每支200mg。
贮藏密封、避光、置阴凉处。
2、抗病毒复方中药(胶囊剂)处方黄芩提取物 88g(相当于黄芩苷80g)苦参提取物 20g(相当于氧化苦参碱15g)甘露醇 100g装入胶囊1000粒制法将处方量提取物和支持剂甘露醇，混匀，装入胶囊即得。
性状本品为黄白色无定形粉末或疏松固体状物、味苦、涩、有引湿性。
功能与主治消热解毒、杀虫。用于外感风热、邪在肺卫、急性上呼吸道感染、急性支气管炎、急性扁桃体炎、轻型肺炎见上述症状者。
用法与用量口服。每次两粒。一日三次或遵医嘱。
规格每粒200mg。
贮藏密封、避光、置阴凉处。
3、抗病毒复方中药(片剂)处方黄芩提取物 88g(相当于黄芩苷80g)苦参提取物 20g(相当于氧化苦参碱15g)甘露醇 150g制成1000片制法将处方量提取物和支持剂甘露醇，混匀，湿法制粒，湿粒于60℃～80℃干燥。将干颗粒进行整粒处理后，加适量润滑剂压制成1000片，包衣，即得。
功能与主治消热解毒、杀虫。用于外感风热、邪在肺卫、急性上呼吸道感染、急性支气管炎、急性扁桃体炎、轻型肺炎见上述症状者。
用法与用量口服。每次两片。一日三次或遵医嘱。
规格每片250mg。
贮藏密封、避光、置阴凉处。
4、抗病毒复方中药(冲剂)处方黄芩提取物 176g(相当于黄芩苷80g)苦参提取物 40g(相当于氧化苦参碱15g)糖 粉 9800g制成1000袋制法将处方量提取物和支持剂糖粉，混匀，湿法制粒，湿粒于60℃～80℃干燥。将干颗粒进行整粒处理后，装1000袋，即得。
功能与主治消热解毒、杀虫。用于外感风热、邪在肺卫、急性上呼吸道感染、急性支气管炎、急性扁桃体炎、轻型肺炎见上述症状者。
用法与用量口服。每次一袋。一日三次或遵医嘱。
规格每袋10g。
贮藏密封、避光、置阴凉处。
5、抗病毒量复方中药(口服液)处方黄芩提取物 8.8g(相当于黄芩苷80g)
苦参提取物 2.0g(相当于氧化苦参碱15g)甘露醇 10.0g制成1000ml制法将处方量提取物和支持剂甘露醇，加适量水，加热溶解，加入单糖浆，苯甲酸钠，再加适量的水至1000ml，冷藏，过滤，封装于10ml安瓶中，以100℃灭菌30分钟，即得。
功能与主治消热解毒、杀虫。用于外感风热、邪在肺卫、急性上呼吸道感染、急性支气管炎、急性扁桃体炎、轻型肺炎见上述症状者。
用法与用量口服。每次两瓶。一日三次或遵医嘱。
规格每瓶10ml。
贮藏密封、避光、置阴凉处。
在实际制剂过程中，上述处方还可以加入常规的药用辅料，如葡萄糖、甘露醇、淀粉、糊精等。辅料的加入量对药效的影响并不是至关重要的，本领域中的技术人员可根据实际需要而选择常用量。
上述的药物组合物可以制备成不同的剂型，如注射用粉针剂、水针剂、胶囊剂、片剂、冲剂、口服液等。
权利要求
1.一种抗病毒复方中药及制备方法，它包括黄芩、苦参提取物和辅料，其特征在于黄芩提取物与苦参提取物的重量比为2～6∶0.5～2.0，其余为辅料。
2.根据权利要求1所述的一种抗病毒复方中药及制备方法，其特征在于所说的辅料是甘露醇、乳糖、糊精、淀粉、糖粉。
3.一种如权利要求1所述的一种抗病毒复方中药的制备方法，其特征在于本发明的制备工艺如下a.制取黄芩提取物，取黄芩，粉碎成最粗粉，加水煎煮二次，第一次加10倍量水煎煮2小时，第二次加8倍量水煎煮1小时，滤过，合并煎液，加盐酸调pH值至1-2，80℃保温1小时，室温放置24小时，滤过，沉淀物与药材等量水搅匀，用40％氢氧化钠调pH值至7，充分搅拌，加1倍量95％乙醇，混合均匀，抽滤，滤液再加盐酸调pH值至1-2，80℃保温1小时，室温放置24小时，滤过，沉淀用5倍量95％乙醇抽洗三次，抽干，于60℃真空干燥2小时，粉碎即得；b.制取苦参提取物，取苦参药材，粉碎成最粗粉，按《中国药典》(2000年版)一部附录IO流浸膏与浸膏剂项下，渗漉法的要点要求进行渗漉，渗漉溶剂为0.1％盐酸，渗漉液通过阳离子交换树脂柱，交换完毕后，将树脂倾入容器中，用水洗涤至水液澄清，抽干，再将树脂置盘中风干，风干后树脂加入浓氨水适量，拌匀，闷置30分钟，使碱化完全，挥尽多余氨，装入索氏提取器中，用氯仿回流提取3小时，氯仿提取液加入无水硫酸钠进行脱水，搅拌后放置30分钟，过滤，回收氯仿至近干，加入丙酮—乙醚(1∶1)混合溶剂少量，放置，析晶，析出粗晶置垂熔漏斗中，用少量丙酮—乙醚(1∶1)混合溶剂洗涤数次，抽滤，然后于60℃真空干燥2小时即得；c.将黄芩提取物与苦参提取物按2～6∶0.5～2.0的重量比混合加入甘露醇混匀制成药用剂型。
4.一种如权利要求1所述的一种抗病毒复方中药的医药用途，其特征在于以黄芩提取物与苦参提取物混合制成的抗病毒、抗菌和抗炎的药物。
全文摘要
本发明是一种抗病毒复方中药及制备方法,它是一种以中药为原料的抗病毒制剂,它包括黄芩、苦参提取物和辅料,黄芩提取物与苦参提取物的重量比为2～6∶0.5～2.0,其余为辅料。它是将黄芩和苦参的提取物提取后,按一定比例混合加入甘露醇混匀制成的各种药用剂型。它具有较好的抗病毒、抗菌和抗炎的作用,为黄芩和苦参的应用开辟了新的途径。
文档编号A61P31/12GK1370558SQ0110619
公开日2002年9月25日 申请日期2001年2月26日 优先权日2001年2月26日
发明者徐绥绪, 张国刚, 宋少江, 曹颖林, 徐怀栋, 赵帮爱, 段淑敏 申请人:沈阳药科大学