专利名称：羟基喜树碱聚乳酸纳米粒的制备方法
技术领域：
本发明属于羟基喜树碱的制备方法，具体涉及羟基喜树碱纳米粒的制备方法。
背景技术：
羟基喜树硷属于细胞毒类药物，它在杀死癌细胞的同时，对正常细胞有明显的影响，其临床副作用主要表现为抑制造血系统等。
目前临床上用于治疗肝癌、肺癌的药物，绝大多数的毒副作用较强。其主要原因是因为这些药物在体内的分布没有选择性，除了对癌变的细胞有杀灭作用之外，对正常细胞的代谢也同样有影响，其结果是产生不必要副作用。使患者的治疗难以继续进行，导致癌症病人生存质量下降，死亡率增加。
目前国内用聚乳酸制备纳米粒的方法有三种，黎洪珊报导的溶剂挥发法，盐析法和溶剂非溶剂法，其中溶剂挥发法需用大量低沸点的有机溶剂，对环保不利。第二种方法盐析法只适用于在水中的溶解度较小的药物，而羟基喜树对硷的水溶较大，不合适。第三种方法，即溶剂非溶剂法，是通过改变溶剂的极性而使药物从溶中析出来。
发明内容
本发明的目的在于提供一种不同于上述三种方法的羟基喜树碱聚乳酸纳米粒的制备方法。
本方明是这样实现的通过表面活性处理的羟基喜树碱的水溶液加碱调节pH值为7.5～12.0，通过超声波处理后冷却0～10℃，加入聚乳酸溶液在45～70℃的水浴中搅拌后，通过高速离心分离的沉淀物水洗后，再离心分离得羟基喜树碱纳米粒。
本项目是选择合适的载体和工艺将羟基喜树硷制成50～300nm超微粒。经静脉给药后，对肝脏有较高的选择性，而其他器官中分布的量较少，从而达到提高羟基喜树硷的抗癌效果，而减少对正常细胞的影响，最终实现提高抗肿瘤药物治疗的顺应性，提高患者的生存质量，延长生存时间的效果。该法的优点是，加硷，由[OH-]崔化聚合，然后挥去有机溶剂，(少量有机溶剂)而制得羟基喜树硷聚乳酸纳米粒。
附图 羟基喜树碱聚乳酸纳米粒的制备方法流程图具体实施方式
(1)1～100重量份羟基喜树碱，1～100重量份表面活性剂伯罗沙姆或土温-80或司盘-65溶于10～100重量份的蒸馏水中，滴加氢氧化钠调节pH值为7.5～12.0，通过水浴超声波处理10～60秒得溶液A；(2)将1～500重量分聚乳酸溶于丙酮或三氯甲烷中得溶液B；(3)将0～10℃的溶液A在搅拌条件下加入0～10℃的溶液B并搅拌；(4)将混合液置在45～70℃水浴中搅拌；(5)将搅拌后的沉淀物在室温下离心分离水洗，再离心分离，得羟基喜树碱纳米粒。
以15.0mg的羟基喜树减原料为例将15.0mg的羟基喜树碱和37.8mg的表面活性剂伯罗沙姆溶于15ml蒸馏水中，加2滴NaoH溶液(NaOH的PH值13.34)，并短时水浴超声30秒，得溶液A。
另将100.0mg的聚乳酸溶于5ml丙酮中，得溶液B。
将溶液A和B降温到0～2℃，并在磁力搅拌下(搅拌速度约为1000转/分)，用注射器将溶液B快速(约1ml/s)注入到溶液A中，持续搅拌1min。
迅速将混合液置60℃水浴中，同时磁力搅拌，调节搅拌速度至500转/分，持续水浴觉拌1hr，用蒸馏水洗涤得到产品。
将高速离心后的成品，冻干，取冻干品约100mg，加碱处理，取碱性溶液用紫外分光度法，在412nm处测定吸收度，将A值代入回归方程求浓度。计算出包封率为73.2％。
取成品12.6mg，用pH为10.37的蒸馏水稀释至250ml，分别取1ml、2ml、3ml、4ml、5ml、6ml、7ml置于25ml容量瓶中，稀释至刻度线。
在412nm处测吸光度，作标准曲线回归，结果如表一
以吸光度读数平均值A对浓度c进行直线回归，得c＝18.2745A+0.01796r＝0.999861号与6号点的吸光度偏离较大，舍弃后，以吸光度读数平均值A对浓度c进行直线回归，得c＝18.2998A-0.03489r＝0.999987将高速离心后的样品，经透外电镜测得粒度分布如下50～80nm占6％80～100nm占8％ 110～140nm占11％140～170nm占18％ 170～200nm占24％200～230nm占16％ 230～260nm占11％60～300nm占6％实验表明，应用该方法测得的羟基喜树硷聚乳酸纳米粒成球形，分散性好，载药量高。
权利要求
1.一种羟基喜树碱聚乳酸纳米粒的制备方法，其特征是通过表面活性处理的羟基喜树碱的水溶液加碱调节pH值为7.5～12.0，通过超声波处理后冷却至0～10℃，加入聚乳酸溶液在45～70℃的水浴中搅拌后，通过高速离心分离的沉淀物水洗后，再离心分离得羟基喜树碱纳米粒。
2.如权利要求1所述羟基喜树碱聚乳酸纳米粒的制备方法，其特征是通过表面活性处理的羟基喜树碱的水溶液是羟基喜树碱和伯罗沙姆或土温-80或司盘-65的蒸馏水溶液。
3.如权利要求1所述羟基喜树碱聚乳酸纳米粒的制备方法，其特征是聚乳酸溶液是聚乳酸与丙酮或三氯甲烷的溶液。
4.如权利要求1所述羟基喜树碱聚乳酸纳米粒的制备方法，其特征是(1)1～100重量份羟基喜树碱，1～100重量份表面活性剂伯罗沙姆或土温-80或司盘-65溶于10～100重量份的蒸馏水中，滴加氢氧化钠调节pH值为7.5～12.0，通过水浴超声波处理得溶液A；(2)将1～500重量分聚乳酸溶于丙酮或三氯甲烷中得溶液B；(3)将0～10℃的溶液A在搅拌条件下加入0～10℃的溶液B并搅拌；(4)将混合液置在45～70℃水浴中搅拌；(5)将搅拌后的沉淀物在室温下离心分离水洗，再离心分离，得羟基喜树碱纳米粒
5.如权利要求4所述羟基喜树碱聚乳酸纳米粒的制备方法，其特征是步骤(3)、(4)中在磁力条件下搅拌。
6.如权利要求4所述羟基喜树碱聚乳酸纳米粒的制备方法，其特征是步骤(1)中水浴超声波处理时间为10～60秒。
全文摘要
本发明的目的在于提供羟基喜树碱聚乳酸纳米粒的制备方法。它是通过表面活性处理的羟基喜树碱的水溶液加碱调节pH值为7.5～12.0,通过超声波处理后冷却0～10℃,加入聚乳酸溶液在45～70℃的水浴中搅拌后,通过高速离心分离的沉淀物水洗后,再离心分离得羟基喜树碱纳米粒。该法的优点是,加硷,由[OH
文档编号A61K31/4738GK1363394SQ01133700
公开日2002年8月14日 申请日期2001年11月22日 优先权日2001年11月22日
发明者易以木, 杨唐玉, 吴汉强, 陈秀珍 申请人:黄石李时珍药业集团武汉李时珍药业有限公司