作为蛋白酶抑制剂的氨基吡啶基－,氨基胍基－和烷氧基胍基－取代苯基乙酰胺的制作方法

专利名称：作为蛋白酶抑制剂的氨基吡啶基－,氨基胍基－和烷氧基胍基－取代苯基乙酰胺的制作方法
技术领域：
本发明的背景本发明的领域本发明涉及用作蛋白水解酶抑制剂的新型化合物，更具体地涉及新型凝血酶抑制剂。
相关
背景技术：
蛋白酶类是在单个、特定的肽键上分裂蛋白质的酶。蛋白酶类能够分成四个属类丝氨酸，硫醇或半胱氨酰，酸或天冬氨酰基，和金属蛋白酶(Cuypers等人，J.Biol.Chem.2577086(1982))。蛋白酶类对于各种生物活性，如血凝块的消化、形成和溶解，再生和对于外来细胞和生物体的免疫反应来说是重要的。异常的蛋白水解与在人体和其它哺乳动物体内中的许多疾病有关。人嗜中性白细胞蛋白酶类，弹性蛋白酶和组织蛋白酶G，已经被怀疑会导致以组织破坏为特征的疾病症状。这些疾病症状包括肺气肿，类风湿性关节炎，角膜溃疡和肾小球性肾炎。(Barret，在Enzyme Inhibitors as Drugs中，Sandler编辑，University Park Press，Baltimore，(1980))。附加的蛋白酶类如纤溶酶，C-1酯酶，C-3转化酶，尿激酶，纤溶酶原激活物，顶体蛋白，和激肽释放酶在哺乳动物的正常生物机能中起着重要的作用。在许多情况下，在治疗哺乳动物的过程中破坏一种或多种蛋白水解酶的功能是有益的。
丝氨酸蛋白酶包括诸如弹性蛋白酶(人白细胞)，组织蛋白酶G，纤溶酶，C-1酯酶，C-3转化酶，尿激酶，纤溶酶原激活物，顶体蛋白，糜蛋白酶，胰蛋白酶，凝血酶，因子Xa和激肽释放酶之类的酶。
人白细胞弹性蛋白酶是在炎症部位被多形核白细胞所释放，因此是许多疾病症状的病因。组织蛋白酶G是另一种人嗜中性白细胞丝氨酸蛋白酶。能够抑制这些酶的活性的化合物预计具有消炎作用，可用于痛风、类风湿性关节炎和其它炎症疾病的治疗中，和用于肺气肿的治疗中。糜蛋白酶和胰蛋白酶是消化酶。这些酶的抑制剂可用于治疗胰腺炎。尿激酶和纤溶酶原激活物的抑制剂可用于治疗过度细胞生长疾病症状，如良性前列腺肥大，前列腺癌和牛皮癣。
该丝氨酸蛋白酶凝血酶在止血和血栓形成中发挥着中心作用，并作为多因子的蛋白质，会诱导许多对于血小板，内皮细胞，平滑肌细胞，白细胞，心脏，和神经原的作用。该凝固级联利用内在途径(接触激活作用)或外在途径(由血浆暴露于非内皮表面所活化，损害血管壁或组织因子释放)的活化会导致一系列的集中于凝血酶上的生物化学作用。凝血酶分解纤维蛋白原而最终导致止血栓(血凝块形成)，通过细胞表面凝血酶受体的独特的蛋白水解性分解作用而有效地活化血小板(Coughlin，Seminars in Hematology31(4)270-277(1994))，和通过反馈机理来自动放大它自身的产生。因此，凝血酶功能的抑制剂在大量的心血管和非心血管疾病中具有治疗潜力。
因子Xa是以凝固途径的另一种丝氨酸蛋白酶。因子Xa与在磷脂膜上的因子Va和钙有关，因此形成了凝血酶原酶配合物。这一凝血酶原酶配合物然后将凝血酶原转化成凝血酶(Claeson，BloodCoagulation and Fibrinolysis 5411-436(1994)；Harker，BloodCoagulation and Fibrinolysis 5(Suppl 1)S47-S58(1994))。因子Xa的抑制剂被认为提供了与直接抑制凝血酶的试剂相比的优点，因为直接凝血酶抑制剂仍然容许显著的新凝血酶产生(Lefkovits andTopol，Circulation 90(3)1522-1536(1994)；Harker，BloodCoagulation and Fibrinolysis 5(Suppl 1)S47-S58(1994))。
以前已经报导了血管内血栓的活体内诊断成象方法。这些成象方法使用可检测性地标记了放射性或顺磁性原子的化合物。例如，标记了γ发射体In-111的血小板能够用作检测血栓的成像剂(Thakur，M.L.等人，Thromb Res.9345(1976)；Powers等人，Neurology 32938(1982))。标记Tc-99m的血栓溶解酶链激酶被建议作为成象剂(Wong，U.S.专利No.4,418,052(1983))。用γ发射体I-125和I-131标记的金黄色葡萄球菌衍生蛋白A的血纤蛋白结合域已经建议作为成象剂(Pang，U.S.专利No.5,011,686(1991))。对血纤蛋白有特异性(与纤维蛋白原相反)和用Tc-99m标记的单克隆抗体已经建议作为成象剂(Berger等人，U.S.专利No.5,024,829(1991)；Dean等人，U.S.专利No.4,980,148(1990))。顺磁性造影剂，钆二亚乙基三胺五乙酸在为了急性心肌梗塞而通过血栓溶解来治疗的病人的核磁共振成象中的使用已经有报导(De Roos，A.等人，Int.J.Card.Imaging 7133(1991))。放射性标记的和顺磁性标记的α-酮酰胺衍生物被推荐作为血栓成象剂(Abelman等人，美国专利No.5,656,600)。
对属于有潜力和选择性的蛋白酶抑制剂并比现用的蛋白酶抑制剂有更高的生物利用率和更少副作用的非肽化合物仍然有需求。因此，以强力抑制能力和对哺乳动物低毒性为特征的新型高效蛋白酶抑制剂对于许多症状是潜在有价值的治疗剂，其中包括许多哺乳动物蛋白水解作用的疾病症状的治疗。
本发明的概述本发明涉及具有通式I(以下)的新型氨基吡啶基-，氨基胍基-，和烷氧基胍基-取代苯基乙酰胺。还提供的是制备通式I的化合物的方法。本发明的新型化合物是蛋白酶类，尤其胰蛋白酶状丝氨酸蛋白酶，如糜蛋白酶，胰蛋白酶，凝血酶，纤溶酶和因子Xa的高效抑制剂。某些化合物经凝血酶的直接、选择性抑制作用而显示出抗血栓形成的活性，或是可用于制备具有抗血栓形成活性的化合物的中间体。也提供的是抑制或治疗哺乳动物异常蛋白水解的方法，以及通过施用有效量的通式I的化合物来治疗哺乳动物的血栓形成，局部缺血，中风，再狭窄或炎症的方法。
本发明包括在可药用载体中含有本发明化合物的一种组合物，该组合物用于抑制血小板的损失，抑制血小板聚集体的形成，抑制血纤蛋白的形成，抑制血栓形成，和抑制在哺乳动物体内栓塞形成。这些组合物可以任选包括抗凝剂，抗血小板剂，和溶栓剂。该组合物能够被加入到血液，血液制品，或哺乳动物器官中，以发挥所需的抑制作用。
还提供是抑制或治疗哺乳动物的异常蛋白水解的方法，以及治疗心肌梗塞；不稳定的绞痛；中风；再狭窄；深静脉血栓形成；由外伤引起的弥漫性血管内凝血，脓毒病或瘤转移；血液透析作用；心肺分流外科；成人呼吸窘迫综合征；内毒素性休克；类风湿性关节炎；溃疡性结肠炎；硬化；转移；化疗过程中的高凝性；阿尔茨海默氏病；唐氏综合征；眼睛内血纤蛋白形成；和伤口愈合的方法。本发明化合物的其它用途是作为被包埋于或以物理方式连接于材料中的抗凝剂，该材料用于制造在血收集、血液循环和血储存中使用的装置，如导管，血液透析机，血收集注射器和管，血线和支架。
本发明还包括减少在哺乳动物表面血栓形成性的方法，这通过将本发明的化合物以共价键或非共价键方式结合于该表面来实现。
在另一个方面，本发明包括用于哺乳动物的血栓的体内成象的组合物，该组合物包括能够在体外检测到的本发明的化合物。优选的组合物包括本发明的化合物和可检测的标记物，如放射性或顺磁性的原子。
在另一个方面，本发明提供用于哺乳动物的血栓的体内成象的诊断组合物，该组合物包括可药用的载体和诊断有效量的本发明的化合物或组合物。
在另一个方面，本发明包括可用于哺乳动物的血栓的体内成象的方法。
优选实施方案的详细说明本发明的化合物包括通式I的化合物
或它的溶剂化物，水合物或可药用的盐；其中W是氢，R1，R1OC(O)，R1C(O)，R1(CH2)sNHC(O)，R1S(O)2，或(R1)2CH(CH2)sNHC(O)，其中s是0-4；R1是R2，R2(CH2)tC(R12)2，其中t是0-3，并且各R12能够是相同的或不同的，(R2)(OR12)CH(CH2)p，其中p是1-4，(R2)2(OR12)C(CH2)p，其中p是1-4，R2C(R12)2(CH2)t，其中t是0-3，并且各R12能够是相同的或不同的，其中(R12)2还可以与C一起形成以C3-9环烷基为代表的环，R2CF2C(R12)2(CH2)q，其中q是0-2，并且各R12能够是相同的或不同的，其中(R12)2还可以与C一起形成以C3-9环烷基为代表的环，R2CH2C(R12)2(CH2)q，其中q是0-2，并且各R12能够是相同的或不同的，其中(R12)2还可以与C一起形成以C3-9环烷基为代表的环，(R2)2CH(CH2)r，其中r是0-4和各R2能够是相同的或不同的，并且其中(R2)2也能够与CH形成环，该环的代表有C3-9环烷基，C7-12二环烷基，C10-16三环烷基，或5-到7-员单环或二环的杂环，后者能够是饱和的或不饱和的，并且它含有1至3个选自N，O和S中的杂原子，R2O(CH2)p，其中p是2-4，(R2)2CF(CH2)r，其中r是0-4和各R2能够是相同的不同的，其中(R2)2还可以与C一起形成环，该环的代表有C3-9环烷基，C7-12二环烷基，C10-16三环烷基，或5-到7-员单环或二环的杂环，后者能够是饱和的或不饱和的，并且它含有1-3个选自N，O和S中的杂原子，
其中s是0或1，或R2CF2C(R12)2；R2是苯基，萘基，或联苯，其中每一个是未被取代的或被下列基因中的一个或多个取代C1-4烷基，C1-4烷氧基，卤素，羟基，CF3，OCF3，COOH，CONH2或SO2NH2，5-到7-员单环族或9-到10-员二环族的饱和或不饱和杂环或非杂环，其中该杂环含有1-4个选自N，O和S中的杂原子，并且其中该杂环或非杂环是未被取代的或被卤素或羟基取代，C1-12烷基，未被取代的或被下列基团中的一个或多个取代羟基，COOH，氨基，任选C1-3烷基取代的芳基，C3-9环烷基，CF3，N(CH3)2，杂芳基，或杂环烷基，CF3，C3-9环烷基，未被取代的或被芳基取代，C7-12二环烷基，或C10-16三环烷基；Y是-NH-或-O-；R3，R4，R5和R6独立地是氢，烷基，环烷基，链烯基，炔基，任选取代的芳基，任选取代的芳烷基，任选取代的杂芳基，卤代烷基，羟基，烷氧基，芳氧基，杂芳氧基，卤素，卤代烷氧基，羟烷基，氰基，硝基，-CO2Rx，-CH2ORx或-ORx，其中Rx在每种情况下独立地是氢，C1-12烷基或C3-9环烷基中的一个，其中该C1-12烷基或C3-9环烷基可以任选具有一个或多个不饱和键；R11是氢，烷基，或链烯基；R12是氢或卤素，苯基，萘基，或联苯，其中每一个是未被取代的或被下列基团中的一个或多个取代C1-4烷基，C1-4烷氧基，卤素，羟基，CF3，OCF3，COOH，或CONH2，5-到7-员单环族或9-到10-员二环族的杂环，它能够是饱和或不饱和的，并且它含有1-4个选自N，O和S中的杂原子，C1-12烷基，未被取代的或被下列基团中的一个或多个取代羟基，COOH，氨基，C6-14芳基，杂芳基，或杂环烷基，CF3，C3-9环烷基，C7-12二环烷基，或C10-16三环烷基；B是选自 或 其中R7，R8，R9，和R10独立地是氢，烷基，芳烷基，芳基，羟烷基，氨基烷基，单烷基氨基烷基，二烷基氨基烷基或羧基烷基；或R7和R8联在一起形成-(CH2)u-，其中u是2到7，优选2到5，而R9和R10如以上所定义；
或R9和R10联在一起形成-(CH2)v-，其中v是2到7，优选2到5，而R7和R8如以上所定义；或R7和R9联在一起形成-(CH2)y-，其中y是0(一个键)或1-7，优选0-4，而R8和R10如以上所定义；X是-O-，-NR18-，或-CH＝N-(其中N键接于NR13上)，其中R18是氢，烷基，环烷基或芳基，其中该烷基、环烷基或芳基任选被氨基，单烷基氨基，二烷基氨基，烷氧基，羟基，羧基，烷氧基羰基，芳氧基羰基，芳烷氧基羰基，芳基，杂芳基，酰氨基，氰基或三氟甲基取代；Ra，Rb和Rc独立地是氢，烷基，羟基，烷氧基，芳氧基，芳烷氧基，烷氧基羰基氧基，氰基或-CO2Rw，其中Rw是C1-12烷基，C3-9环烷基，C6-14芳基，C6-14芳基(C1-12)烷基， 或 其中Re和Rf独立地是氢，C1-6烷基，C2-6链烯基或C6-14芳基，Rg是氢，C1-6烷基，C2-6链烯基或C6-14芳基，Rh是氢，C1-6烷基，C2-6链烯基或C6-14芳基，和Ri是C6-14芳基(C1-12)烷基或C1-12烷基；n是0到8；和m是0到6；R13是氢，烷基，链烯基，芳烷基，芳基，羟烷基，氨基烷基，单烷基氨基烷基，二烷基氨基烷基或羧基烷基；R14和R15独立地是氢，烷基，环烷基，卤素或烷氧基；和R16和R17独立地是氢，烷基，羟基，烷氧基，芳氧基，烷氧基羰基，氰基或-CO2Rj，其中Rj是C1-12烷基，C3-9环烷基，C6-14芳基，C6-14芳基(C1-12)烷基，卤代(C1-12)烷基或
其中Re、Rf和Rg独立地是氢或C1-12烷基。
在本发明范围内的化合物包括满足以下条件的那些R3，R4，R5和R6独立地是氢，C1-12烷基，C3-9环烷基，卤素，C2-20链烯基，C2-20炔基，任选取代的C6-14芳基，任选取代的C6-14芳基(C1-12)烷基，任选取代的杂芳基，卤素(C1-12)烷基，C1-12烷氧基，C6-14芳氧基，杂芳氧基，卤代(C1-20)烷氧基或羟基(C1-12)烷基；R11是氢，C1-12烷基或C2-20链烯基；R7，R8，R9和R10独立地是氢，C1-12烷基，C6-14芳基(C1-12)烷基，C6-14芳基，羟基(C1-12)烷基，氨基(C1-12)烷基，单(C1-12)烷基氨基(C1-12)烷基，二(C1-12)烷基氨基(C1-12)烷基，或羧基(C1-12)烷基；R18是C1-12烷基，C3-9环烷基或C6-14芳基，其中每一个任选被氨基，单(C1-12)烷基氨基，二(C1-12)烷基氨基，C1-20烷氧基，羟基，羧基，C1-20烷氧基羰基，C6-14芳氧基羰基，C6-14芳基(C1-20)烷氧基羰基，C6-14芳基，C5-10杂芳基，酰氨基，氰基或三氟甲基取代；Ra，Rb和Rc独立地是C1-12烷基，C1-20烷氧基，C6-14芳氧基，C6-14芳基(C1-20)烷氧基，或C1-20烷氧基羰基氧基；R13是C1-12烷基，C1-20烷氧基，C6-14芳氧基或C1-20烷氧基羰基；R14和R15独立地是C1-12烷基，C3-9环烷基或C1-20烷氧基；和R16和R17独立地是C1-12烷基，C1-20烷氧基，C6-14芳氧基或C1-20烷氧基羰基。
以上通式I的优选化合物是Y是-NH-或-SO2NH-的那些化合物。
以上通式I的化合物的优选亚属是其中B是以下基团的那些化合物
其中R7-R10，R13和Ra-Rc如以上所定义。
以上通式I的化合物的另一优选亚属是其中B是以下基团的那些化合物 其中R9，R10和R14-R17如以上所定义。
以上通式I的优选化合物是满足以下条件的那些W是R1，而R1是R2且R2是任选取代的苯基，任选取代的萘基或被芳基取代的C1-7烷基。
以上通式I的优选化合物是R1是R2CF2C(R12)2(CH2)q的那些。
以上通式I的优选化合物是R6是C1-6烷基或卤素的那些化合物。在第三个优选的亚属中的更优选的化合物是其中R6是甲基或氯的那些化合物，其中包括R6是氯而R3是氟的化合物。
以上通式I的优选的化合物是其中R11是氢的那些化合物。
在通式I中Ra，Rb和Rc的优选值独立地是氢，羟基，C1-6烷基，C1-6烷氧基，氰基或-CO2Rw，其中Rw在各种情况下优选是C1-4烷基，C4-7环烷基或苄氧基羰基中的一个。Ra，Rb和Rc的合适值包括氢，甲基，乙基，丙基，正丁基，羟基，甲氧基，乙氧基，氰基，-CO2CH3，-CO2CH2CH3和-CO2CH2CH2CH3。在最优选的实施方案中，Ra，Rb和Rc都是氢。
Ra，Rb和Rc的其它优选值是基团-CO2Rw，其中Rw是以下基团中的一个 或 其中Re-Ri如以上所定义。当Ra，Rb和Rc是-CO2Rw，其中Rw是这些结构部分中的一种时，所获得的化合物是具有令人想望的配方和生物利用率特性的前体药物。Re、Rf和Rh中每一个的优选值是氢，Rg是甲基，Ri的优选值包括苄基和叔丁基。
优选的化合物是通式I的那些，其中R7，R8，R9和R10独立地是氢，C1-6烷基，C6-10芳基(C1-6)烷基，C6-10芳基，C2-10羟烷基或C2-7羧基烷基中的一个。R7，R8，R9和R10的有用的值包括氢，甲基，乙基，丙基，正丁基，苄基，苯基乙基，2-羟乙基，3-羟丙基，4-羟基丁基，2-羧甲基，3-羧乙基和4-羧基丙基。附加的优选化合物是其中R7和R8或R9和R10联在一起形成-(CH2)y-(其中y是2)的那些。
当X是NR18时的优选化合物是满足以下条件的那些其中R18是氢或C1-6烷基，任选被下列基团中的一个、两个或三个，优选被一个取代氨基，单烷基氨基，二烷基氨基，烷氧基，羟基，烷氧基羰基，芳氧基羰基，芳烷氧基羰基，羰基烷氧基，苯基，氰基，三氟甲基，乙酰氨基，吡啶基，苯硫基，呋喃基，吡咯基或咪唑基。
R18的合适值包括氢，甲基，乙基，丙基，正丁基，苄基，苯乙基，2-羟乙基，3-羟丙基，4-羟基丁基，羧甲基和羧乙基。
最优选的化合物是其中X是氧的那些化合物。
R6能够表示氢，C1-3烷基，卤素，或C1-2烷氧基。R6优选是C1-3烷基，例如，甲基，或卤素，例如，氯，溴或氟。
R3，R4，R5和R6能够独立地表示氢，羟基，C1-3烷基，卤素，或C1-2烷氧基。优选R3是氟和羟基。
在通式I中n的优选值包括0到6，更优选0到4，和最优选0，1或2。m的优选值包括0到4，更优选0，1，2或3。
还可以理解的是，本发明被认为包括立体异构体和旋光异构体，例如对映异构体以及各对映异构体和非对映异构体的混合物，它们起源于在本系列的所选择化合物中的结构不对称。本发明的化合物也具有多态晶形，而所有的多态晶形被归入本发明中。
通式I的化合物也可以是溶剂化的，尤其水合的。水合可以在化合物或包括该化合物的组合物的制造过程中发生或将来由于化合物的吸水性而发生水合。
在通式I的范围内的某些化合物是称为前体药物的衍生物。该表达短语“前体药物”表示已知的直接作用型药物的衍生物，该衍生物与该药物相比具有增强的分配输送特性和治疗价值，并通过酶促或化学过程被转化成活性药物。有用的前体药物是其中Ra，Rb，Rc和/或Rd是-CO2RW，而Rw如以上所定义的那些。参见，U.S.专利No.5,466,811和Saulnier等人，Bioorg.Med.Chem.Lett.41985-1990(1994)。
当任何变量在任何成分或在通式I中出现一次以上时，它的定义在每种情况下与在每一种其它情况下的它的定义无关。同样，取代基和/或变量的结合只有当该结合导致获得稳定化合物时才是允许的。
在另一个方面，本发明包括用于哺乳动物的血栓的体内成象的组合物，该组合物包括能够在体外检测到的本发明的化合物。优选的组合物包括本发明的化合物和可检测的标记物，如放射性或顺磁性的原子。
在另一个方面，本发明提供用于哺乳动物的血栓的体内成象的诊断组合物，该组合物包括可药用的载体和诊断有效量的本发明的化合物或组合物。
在另一个方面，本发明包括可用于哺乳动物的血栓的体内成象的方法。
根据优选的方面，有用的化合物是满足以下条件的那些其中R1取代基用可检测的标记物如放射性碘原子如I-125，I-131或I-123取代。在这一方面，R1优选是苯基，具有对位I-123，对位I-125或对位I-131取代，或苄基，具有间位I-123，间位I-125或间位I-131取代。
可检测的标记也可以是放射性或顺磁性的螯合物，其中合适的配位体(L)直接或经由二价联结基A″结合于R1取代基。另外地，该基团-A″-L替代在通式I中的基团W。合适的配位体是指能够螯合放射性或顺磁性金属离子的有机结构部分。
在这些化合物中，该二价联结基A″包括能够以共价键方式与游离氨基和螯合单元连接的基团。例如，A″可以是-C(＝S)-，-C(＝O)-，-C(＝NH)-(CH2)6-C(＝NH)-，-C(＝O)-(CH2)6-C(＝O)-， 和类似基团。
同样，在由通式I表示的化合物中，该螯合配位体，L，包括能够以共价键方式连接于或以非共价键方式连接于放射性或顺磁性原子的那些基团。该螯合单元是指通常用于配合放射性或顺磁性原子的那些。这些包括含有键接于氮原子上的3到12个，优选3到8个亚甲基膦酸基团，亚甲基羰基异羟肟酸基团，羧基亚乙基基团，或尤其羧基亚甲基基团的螯合单元。如果只有一个或两个酸基键接于氮原子上，则该氮原子通过任选取代的亚乙基或通过至多4个分开的亚乙基单元(被氮或氧或硫原子分开)而键接于具有此类基团的另一个氮原子。优选作为配位单元的是二亚乙基三胺-N，N，N′，N″，N″-五乙酸(DTPA)。DTPA在所属技术领域中已知作为放射性原子铟-111(In-111)，锝-99m(Tc-99m)，和顺磁性原子钆(Gd)的螯合单元。Khaw等人，Science 209295(1980)；Paik C.H.等人，U.S.专利No.4,652,440(1987)；Gries，H.等人，U.S.专利No.4,957,939(1990)。优选的螯合配位体，L，是1-(对-氨基苄基)-二亚乙基三胺五乙酸。也包括为螯合单元的是含有巯基或胺结构部分的化合物，在任何结合中它的总数是至少四个。这些巯基或胺结构部分彼此被至少两个原子分开，它们能够是碳，氮，氧，或硫原子。螯合单元L的尤其优选的是金属硫因，它在所属技术领域中已知作为Tc-99m的螯合单元。
这里其本身或作为另一个基团的一部分来使用的术语“烷基”是指具有至多12个碳原子的直链和支链基团，如甲基，乙基，丙基，异丙基，丁基，叔丁基，异丁基，戊基，己基，异己基，庚基，4，4-二甲基戊基，辛基，2，2，4-三甲基戊基，壬基，癸基，十一基，十二烷基。优选，烷基具有1到6个碳原子。
这里使用的术语“链烯基”是指具有2-20个碳原子的直链或支链基团，除非该链长度限于它，该基团包括但不限于，乙烯基，1-丙烯基，2-丙烯基，2-甲基-1-丙烯基，1-丁烯基，2-丁烯基，等等。优选，该链烯基链具有2-10个碳原子的长度，更优选，2到8个碳原子的长度和最优选2到4个碳原子的长度。
这里使用的术语“炔基”是指具有2-20个碳原子的直链或支链基团，除非该链长度限于它，其中在链中的两个碳原子之间有至少一个叁键，该基团包括但不限于，乙炔，1-丙烯，2-丙烯，等等。优选，该炔基链具有2-10个碳原子的长度，更优选，2到8个碳原子的长度和最优选2到4个碳原子的长度。
在有链烯基或炔基结构部分作为取代基团的所有情况下，该不饱和键，即亚乙烯基或炔键，优选不直接连接于氮，氧或硫结构部分上。
这里使用的术语“烷氧基”是指键接到氧原子上的具有1到20个碳原子的直链或支链基团，除非该链长度限于它，该基团包括但不限于，甲氧基，乙氧基，正丙氧基，异丙氧基，等等。优选该烷氧基链具有1-10个碳原子的长度，更优选1-8个碳原子的长度。
这里其本身或作为另一个基团的一部分来使用的术语“芳基”是指在环部分中含有6-14个碳原子，优选在环部分中含有6-10个碳原子的单环或双环族芳族基，如苯基，萘基或四氢萘基。
这里使用的术语“杂芳基”是指具有5到14个环原子的基团；在环阵列中共享6，10或14个π电子；并含有碳原子和1，2或3个氧，氮或硫杂原子(其中杂芳基的例子是噻吩基，苯并[b]噻吩基，萘并[2，3-b]噻吩基，噻蒽基，呋喃基，吡喃基，异苯并呋喃基，苯并噁唑基，苯并吡喃基，呫吨基，phenoxathiinyl，2H-吡咯基，吡咯基，咪唑基，吡唑基，吡啶基，吡嗪基，嘧啶基，哒嗪基，中氮茚基，异氮杂茚基，3H-吲哚基，吲哚基，吲唑基，嘌呤基，4H-喹嗪基，异喹啉基，喹啉基，2，3-二氮杂萘基，萘啶基，喹唑啉基，噌啉基，喋啶基，4αH-咔唑基，咔唑基，β-咔啉基，菲啶基，吖啶基，萘嵌间二氮杂苯基，菲咯啉基，吩嗪基，异噻唑基，吩噻嗪基，异噁唑基，呋咱基和吩噁嗪基团)。
这里其本身或作为另一个基团的一部分来使用的术语“芳烷基”或“芳基烷基”是指，C1-12烷基，优选C1-6烷基，如以上所讨论的具有芳基取代基的基团，如苄基，苯基乙基或2-萘基甲基。
这里其本身或作为另一个基团的一部分来使用的术语“环烷基”是指含有3-9个碳原子，优选3-7个碳原子的环烷基。典型实例是环丙基，环丁基，环戊基，环己基，环庚基，环辛基和环壬基。
该术语“C7-12二环烷基”希望包括双环[2.2.1]庚基(降冰片基)，双环[2.2.2]辛基，1，1，3-三甲基双环[2.2.1]庚基(冰片基)，和类似基团。
该术语“C10-16三环烷基”希望包括三环[5，2，1，02，6]癸基，金刚烷基，等等。
这里其本身或作为另一个基团的一部分来使用的术语“卤素”或“卤”是指氯，溴，氟或碘，其中氯和氟是优选的。
这里其本身或作为另一个基团的一部分来使用的术语“单烷基胺”是指被具有1-12个、优选1-6个碳原子的一个烷基取代的氨基。
这里其本身或作为另一个基团的一部分来使用的术语“二烷基胺”是指被各自具有1-12个、优选1-6个碳原子的两个烷基取代的氨基。
这里使用的术语“羟烷基”是指被一个或多个羟基结构部分取代的上述烷基中的任何一种。
这里使用的术语“羧基烷基”是指被一个或多个羧酸结构部分取代的上述烷基中的任何一种。
这里使用的术语“杂环”或“杂环族环”，若指出的则除外，表示稳定的5-到7-员单环族或二环族的或稳定的7-到10-员二环族的杂环族体系，其中任何一个环可以是饱和的或不饱和的，且它由碳原子和1至3个选自N、O和S中的杂原子组成，且其中该氮和硫杂原子可任选被氧化，且该氮杂原子可以任选是季铵化的，并且包括其中以上所定义的杂环族环中任何一个稠合到苯环上的任何双环基团。尤其有用的是含有一个氧或硫，1-3个氮原子，或一个氧或硫连同一个或两个氮原子的环。该杂环可以在任何杂原子或碳原子上连接，导致产生了稳定结构。此类杂环基团的例子包括哌啶基，哌嗪基，2-氧代哌嗪基，2-氧代哌啶基，2-氧代吡咯烷基，2-氧代吖庚因基，吖庚因基，吡咯基，4-哌啶酮基，吡咯烷基，吡唑基，吡唑烷基，咪唑基，咪唑啉基，咪唑烷基，吡啶基，吡嗪基，嘧啶基，哒嗪基，噁唑基，噁唑烷基，异噁唑基，异噁唑烷基，吗啉基，噻唑基，噻唑烷基，异噻唑基，奎宁环基，异噻唑烷基，吲哚基，喹啉基，异喹啉基，苯并咪唑基，噻二唑基，苯并吡喃基，苯并噻唑基，苯并噁唑基，呋喃基，四氢呋喃基，四氢吡喃基，噻吩基，苯并噻吩基，硫杂吗啉基，硫杂吗啉基亚砜，硫杂吗啉基砜，和噁二唑基。吗啉代(morpholino)与吗啉基(morpholinyl)相同。
这里使用的术语“杂原子”是指氧原子(“O”)，硫原子(“S”)或氮原子(“N”)。可以认识到，当杂原子是氮时，它可以形式NRaRb结构部分，其中Ra和Rb彼此独立地是氢或C1到C8烷基，或与它们所键接的氮一起形成饱和的或不饱和的5-，6-，或7-员环。
反应历程1-8列出了通式I化合物的合成路线。
反应历程1 在反应历程1中，乙酸侧链通过如下被引入到苯环上由氟化硝基苯1，如1，2，3-三氟-4-硝基苯，与取代或非取代的丙二酸酯如丙二酸二乙酯的金属盐在合适溶剂如四氢呋喃(THF)中反应，随后进行酸水解和在加热下进行脱羧，生产出化合物2(Yokomoto，M，W.，等人，EP出版专利申请No.0470578A1(1991))。化合物2的羧基在典型的还原条件如甲硼烷(BH3)-THF配合物和硼氢化钠(NaBH4)下，在合适的溶剂如THF中被转化成羟基，得到醇3(Yokomoto，M，W.等人，在同书的出处中)。在环上硝基的对位上合适官能团的引入可通过在化合物3中的氟被合适亲核试剂如叔丁胺在合适溶剂如二甲亚砜(DMSO)和甲苯中在回流条件下的芳族亲核取代来实现，获得化合物4(Yokomoto，M，W.，等人，在同书的出处)。在化合物4中的氮保护基如叔丁基是在标准条件如在回流下的浓盐酸(HCl)中被除去，得到化合物5(Yokomoto，M，W.，等人，在同书的出处)。化合物5的羟基在本技术领域中公知的标准条件下(Greene，T.W.，和Wuts，P.G.M.，Protecting Groups in Organic Synthesis，第二版，John Wiley and Sons，Inc.，New York(1991))下用合适的保护基如乙酰基加以封闭，如在二氯甲烷(DCM)中的乙酰氯在碱如三乙胺或二异丙基乙胺(DIEA)存在下，得到化合物6。活化羰基化合物ACOCl与化合物6在合适的溶剂如DCM中的偶合，生产化合物7。
反应历程2 在反应历程2中，芳基硝基化合物7在典型条件下的还原，如在钯/活性炭存在下在乙醇或甲醇中用氢的催化氢化，得到芳基胺8。化合物8的乙酰基保护基通过在碱性条件下水解而被除去(为了在氨基调整之前提高化合物的溶解度)，如在甲醇中的碳酸钾(K2CO3)水溶液，以释放该保护的羟基，得到化合物9。所希望的R6通过如下被引入到化合物9的中心搭交手(scaffold)中通过用合适试剂如亚硝酸钠(NaNO2)和HCl，随后用铜(I)氯化物(CuCl)的Sandmeyer型反应((a)Gunstone，F.D.，等人，Org.Syn.Collect vol.1，Wiley，NewYork，N.Y.(1941)，170页；(b)Yokomoto，M，W.，等人，EP出版专利申请No.0470578A1(1991))，或通过用合适试剂如叔丁基亚硝酸酯(t-BuONO)和铜(II)氯化物(CuCl2)的取代性脱氨基作用(Doyle，M.P.，等人，J.Org.Chem.422426(1977))，得到化合物10。芳基胺9的氨基能够在碳-碳偶合条件下在钯催化剂存在下通过芳烃重氮盐中间体(arenediazonium salt intermediate)而转化成甲基(Kikukawa，K.，等人，J.Org.Chem.481333(1983))。化合物10进而用合适的还原剂如BH3来还原，产生其中Y是-NH-的化合物11的所需片段WY。化合物11用氧化剂如三氧化硫吡啶配合物(SO3·吡啶)在DCM中的氧化，得到醛12。目标化合物的中心和左片段的构造最终是通过在合适氧化条件下，如亚氯酸钠(NaClO2)在磷酸二氢钠(NaH2PO4)和DMSO存在下，醛12进一步氧化成羧酸13来实现的(Dalcanale，E.，等人，J.Org.Chem.51567(1986))。
反应历程3 在反应历程3中，酸13与合适的胺14，如受保护的O-胍基胺(Tianbao Lu，等人，WO99/26926(1999))，或氨基吡啶基胺(Sanderson，P.E.，等人，WO97/01338(1997))在典型的肽偶合剂如Castro氏试剂(BOP)和碱如DIEA存在下，在合适的溶剂如N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中偶合，生产酰胺15。任选地，保护基如叔-(丁氧基)羰基(Boc)，能够在典型的去保护条件下，如在DCM中三氟乙酸(TFA)溶液(当B是O-胍时)，或在1，4-二噁烷中的HCl溶液(当B是氨基吡啶时)，被除去而分别产生游离O-胍，或氨基吡啶。
反应历程4 在反应历程4中，苯基乙酸衍生物16通过使用标准条件，如在浓硫酸中的96％硝酸，在苯环的间位上硝化(Sindelar等人，Coll.Czechoslov.Chem.Commun.422231(1977))，得到硝基化合物17。化合物17的羧酸基团然后通过使用本技术领域中已知的标准条件加以保护(Greene，T.W.和Wuts，P.G.M.，Protective Groups inOrganic Synthesis，第二版，John Wiley and Sons，NewYork(1991))，如通过与草酰氯反应和随后与醇POH反应而转化成酯，获得酯18(其中P是典型的羧酸保护基)。硝基的还原通过使用合适的试剂如锡(II)氯化物，在合适溶剂如乙醇中来实现，然后，所获得的胺19与酰化剂(W＝R1C(O))或磺酰化剂(W＝R1S(O)2)如苄基磺酰氯，和合适的碱如N-甲基吗啉，在溶剂如DCM中反应，得到N-取代-氨基苯基乙酸酯20(Y＝-NH-)。该羧酸基团通过使用本技术领域中公知的标准条件(Greene，T.W.和Wuts，P.G.M.，Protective Groupsin Organic Synthesis，第二版，John Wiley and Sons，NewYork(1991))，如用氢氧化物水溶液水解，加以去保护，得到酸13(Y＝-NH-)。它然后与胺14偶合和去保护，与反应历程3中一样，生产苯基乙酰胺15(Y＝NH)。
反应历程5
在反应历程5中，硝基苯基乙酸17通过使用标准肽偶合程序，与反应历程3中一样，偶合到氨基醇21如乙醇胺上，得到醇22。该醇通过使用标准试剂(Mitsunobu，O.，Synthesis 11(1981))，如三苯基膦和偶氮二羧酸二乙基酯，在合适的溶剂如THF中偶合到N-羟基邻苯二甲酰亚胺上而转化成受保护的烷氧基胺，获得化合物23，它然后在典型的还原条件下，如在钯(O)/炭催化剂上的氢化，在合适溶剂如乙醇中被转化成苯胺24。该胺然后与反应历程4中一样被酰化或磺酰化得到中间体25，和该烷氧基胺通过使用本技术领域中公知的标准条件(Greene，T.W.和Wuts，P.G.M.，ProtectiveGroups in Organic Synthesis，第二版，John Wiley and Sons，New York(1991))，如在乙醇/THF中的含水甲胺，进行去保护。所获得的烷氧基胺26的胍基化是用标准胍基化试剂如N，N’-双(叔丁氧基羰基)-S-甲基硫脲(Bergeron，R.J.和McManis，J.S.，J.Org.Chem.521700(1987))或N-Ra-N’-Rb，Rc-1H-吡唑-1-氨代甲酰胺(Bernatowicz，M.S.等人，Tetrahedron Lett.343389(1993))来完成的，然后该胍任选与反应历程3中一样进行去保护，得到最终的目标化合物27。
反应历程6 在反应历程6中，该酮、醛(R11＝H)或羧酸(R11＝OH)起始原料28用合适试剂如甲硼烷-THF还原而得醇29，它然后通过在合适溶剂如DCM中与磺酰氯如甲磺酰氯反应而转化成更佳的离去基团，生产化合物30。该磺酸根在标准条件下被置换，如在回流乙腈中的氰化钾，得到腈31，它然后用典型的试剂如氢氧化物水溶液水解。所获得的酸17与胺14的偶合是与反应历程3中一样完成的，得到中间体32，和该硝基与反应历程4或5中一样被还原而获得苯胺33。它与反应历程4中一样被酰化或磺酰化，该胍任选地与反应历程3中一样去保护，得到最终目标化合物15(Y＝NH)。
反应历程7 在反应历程7中，硝基苯酚34用烯丙基卤35和合适的碱如碳酸铯在极性非质子传递溶剂如DMF中加以烷基化而得到中间体36，它然后通过加热经由芳族克莱森重排作用(aromatic Claisenrearrangement)而转化成化合物37。该苯酚通过使用典型的试剂如苄基溴和碳酸铯在溶剂如DMF中加以保护，得到38(其中P是典型的羟基保护基)和该硝基与反应历程4或5中一样加以还原而生产苯胺39。苯胺39与反应历程4中一样被转化为中间体40，该烯烃通过使用标准条件，如在二噁烷/水中的高碘酸钠和四氧化锇，随后使用琼斯试剂(Jones reagent)，而被氧化性分裂，得到酸41。它然后偶合到胺14上，该胍任选按照反应历程3进行去保护，和酚基团任选使用标准条件进行去保护，如在合适溶剂如乙醇中在钯(O)/炭上的氢化，得到目标化合物42。
反应历程8 在反应历程8中，单-保护的儿茶酚43用试剂W-Cl如间-甲苯磺酰氯，在溶剂如DCM中，在碱如三乙胺存在下，进行磺酰化，得到化合物44。该保护基通过使用标准条件，如在DCM中三溴化硼而被除去，然后所获得的酚45用烯丙基卤35烷基化得到46，重排为酚47，然后按照反应历程7加以保护而获得中间体48。该烯烃通过使用标准条件，如在乙腈/水中的高碘酸钠和钌(III)氯化物(Ashby，E.C.和Goel，A.B.，J.Org.Chem.463936(1981))，随后使用琼斯试剂，进行分解性分裂，得到酸49，它然后与胺14偶合和任选按照反应历程3和7进行去保护而获得目标化合物50。
通式I的化合物的可药用盐(水溶性或油溶性或可分散的产品)包括从无机或有机酸或碱形成的普通的无毒的盐或季铵盐。此类酸加合盐的例子包括乙酸盐，己二酸盐，藻酸盐，天冬氨酸盐，苯甲酸盐，苯磺酸盐，硫酸氢盐，丁酸盐，柠檬酸盐，樟脑酸盐，樟脑磺酸盐，环戊烷丙酸盐，二葡萄糖酸盐，十二烷基硫酸盐，乙烷磺酸盐，富马酸盐，葡庚糖酸盐，甘油磷酸盐，半硫酸盐，庚酸盐，己酸盐，盐酸盐，氢溴酸盐，氢碘酸盐，2-羟基乙烷磺酸盐，乳酸盐，马来酸盐，甲磺酸盐，2-萘磺酸盐，烟酸盐，硝酸盐，草酸盐，双羟萘酸盐，果胶酯酸盐(pectinate)，过硫酸盐，3-苯基丙酸盐，苦酸盐，新戊酸酯，丙酸盐，琥珀酸盐，硫酸盐，酒石酸盐，硫氰酸盐，甲苯磺酸盐，三氟乙酸盐，和十一烷酸盐。碱盐包括铵盐，碱金属盐如钠和钾盐，碱土金属盐如钙和镁盐，与有机碱形成的盐如二环己基胺盐，N-甲基-D-葡糖胺，和与氨基酸如精氨酸、赖氨酸等形成的盐，其中包括具有胍基结构部分的盐。同时，碱性含氮的基团可以用试剂来季铵化，如低级烷基卤，如甲基、乙基、丙基和丁基氯化物、溴化物和碘化物；二烷基硫酸酯象二甲基、二乙基、二丁基和二戊基硫酸酯；长链卤化物如癸基、月桂基、肉豆蔻基和硬脂酰氯化物、溴化物和碘化物；芳烷基卤化物像苄基和苯乙基溴化物以及其它类似物。用于形成酸加合盐的优选酸包括HCl，乙酸和三氟乙酸。
本发明的化合物代表了金属，酸，硫醇和丝氨酸蛋白酶类的新型高效抑制剂。被本发明范围内的化合物所抑制的丝氨酸蛋白酶的例子包括白细胞嗜中性白细胞弹性蛋白酶，在肺气肿的致病中有牵连的蛋白水解酶；糜蛋白酶和胰蛋白酶，消化酶；胰弹性蛋白酶，和组织蛋白酶G，也与白细胞有关的糜蛋白酶状蛋白酶；凝血酶和因子Xa，按照血液凝固途径的蛋白水解酶。嗜热菌蛋白酶，金属蛋白酶，和胃蛋白酶，酸性蛋白酶的抑制也可以考虑使用本发明的化合物。本发明的化合物优选用于抑制胰蛋白酶状蛋白酶类。
对于它们的最终应用，本发明化合物的酶-抑制特性的效力和其它生化参数能够容易地通过所属技术领域中那些技术人员已知的标准生物化学技术来确定。例如，抑制糜蛋白酶和胰蛋白酶的化合物的最终用途是用于治疗胰腺炎。对于它们的特定最终应用来说的实际剂量范围当然取决于所要治疗的病人或动物的疾病症状的性质和严重性，这可由主治诊断医生来确定。可以预期的是，为了获得有效的治疗效果，有用的剂量范围是大约0.01-10mg/kg/天。
以它们的抑制凝血酶的能力而表现突出的本发明化合物可以用于许多治疗目的。作为凝血酶抑制剂，本发明的化合物可以抑制凝血酶产生。因此，这些化合物可用于治疗或预防以牵涉到凝血酶产生或作用的异常静脉或动脉血栓形成为特征的症状。这些症状包括，但不限于，深静脉血栓形成；在脓毒性休克、病毒感染和癌过程中发生的传播的血管内凝血病；心肌梗塞；中风；冠状动脉分流术；在眼睛中的血纤蛋白形成；髋置换；以及从溶血栓疗法或经皮冠状动脉成形术(PCTA)引起的血栓形成。其它用途包括该凝血酶抑制剂作为被包埋于或以物理方式连接于材料中的抗凝剂的用途，该材料用于制造在血液收集、血液循环和血液储存中使用的装置，如导管，血液透析机，血收集注射器和管，以及血线。本发明的化合物也可在体外的血液回路中用作抗凝剂。
支架(Stents)已经显示会减少再狭窄，但却是发生血栓的。减少支架的血栓形成性的策略是将凝血酶抑制剂涂敷、包埋、吸附或以共价键方式附着于支架表面上。本发明的化合物能够用于这一目的。本发明的化合物能够附着于，或包埋在可溶性和/或可生物降解的聚合物中，已涂敷在支架材料上和其后涂敷在支架材料上。此类聚合物能够包括聚乙烯吡咯烷酮，聚羟基丙基甲基丙烯酰胺-苯酚，聚羟乙基-天冬酰胺-苯酚，或被棕榈酰残基取代的聚氧化乙烯-聚赖氨酸，聚乳酸，聚乙醇酸，聚乳酸和聚乙醇酸的共聚物，聚ε-己内酯，多羟基丁酸，聚原酸酯(polyorthoesters)，聚缩醛类，聚二氢吡喃，聚氰基丙烯酸酯以及水凝胶的交联的或两亲性的嵌段共聚物。参见欧洲申请761251，欧洲申请604,022，加拿大专利No.2,164,684和PCT出版申请WO96/11668，WO96/32143和WO96/38136。
利用凝血酶对于大量细胞类型如平滑肌细胞、内皮细胞和嗜中性粒细胞的效果，本发明的化合物发现另外可用于治疗或预防成人呼吸窘迫综合征；炎症应答；伤口愈合；再灌注损害；动脉粥样硬化；和在诸如球囊血管成形术、动脉粥样硬化斑块切除术和动脉支架置放之类的损害之后的血管再狭窄。
本发明的化合物可用于治疗肿瘤形成和转移以及神经变性疾病如阿尔茨海默氏病和帕金森氏病。
当用作凝血酶抑制剂时，本发明的化合物能够以大约0.1-大约500mg/kg，优选在0.1-10mg/kg体重之间的剂量范围内的有效量给药，按照单次或2-4均分日剂量的给药方式。
当用作凝血酶的抑制剂时，本发明的化合物可以与溶栓剂如组织纤溶酶原激活物，链激酶，和尿激酶相结合使用。另外，本发明的化合物可以与其它抗血栓形成的或抗凝血药物联用，该药物例如是，但不限于，纤维蛋白原拮抗药和促血栓素受体拮抗剂。
该凝血酶抑制剂也可与作为靶药物载体的可溶性聚合物偶合。此类聚合物能够包括聚乙烯吡咯烷酮，吡喃共聚物，聚羟基-聚甲基丙烯酰胺-苯酚，聚羟乙基-天冬酰胺-苯酚，或聚氧化乙烯-被棕榈酰残基取代的聚赖氨酸。此外，该凝血酶抑制剂可以偶合到可用于实现药物的控制释放的一类可生物降解的聚合物上，例如，聚乳酸，聚乙醇酸，聚乳酸和聚乙醇酸的共聚物，聚ε-己内酯，聚羟基丁酸，聚原酸酯，聚缩醛类，聚二氢吡喃，聚氰基丙烯酸酯以及水凝胶的交联的或两亲性的嵌段共聚物。
人白细胞弹性蛋白酶是在炎症部位被多形核白细胞所释放，因此是许多疾病症状的病因。本发明的化合物预计具有消炎作用，可用于痛风、类风湿性关节炎和其它炎症疾病的治疗中，和用于肺气肿的治疗中。本发明的化合物的白细胞弹性蛋白酶抑制性质可通过上述方法测定。组织蛋白酶G也在关节炎，痛风和肺气肿的疾病症状中，和另外在肾小球肾炎和由肺部感染引起的肺感染中有牵连。在它们的最终应用中，通式I化合物的酶抑制性质容易通过本技术领域中公知的标准生物化学技术来确定。
在本发明范围内的化合物的组织蛋白酶G抑制性质可通过下述方法测定。部分地提纯的人组织蛋白酶G的制剂是通过Baugh等人，Biochemistry 15836(1979)的程序获得的。白细胞颗粒是白细胞弹性蛋白酶和组织蛋白酶G(糜蛋白酶状活性)的制备的主要来源。白细胞被溶解和分离出颗粒物。该白细胞颗粒用0.20M乙酸钠(pH4.0)萃取，和萃取物对于含有0.05M NaCl的0.05M三羟甲基氨基甲烷缓冲液(Tris buffer，pH8.0)在4℃下渗析一夜。在渗析过程中蛋白质级分发生沉淀，然后通过离心来分离。这一级分含有大部分的白细胞颗粒的糜蛋白酶状活性。
为每种酶制备特定的底物即N-Suc-Ala-Ala-Pro-Val-对-硝基苯胺和Suc-Ala-Ala-Pro-Phe-对-硝基苯胺。后者不被白细胞弹性蛋白酶所水解。酶制剂是在含有0.50M NaCl，10％二甲亚砜和0.0020M作为底物的Suc-Ala-Ala-Pro-Phe-对-硝基苯胺的2.00mL的0.10MHepes缓冲液(pH7.5)中试验。该对-硝基苯胺底物的水解是在405nm和25℃下监测的。
本发明的化合物作为嗜中性粒细胞弹性蛋白酶抑制剂和作为组织蛋白酶G抑制剂的有用的给药剂量范围取决于由主治医生确定的疾病症状的性质和严重程度，其中0.01-10mg/kg体重/天的范围可用于上述疾病症状抑制尿激酶或纤溶酶原激活物的本发明的化合物可有效地用于治疗过度细胞生长疾病。照这样，本发明的化合物也可用于治疗良性前列腺肥大和前列腺癌，治疗牛皮癣，和作为堕胎药。对于它们的最终应用，本发明化合物的酶-抑制特性的效力和其它生化参数能够容易地通过所属技术领域中那些技术人员公知的标准生物化学技术来确定。对于这一用途来说的实际剂量范围取决于所要治疗的病人或动物的疾病症状的性质和严重性，这由主治诊断医生来确定。可以预期的是，为了获得有效的治疗效果，一般的剂量范围是大约0.01-10mg/kg/天。
本发明的化合物的附加用途包括商购试剂酶对于活性部位浓度的分析。例如，糜蛋白酶是作为用于在胰液和粪便中糜蛋白酶活性的临床定量分析中的标准试剂来提供。这样的试验是对于胃肠和胰腺异常的诊断。胰弹性蛋白酶也在商业上作为在血浆中α1-抗胰蛋白酶的定量用试剂来提供。在几种炎症疾病的过程中血浆α1-抗胰蛋白酶会提高浓度，而且α1-抗胰蛋白酶缺乏与肺疾病的增加发生有关。本发明的化合物可用于通过作为试剂提供的商购弹性蛋白酶的滴定分析标准化，来增强这些分析的精确性和可再现性。参见，U.S.专利No.4,499,082。
在特殊蛋白质的提纯过程中在某些蛋白质萃取物中蛋白酶活性是重复性(recurring)问题，它使蛋白质离析程序的结果变复杂和损害该结果。在该萃取物中存在的某些蛋白酶类能够在提纯步骤中通过本发明的化合物来抑制，它们紧密地结合于各种蛋白水解酶上。
本发明的药物组合物能够施用于可获得本发明化合物的有益效果的任何动物。这些动物当中最重要的是人，虽然本发明不希望这样限定。
本发明的药物组合物能够通过实现它们的预定目的的任何方式来给药。例如，给药途径是非肠道的，皮下的，静脉内的，肌内的，腹膜内的，透皮的，透颊的，或经眼途径。另外地或同时，可通过口服途径来给药。给药的剂量取决于接受者的年龄、健康状况和体重，同时治疗的类型，如果有的话，治疗频率，和所希望效果的性质。
除了药理活性化合物之外，该新型药物制剂能够含有合适的药用载体，后者包括有利于活性化合物加工成能够药用的制剂的赋形剂和助剂。
本发明的药物制剂是按照本身已知的方式，例如，利用普通的混合，造粒，糖衣丸制造，溶解，或冻干工艺来制造。因此，口服的药物制剂能够通过将活性化合物与固体赋形剂掺混，任选将所获得的混合物研磨和将颗粒的混合物(如果希望或需要，在添加合适助剂之后)加工获得药片或糖衣丸芯，而获得。
为了使本发明的组合物适合施用于人，该术语“赋形剂”旨在包括，但不限于，在Handbook of Pharmaceutical Excipients，American Pharmaceutical Association，第二版(1994)中描述的那些赋形剂，该文献以其全部内容被引入供参考。合适的赋形剂是，尤其，填料如糖类，例如，乳糖或蔗糖，甘露糖醇或山梨糖醇，纤维素制剂和/或磷酸钙，例如，磷酸三钙或磷酸氢钙，以及粘结剂，如，淀粉糊，使用，例如，玉米淀粉，小麦淀粉，大米淀粉，马铃薯淀粉，明胶，黄芪胶，甲基纤维素，羟丙基甲基纤维素，羧甲基纤维素钠，和/或聚乙烯基吡咯烷酮。如果需要，能够添加崩解剂，如，上述淀粉以及羧甲基淀粉，交联的聚乙烯基吡咯烷酮，琼脂，或藻酸或它的盐，如，藻酸钠。助剂，最主要的是，是流动调节剂和润滑剂，例如，硅石，滑石，硬脂酸或它的盐，如硬脂酸镁或硬脂酸钙，和/或聚乙二醇。糖衣丸芯被提供了合适的涂层，如果需要，它是耐胃液的。为此目的，能够使用浓的糖溶液，它可以任选含有阿拉伯树胶，滑石，聚乙烯基吡咯烷酮，聚乙二醇，和/或二氧化钛，硝基纤维素(lacquer)溶液和合适的有机溶剂或溶剂混合物。为了生产耐胃液的涂层，可使用合适纤维素制剂如乙酰纤维素邻苯二甲酸酯或羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯的溶液。染料或颜料能够被加入到药片或糖衣丸涂层中，例如，为了鉴别或为了表征活性化合物剂量的结合。
可口服的其它药物制剂包括由明胶制备的推入配合式胶囊，以及由明胶和增塑剂如甘油或山梨糖醇制成的软、密封胶囊。该推入配合式胶囊能够含有颗粒形式的活性化合物，它可以与填料如乳糖，粘结剂如淀粉，和/或润滑剂如滑石或硬脂酸镁，和任选的稳定剂混合。在软胶囊中，该活性化合物优选溶解或悬浮在合适的液体如脂肪油或液体石蜡中。另外，可以添加稳定剂。
肠胃外投药的合适配制剂包括水溶性形式，例如水溶性盐，碱溶液和环糊精包合配合物中的活性化合物的水溶液。尤其优选的碱盐是例如用Tris，胆碱氢氧化物，Bis-Tris丙烷，N-甲基葡糖胺或精氨酸制备的铵盐。一种或多种改性或未改性的环糊精能够用于稳定和提高本发明的化合物的水溶性。用于这一目的的有用的环糊精公开于US专利No4,727,064，4,764,604和5,024,998中。
另外，作为合适的油性注射悬浮液的活性化合物悬浮液能够给药。合适的亲脂性溶剂或媒介物包括脂肪油，例如，芝麻油，或合成脂肪酸酯类，例如，油酸乙酯或三酸甘油酯或聚乙二醇-400(化合物可溶于PEG-400中)。水性注射悬浮液能够含有会提高悬浮液的粘度的物质，例如羧甲基纤维素钠，山梨糖醇，和/或右旋糖酐。任选地，该悬浮液也可含有稳定剂。
通式I的化合物能够通过使用交换反应用放射性碘来标记。把热碘换成冷碘是本技术领域中公知的。另外地，放射性碘标记的化合物能够经三丁基甲锡烷基中间体从相应溴化合物制备。参见，美国专利No.5,122,361，引入这里供参考。
本发明还包括用于在哺乳动物体内血栓的体内成象的组合物，其中该组合物是由与放射性原子配位的通式I的化合物组成。
对于通式I的化合物，合适的放射性原子包括Co-57，Cu-67，Ga-67，Ga-68，Ru-97，Tc-99m，In-111，In-113m，Hg-197，Au-198，和Pb-203。一些放射性原子具有优异的性质，可用于放射化学成象技术中。尤其，锝-99m(Tc-99m)是成象的理想放射性原子，因为它的原子核性质。铼-186和-188也有γ发射，可以用于成象。优选的组合物含有该放射性原子，Tc-99m。
通式I的化合物能够通过本技术领域中已知的许多技术当中的任何一种来标记，以提供本发明的组合物。例如，这些化合物能够通过螯合剂如二亚乙基三胺五乙酸(DTPA)或金属硫因来标记，两者都能够以共价键方式连接于通式I的化合物上。
通常，含有锝-99m的本发明的组合物是通过形成锝-99m和还原剂和水溶性配位体的水性混合物，然后让混合物与由通式I表示的本发明化合物接触来制备。例如，本发明的成象化合物是通过让锝-99m(在氧化状态)与具有螯合单元的本发明化合物在还原剂存在下反应，在还原状态(IV或V价态)下的锝-99m之间形成稳定配合物来制备。
本发明的组合物的一个实例是通过用锝-99m标记具有DTPA螯合单元的通式I化合物来制备的。这可通过将预定量(作为5μg到0.5mg)的本发明化合物与含有柠檬酸盐缓冲剂和亚锡类还原剂的水溶液混合，然后添加含有预定水平的放射性(作为15mCi)的新洗脱的高锝酸钠，来实现。在混合物在室温下培养后，经灭菌过滤器(0.2-0.22微米)将反应混合物装入防护的注射器中，然后，如果需要，分配到0.9％注射盐水中。
本发明的组合物的另一个实例是通过用锝-99m标记具有金属硫因螯合单元的通式I化合物来制备的。这可通过如下来实现将高锝酸钠-99m水溶液与葡庚糖酸亚锡盐水溶液混合而形成了有两个葡庚糖酸盐分子的锝-99m(还原状态)的可溶性配合物，然后将这一溶液与已连接了金属硫因的通式I化合物掺混。在允许锝-99m从葡庚糖酸盐配合物交换到通式I化合物的金属硫因中的条件下将混合物培养一段时间后，形成了本发明的锝-标记的组合物。
用于该方法中的还原剂是在药理学上可接受被用于将锝-99m从它的氧化态还原到IV或V价态或用于将铼从它的氧化态还原。能够使用的还原剂是氯化亚锡，氟化亚锡，葡庚糖酸亚锡，酒石酸亚锡，和连二亚硫酸钠。该优选的试剂是亚锡还原剂，尤其氯化亚锡或葡庚糖酸亚锡。还原剂的量是为了将锝-99m还原以便在这一放射性同位素的还原状态下结合于通式I化合物的螯合单元上所需要的量。例如，氯化亚锡(SnCl2)是还原剂和能够以1-1,000μg/ml范围使用。
柠檬酸与锝-99m快速到配合而形成稳定的锝-99m-柠檬酸盐配合物。在与通式I的化合物接触之后，快速地和在温和条件下实现了锝-99m从它的柠檬酸盐配合物中到通式I的化合物的螯合单元上的大体上定量的转移。柠檬酸(作为柠檬酸钠)的量能够是大约0.5mg/ml到最大限度地可溶于该介质中的量。柠檬酸的优选的量是15-30μg/ml。
具有螯合单元的通式I的化合物的量能够是0.001-大约3mg/mL，优选大约0.017到大约0.15mg/mL。最后，高锝酸盐形式的锝-99m能够以优选大约1-50mCi的量使用。每mg本发明化合物而言mCi的量优选是大约30-150。
在通式I的化合物和金属离子转移配位体配合物之间的反应优选是在通式I化合物保持稳定的pH下在水溶液中进行。“稳定”是指化合物保持为可溶解的并保留它的抵抗α-凝血酶的抑制活性。正常地，反应的pH是大约5到9，该优选的pH是在大于6到8范围内。锝-99m-柠檬酸盐配合物和通式I化合物，优选在大约20℃到大约60℃，最优选大约20℃到大约37℃的温度下，被培养一段足够量的时间，以使金属离子从柠檬酸盐配合物中转移到通式I的化合物的螯合单元中。通常，在这些条件下低于一个小时就足够完成该转移反应。
本发明的另一供选择的组合物包括本发明的In-111标记化合物。
本发明还包括本发明的化合物的组合物，它用于在哺乳动物体内的血栓的活体内成象，由配合到顺磁性原子上的通式I表示的化合物组成。
优选的顺磁性原子是具有21到29，42，44和58到70的原子序数的元素的二价或三价离子。合适的离子包括铬(III)，锰(II)，铁(III)，铁(II)，钴(II)，镍(II)，铜(II)，镨(III)，钕(III)，钐(III)和镱(III)。因为它们的非常强烈的磁矩，钆(III)，铽(III)，镝(III)，钬(III)，和铒(III)是优选的。对于顺磁性原子而言的尤其优选的是钆(III)。
本发明的组合物可以通过将通式I的化合物与顺磁性原子相结合来制备。例如，将合适的顺磁性原子的金属氧化物或金属盐(例如，硝酸盐，氯化物或硫酸盐)溶于或悬浮于由水和醇如甲醇，乙醇或异丙醇组成的介质中。这一混合物被加入到等摩尔量的通式I化合物在类似含水介质中的溶液中并加以搅拌。反应混合物可以适度地加热，直到该反应完成为止。所形成的不溶性组合物可由过滤来分离，而可溶解的组合物可以通过溶剂的蒸发来分离。如果在螯合单元上的酸基仍然存在于本发明的组合物中，则可将无机或有机碱，和甚至氨基酸，加入以便将酸性配合物转化成中性配合物，有利于同质的组合物的分离或提纯。有机碱或碱性氨基酸可以用作中和剂，以及无机碱如钠，钾或锂的氢氧化物，碳酸盐或碳酸氢盐。
本发明还包括用于哺乳动物的血栓的体内成象的诊断组合物，该组合物包括可药用的载体和诊断有效量的从通式I化合物形成的组合物。
为了剂量给药所需要的组合物的“诊断有效量”将取决于给药途径，所要治疗的哺乳动物的类型，和在考虑之中的特定的哺乳动物的生理特征。确定这一剂量的这些因素和它们的关系是在医学诊断领域中的熟练执业医生所公知的。同时，诊断有效量和给药方法能够加以调整以适合获得最佳功效，但取决于诸如体重，日常饮食，同时发生的药物治疗和在医学领域中执业医生了解的其它因素之类的因素。在任何情况下，成象的剂量应该足以检测到在所述血栓的位置中成象剂的存在。典型地，放射成象将会要求由本发明的药物组合物所提供的剂量是大约5到20μCi，优选大约10μCi。核磁共振成象将要求所提供的剂量是大约0.001到5mmol/kg，优选大约0.005到0.5mmol/kg的与顺磁性原子配合的通式I化合物。在任一种情况下，本技术领域中都知道该实际剂量取决于血栓的位置。
活体内使用的“可药用的载体”是药物领域中公知的，并描述在，例如Remington’s Pharmaceutical Sciences，MackPublishing Co.(A.R.Gennaro编，1985)。本发明的药物组合物可用药用载体配制以获得供注射给药用的无菌溶液或悬浮液。尤其，注射剂能够以普通的形式(作为液体溶液或悬浮液)，适合在注射之前溶解或悬浮在液体中的固体形式，或作为乳液形式制得。合适的赋形剂是，例如，水，盐水，葡萄糖，甘露糖醇，乳糖，卵磷脂，清蛋白，谷氨酸钠，半胱氨酸盐酸盐，等等。另外，如果需要，可注射的药物组合物可以含有少量的无毒的辅助物质，如润湿剂，pH缓冲剂，等等。如果需要，可以使用吸收增强制剂(例如，脂质体)。
本发明还包括为贮存或给药所制备的诊断组合物。这些另外含有防腐剂，稳定剂和染料。例如，苯甲酸钠，山梨酸和对-羟基苯甲酸酯类可作为防腐剂添加。Id.at1449。另外，抗氧化剂和悬浮剂都可以使用。
本发明的活体内成象方法也提供了与检测或监测血栓的存在，尺寸，退化或增大的现有成象技术相比的几个优点。尤其，本发明提供化合物，组合物和诊断组合物，它们紧密地结合于与血栓有关的凝血酶上和因此减少了起因于未结合的成象剂的循环放射性或顺磁性所造成的“背景”。此外，通过本发明的化合物，组合物或诊断组合物的冠内注射(intracoronary injection)的活体内成象预计几乎是瞬间的，因为这些成象剂即刻饱和了结合于血栓上的凝血酶。
因此，本发明还包括用于哺乳动物中血栓的活体内成象的方法，包括以下步骤(1)对于哺乳动物给予诊断可接受量的本发明的化合物，组合物，或诊断组合物和(2)检测在血管内的血栓。
这里使用的术语“活体内成象”涉及检测哺乳动物体内的血栓，以及监测哺乳动物体内血栓的尺寸、位置和数量的监测及血栓的溶解或生长的方法。
在由这一方法在活体内使用化合物，组合物或诊断组合物时，“给药”是按系统或局部目标方式经胃肠外途径完成。系统给药是通过将本发明的化合物、组合物或诊断组合物注射到适当的和可进入的静脉或动脉中来完成。这包括但不限于由ankecubutal静脉的给药。局部的目标给药是通过将本发明的化合物，组合物或诊断组合物，在流入的近侧注射到被怀疑在注射部位的远侧含有血栓的静脉或动脉中。这包括但不限于直接注入该冠状动脉的脉管系统来使冠状血栓成象，注入颈动脉在脑的脉管系统中使血栓成象，或注入足静脉使腿的深静脉血栓形成成象。
同时，本发明的组合物分配到血栓位置的方式也被考虑在术语“给药”的范围内。例如，连接了螯合单元的由通式I表示的化合物可以注入到哺乳动物体内，随后在以后的时间中注入放射性原子，因此在活体内在血栓位置形成了包括已配合于放射性原子上的通式化合物的组合物。另外地，包括已配合于放射性原子上的通式化合物的一种组合物可以注入到该哺乳动物体内。
前面提及的，在本发明的方法中使用的化合物，组合物或诊断组合物的“诊断有效量”，取决于给药途径，所要治疗的哺乳动物的类型，和所要治疗的特定哺乳动物的生理特征。确定这一剂量的这些因素和它们的关系是在医学诊断领域中的熟练执业医生所公知的。在任何情况下，活体内成象的剂量应该足以检测到在所述血栓的位置中成象剂的存在。典型地，放射成象将会要求由本发明的诊断组合物所提供的剂量是大约5到20μCi，优选大约10μCi。核磁共振成象将要求由诊断组合物所提供的剂量是大约0.001到5mmol/kg，优选大约0.005到0.5mmol/kg的与顺磁性原子配合的通式I化合物。在任一种情况下，本技术领域中都知道该实际剂量取决于血栓的位置。
通过成象检测血栓将因为位于该血栓处的放射性或顺磁性原子的存在而成为可能。
与本发明的组合物和诊断组合物结合的的放射性原子优选通过使用能够检测γ辐射的放射性检测设备如γ照相机等来成象。典型地，辐射成象照相机使用转换介质(其中该高能量γ射线被吸收，置换电子，该电子在它回到轨道状态之后发射光子)，空间检测室中排列的光电检测器(确定该发射光子的位置)，和用于分析在室中检测到的光子并产生图象的电路。
与本发明的组合物和诊断组合物结合的顺磁性原子可在核磁共振成象(MRI)系统中检测到。在这样的系统中，强磁场用于校直排列在病人体内的原子的核自旋矢量。该场因为位于血栓的顺磁性原子的存在而受干扰，在核子回到它们的平衡校直排列(alignments)状态时读取了病人的图像。
下列实施例是本发明的方法和组合物的举例性质，但没有限制意义。正常遇到的和为本技术领域中那些技术人员知晓的其它合适改进和各种条件和参数的调整是在本发明的精神和范围内。
实施例实施例1N-[2-(脒基氨基氧基)乙基]-2-{3-[(2，2-二氟-2-苯乙基)氨基]-6-氯-2-氟苯基}乙酰胺三氟乙酸盐 1.2，2-二氟-2-苯基乙酸乙酯(Middleton，W.，等人，J.Org.Chem.422883(1980))。
PhCF2CO2Et将苯甲酰基甲酸乙酯(12.5g，70.0mmol)和(二乙基氨基)三氟化硫(DAST，18.5mL，140mmol)的混合物在环境温度下搅拌48小时，然后倾倒于冰上。将所形成的油溶解到二氯甲烷(DCM)中，用H2O洗涤，用Na2SO4干燥，浓缩，再通过短硅胶柱过滤，用50％DCM/己烷洗脱。浓缩滤液，获得了呈褐色液体的标题化合物(12.3g，88％收率)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.65-7.63(m，2H)，7.52-7.43(m，3H)，4.30(q，J＝7.1Hz，2H)，1.30(t，J＝7.1Hz，3H)。
2.2，2-二氟-2-苯基乙酸PhCF2CO2H将在前一步骤中制备的2，2-二氟-2-苯基乙酸乙酯(6.0g，30mmol)在1N NaOH(36mL，36mmol)中的悬浮液在环境温度下搅拌。在36小时后，反应变成几乎均相。混合物用1N HCl(36mL)酸化，再用DCM萃取两次。合并萃取物，用H2O洗涤，用Na2SO4干燥，再浓缩，获得呈浅黄色固体的标题化合物(3.85g，81％收率)，它在没有进一步纯化的情况下使用。
3.2，2-二氟-2-苯基乙酰氯PhCF2COCl向在冰浴中和在氩气下的装有在前一步骤中制备的2，2-二氟-2-苯基乙酸(0.8g，5.06mmol)的烧瓶添加草酰氯(5mL)，再将反应混合物搅拌15分钟。添加二甲基甲酰胺(DMF)(37mg，0.506mmol)在DCM(0.5mL)中的溶液。在2小时后，移走冰浴，混合物继续搅拌1小时。蒸发溶剂，添加DCM，然后在真空中蒸发，获得了标题化合物(0.88g，98％收率)，它在没有进一步纯化的情况下立即使用。
4.2-(2，3-二氟-6-硝基苯基)乙酸(Yokomoto，M，W.，等人，1991，EP0470578A1) 在1小时内，向在冰浴中的NaH(11.3g，60％油分散体，282mmol)在四氢呋喃(THF)(35mL)中的悬浮液添加丙二酸二乙酯(45.2g，42.9mL，282mmol)在THF(70mL)中的溶液，使得反应温度保持在20℃以下。一些白色固体在添加过程中沉淀。在1小时内，向以上反应混合物添加1，2，3-三氟-4-硝基苯(25.0g，141mmol)在THF(35mL)中的溶液，使得反应温度保持在10℃以下。移走冰浴，将混合物在环境温度搅拌2小时。将乙酸(18mL)加入到反应溶液中，再在减压下蒸发THF。添加氯仿(200mL)，H2O(250mL)，和浓HCl(18mL)。分离有机层，浓缩，与4N HCI(45mL)和乙酸(35mL)混合，再回流14小时。让反应混合物冷却到室温。过滤出在冷却时沉淀的固体，用二异丙基醚洗涤，再溶解在MeOH(70mL)中。在用活性炭处理后，蒸发溶剂，结晶残留物用异丙基醚洗涤，再过滤，获得了呈白色固体的标题化合物(17.6g，58％收率)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.05-8.01(m，1H)，7.47(dd，J＝17.4，8.9Hz，1H)，4.10(s，2H)。
5.2-(2，3-二氟-6-硝基苯基)乙醇(Yokomoto，M，W.，等人，EP0470578A1(1991))。
经1小时向冷却到10℃以下的NaBH4(3.60g，95.4mmol)在THF(12mL)中的混合物添加如前一步骤制备的2-(2，3-二氟-6-硝基苯基)乙酸(10.9g，50.2mmol)在THF(4mL)中的溶液。再经1小时，向该混合物添加三氟化硼二乙醚络合物(16.5mL，131mmol)在THF(24mL)中的溶液，保持反应温度在10℃以下。在反应后，反应物继续在冰上搅拌15分钟，然后在环境温度下搅拌20分钟。向DCM(180mL)和H2O(140mL)的混合物添加NaHCO3(15g，179mmol)。将反应混合物缓慢加入到以上NaHCO3溶液中，再搅拌一整夜。分离有机层，用Na2SO4干燥，再浓缩，获得了呈浅褐色油的标题化合物(10.1g，99％收率)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.82(dd，J＝9.1，4.4Hz，1H)，7.27-7.18(m，1H)，3.95(t，J＝6.3Hz，2H)，3.30-3.27(m，2H)，1.82(s，1H)。
6.2-{3-[(叔丁基)氨基]-2-氟-6-硝基苯基}乙醇(Yokomoto，M，W.等人。EP0470578A1(1991))
将在前一步骤中制备的2-(2，3-二氟-6-硝基苯基)乙醇(6.00g，29.6mmol)，叔丁基胺(18.6mL，1.77mmol)，DMSO(30mL)，和甲苯(5mL)的混合物在回流下加热16小时。在冷却到环境温度之后，将褐色溶液倾倒于H2O(300mL)中，再过滤沉淀的黄色晶体和用H2O洗涤两次。将黄色固体溶解在CHCl3(70mL)中，用Na2SO4干燥，浓缩，再从己烷中结晶出来，获得呈黄色固体的标题化合物(4.70g，62％收率)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.92(dd，J＝9.3，1.5Hz，1H)，6.79(t，J＝8.7Hz，1H)，4.69(brs，1H)，3.96(dd，J＝11.4，5.9Hz，2H)，3.32(dt，J＝6.5，3.1Hz，2H)，1.75(t，J＝5.3Hz，1H)，1.46(s，9H)。
7.2-(3-氨基-2-氟-6-硝基苯基)乙醇(Yokomoto，M，W.，等人。EP0470578A1(1991)) 将在前一步骤中制备的2-{3-[(叔丁基)氨基]-2-氟-6-硝基苯基}乙醇(3.9g，15mmol)在浓HCl(40mL)中的溶液回流2小时。在冷却到室温后，混合物用乙酸乙酯(6×50mL)萃取。合并萃取物，用饱和NaHCO3(2次)和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，再浓缩，获得了呈固体的粗产物。固体在己烷中研磨，过滤，再在高度真空中干燥，获得了呈黄色固体的标题化合物(2.8g，93％收率)。1H-NMR(400MHz，CD3OD)δ7.80(dd，J＝9.1，1.5Hz，1H)，6.70(t，J＝9.0Hz，1H)，3.77(t，J＝7.1Hz，2H)，3.26(dt，J＝7.3，2.8Hz，2H)。
8.2-(3-氨基-2-氟-6-硝基苯基)乙酸乙酯 向在冰浴中的DIEA(1.80mL，10.6mmol)和在前一步骤中制备的2-(3-氨基-2-氟-6-硝基苯基)乙醇(0.88g，4.40mmol)在THF(10mL)中的溶液添加乙酰氯(319μL，4.49mmol)在THF(5mL)中的溶液。在搅拌1.5小时后，移走冰浴，再将混合物在环境温度下继续搅拌一整夜。添加另外的乙酰氯(63μL，，0.88mmol)，再将混合物搅拌另外16小时。去除溶剂，让混合物在DCM和H2O之间分配。分离有机层，以及含水层用DCM反萃取。合并有机层，用H2O洗涤(二次)，用Na2SO4干燥，浓缩，再用硅胶急骤层析，用EtOAc/DCM(0，1，2，和5％)洗脱，获得了呈黄色固体的标题化合物(0.73g，69％收率)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.85(dd，J＝9.0，1.5Hz，1H)，6.68(t，J＝8.9Hz，1H)，4.38-4.35(m，4H)，3.38(dt，J＝6.6，2.8Hz，2H)，2.03(s，3H)。
9.2-[3-(2，2-二氟-2-苯基乙酰基氨基)-2-氟-6-硝基苯基]乙酸乙酯 向DIEA(1.49mL，8.55mmol)和如在前一步骤中制备的2-(3-氨基-2-氟-6-硝基苯基)乙酸乙酯(690mg，2.85mmol)在DCM(6mL)中的溶液添加根据实施例1的步骤3的工序制备的2，2-二氟-2-苯基乙酰氯(0.99g，5.20mmol)在DCM(3mL)中的溶液。在搅拌24小时后，浓缩混合物，再在DCM和H2O之间分配。分离有机层，含水层用DCM萃取。合并有机层，用H2O和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，浓缩，再用硅胶进行急骤层析，用EtOAc/DCM(0，2.5，和5％)洗脱，获得了呈橙色油的标题化合物(1.04g，92％收率)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.49-8.43(m，2H)，7.87(d，J＝9.2Hz，1H)，6.68(d，J＝7.1Hz，2H)，7.55-7.49(m，3H)，4.35(t，J＝6.4Hz，2H)，3.37(dt，J＝6.3，2.3Hz，2H)，2.01(s，3H)。
10.2-[2-氨基-5-(2，2-二氟-2-苯基乙酰基氨基)-6-氟苯基]乙酸乙酯 将在前一步骤获得的2-[3-(2，2-二氟-2-苯基乙酰基氨基)-2-氟-6-硝基苯基]乙酸乙酯(0.84g，2.12mmol)，和钯催化剂(226mg，10％，担载在活性炭上，0.212mmol)在乙醇(17mL)中的混合物在氢气球下氢化3.5小时。混合物用塞力特(硅藻土)过滤，再用MeOH洗涤。合并滤液和洗液，浓缩，再用硅胶急骤层析，用EtOAc/DCM(5，10，和20％)洗脱，获得了呈白色固体的标题化合物(0.713g，92％收率)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.10(bs，1H)，7.81(t，J＝8.7Hz，1H)，7.68-7.66(m，2H)，7.52-7.44(m，3H)，6.45(dd，J＝8.8，1.2Hz，1H)，4.18(t，J＝7.4Hz，2H)，4.07(bs，2H)，2.90(dt，J＝7.4，1.9Hz，2H)，2.07(s，3H).质谱(LCMS，ESI)C18H18F3N2O3(M+H)的计算值367.1。实测值367.1。
11.N-[4-氨基-2-氟-3-(2-羟乙基)苯基]-2，2-二氟-2-苯基乙酰胺 向在前一步骤中制备的2-[2-氨基-5-(2，2-二氟-2-苯基乙酰基氨基)-6-氟苯基]乙酸乙酯(0.67g，1.84mmol)在MeOH(19mL)中的溶液滴加K2CO3(280mg，2.03mmol)在H2O(4.8mL)中的溶液。将混合物搅拌45分钟，然后用1N HCl中和。蒸发MeOH，混合物再用EtOAc萃取2次。合并萃取物，用H2O洗涤，用Na2SO4干燥，再浓缩，获得了呈浅褐色固体的标题化合物(0.55g，92％收率)。1H-NMR(400MHz，CD3OD)δ7.70-7.68(m，2H)，7.54-7.48(m，3H)，7.01(t，J＝8.5Hz，1H)，6.53(dd，J＝8.6，1.3Hz，1H)，3.70(t，J＝6.7Hz，2H)，2.80(dt，J＝6.7，2.0Hz，2H)。质谱(LCMS，ESI)C16H16F3N2O2(M+H)的计算值325.1.实测值325.3。
12.N-[4-氯-2-氟-3-(2-羟乙基)苯基]-2，2-二氟-2-苯基乙酰胺(Yokomoto，M，W.，等人，1991，EP0470578A1) 将根据前一步骤的工序制备的N-[4-氨基-2-氟-3-(2-羟乙基)苯基]-2，2-二氟-2-苯基乙酰胺(1.63g，5.00mmol)在6N HCl(9mL)中的悬浮液在冰浴中冷却，然后在5分钟内添加NaNO2(434mg，6.30mmol)在H2O(2.4mL)中的溶液。在30分钟后，添加乙酸(2.9mL)和浓HCl(2.9mL)，再将反应混合物搅拌1小时。在20分钟内，向该混合物添加CuCl(848mg，8.55mmol)在浓HCl(5mL)中的溶液。在冰浴中搅拌3小时后，反应混合物用EtOAc(200mL×3)萃取。合并萃取物，用H2O(2次)和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，浓缩，再用硅胶进行急骤层析，用EtOAc/DCM(0，2.5，和5％)洗脱，获得呈浅橙色油的标题化合物(0.845g，48％收率)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.31(s，1H)，8.14(t，J＝8.6Hz，1H)，7.68-7.66(m，2H)，7.54-7.46(m，3H)，7.19(dd，J＝8.9，1.7Hz，1H)，3.86(dd，J＝12.6，6.5Hz，2H)，3.09(dt，J＝6.7，2.3Hz，2H)，1.58(t，J＝5.7Hz，1H)。
质谱(LCMS，ESI)C16H14ClF3NO2(M+H)的计算值344.1。实测值344.2。
13.2-{3-[(2，2二氟-2-苯乙基)氨基]-6-氯-2-氟苯基}乙醇 在0℃和氩气氛围下，在10分钟内向根据前一步骤的工序制备的N-[4-氯-2-氟-3-(2-羟乙基)苯基]-2，2-二氟-2-苯基乙酰胺(1.05g，3.06mmol)在THF(12mL)中的溶液添加硼烷-THF络合物在THF中的溶液(12.3mL，12.3mmol，1.0M)，继续搅拌反应混合物，直到冰浴开始无效为止。将反应混合物在回流下加热20小时，再冷却到室温。添加K2CO3(1.7g，12mmol)在H2O(12mL)中的溶液，在真空中去除THF，混合物用DCM萃取(3次)。合并萃取物，用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，浓缩，再用硅胶进行急骤层析，用EtOAC/DCM(0和2.5％)洗脱，获得了呈无色油的标题化合物(815mg，81％收率)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.52-7.43(m，5H)，6.97(dd，J＝8.8，1.7Hz，1H)，6.51(t，J＝8.9Hz，1H)，4.17(bs，1H)，3.83(t，J＝6.9Hz，2H)，3.74(dt，J＝13.4，6.6Hz，2H)，3.04(dt，J＝6.9，2.4Hz，2H)，1.43(s，1H)。质谱(LCMS，ESI)C16H16ClF3NO(M+H)的计算值330.1。实测值330.3。
14.2-{3-[(2，2-二氟-2-苯基乙基)氨基]-6-氯-2-氟苯基}乙醛 向在冰浴中的DMSO(1.03mL，14.5mmol)，DIEA(1.99mL，11.4mmol)，和根据前一步骤的工序制备的2-{3-[(2，2-二氟-2-苯乙基)氨基]-6-氯-2-氟苯基}乙醇(1.45g，4.4mmol)在DCM(140mL)中的溶液添加三氧化硫吡啶络合物(1.82g，11.4mmol)，再在相同的温度下搅拌3.5小时。混合物用DCM(300mL)稀释，用10％柠檬酸(3次)，H2O和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，再浓缩，获得呈橙色油的的标题化合物(1.43g，99％收率)，它们在没有进一步纯化的情况下使用。
15.2-{3-[(2，2-二氟-2-苯乙基)氨基]-6-氯-2-氟苯基}乙酸(Dalcanale，E.，et al.J.Org.Chem.，51567(1986))
在30分钟内，将亚氯酸钠(692mg，6.11mmol)在H2O(6.1mL)中的溶液添加到在前一步骤制备的2-{3-[(2，2-二氟-2-苯基乙基)氨基]-6-氯-2-氟苯基}乙醛(1.43g，4.37mmol)在DMSO(4.5mL)中和NaH2PO4(141mg，1.18mmol)在H2O(1.7mL)中的搅拌混合物中。在添加后，混合物在环境温度下搅拌一整夜，用10M HCl酸化到pH1，再用DCM(3次)萃取。合并萃取物，用H2O和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，再在真空中浓缩。所得残留物用硅胶进行急骤层析，用MeOH/DCM(0，2，和4％)洗脱，获得了呈浅褐色固体的标题化合物(0.77g，51％收率)。
1H-NMR(400MHz，CD3OD)δ7.53-7.51(m，2H)，7.44-7.41(m，3H)，6.93(dd，J＝8.9，1.8Hz，1H)，6.62(t，J＝9.1Hz，1H)，3.80(t，J＝13.7Hz，2H)，3.74(d，J＝2.2Hz，2H)。质谱(LCMS，ESI)C16H14ClF3NO2(M+H)的计算值344.1。实测值344.4。
16.2-氮杂-3-{[2-(2-{3-[(2，2-二氟-2-苯乙基)氨基]-6-氯-2-氟苯基}乙酰基氨基)乙氧基]氨基}-3-[(叔丁氧基)羰基氨基]丙-2-烯酸叔丁酯 向在冰浴中的前一步骤制备的2-{3-[(2，2-二氟-2-苯乙基)氨基]-6-氯-2-氟苯基}乙酸(28mg，82μmol)在DMF(0.3mL)中的溶液添加BOP(58mg，130μmol)，[N，N’-二(叔丁氧基羰基)]-2-氨基乙氧基胍的HCl盐(36mg，102ummol)(Tianbao Lu等人，WO99/26926(1999))，和DIEA(42mg，33μmol)在DMF(0.1mL)中的溶液。在冰浴开始无效后，将反应混合物在环境温度下继续搅拌一整夜。蒸发溶剂，所得残留物在饱和NaHCO3和DCM之间分配。水相用DCM萃取，合并有机层，用10％KHSO4，H2O和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，浓缩，再用硅胶进行急骤层析，用MeOH/DCM(1％)洗脱，获得呈无色油的标题化合物(44mg，83％收率)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.54-7.50(m，2H)，7.45-7.42(m，3H)，6.93(dd，J＝8.8，1.7Hz，1H)，6.63(t，J＝9.0Hz，1H)，4.03(t，J＝4.8Hz，2H)，3.81(t，J＝13.7Hz，2H)，3.71(d，J＝1.9Hz，2H)，3.47(t，J＝5.1Hz，2H)，1.50(s，9H)，1.48(s，9H)。
质谱(LCMS，ESI)C29H38ClF3N5O6(M+H)的计算值644.2。实测值644.1。
17.N-[2-(脒基氨基氧基)乙基]-2-{3-[(2，2-二氟-2-苯乙基)氨基]-6-氯-2-氟苯基}乙酰胺三氟乙酸盐 将在前一步骤中制备的2-氮杂-3-{[2-(2-[3-[(2，2-二氟-2-苯乙基)氨基]-6-氯-2-氟苯基]乙酰基氨基)乙氧基]氨基}-3-[(叔丁氧基)羰基氨基]丙-2-烯酸叔丁酯(44mg，68μmol)在TFA/DCM(2mL，2/3)中的溶液在室温下搅拌4小时。蒸发溶剂，以及所得残留物用硅胶进行急骤层析，用在MeOH/DCM(5和10％)中的0.05％TFA洗脱，获得呈白色固体的标题化合物(37mg，98％收率)。1H-NMR(400MHz，CD3OD)δ7.67-7.52(m，2H)，7.47-7.42(m，3H)，6.96(dd，J＝8.9，1.7Hz，1H)，6.66(t，J＝9.1Hz，1H)，3.93(t，J＝5.4Hz，2H)，3.82(t，J＝13.8Hz，2H)，3.71(d，J＝2.0Hz，2H)，3.50(t，J＝5.4Hz，2H).质谱(LCMS，ESI)C19H22ClF3N5O2(M+H)的计算值444.1。
实测值444.2。
实施例2N-[(6-氨基-2-甲基(3-吡啶基))甲基]-2-{3-[(2，2-二氟-2-苯乙基)氨基]-6-氯-2-氟苯基}乙酰胺盐酸盐 1.2-{3-[(2，2-二氟-2-苯乙基)氨基]-6-氯-2-氟苯基}-N-({6-[(叔丁氧基)羰基氨基]-2-甲基(3-吡啶基)}甲基)乙酰胺 向在实施例1的步骤15中制备的2-{3-[(2，2-二氟-2-苯乙基)氨基]-6-氯-2-氟苯基}乙酸(516mg，1.5mmol)在DMF(8.0mL)中的溶液添加N-[5-(氨基甲基)-6-甲基(2-吡啶基)](叔丁氧基)羧酰胺(498mg，2.1mmol)(Sanderson，P.E.等人，WO97/01338(1997))，BOP(1.06g，2.4mmol)，和DIEA(0.78mL，4.5mmol)。在搅拌18小时后，添加另外的胺(107mg，450μmol)，混合物继续搅拌18小时。蒸发溶剂，以及让反应混合物在DCM和饱和NaHCO3之间分配。分离有机层，以及含水层用DCM萃取。合并有机层，用10％KHSO4(2二次)，H2O，和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，浓缩，再用硅胶进行急骤层析，用MeOH/DCM(0，1.5，和2.5％)洗脱，获得了呈浅褐色泡沫的标题化合物(770mg，91％收率)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.66(d，J＝8.4Hz，1H)，7.51-7.41(m，6H)，7.23(bs，1H)，7.01(dd，J＝8.8，1.5Hz，1H)，6.57(t，J＝9.0Hz，1H)，5.64(brs，1H)，4.37(d，J＝5.6Hz，2H)，4.26-4.22(m，1H)，3.79-3.70(m，4H)，2.35(s，3H)，1.50(s，9H)。质谱(LCMS，ESI)C28H31ClF3N4O3(M+H)的计算值563.2。实测值562.9。
2.N-[(6-氨基-2-甲基(3-吡啶基))甲基]-2-{3-[(2，2-二氟-2-苯乙基)氨基]-6-氯-2-氟苯基}乙酰胺盐酸盐 向装有在前一步骤制备的2-{3-[(2，2-二氟-2-苯乙基)氨基]-6-氯-2-氟苯基}-N-({6-[(叔丁氧基)羰基氨基]-2-甲基(3-吡啶基)}甲基)乙酰胺(770mg，1.37mmol)的烧瓶添加HCl在1，4-二噁烷(5mL，20mmol，4.0M)中的溶液。在环境温度下1.5小时后，一些固体沉淀下来。添加MeOH(1mL)在DCM(3mL)中溶液，以溶解该固体，再将混合物搅拌另外4小时。去除溶剂，所得残留物用DCM(5mL×2)，醚(8mL×2)洗涤，再在高度真空中干燥，获得呈浅褐色固体的标题化合物(620mg，91％收率)。1H-NMR(400MHz，CD3OD)δ7.81(d，J＝9.1Hz，1H)，7.54-7.51(m，2H)，7.45-7.42(m，3H)，6.94(dd，J＝8.9，1.6Hz，1H)，6.80(d，J＝9.1Hz，1H)，6.65(t，J＝9.1Hz，1H)，4.25(s，2H)，3.81(t，J＝13.8Hz，2H)，3.70(d，J＝1.8Hz，2H)，2.50(s，3H)。质谱(LCMS，ESI)C23H23ClF3N4O(M+H)的计算值463.1。实测值463.7。
实施例3N-[(6-氨基-2，4-二甲基(3-吡啶基))甲基]-2-{3-[(2，2-二氟-2-苯乙基)氨基]-6-氯-2-氟苯基}乙酰胺盐酸盐
1.2-{3-[(2，2-二氟-2-苯乙基)氨基]-6-氯-2-氟苯基]-N-({6-[(叔丁氧基)羰基氨基]-2，4-二甲基(3-吡啶基)}甲基)乙酰胺 向如在实施例1的步骤15中制备的2-{3-[(2，2-二氟-2-苯乙基)氨基]-6-氯-2-氟苯基}乙酸(25mg，73μmol)在DMF(0.25mL)中的溶液添加BOP(52mg，116μmol)，DIEA(38mg，295mol)在DMF(0.1mL)中的溶液，和N-[5-(氨基甲基)-4，6-二甲基(2-吡啶基)](叔丁氧基)羧酰胺(23mg，91μmol)(Sanderson，P.E.等人，WO97/01338(1997))。在环境温度下搅拌2天后，添加另外的胺(7mg，28μmol)，BOP(16mg，36μmol)，和DIEA(9mg，70μmol)，再将混合物搅拌另外16小时。蒸发溶剂，所得残留物在饱和NaHCO3和DCM之间分配。分离有机层，含水层用DCM萃取。合并有机层，用10％柠檬酸，H2O和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，浓缩，再用硅胶进行急骤层析，用MeOH/DCM(0，1，2％)洗脱，获得了呈浅褐色固体的标题化合物(18.5mg，44％收率)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.58(s，1H)，7.50-7.41(m，5H)，7.24(s，1H)，6.98(dd，J＝8.8，1.1Hz，1H)，6.55(t，J＝9.0Hz，1H)，5.33(bs，1H)，4.40(d，J＝4.7Hz，2H)，4.24-4.20(m，1H)，3.78-3.70(m，4H)，2.39(s，3H)，2.28(s，3H)，1.50(s，9H)。质谱(LCMS，ESI)C29H33ClF3N4O3(M+H)的计算值577.0。实测值577.1。
2.N-[(6-氨基-2，4-二甲基(3-吡啶基))甲基]-2-{3-[(2，2-二氟-2-苯乙基)氨基]-6-氯-2-氟苯基}乙酰胺盐酸盐 将HCl在1，4-二噁烷(4.0M，0.5mL，2mmol)中的溶液加入到如在前一步骤中制备的2-{3-[(2，2-二氟-2-苯乙基)氨基]-6-氯-2-氟苯基}-N-({6-[(叔丁氧基)羰基氨基]-2，4-二甲基(3-吡啶基)}甲基)乙酰胺(18.5mg，32μmol)中。在环境温度下搅拌3小时后，固体沉淀出来。添加MeOH(0.1mL)在DCM(1mL)中的溶液，以溶解该固体。在搅拌另外2小时后，浓缩反应物，获得褐色固体，用醚和DCM洗涤，再在真空中干燥，获得呈浅褐色固体的标题化合物(12.6mg，77％收率)。1H-NMR(400MHz，CD3OD)δ8.40(bs，1H)，7.53-7.51(m，2H)，7.47-7.40(m，3H)，6.93(dd，J＝8.8，1.3Hz，1H)，6.68(s，1H)，6.64(t，J＝9.1Hz，1H)，4.31(d，J＝4.6Hz，2H)，3.81(t，J＝13.8Hz，2H)，3.67(d，J＝1.2Hz，2H)，2.54(s，3H)，2.42(s，3H)。质谱(LCMS，ESI)C24H25ClF3N4O(M+H)的计算值477.2。实测值477.5。
实施例4N-[2-(脒基氨基氧基)乙基]-2-(3-{[2，2-二氟-2-(4-氟萘基)乙基]氨基}-6-氯-2-氟苯基)乙酰胺三氟乙酸盐
1.2-(4-氟萘基)-2-氧代乙酸乙酯 将正丁基锂(2.5M THF溶液，20mL，50mmol)冷却-78℃，再缓慢添加1-溴-4-氟萘(11.25g，50mmol)在THF(40mL)中的溶液和将混合物搅拌1小时。将反应混合物升温到-20℃，然后加入到-78℃的草酸二乙酯(29.2g，200mmol)在THF(40mL)中的溶液中。在缓慢升温到室温后，添加EtOAc(100mL)，10％HCl(50mL)和水(50mL)和分离各相。含水层用EtOAc(2×100mL)萃取，再合并有机层，用盐水(50mL)洗涤，和用Na2SO4干燥。在高度真空下蒸发溶剂和过量草酸二乙酯后，残留物通过急骤柱层析法(1∶1DCM∶己烷)纯化，获得了呈白色固体的标题化合物(9.4g，76％收率)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ(9.13(d，J＝8.6Hz，1H)，8.20(d，J＝8.4Hz，1H)，8.01(dd，J＝8.2，5.4Hz，1H)，7.76(t，J＝7.2Hz，1H)，7.67(t，J＝8.1Hz，1H)，7.21(t，J＝8.5Hz，1H)，4.49(q，J＝7.1Hz，2H)，1.45(t，J＝7.1Hz，3H)。
2.2，2-二氟-2-(4-氟萘基)乙酸乙酯 向在前一步骤制备的2-(4-氟萘基)-2-氧代乙酸乙酯(9.4g，38.2mmol)在DCM(60mL)中的溶液添加(16.1g，100mmol)。混合物在室温下搅拌一整夜，缓慢倾倒于冰中，再用DCM(3×50mL)萃取。合并有机层，用盐水洗涤，和用Na2SO4干燥。在蒸发溶剂后，残留物通过急骤柱层析法纯化。(1∶1DCM∶己烷)，获得呈浅褐色油的标题化合物(9.7g，95％收率)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.20(m，2H)，7.82(dd，J＝8.2，5.3Hz，1H)，7.63(m，2H)，7.20(t，J＝8.4Hz，1H)，4.28(q，J＝7.1Hz，2H)，1.24(t，J＝7.1Hz，3H)。
3.2，2-二氟-2-(4-氟萘基)乙酸 向如在前一步骤制备的2，2-二氟2(4-氟萘基)乙酸乙酯(9.6g，35.8mmol)在甲醇(20mL)和THF(20mL)中的溶液添加NaOH(2.0g，50mmol)在水(40mL)中的溶液。将反应混合物在室温下搅拌2小时。在真空下蒸发甲醇和THF后，水相用10％HCl酸化到pH2，再用DCM(3×50mL)萃取。合并萃取物，用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，再浓缩，获得了呈灰白色固体的标题化合物(8.1g，94％收率)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ9.68(brs，1H)，8.18(m，2H)，7.83(dd，J＝8.1，5.3Hz，1H)，7.62(m，2H)，7.19(t，J＝8.3Hz，1H)。
4.2-{3-[2，2二氟-2-(4-氟萘基)乙酰基氨基]-2-氟-6-硝基苯基}乙酸乙酯 向DIEA(7.8mL)和在实施例1的步骤8中制备的2-(3-氨基-2-氟-6-硝基苯基)乙酸乙酯(4.6g，19mmol)在DCM(60mL)中的溶液添加在DCM(40mL)中的2，2-二氟-2-(4-氟萘基)乙酰氯(通过用草酰氯回流如在前一步骤中制备的2，2-二氟-2-(4-氟萘基)乙酸来制备)(7.8g，30mmol)。将混合物在室温下搅拌1小时。添加另外的DCM(100mL)，所得混合物10％柠檬酸(3×40mL)和盐水洗涤，再用Na2SO4干燥。在蒸发溶剂后，残留物通过急骤柱层析法纯化，用DCM洗脱，获得了呈黄色油的标题化合物(5.3g，61％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.45(m，2H)，8.21(d，J＝7.0Hz，2H)，7.87(s，1H)，7.85(t，J＝4.1Hz，1H)，7.66(m，2H)，7.22(t，J＝8.3Hz，1H)，4.34(t，J＝6.4Hz，2H)，3.36(t，J＝6.4Hz，2H)，2.00(s，3H)。
5.2-{2-氨基-5-[2，2-二氟-2-(4-氟萘基)乙酰基氨基]-6-氟苯基}乙酸乙酯 在氢气下，将如在前一步骤制备的2-{3-[2，2-二氟-2-(4-氟萘基)乙酰基氨基)-2-氟-6-硝基苯基}乙酸乙酯(4.9g，10.5mmol)和Pd/C(10％，500mg)在乙醇(50mL)和THF(50mL)中的混合物搅拌5小时。反应混合物用塞力特过滤，再用THF和MeOH洗涤。合并滤液和洗液，在真空中浓缩，再用硅胶进行急骤层析，用EtOAc/DCM(0-2％)洗脱，获得了呈灰白色固体的标题化合物(3.8g，83％)，1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.27(d，J＝8.2Hz，1H)，8.19(d，J＝8.6Hz，1H)，8.10(s，1H)，7.82(m，2H)，7.63(m，2H)，7.19(t，J＝8.6Hz，1H)，6.46(d，J＝8.7Hz，1H)，4.19(t，J＝7.4Hz，2H)，4.08(s，2H)，2.91(t，J＝7.3Hz，2H)，2.08(s，3H)。
6.N-[4-氨基-2-氟-3-(2-羟乙基)苯基]-2，2-二氟-2-(4-氟萘基)乙酰胺
向如在前一步骤中制备的2-{2-氨基-5-[2，2-二氟-2-(4-氟萘基)乙酰基氨基]-6-氟苯基}乙酸乙酯(3.8g，8.8mmol)在MeOH(40mL)和THF(20mL)中的溶液添加K2CO3(1.68g，12mmol)在水(30mL)中的溶液。混合物在室温下搅拌3小时。添加另外的水(50mL)，所得混合物用EtOAc(3×50mL)萃取。合并萃取物。用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，以及在真空中浓缩，获得了呈灰白色固体的标题化合物(3.3g，96％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.27(d，J＝8.4Hz，1H)，8.19(d，J＝8.2Hz，1H)，8.13(s，1H)，7.81(m，2H)，7.64(m，2H)，7.19(t，J＝8.7Hz，1H)，6.47(d，J＝8.7Hz，1H)，4.07(s，2H)，3.89(t，J＝5.6Hz，2H)，2.85(t，J＝5.5Hz，2H)。
7.N-[4-氯-2-氟-3-(2-羟乙基)苯基-2，2-二氟-2-(4-氟萘基)乙酰胺(Doyle，M.P.，等人，J.Org.Chem.，422426(1977)) 在氩气氛围下，向装有氯化铜(II)(1.84g，13.7mmol)的烧瓶添加叔丁基腈(1.46g，12.8mmol，90％，Aldrich)在乙腈(35mL)中的溶液。所得绿色反应混合物在冰浴中在0℃下冷却，以及经45分钟加入根据前一步骤的工序制备的N-[4-氨基-2-氟-3-(2-羟乙基)苯基]-2，2-二氟-2-(4-氟萘基)乙酰胺(3.58g，9.13mmol)在乙腈(60mL)中的溶液。在0℃下搅拌另外6小时后，将所得褐色混合物加热到环境温度，然后倾倒于20％HCl水溶液(160mL)中，再用DCM萃取(3次)。合并萃取物，用20％HCl，H2O，和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，浓缩，再用硅胶进行急骤层析，用EtOAc/DCM(0和2.5％)洗脱，获得了呈白色固体的标题化合物(2.1g，56％收率)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.31(brs，1H)，8.24-8.12(m，3H)，7.84(dd，J＝8.2，5.3Hz，1H).7.68-7.60(m，2H)，7.22-7.20(m，2H)，3.87(dd，J＝12.6，6.5Hz，2H)，3.09(dt，J＝6.7，2.2Hz，2H)，1.47(t，J＝5.6Hz，2H)。质谱(LCMS，ESI)C20H15ClF4NO2(M+H)的计算值412.1。
实测值412.6。
8.2-(3-{[2，2-二氟-2-(4-氟萘基)乙基]氨基}-6-氯-2-氟苯基)乙醇 在0℃下，经20分钟向在前一步骤制备的N-[4-氯-2-氟-3-(2-羟乙基)苯基-2，2-二氟-2-(4-氟萘基)乙酰胺(1.9g，4.6mmol)在THF(19mL)中的溶液滴加BH3·THF络合物的溶液(19.4mL，19.4mmol，1.0MTHF溶液)，继续搅拌反应混合物，直到冰浴开始无效为止。混合物然后在油浴中在回流下在75-80℃加热3小时，继续在环境温度搅拌过夜。添加NaHCO3(1.63g，19.4mmol)在H2O(20mL)中的溶液，蒸发THF，以及所得混合物用DCM萃取2次。合并萃取物，用HO和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，浓缩，以及用硅胶进行急骤层析，用EtOAc/DCM(0，1，1.5％)洗脱，获得呈白色固体的标题化合物(805mg，44％收率)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.24-8.19(m，2H)，7.70-7.61(m，3H)，7.14(t，J＝9.3Hz，1H)，6.90(dd，J＝8.7，1.6Hz，1H)，6.42(t，J＝8.9Hz，1H)，4.22-4.16(m，1H)，4.00(dt，J＝13.4，6.8Hz，2H)，3.82(dd，J＝12.1，6.4Hz，2H)，3.02(dt，J＝6.8，2.3Hz，2H)，1.39(brs，1H)。质谱(LCMS，ESI)C20H17ClF4NO(M+H)的计算值398.1。实测值398.3。
9.2-(3-{[2，2-二氟-2-(4-氟萘基)乙基]氨基}-6-氯-2-氟苯基)乙醛 向在冰浴中的DMSO(470mg，6.0mmol)，DIEA(823μL，4.74mmol)和在前一步骤制备的2-(3-{[2，2-二氟-2-(4-氟萘基)乙基]氨基}-6-氯-2-氟苯基)乙醇(723mg，1.82mmol)在DCM(55mL)中的溶液添加三氧化硫吡啶络合物(754mg，4.74mmol)。在搅拌3.5小时后，反应混合物用DCM(110mL)洗脱。分离有机层，以及含水层用DCM(100mL)萃取。合并有机层，以及含水层用DCM(100mL)萃取。合并有机层，用10％柠檬酸(3次)，H2O和盐水洗涤，用Na2SO4干燥和浓缩，获得了呈橙色油的标题化合物(722mg，定量收率)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ9.69(d，J＝1.1Hz，1H)，8.22-8.18(m，2H)，7.67-7.60(m，3H)，7.14(t，J＝9.2Hz，1H)，6.94(d，J＝8.8Hz，1H)，6.49(t，J＝8.7Hz，1H)，4.20(bs，1H)，4.00(dt，J＝13.3，6.7Hz，2H)，3.83(s，2H)。
10.2-(3-{[2，2-二氟-2-(4-氟萘基)乙基]氨基}-6-氯-2-氟苯基)乙酸
经30分钟，将氯化钠(309mg，2.73mmol，80％)在H2O(3.0mL)中的溶液滴加到到如在前一步骤制备的2-(3-{{2，2-二氟-2-(4-氟萘基)乙基]氨基}-6-氯-2-氟苯基)乙醛(722mg，1.82mmol)在DMSO(3.6mL)中和NaH2PO4(74mg，0.55mmol)在H2O(0.9mL)中的搅拌混合物中。在添加后，将混合物在环境温度下搅拌48小时，然后用10MHCl酸化到pH1再用DCM萃取(3次)。合并萃取物，用H2O和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，和在真空中浓缩。所得残留物用硅胶进行急骤层析，用MeOH/DCM(0，1，1.5，和2％)洗脱，获得了起始醛2-(3-{[2，2-二氟-2-(4-氟萘基)乙基]氨基}-6-氯-2-氟苯基)乙醛(165mg，23％收率)和呈固体的标题化合物(570mg，76％收率)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.32(d，J＝8.4Hz，1H)，8.15(d，J＝8.0Hz，1H)，7.71-7.61(m，3H)，7.18(dd，J＝9.8，8.5Hz，1H)，6.78(dd，J＝8.8，1.5Hz，1H)，6.44(t，J＝9.1Hz，1H)，4.05(t，J＝13.5Hz，2H)，3.69(d，J＝2.1Hz，2H)。
11.2-氮杂-3-({2-[2-(3-{[2，2-二氟-2-(4-氟萘基)乙基]氨基}-6-氯-2-氟苯基)乙酰基氨基]乙氧基}氨基)-3-[(叔丁氧基)羰基氨基]丙-2-烯酸叔丁酯 向在冰浴中的如前一步骤制备的2-(3-{[2，2-二氟-2-(4-氟萘基)乙基]氨基}-6-氯-2-氟苯基)乙酸(570mg，1.39mmol)在DMF(7.5mL)中的溶液添加BOP(981mg，2.22mmol)，[N，N’-二(叔丁氧羰基)]-2-氨基乙氧基胍的HCl盐(689mg，1.94mmol)，和DIEA(0.96mL，5.55mmol)。在冰浴开始无效后，混合物在环境温度下搅拌一整夜。添加另外的BOP(123mg，0.28mmol)和[N，N’-二(叔丁氧羰基)]-2-氨基乙氧基胍的HCl盐(98mg，0.28mmol)，再将反应混合物搅拌24小时。蒸发溶剂，以及所得残留物在饱和NaHCO3和DCM之间分配。分离有机层，以及含水层用DCM萃取。合并有机层，用10％KHSO4，H2O，和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，浓缩，以及用硅胶进行急骤层析，用MeOH/DCM(0，0.5，和1％)洗脱，获得了呈白色泡沫的标题化合物(720mg，73％yield)。1H-NMR(400MHz，CD3OD)δ9.12(s，1H)，8.24-8.19(m，2H)，7.78-7.81(m，1H)，7.70-7.60(m，4H)，7.14(dd，J＝9.6，8.4Hz，1H)，6.91(dd，J＝8.8，1.6Hz，1H)，6.44(t，J＝8.8Hz，1H)，4.20-4.15(m，1H)，4.13-4.10(m，2H)，3.98(dt，J＝13.4，6.7Hz，2H)，3.78(d，J＝1.9Hz，2H)，3.60(dd，J＝8.6，4.9Hz，2H)，1.51(s，9H)，1.48(s，9H)。质谱(LCMS，ESI)C33H39ClF4N5O6(M+H)的计算值712.2。实测值712.3.
12.N-[2-(脒基氨基氧基)乙基]-2-(3-{[2，2-二氟-2-(4-氟萘基)乙基]氨基}-6-氯-2-氟苯基)乙酰胺三氟乙酸盐 将如前一步骤制备的2-氮杂-3-({2-[2-(3-{[2，2-二氟-2-(4-氟萘基)乙基]氨基}-6-氯-2-氟苯基)乙酰基氨基]乙氧基}氨基)-3-[(叔丁氧基)羰基氨基]丙-2-烯酸叔丁酯(720mg，1.01mmol)在TFA/DCM(2∶3，30mL)中的溶液在环境温度下搅拌4小时。蒸发溶剂，所得残留物用硅胶进行急骤层析，用在MeOH/DCM(5和10％)中的0.05％TFA洗脱，获得呈浅褐色泡沫的标题化合物(626mg，99％收率)。1H-NMR(400MHz，CD3OD)δ8.33(d，J＝8.5Hz，1H)，8.17-8.15(m，1H)，7.73-7.63(m，3H)，7.20(dd，J＝10.0，8.3Hz，1H)，6.82(dd，J＝8.8，1.6Hz，1H)，6.92(t，J＝9.1Hz，1H)，4.07(t，J＝13.7Hz，2H)，3.92(t，J＝5.4Hz，2H)，3.67(d，J＝1.8Hz，2H)，3.52-3.51(m，2H)。质谱(LCMS，ESI)C23H23ClF4N5O2(M+H)的计算值512.1。实测值512.2。
实施例5N-[(6-氨基-2-甲基(3-吡啶基))甲基]-2-(3-{[2，2-二氟-2-(4-氟萘基)乙基]氨基}-6-氯-2-氟苯基)乙酰胺盐酸盐 1.2-(3-{[2，2-二氟-2-(4-氟萘基)乙基]氨基}-6-氯-2-氟苯基)-N-({6-[(叔丁氧基)羰基氨基]-2-甲基(3-吡啶基)}甲基)乙酰胺 向根据实施例4的步骤10制备的2-(3-{[2，2-二氟-2-(4-氟萘基)乙基]氨基}-6-氯-2-氟苯基)乙酸(15mg，37μmol)在DMF(0.3mL)中的溶液添加BOP(26mg，58μmol)，N-[5-(氨基甲基)-6-甲基(2-吡啶基)](叔丁氧基)羧酰胺(12mg，51μmol)和DIEA(19mg，146μmol)在DMF(0.1mL)中的溶液(Sanderson，P.E.等人，WO97/01338(1997))。将混合物搅拌一整夜，蒸发溶剂，所得混合物在饱和NaHCO3和DCM之间分配。分离有机层，以及含水层用DCM萃取。合并有机层，用10％KHSO4，H2O，和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，浓缩，以及用硅胶进行急骤层析，用MeOH/DCM(0.3，0.6，和1％)洗脱，获得了呈白色固体的标题化合物(11mg，49％收率)。1H-NMR(400MHz，CD3OD)δ8.33(d，J＝8.4Hz，1H)，8.17-8.14(m，1H)，7.72-7.61(m，4H)，7.55(d，J＝8.5Hz，1H)，7.19(dd，J＝10.0，8.3Hz，1H)，6.81(dd，J＝8.8，1.7Hz，1H)，6.47(t，J＝9.1Hz，1H)，4.32(s，2H)，4.12-4.03(m，2H)，3.67(d，J＝2.0Hz，2H)，2.40(s，3H)，1.50(s，9H)。质谱(LCMS，ESI)C32H32ClF4N4O3(M+H)的计算值631.2。实测值631.1。
2.N-[(6-氨基-2-甲基(3-吡啶基))甲基]-2-(3-{[2，2-二氟-2-(4-氟萘基)乙基]氨基}-6-氯-2-氟苯基)乙酰胺盐酸盐 将前一步骤制备的2-(3-{[2，2-二氟-2-(4-氟萘基)乙基]氨基}-6-氯-2-氟苯基)-N-({6-[(叔丁氧基)羰基氨基]-2-甲基(3-吡啶基)}甲基)乙酰胺(10mg，16μmol)在HCl(0.5mL，4.0M的1，4-二噁烷溶液)中的溶液在环境温度下搅拌2小时。添加MeOH/DCM(25％，0.4mL)的溶液，再将混合物继续搅拌一整夜。蒸发溶剂，以及所得褐色残留物用硅胶进行急骤层析，用MeOH/DCM(2.5，5，和10％)洗脱，获得了固体产物。它用在DCM(0.5mL)中的HCl溶液(0.01mL，4.0M1，4-二噁烷溶液，40μmol)处理，搅拌5分钟，以及蒸发溶剂，获得了呈白色固体的标题化合物(6.2mg，69％收率)。1H-NMR(400MHz，CD3OD)δ8.26(d，J＝8.4Hz，1H)，8.17-8.14(m，1H)，7.80(d，J＝9.1Hz，1H)，7.73-7.64(m，4H)，7.20(dd，J＝10.0，8.3Hz，1H)，6.82-6.79(m，1H)，6.49(t，J＝9.1Hz，1H)，4.24(s，2H)，4.10-4.02(m，2H)，3.66(d，J＝2.3Hz，2H)，2.49(s，3H)。质谱(LCMS，ESI)C27H24ClF4N4O(M+H)的计算值531.1。实测值531.6。
实施例6N-[2-(胍基氧基)乙基]-2-(3-{[苄基磺酰基]氨基}苯基)乙酰胺三氟乙酸盐 1.N-(2-羟乙基)-2-(3-硝基苯基)乙酰胺 向3-硝基苯乙酸(3.21g，17.7mmol)，乙醇胺(2.8g，46mmol)和三乙胺(3.0mL，22mmol)在无水DMF(110mL)中的溶液添加六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基-三-吡咯烷基-鏻(PyBOP，9.37g，18.0mmol)在无水DMF(80mL)中的溶液。在环境温度下搅拌16小时后(在氮气下)，将反应混合物在真空中浓缩，溶解在DCM中，再过滤。滤液用10％柠檬酸水溶液，饱和NaHCO3水溶液，pH7缓冲液，和盐水洗涤，用Na2SO4干燥和过滤。蒸发的滤液然后通过急骤层析法纯化(在DCM中的10％甲醇)，获得了呈浅褐色固体的标题化合物(1.02g，26％)。1HNMR(300MHz，CDCl3/CD3OD)δ8.18(m，1H)，8.11(ddd，1H，J＝8.1Hz，2.4Hz，1.1Hz)，7.72(m，1H)，7.60(t，1H，J＝7.8Hz)，3.62(s，2H)，3.44(t，2H，J＝5.9Hz)，3.16(t，2H，J＝5.9Hz)。
2.N-[2-(N’-邻苯二甲酰亚胺基)羟乙基]-2-(3-硝基苯基)乙酰胺 通过注射器向前一步骤的产物(1.02g，4.55mmol)，N-羟基邻苯二甲酰亚胺(0.76g，4.64mmol)，和三苯基膦(1.22g，4.65mmol)在无水THF(100mL)中的溶液添加二乙基氮杂二羧酸酯(0.75mL，4.77mmol)。在环境温度下搅拌一整夜(在氮气下)，反应物在真空中浓缩和通过急骤层析法纯化(在DCM中的40％乙酸乙酯)，获得了不纯产物，将它溶解在DCM中，冷却，再过滤。蒸发的滤液然后通过急骤层析法(在己烷中的66％-100％乙酸乙酯)纯化，获得了呈白色固体的标题化合物(0.86g，51％)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.26(t，1H，J＝1.7Hz)，8.15(ddd，1H，J＝8.3Hz，2.3Hz，1.0Hz)，7.82(m，4H)，7.74(m，1H)，7.53(t，1H，J＝7.9Hz)，7.03(brs，1H)，4.26(m，2H)，3.76(s，2H)，3.57(dd，2H，J＝9.8Hz，5.7Hz)。
3.N-[2-(N’-邻苯二甲酰亚胺基)羟乙基]-2-(3-氨基苯基)乙酰胺 将前一步骤的产物(0.66g，1.80mmol)和10％Pd/C(15mg)在脱气1∶1乙醇∶THF(40mL)中的溶液在氢气下在环境温度下搅拌。在6小时后，用塞力特过滤反应物，蒸发滤液，再通过急骤层析法纯化(在DCM中的5％甲醇)，获得了呈黄色固体的标题化合物(0.20g，33％)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.81(m，4H)，7.14(t，1H，J＝8.0Hz)，6.72(m，2H)，6.61(ddd，1H，J＝8.0Hz，2.2Hz，1.0Hz)，4.23(m，2H)，3.55(m，4H)。质谱(MALDI-TOF，α-氰基-4-羟基肉桂酸基质)C18H17N3O4的计算值362.1(M+Na)，340.1(M+H)。实测值362.2，340.3。
4.N-[2-(N’-邻苯二甲酰亚胺基)羟乙基]-2-(3-{[苄基磺酰基]氨基}苯基)乙酰胺 先后向在前一步骤的产物(0.20g，0.58mmol)在无水DCM(50mL)中的冰冷却的溶液添加α-甲苯磺酰氯(0.11g，0.58mmol)在无水DCM(20mL)中的溶液和N-甲基吗啉(0.10mL，0.91mmol)。在环境温度下搅拌16小时后，添加另外的α-甲苯磺酰氯(0.07g，0.36mmol)和N-甲基吗啉(0.10mL，0.91mmol)，将反应物搅拌另外4小时，在真空中蒸发。将残留物溶解在DCM中，用10％柠檬酸水溶液，pH7缓冲液和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，再蒸发滤液，获得了呈浅黄色固体的标题化合物(0.20g，69％)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.77(m，4H)，7.35(m，1H)，7.22(s，5H)，7.17(m，1H)，7.11(m，1H)，7.05(s，1H)，6.71(br m，1H)，4.37(s，2H)，4.25(m，2H)，3.64(s，2H)，3.64(dd，2H，J＝10Hz，5.5Hz)。
5.N-[2-(氨基氧基)乙基]-2-(3-{[苄基磺酰基]氨基}苯基)乙酰胺
将前一步骤的产物(0.19g，0.39mmol)溶解在1∶1乙醇∶THF(20mL)中，再在环境温度下与40％甲基胺水溶液(10mL)反应1小时。反应物在真空中蒸发，再用Waters Sep-Pak(5g硅石，1∶1 DCM∶乙酸乙酯)纯化，获得了不纯的黄色固体。这之后通过制备薄层色谱法(在DCM中的10％甲醇)，获得了呈白色固体的标题化合物(0.10g，72％)。1HNMR(300MHz，CDCl3/CD3OD)δ7.34(m，3H)，7.28(m，3H)，7.10(m，1H)，7.05(m，2H)，4.35(s，2H)，3.69(t，2H，J＝5Hz)，3.51(s，2H)，3.43(t，2H，J＝5Hz)。质谱(MALDI-TOF，α-氰基-4-羟基肉桂酸基质)C17H21N3O4S的计算值386.1(M+Na)。实测值386.6。
6.N-[2-({N，N’-二[叔丁氧羰基]}{胍基氧基)乙基]-2-(3-{[苄基磺酰基]氨基}苯基)乙酰胺 在环境温度下，将前一步骤的产物(89mg，0.24mmol)和[N，N’-二(叔丁氧羰基)]脒基吡唑(86mg，0.28mmol)在DMF(5mL)中的溶液搅拌4天。在真空中蒸发反应物，通过急骤层析法纯化粗产物(在DCM中的5％甲醇)，获得了不纯黄色油。这之后通过制备薄层色谱法纯化(在DCM中的5％甲醇)，获得了呈无色固体的标题化合物(72mg，49％)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ9.19(s，1H)，8.22(brt，1H，J＝5.0Hz)，7.62(s，1H)，7.23(m，10H(Ar+NH))，4.27(s，2H)，4.08(m，2H)，3.57(m，4H)，1.51(s，9H)，1.49(s，9H)。
7.N-[2-(胍基氧基)乙基]-2-(3-{[苄基磺酰基]氨基}苯基)乙酰胺三氟乙酸盐 将前一步骤的产物(72mg，0.12mmol)溶解在DCM(5mL)中，再在环境温度下与三氟乙酸(2mL)反应4小时。反应物在真空中浓缩，粗产物通过制备薄层色谱法纯化(在DCM中的20％甲醇)，获得了呈浅黄色蜡的标题化合物(44mg，71％)。1H NMR(300MHz，CDCl3/CD3OD)δ7.34(m，3H)，7.28(m，3H)，7.11(m，1H)，7.05(m，2H)，4.35(s，2H)，3.90(t，2H，J＝4.9Hz)，3.52(s，2H)，3.47(t，2H，J＝4.8Hz)。质谱(MALDI-TOF，α-氰基-4-羟基肉桂酸基质)C18H23N5O4S的计算值428.1(M+Na)，406.2(M+H)。实测值428.4，406.4。
实施例7N-[2-(胍基氧基)乙基]-2-(2-氯-5-{[苄基磺酰基]氨基}苯基)乙酰胺三氟乙酸盐 1.2-氯-5-硝基苯基乙酸一水合物
将2-氯苯基乙酸(10.0g，58.6mmol)在浓硫酸(40mL)中的溶液冷却到-10℃，再与发烟硝酸(2.80mL，66.7mmol)在浓硫酸(7.2mL).中的溶液反应。在2.5小时后，将反应物缓慢倾倒于冰水(400mL)上，用粗孔玻璃滤器过滤，用冷水洗涤一次，和在玻璃滤器上干燥一整夜，获得了呈白色固体的标题化合物(13.5g，98％)。质子NMR谱的积分显示，产物含有大约0.2当量的2-氯苯基乙酸，但薄层色谱法表明这不能从产物中分离出来。1H NMR(300MHz，CDCl3/CD3OD)δ8.25(d，1H，J＝2.7Hz)，8.13(dd，1H，J＝8.7Hz，2.7Hz)，7.61(d，1H，J＝8.8Hz)，3.89(s，2H)。
2.2-(3-氨基-6-氯苯基)乙酸乙酯 将前一步骤的产物(4.14g，17.7mmol)悬浮在DCM(70mL)中，再与草酰氯(4.0mL，46mmol)和几滴DMF反应。在环境温度下搅拌1小时后，反应变得均匀，加入试剂级乙醇(30mL)，再将反应物搅拌另外30分钟。粗产物在真空中蒸发，再通过急骤层析法纯化(在己烷中的10％-15％乙酸乙酯)，获得了呈浅黄色油的标题化合物(4.6g)。质子NMR显示，产物含有大约0.8当量的草酸二乙酯，它不能通过薄层色谱法查出。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.21(d，1H，J＝2.7Hz)，8.11(dd，1H，J＝8.8Hz，2.7Hz)，7.57(d，1H，J＝8.8Hz)，4.21(q，2H，J＝7.2Hz)，3.87(s，2H)，1.28(t，3H，J＝7.2Hz)。
3.2-(3-氨基-6-氯苯基)乙酸乙酯 让前一步骤的产物(2.00g，8.21mmol)在试剂级乙醇(50mL)中的溶液与氯化锡(II)二水合物(9.40g，41.7mmol)在环境温度下反应。在16小时后，反应物在真空中浓缩，溶解在DCM中和过滤。滤液用水和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，再过滤。蒸发过的滤液然后通过急骤层析法(在己烷中的40％乙酸乙酯)纯化，获得了呈浅黄色油的标题化合物(0.53g，30％)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.12(d，1H，J＝8.5Hz)，6.60(d，1H，J＝2.8Hz)，6.53(dd，1H， 8.5Hz，2.9Hz)，4.17(q，2H，J＝7.1Hz)，3.65(s，2H)，1.26(t，3H，J＝7.1Hz)。
4.2-(2-氯-5-{[苄基磺酰基]氨基}苯基)乙酸乙酯 将前一步骤的产物(0.50g，2.32mmol)和α-甲苯磺酰氯(0.74g，3.88mmol)在DCM(40mL)和N-甲基吗啉(0.80mL，7.3mmol)中的溶液在环境温度下搅拌3小时，用稀HCl水溶液、水和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，再过滤。蒸发过的滤液通过急骤层析法(在DCM中的5％乙酸乙酯)，获得了呈浅黄色固体的标题产物(0.693g，81％)。1HNMR(300MHz，CDCl3)δ7.36(m，4H)，7.26(m，2H)，7.04(d，1H，J＝2.7Hz)，6.99(dd，1H，J＝8.5Hz，2.8Hz)，6.47(br s，1H)，4.33(s，2H)，4.20(q，2H，J＝7.1Hz)，3.73(s，2H)，1.29(t，3H，J＝7.1Hz)。质谱(MALDI-TOF，α-氰基-4-羟基肉桂酸基质)C17H18NO4SCl的计算值390.1(M+Na)。实测值390.7。
5.2-(2-氯-5-{[苄基磺酰基]氨基}苯基)乙酸 将前一步骤的产物(0.69g，1.87mmol)在1∶1水/THF(20mL)中的溶液与氢氧化钾(0.52g，9.32mmol)在环境温度下反应20小时。在真空中蒸发THF之后，剩余含水层用1N HCl酸化到pH3，再用DCM和醚萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，再过滤。然后在真空中蒸发滤液，获得了呈白色固体的标题化合物(0.586g，92％)。1H NMR(300MHz，CDCl3/CD3OD)δ7.34(m，4H)，7.28(m，2H)，7.07(m，2H)，4.34(s，2H)，3.73(s，2H)。质谱(MALDI-TOF，(α-氰基-4-羟基肉桂酸基质)C15H14NO4SCl的计算值378.0(M+K)，362.0(M+Na)。实测值378.8，362.9。
6.N-[2-({N，N’-二-[叔丁氧羰基]}胍基氧基)乙基]-2-(2-氯-5-{[苄基磺酰基]氨基}苯基)乙酰胺
让前一步骤的产物(0.21g，0.60mmol)和[N，N’-二(叔丁氧羰基)]-2-氨基乙氧基胍(Tianbao Lu等人，WO99/26926(1999))(0.19g，0.60mmol)在无水THF(50mL)中的溶液与BOP(0.33g，0.75mmol)和三乙胺(0.25mL，1.8mmol)在环境温度下反应16小时。反应物在真空中蒸发，溶解在DCM中，用pH7缓冲液和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，再过滤。蒸发过的滤液通过急骤层析法(在DCM中的5％甲醇)纯化，获得了呈橙色固体的标题化合物(0.380g，98％)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ9.14(s，1H)，8.22(brt，1H，J＝5.0Hz)，7.60(s，1H)，7.34(m，3H)，7.28(m，3H)，7.10(d，1H，J＝2.6Hz)，7.03(dd，1H，J＝8.6Hz，2.7Hz)，6.84(brs，1H)，4.29(s，2H)，4.13(m，2H)，3.75(s，2H)，3.62(dd，2H，J＝8.8Hz，5.1Hz)，1.51(s，9H)，1.46(s，9H)。质谱(MALDI-TOF，龙胆酸基质)C28H38N5O8SCl的计算值662.2(M+Na)，440.1(M-2Boc+H)。实测值661.7，439.9。
7.N-[2-(胍基氧基)乙基]-2-(2-氯-5-{[苄基磺酰基]氨基}苯基)乙酰胺三氟乙酸盐 将前一步骤的产物(0.375g，0.586mmol)在DCM(10mL)中的溶液用三氟乙酸(5mL)在环境温度下处理16小时。反应物在真空中蒸发，以及粗产物通过急骤层析法(在DCM中的20％甲醇)纯化。反应物在真空中蒸发，以及粗产物通过急骤层析法(在DCM中的20％甲醇)纯化，获得了呈浅黄色固体的标题化合物(0.326g，100％)。1HNMR(300MHz，CDCl3/CD3OD)δ7.34(m，3H)，7.29(m，3H)，7.06(m，2H)，4.35(s，2H)，3.94(brt，2H，J＝5Hz)，3.65(s，2H)，3.49(brt，2H，J＝5Hz)。质谱(MALDI-TOF，α-氰基-4-羟基肉桂酸基质)C18H22N5O4SCl的计算值462.1(M+Na)，440.1(M+H)。实测值461.9，439.9。
实施例8N-[2-(胍基氧基)乙基]-2-(2-甲基-5-{[苄基磺酰基]氨基}苯基)乙酰胺三氟乙酸盐 1.(2-甲基-5-硝基苯基)甲醇 在氮气下加热2-甲基-5-硝基苯甲酸(2.00g，11.0mmol)，溶解在无水THF(25mL)中，再用硼烷在THF(16.5mL)的1N溶液处理。在环境温度下搅拌18小时后，反应物用碳酸钾(1.8g，13mmol)在水(50mL)中的溶液骤冷，以及在真空中去除THF。剩余水溶液用DCM萃取，以及有机层用pH7缓冲剂和盐水洗涤，用硫酸钠干燥，再过滤。蒸发过的滤液提供了呈浅黄色固体的标题化合物(1.76g，95％)。1HNMR(300MHz，CDCl3)δ8.29(d，1H，J＝2.5Hz)，8.04(dd，1H，J＝8.3Hz，2.5Hz)，7.31(d，1H，J＝8.31Hz)，4.77(d，2H，J＝5.5Hz)，2.41(s，3H)，2.09(t，1H，J＝5.6Hz)。
2.甲磺酸(2-甲基-5-硝基苯基)甲酯
将前一步骤的产物(1.74g，10.4mmol)在DCM(50mL)中的溶液冷却到0℃，再用甲磺酰氯(0.90mL，11.6mmol)三乙胺(1.75mL，12.6mmol)处理。在搅拌30分钟后，将反应物升温到环境温度，搅拌另外30分钟，再倾倒于pH7缓冲溶液中。分离各相，有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，再过滤。蒸发过的滤液提供了呈浅黄色油的标题化合物(2.53g，99％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.26(d，1H，J＝2.5Hz)，8.16(dd，1H，J＝8.4Hz，2.4Hz)，7.42(d，1H，J＝8.4Hz)，5.31(s，2H)，3.08(s，3H)，2.51(s，3H)。
3.2-(2-甲基-5-硝基苯基)乙腈 将前一步骤的产物(2.48g，10.1mmol)和氰化钾(2.00g，30.7mmol)在乙腈(100mL)中回流8小时，然后冷却到环境温度和搅拌一整夜。反应物在真空中蒸发，溶解在DCM中，再过滤。滤液用pH7缓冲剂和盐水洗涤，蒸发，再通过急骤柱层析法(1∶1己烷∶乙酸乙酯洗脱剂)纯化，获得了呈黄色固体的标题化合物(1.27g，71％)。1HNMR(300MHz，CDCl3)δ8.26(d，1H，J＝2.4Hz)，8.13(dd，1H，J＝8.3Hz，2.4Hz)，7.42(d，1H，J＝8.3Hz)，3.78(s，2H)，2.48(s，3H)。
4.2-(2-甲基-5-硝基苯基)乙酸 向前一步骤的产物(1.27g，7.21mmol)在甲醇(30mL)中的溶液添加氢氧化钾(4.06g，72.4mmol)在水(30mL)中的溶液。反应在回流下搅拌一整夜，和在真空中去除甲醇。剩余含水层用3NHCl酸化，再过滤，固体用二乙醚洗涤，以及分离滤液。含水层用DCM和二乙醚洗涤，以及合并的有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，再过滤。蒸发过的滤液提供了呈橙色固体的标题化合物(0.84g，60％)。1HNMR(300MHz，丙酮-d6)δ8.17(d，1H，J＝2.3Hz)，8.06(dd，1H，J＝8.4Hz，2.5Hz)，7.29(d，1H，J＝8.4Hz)，3.88(s，2H)，2.45(s，3H)。
5.N-[2-({N，N’-二-[叔丁氧羰基]}胍基氧基)乙基]-2-(2-甲基-5-硝基苯基)乙酰胺 将前一步骤的产物(0.27g，1.40mmol)，BOP(0.70g，1.58mmol)，三乙胺(0.50mL，3.60mmol)，和[N，N’-二(叔丁氧羰基)]2-氨基乙氧基胍(Tianbao Lu等人，WO99/26926(1999))(0.44g，1.38mmol)在无水DMF中的溶液在环境温度下搅拌一整夜。反应物在真空中浓缩，粗产物通过急骤柱层析法(在DCM洗脱剂中的5％甲醇)纯化，获得了呈浅橙色固体的标题化合物(0.63g，92％)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ9.21(s，1H)，8.42(m，1H)，8.17(d，1H，J＝2.4Hz)，7.99(dd，1H，J＝8.4Hz，2.5Hz)，7.59(s，1H)，7.29(d，1H，J＝8.4Hz)，4.12(m，2H)，3.74(s，2H)，3.63(m，2H)，2.48(s，3H)，1.52(s，9H)，1.47(s，9H)。
6.N-[2-({N，N’-二-[叔丁氧羰基]}胍基氧基)乙基]-2-(3-氨基-6-甲基苯基)乙酰胺 将前一步骤的产物(0.29g，0.58mmol)和10％钯(O)/碳(0.06g)溶解在试剂乙醇(50mL)中，用氮气和真空脱气，再在氢气球下在环境温度下搅拌。在4小时后，反应物用塞力特过滤，该玻璃料用甲醇洗涤，以及滤液在真空中蒸发，获得了标题化合物(0.27g，100％)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ9.10(s，1H)，7.61(s，1H)，7.30(m，1H)，6.94(d，1H，J＝8.0Hz)，6.63(d，1H，J＝2.4Hz)，6.51(dd，1H，J＝8.0Hz，2.5Hz)，4.09(m，2H)，3.58(m，2H)，3.53(s，2H)，2.21(s，3H)，1.52(s，9H)，1.47(s，9H)。
7.N-[2-({N，N’-二-[叔丁氧羰基]}胍基氧基)乙基]-2-(2-甲基-5-{[苄基磺酰基]氨基}苯基)乙酰胺
将前一步骤的产物(0.27g，0.58mmol)，α-甲苯磺酰氯(0.18g，0.96mmol)和N-甲基吗啉(0.20mL，1.82mmol)在环境温度下在DCM(20mL)中搅拌。在2小时后，反应物用其它DCM稀释，再用稀HCl水溶液，饱和碳酸氢钠水溶液，pH7缓冲液和盐水洗涤。有机层用硫酸钠干燥，过滤，和滤液在真空中浓缩，获得了呈浅黄色固体的标题化合物(0.35g，97％)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ9.15(s，1H)，8.04(brt，1H，J＝5Hz)，7.60(s，1H)，7.34(m，5H)，7.12(d，1H，J＝8.0Hz)，7.03(dd，1H，J＝11Hz，2.3Hz)，6.26(s，1H)，4.31(s，2H)，4.12(m，2H)，3.63(m，4H)，2.33(s，3H)，1.51(s，9H)，1.45(s，9H)。
8.N-[2-(胍基氧基)乙基]-2-(2-甲基-5-{[苄基磺酰基]氨基}苯基)乙酰胺三氟乙酸盐 将前一步骤的产物(0.35g，0.56mmol)溶解在DCM(10mL)中和用三氟乙酸(3mL)在环境温度下处理。在16小时后，反应物在真空中浓缩，以及粗产物用10g Waters silica Sep-Pak(在DCM中的5-20％甲醇梯度洗脱剂)纯化，获得了呈浅黄色固体的标题化合物(0.27g，89％)。1H NMR(300MHz，CDCl3/CD3OD)δ7.34(m，3H)，7.29(m，2H)，7.14(d，1H，J＝9.0Hz)，7.02(dd，1H，J＝6.5Hz，2.3Hz)，7.00(s，1H)，4.33(s，2H)，3.92(brt，2H，J＝5Hz)，3.55(s，2H)，3.48(brt，2H，J＝5Hz)，2.28(s，3H)。质谱(MALDI-TOF，龙胆酸基质)C19H25N5O4S的计算值442.2(M+Na)，420.2(M+H)。实测值442.5，420.6。
实施例9N-[2-(胍基氧基)乙基]-2-(2-羟基-6-甲基-3-{[(3-甲基苯基)磺酰基]氨基}苯基)乙酰胺盐酸盐 1.4-甲基-1-硝基-2-丙-2-烯基氧基苯 将5-甲基-2-硝基酚(2.00g，13.1mmol)，烯丙基溴(1.30mL，15.0mmol)，和碳酸铯(5.5g，17mmol)在DMF(100mL)中的溶液在环境温度下搅拌。在20小时后，过滤反应物，用甲醇在玻璃料上洗涤，以及滤液在真空中在50℃下蒸发。残留物通过急骤柱层析法(4∶1然后2∶1己烷∶乙酸乙酯洗脱剂)纯化，获得了呈黄色油的标题化合物(2.39g，95％)，它在环境温度下放置3天后结晶。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.79(d，1H，J＝8.2Hz)，6.86(s，1H)，6.82(m，1H)，6.05(ddt，1H，J＝17.3Hz，10.6Hz，5.0Hz)，5.50(ddd，1H，J＝17.3Hz，3.3Hz，1.7Hz)，5.33(ddd，1H，J＝10.6Hz，2.9Hz，1.5Hz)，4.6 7(dt，2H，J＝4.9Hz，1.6Hz)，2.40(s，3H)。
2.3-甲基-6-硝基-2-丙-2-烯基酚
将如在前一步骤制备的4-甲基-1-硝基-2-丙-2-烯氧基苯(7.11g，36.8mmol)在氮气下在200℃下均匀加热3小时，冷却到环境温度，再通过急骤柱层析法(1∶1己烷∶DCM洗脱剂)纯化，获得了呈橙色油的标题化合物(5.04g，71％)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ11.07(s，1H)，7.90(d，1H，J＝8.7Hz)，6.80(d，1H，J＝8.7Hz)，5.93(m，1H)，5.03(m，1H)，4.96(m，1H)，3.50(dt，2H，J＝5.9Hz，1.7Hz)，2.36(s，3H)。
3.1-甲基-4-硝基-3-(苯基甲氧基)-2-丙-2-烯基苯 将前一步骤的产物(5.02g，26.0mmol)，苄基溴(3.40mL，28.6mmol)，碳酸铯(17.2g，52.8mmol)在DMF(100mL)中的溶液在环境温度下搅拌20小时。过滤溶液，在真空中浓缩滤液，以及将粗产物吸附到硅石上。将这倾倒于硅石的短床上和用DCM洗脱，和蒸发洗脱物，获得呈黄色油的标题化合物(7.20g，98％)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.72(d，1H，J＝8.4Hz)，7.46(m，2H)，7.37(m，3H)，7.06(d，1H，J＝8.5Hz)，5.93(m，1H)，5.08(m，1H)，4.98(s，2H)，4.88(m，1H)，3.51(dt，2H，J＝5.4Hz，1.9Hz)，2.36(s，3H)。
4.4-甲基-2-(苯基甲氧基)-3-丙-2-烯基苯基胺
将前一步骤的产物(0.55g，1.94mmol)和氯化锡(II)二水合物(2.89g，12.8mmol)在试剂级乙醇(40mL)中在环境温度下搅拌。在20小时后，反应物在真空中浓缩，以及残留物在饱和碳酸氢钠和DCM之间分配。过滤所得乳液，固体和含水层用另外的DCM洗涤，以及合并的有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，再过滤。然后蒸发滤液，获得了呈橙色油的标题化合物(0.51g，90％)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.47(m，2H)，7.38(m，3H)，6.78(d，1H，J＝8.1Hz)，6.60(d，1H，J＝8.0Hz)，5.97(m，1H)，5.02(m，1H)，4.95(m，1H)，4.85(s，2H)，3.64(brs，2H)，3.47(dt，2H，J＝5.7Hz，1.8Hz)，2.20(s，3H)。
5.[4-甲基-2-(苯基甲氧基)-3-丙-2-烯基苯基][(3-甲基苯基)磺酰基]胺 将前一步骤的产物(0.49g，1.92mmol)溶解在DCM(10mL)中，并用间-甲苯磺酰氯(0.37g，1.96mmol)和N-甲基吗啉(0.25mL，2.27mmol)在环境温度下处理。在18小时后，反应在真空中浓缩，以及残留物通过急骤柱层析法(DCM洗脱剂)纯化，获得了呈浅黄色油的标题化合物(0.72g，92％)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.54(m，2H)，7.35(m，8H)，6.89(d，1H，J＝8.3Hz)，6.80(s，1H)，5.87(m，1H)，4.99(m，1H)，4.79(m，1H)，4.43(s，2H)，3.36(dt，2H，J＝5.3Hz，1.9Hz)，2.31(s，3H)，2.19(s，3H)。
6.2-(6-甲基-3-{[(3-甲基苯基)磺酰基]氨基}-2-(苯基甲氧基)苯基)乙醇
将前一步骤的产物(0.71g，1.74mmol)溶解在1，4-二噁烷(25mL)中，并用过碘酸钠(1.50g，7.01mmol)在水(12mL)中的溶液和四氧化锇(0.25mL，0.02mmol)在2-甲基-2-丙醇中的2.5wt％溶液处理。在环境温度下搅拌4小时后，反应物用DCM稀释，用5％亚硫酸氢钠水溶液，水和盐水洗涤，用硫酸钠干燥，再过滤。滤液在真空中浓缩，获得了浅黄色油，它在没有进一步纯化的情况下使用。
7.2-(6-甲基-3-{[(3-甲基苯基)磺酰基]氨基}-2-(苯基甲氧基)苯基)乙酸 将重铬酸钠(0.79g，2.64mmol)和浓硫酸(1.5mL，28mmol)在水(25mL)中的溶液加入到前一步骤的产物在丙酮(25mL)中的溶液中，以及反应物在环境温度下搅拌3天。在添加甲醇(3mL)和搅拌另外15分钟后，在真空中去除有机溶剂，和剩余的含水层用DCM萃取。DCM层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤，再浓缩滤液和通过急骤柱层析法(在DCM中的10％甲醇)纯化，获得了呈浅黄色固体的标题化合物(0.51g，步骤5的69％)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.56(m，2H)，7.39(m，4H)，7.31(m，4H)，6.93(d，1H，J＝8.4Hz)，6.78(s，1H)，4.52(s，2H)，3.67(s，2H)，2.33(s，3H)，2.21(s，3H)。质谱(LCMS，ESI pos.)C23H23NO5S的计算值448.1(M+Na)，425.1(M+H)。实测值448.1，425.9。
8.N-[2-({N，N’-二-[叔丁氧羰基]}胍基氧基)乙基]-2-(6-甲基-3-{[(3-甲基苯基)磺酰基]氨基}-2-(苯基甲氧基)苯基)乙酰胺 将前一步骤的产物(0.32g，0.75mmol)，BOP(0.34g，0.77mmol)，三乙胺(0.25mL，1.80mmol)，和[N，N’-二-(叔丁氧羰基)]-2-氨基乙氧基胍(Tianbao Lu等人，WO99/26926(1999))(0.27g，0.76mmol)在DMF(15mL)中的溶液在环境温度下搅拌一整夜。在真空中浓缩反应物，将残留物溶解在DCM中，用饱和碳酸氢钠、水和盐水洗涤，用硫酸钠干燥，再过滤。滤液在真空中浓缩，以及粗产物通过急骤柱层析法(在DCM中的7％甲醇洗脱剂)，获得了浅黄色固体的标题化合物(0.41g，76％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ9.11(s，1H)，7.93(m，1H)，7.55(m，3H)，7.36(m，8H)，6.90(d，1H，J＝8.3Hz)，6.84(s，1H)，4.60(s，2H)，4.06(m，2H)，3.71(s，2H)，3.56(dd，2H，J＝8.8Hz，5.2Hz)，2.34(s，3H)，2.23(s，3H)，1.51(s，9H)，1.43(s，9H)。
9.N-[2-({N，N’-二-[叔丁氧羰基]}胍基氧基)乙基]-2-(2-羟基-6-甲基-3-{[(3-甲基苯基)磺酰基]氨基}苯基)乙酰胺
将前一步骤的产物(0.41g，0.57mmol)和10％钯(O)/碳(60mg)溶解在试剂级乙醇(20mL)中，用氮和真空脱气，再在氢气球下在环境温度下搅拌4小时。反应物用塞力特过滤，用甲醇在玻璃料上洗涤，蒸发滤液，以及残留物通过制备薄层色谱法(在DCM中的5％甲醇洗脱剂)纯化，获得了呈浅黄色固体的标题化合物(13.0mg，4％)。1HNMR(300MHz，CDCl3)δ9.25(s，1H)，8.62(m，1H)，7.61(m，3H)，7.29(m，3H)，6.61(d，1H，J＝8.5Hz)，4.06(m，2H)，3.64(s，2H)，3.54(dd，2H，J＝8.7Hz，5.0Hz)，2.34(s，3H)，2.30(s，3H)，1.51(s，9H)，1.49(s，9H)。
10.N-[2-(胍基氧基)乙基]-2-(2-羟基-6-甲基-3-{[(3-甲基苯基)磺酰基]氨基}苯基)乙酰胺盐酸盐 将前一步骤的产物(13.0mg，0.02mmol)溶解在DCM(5mL)中，并用三氟乙酸(1mL)在环境温度下处理。在16小时后，在真空中浓缩反应物，以及粗产物通过制备薄层色谱法(在DCM中的12％甲醇洗脱剂，用氨饱和)纯化。所得产物用HCl的4N乙醇溶液处理，过滤，蒸发滤液，以及固体用二乙醚洗涤，再真空干燥，获得了呈黄褐色固体的标题化合物(5.0mg，52％)。1H NMR(300MHz，CD3OD)δ7.51(m，2H)，7.38(m，2H)，6.56(m，2H)，3.91(t，2H，J＝5.3Hz)，3.61(s，2H)，3.47(t，2H，J＝5.3Hz)，2.36(s，3H)，2.27(s，3H)。质谱(LCMS，ESI pos.)C19H25N5O5S的计算值436.1(M+H)。实测值436.2。
实施例10N-[(6-氨基-2-甲基(3-吡啶基))甲基]-2-(2-羟基-6-甲基-3-{[(3-甲基苯基)磺酰基]氨基}苯基)乙酰胺盐酸盐 1.N-[(6-氨基-2-甲基(3-吡啶基))甲基]-2-(6-甲基-3-{[(3-甲基苯基)磺酰基]氨基}-2-(苯基甲氧基)苯基)乙酰胺 将实施例9步骤7的产物(0.18g，0.42mmol)，BOP(0.21g，0.47mmol)，三乙胺(0.25mL，1.80mmol)和2-氨基-5-氨基甲基-6-甲基吡啶二盐酸盐(Sanderson，P.E.，等人，WO97/01338(1997))(0.10g，0.48mmol)溶解在DMF(10mL)中，再在环境温度下搅拌2小时。将反应物在真空中浓缩，以及粗产物通过急骤柱层析法(梯度洗脱在DCM中的10-15％甲醇)纯化，获得了不纯产物，将它溶解在DCM中，用饱和碳酸氢钠和岁和盐水洗涤，用硫酸钠干燥，再过滤。蒸发过的滤液然后得到了呈浅黄色固体的标题化合物。(0.23g，99％)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.64(m，1H)，7.56(m，1H)，7.35(m，10H)，7.11(d，1H，J＝8.3Hz)，6.94(d，1H，J＝8.5Hz)，6.22(d，1H，J＝8.1Hz)，5.60(brt，1H，J＝5.3Hz)，4.49(s，2H)，4.37(brs，2H)，4.19(d，2H，J＝5.5Hz)，3.56(s，2H)，2.34(s，3H)，2.23(s，3H)，2.22(s，3H)。质谱(LCMS，ESIpos.)C30H32N4O4S的计算值545.2(M+H)。实测值545.2。
2.N-[(6-氨基-2-甲基(3-吡啶基))甲基]-2-(2-羟基-6-甲基-3-{[(3-甲基苯基)磺酰基]氨基}苯基)乙酰胺盐酸盐 将前一步骤的产物(0.22g，0.41mmol)和10％钯(O)/碳(0.03g)溶解在2∶1乙醇∶THF(30mL)中，用氮和真空脱气，再在氢气球下在环境温度下搅拌。在7小时后，用塞力特过滤反应物，用甲醇在玻璃料上洗涤，以及滤液在真空中浓缩。残留物用HCl的4N乙醇溶液(约3mL)处理，在高度真空下蒸发，溶解在DCM中，过滤，再次在高度真空下蒸发滤液，获得了呈浅棕色固体的标题化合物(0.14g，71％)。1H NMR(300MHz，CDCl3/CD3OD)δ7.60(m，3H)，7.33(m，2H)，6.82(d，1H，J＝8.2Hz)，6.67(d，1H，J＝9.0Hz)，6.58(d，1H，J＝8.3Hz)，4.18(s，2H)，3.58(s，2H)，2.45(s，3H)，2.37(s，3H)，2.25(s，3H)。质谱(LCMS，ESI pos.)C23H26N4O4S的计算值455.2(M+H)。实测值455.2。
实施例113-({N-(2-(胍基氧基)乙基]氨基甲酰基}甲基)-2-羟基-4-甲基苯基3-甲基苯磺酸酯盐酸盐 1.3-甲基苯磺酸2-甲氧基-4-甲基苯基酯
将间甲苯磺酰氯(0.53g，2.78mmol)和2-甲氧基-4-甲基酚(0.38g，2.75mmol)在DCM(10mL)中的溶液用三乙胺(0.5mL，3.6mmol)处理，并在环境温度下搅拌。在18小时后，在真空中浓缩反应物，将残留物溶解在1∶1己烷∶DCM中，过滤，以及在高度真空下蒸发滤液，获得了呈白色固体的标题化合物(0.79g，99％)。1HNMR(300MHz，CDCl3)δ7.72(brs，1H)，7.66(brd，1H，J＝7.2Hz)，7.45(brd，1H，J＝7.2Hz)，7.38(t，1H，J＝7.6Hz)，7.00(d，1H，J＝8.1Hz)，6.67(m，1H)，3.54(s，3H)，2.42(s，3H)，2.31(s，3H)。
2.3-甲基苯磺酸2-羟基-4-甲基苯基酯 将前一步骤的产物(0.79g，2.72mmol)溶解在DCM(10mL)中，冷却到-78℃，再用三溴化硼在DCM(3.0mL)中的1N溶液在氮气下处理。在10分钟后，移走于冰浴，再将反应物搅拌另外1小时，同时升至环境温度。在用水缓慢骤冷后，反应物用另外的DCM稀释，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，再过滤。滤液在真空中浓缩，残留物通过急骤柱层析法(梯度洗脱在DCM中的50％到33％到0％己烷)纯化，获得了呈白色结晶固体的标题化合物(0.51g，68％)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.71(brs，1H)，7.67(brd，1H，J＝7.7Hz)，7.51(brd，1H，J＝8.1Hz)，7.43(t，1H，J＝7.7Hz)，6.81(d，1HJ＝1.7Hz)，6.63(d，1H，J＝8.3Hz)，6.55(m，1H)，5.87(s，1H)，2.43(s，3H)，2.26(s，3H)。
3.3-甲基苯磺酸4-甲基-2-丙-2-烯基氧基苯基酯 将前一步骤的产物(0.51g，1.83mmol)，烯丙基溴(0.20mL，2.30mmol)碳酸铯(0.77g，2.40mmol)在DMF(25mL)中的溶液在环境温度下搅拌16小时。反应物在真空中浓缩，将残留物溶解在DCM中，过滤，以及滤液用1NKOH水溶液、水和盐水洗涤，用硫酸钠干燥，再过滤。蒸发过的滤液然后产生了呈浅黄色油的标题化合物(0.54g，93％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.72(s，1H)，7.64(d，1H，J＝7.7Hz)，7.42(d，1H，J＝7.7Hz)，7.35(t，1H，J＝7.7Hz)，7.04(d，1H，J＝8.2Hz)，6.68(m，2H)，5.80(ddt，1H，J＝17.3Hz，10.6Hz，5.1Hz)，5.28(ddd，1H，J＝17.3Hz，3.1Hz，1.6Hz)，5.20(ddd，1H，J＝10.6Hz，2.8Hz，1.3Hz)，4.29(dt，2H，J＝5.1Hz，1.5Hz)，2.40(s，3H)，2.30(s，3H)。
4.3-甲基苯磺酸2-羟基-4-甲基-3-丙-2-烯基苯酯 将前一步骤的产物(0.54g，1.70mmol)在200℃下均匀加热6小时，冷却到环境温度，再通过急骤柱层析法纯化2次(第一次用2∶1DCM∶己烷，然后用4∶1己烷∶乙酸乙酯洗脱剂)，获得了呈无色油的标题化合物(84mg，16％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.74(s，1H)，7.67(d，1H，J＝7.8Hz)，7.44(d，1H，J＝7.6Hz)，7.36(t，1H，J＝7.7Hz)，6.86(d，1H，J＝8.3Hz)，6.55(d，1H，J＝8.3Hz)，4.74(m，1H)，3.15(dd，1H，J＝1 5.5Hz，8.9Hz)，2.61(dd，1H，J＝15.5Hz，7.6Hz)，2.41(s，3H)，2.16(s，3H)，1.24(d，2H，J＝6.3Hz)。
5.3-甲基苯磺酸4-甲基-2-(苯基甲氧基)-3-丙-2-烯基苯酯 在环境温度下，将前一步骤的产物(68mg，0.21mmol)和碳酸铯(0.19g，0.58mmol)溶解在DMF(5mL)中，再用苄溴(0.05mL，0.42mmol)处理。在3天后，反应物在真空中浓缩，以及残留物通过急骤柱层析法(DCM洗脱剂)纯化，获得了呈浅黄色油的标题化合物(50mg，58％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.60(brs，1H)，7.54(brd，1H，J＝7.8Hz)，7.34(m，4H)，7.27(m，3H)，7.10(d，1H，J＝8.4Hz)，6.91(d，1H，J＝8.4Hz)，5.74(ddt，1H，J＝17.1Hz，10.2Hz，5.7Hz)，4.93(dq，1H，J＝10.2Hz，1.7Hz)，4.81(s，2H)，4.72(dq，1H，J＝17.1Hz，1.8Hz)，3.30(dt，2H，J＝5.7Hz，1.7Hz)，2.24(s，3H)，2.23(s，3H)。
6.3-甲基苯磺酸4-甲基-3-(2-氧代乙基)-2-(苯基甲氧基)苯基酯
向前一步骤的产物(50mg，0.12mmol)和过碘酸钠(0.12g，0.56mmol)在5∶1乙腈∶水(12mL)中的溶液添加氯化钌(III)水合物(8mg，0.04mmol)。将反应物在环境温度下搅拌6小时，用DCM稀释，再用5％亚硫酸氢钠水溶液、水和盐水洗涤。有机溶液用硫酸钠干燥，过滤，再蒸发滤液，获得了作为粗油的标题化合物，它在没有进一步纯化的情况下使用。
7.2-{6-甲基-3-[(3-甲基苯基)磺酰氧基]-2-(苯基甲氧基)苯基}乙酸 将前一步骤的产物溶解在丙酮(5mL)中，再用重铬酸钠(65mg，0.22mmol)和浓硫酸(1mL)在水(4mL)中的溶液在环境温度下处理。在搅拌3天后，在真空中除去丙酮，剩余含水层用DCM萃取。有机相然后用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤，以及蒸发过的滤液用急骤柱层析法(在DCM中的8％甲醇洗脱剂)纯化，获得了呈白色固体的标题化合物(45mg，步骤5的88％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.61(brs，1H)，7.53(brd，1H，J＝7.8Hz)，7.33(brd，1H，J＝7.6Hz)，7.27(m，6H)，7.12(d，1H，J＝8.4Hz)，6.92(d，1H，J＝8.4Hz)，4.87(s，2H)，3.60(s，2H)，2.24(s，3H)，2.23(s，3H)。
8.3-甲基苯磺酸3-({N-[2-({N，N’-二-[叔丁氧羰基]}胍基氧基)乙基]氨基甲酰基}甲基)-4-甲基-2-(苯基甲氧基)苯酯 向前一步骤的产物(45mg，0.11mmol)，BOP(48mg，0.11mmol)，和[N，N’-二(叔丁氧羰基)]-2-氨基乙氧基胍(TianbaoLu等人，WO99/26926(1999))(39mg，0.11mmol)在DMF(5mL)中的溶液添加三乙胺(0.2mL，1.4mmol)。在环境温度下搅拌18小时后，反应物在真空中浓缩，以及残留物通过急骤柱层析法(3∶1DCM∶乙酸乙酯洗脱剂)纯化，获得了呈无色油的标题化合物(61mg，79％)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ9.11(s，1H)，7.65(brs，1H)，7.58(brd，1H，J＝8.5Hz)，7.48(m，1H)，7.36(brd，1H，J＝7.6Hz)，7.29(m，7H)，7.03(d，1H，J＝8.4Hz)，6.90(d，1H，J＝8.5Hz)，4.92(s，2H)，4.02(m，2H)，3.66(s，2H)，3.50(dd，2H，J＝9.2Hz，5.2Hz)，2.28(s，3H)，2.26(s，3H)，1.51(s，9H)，1.45(s，9H)。
9.3-甲基苯磺酸3-({N-[2-({N，N’-二-[叔丁氧羰基]}胍基氧基)乙基]氨基甲酰基}甲基)-2-羟基-4-甲基苯酯 将前一步骤的产物(61mg，0.08mmol)和10％钯(o)/碳(20mg)溶解在THF、甲醇和水的1∶1∶1混合物(50mL)中，用氮和真空脱气，再在氢气球下在环境温度下强力搅拌。在18小时后，反应物用塞力特过滤，用甲醇在玻璃料上洗涤，以及蒸发过的滤液通过急骤柱层析法(在DCM中的10％乙酸乙酯洗脱剂)纯化，获得了呈无色固体的标题化合物(40mg，74％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.25(s，1H)，8.50(brt，1H，J＝4.9Hz)，7.79(s，1H)，7.57(d，1H，J＝7.7Hz)，7.59(brs，1H)，7.43(d，1H，J＝7.7Hz)，7.38(t，1H，J＝7.6Hz)，6.90(d，1H，J＝8.3Hz)，6.62(d，1H，J＝8.4Hz)，4.08(m，2H)，3.69(s，2H)，3.56(dd，2H，J＝8.7Hz，5.0Hz)，2.41(s，3H)，2.35(s，3H)，1.51(s，9H)，1.50(s，9H)。
10.3-甲基苯磺酸3-({N-[2-(胍基氧基)乙基]氨基甲酰基}甲基)-2-羟基-4-甲基苯基酯盐酸盐 将前一步骤的产物(40mg，0.06mmol)溶解在DCM(4mL)中，再用纯三氟乙酸(1.5mL)在环境温度下处理。在3小时后，反应物在真空中浓缩，以及残留物通过制备薄层色谱法(用氨气饱和的在DCM中的20％甲醇作为洗脱剂)，纯化，用在乙醇中的4NHCl处理，再过滤。蒸发过的滤液用二乙醚洗涤，以及在高度真空下干燥，获得了呈浅黄色固体的标题化合物。(17mg，57％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.87(s，1H)，9.76(s，1H)，7.67(m，5H)，7.60(d，1H，J＝7.6Hz)，7.51(t，1H，J＝7.7Hz)，6.70(d，1H，J＝8.3Hz)，6.60(d，1H，J＝8.5Hz)，3.79(t，2H，J＝5.5Hz)，3.45(m，4H)，2.39(s，3H)，2.17(s，3H)。
质谱(LCMS，ESIpos.)C19H24N4O6S的计算值437.1(M+H)。实测值437.3。
实施例12片剂制备如以下所述制备分别含有25.0，50.0和100.0mg的以下活性化合物的片剂a.N-[2-(脒基氨基氧基)乙基]-2-{3-[(2，2-二氟-2-苯乙基)氨基]-6-氯-2-氟苯基}乙酰胺三氟乙酸盐；和b.N-[(6-氨基-2-甲基(3-吡啶基))甲基]-2-{3-[(2，2-二氟-2-苯乙基)氨基]-6-氯-2-氟苯基}乙酰胺盐酸盐。
含25-100mg活性化合物剂量的片剂量-mg活性化合物25.0 50.0 100.00微晶纤维素37.25 100.0 200.0改性食品玉米淀粉 37.25 4.25 8.5硬脂酸镁 0.50 0.75 1.5全部的活性化合物，纤维素，和一部分的玉米淀粉被混合和造粒成10％玉米淀粉糊。所获得的颗粒物进行筛选，干燥和与剩余部分的玉米淀粉和硬脂酸镁掺混。所获得的颗粒物然后被压制成每片分别含有25.0，50.0和100.0mg的活性成分的片剂。
实施例13静脉内溶液制备如下制备实施例1和2的以上所指定的活性化合物的静脉内剂型活性化合物0.5-10.0mg柠檬酸钠 5-50mg柠檬酸1-15mg
氯化钠 1-8mg注射用水(USP)相对于1ml的余量利用上述用量，在室温下将活性化合物溶解在预先制备的氯化钠，柠檬酸，和柠檬酸钠在注射用水的溶液中(USP，参见1995版的United States Pharmacopeia/National Formulary的1636页，由United States Pharmacopeial Convention，Inc.，Rockyille，Maryland出版(1994)。
实施例14纯化酶的活体外抑制试剂全部缓冲盐是从Sigma Chemical Company(St.Louis，MO)获得，并且具有可行的最高纯度。酶底物，N-苯甲酰基-Phe-Val-Arg-对-硝基苯胺(Sigma B7632)，N-苯甲酰基-Ile-Glu-Gly-Arg-对-硝基苯胺盐酸盐(Sigma B2291)，N-对-甲苯磺酰基-Gly-Pro-Lys-对-硝基苯胺(Sigma T6140)，N-琥珀酰基-Ala-Ala-Pro-Phe-对-硝基苯胺(Sigma S7388)和N-CBZ-Val-Gly-Arg-对-硝基苯胺(Sigma C7271)都是从Sigma获得的。N-琥珀酰基-Ala-Ala-Pro-Arg-对-硝基苯胺(BACHEML-1720)和N-琥珀酰基-Ala-Ala-Pro-Val-对-硝基苯胺(BACHEML-1770)是从BACHEM(King of Prussia，PA)获得。
人α-凝血酶，人因子Xa和人纤溶酶都是从Enzyme ResearchLaboratories(South Bend，Indiana)获得。牛α-糜蛋白酶(SigmaC4129)，牛胰蛋白酶(Sigma T8642)和人肾细胞尿激酶(Sigma U5004)是从Sigma获得。人白细胞弹性蛋白酶是从Elastin Products(Pacific，MO)获得。
Ki测定全部试验是基于试验化合物抑制肽对-硝基苯胺底物的酶催化水解的能力。在典型的Ki测定中，底物是在DMSO中制备，并且稀释到由50mM HEPES，200mM NaCl，pH7.5组成的分析缓冲液中。每一种底物的最后浓度列于如下。通常，底物浓度低于Km的实验测定值。试验化合物是作为在DMSO中的1.0mg/ml溶液来制备。稀释液是在DMSO中制备，得到了包括200倍浓度范围的8个最终浓度。在分析缓冲液中按下面所列浓度制备酶溶液。
在典型的Ki测定中，用移液管向96孔板的每个孔中移取280mL的底物溶液，10mL的试验化合物溶液，然后将该板在MolecularDevices板读取器中在37℃下热平衡＞15分钟。通过添加酶的10mL等分试样来引发反应，在405nm下提高的吸光率被记录15分钟。在计算中使用与低于10％的总底物水解对应的数据。不含试验化合物的样品的速度的比率(吸光率变化速率与时间的关系)除以含有试验化合物的样品的速度，并作为试验化合物浓度的函数来描绘。该数据拟合到线性回归，计算直线斜率的值。斜率的倒数是实验上确定的Ki值。
凝血酶凝血酶活性是作为水解该底物N-琥珀酰基-Ala-Ala-Pro-Arg-对-硝基苯胺的能力来分析。底物溶液是以在分析缓冲液中32mM的浓度(32mM＜＜Km＝180mM)来制备。最终的DMSO浓度是4.3％。提纯后的人α-凝血酶被稀释到分析缓冲液中达到15nM的浓度。最终试剂浓度是[凝血酶]＝0.5nM，[底物N-琥珀酰基-Ala-Ala-Pro-Arg-对-硝基苯胺]＝32mM。
因子X[FXa]FXa活性是作为水解该底物N-苯甲酰基-Ile-Glu-Gly-Arg-对-硝基苯胺盐酸盐的能力来分析的。底物溶液是以在分析缓冲液中51mM的浓度(51＜＜Km＝1.3mM)制备的。最终的DMSO浓度是4.3％。将纯化的活化的人因子X稀释到分析缓冲液中达到300nM的浓度。最终试剂浓度是[FXa]＝10nM，[N-苯甲酰基-Ile-Glu-Gly-Arg-对-硝基苯胺盐酸盐]＝51mM。
纤溶酶纤溶酶活性是作为水解该N-p-甲苯磺酰基-Gly-Pro-Lys-对-硝基苯胺的能力来分析。底物溶液是以在分析缓冲液中37mM的浓度(37mM＜＜Km＝243mM)制备的。最终的DMSO浓度是4.3％。提纯后的人纤溶酶被稀释到分析缓冲液中达到240nM的浓度。最终试剂浓度是[纤溶酶]＝8nM，[N-对-甲苯磺酰基-Gly-Pro-Lys-对-硝基苯胺]＝37mM。
糜蛋白酶糜蛋白酶活性是作为水解该N-琥珀酰基-Ala-Ala-Pro-Phe-对-硝基苯胺的能力来分析。底物溶液是以在分析缓冲液中14mM的浓度(14mM＜＜Km＝62mM)制备的。最终的DMSO浓度是4.3％。提纯后的牛糜蛋白酶被稀释到分析缓冲液中达到81nM的浓度。最终试剂浓度是[糜蛋白酶]＝2.7nM，[N-琥珀酰基-Ala-Ala-Pro-Phe-对-硝基苯胺]＝14mM。
胰蛋白酶胰蛋白酶活性是作为水解该N-苯甲酰基-Phe-Val-Arg-对-硝基苯胺的能力来分析。底物溶液是以在分析缓冲液中13mM的浓度(13mM＜＜Km＝291mM)制备的。最终的DMSO浓度是4.3％。提纯后的牛胰蛋白酶被稀释到分析缓冲液中达到120nM的浓度。最终试剂浓度是[胰蛋白酶]＝4nM，[N-苯甲酰基-Phe-Val-Arg-对-硝基苯胺]＝13mM。
弹性蛋白酶弹性蛋白酶活性是作为水解该N-琥珀酰基-Ala-Ala-Pro-Val-对-硝基苯胺的能力来分析。底物溶液是以在分析缓冲液中19mM的浓度(19mM＜＜Km＝89mM)制备的。最终的DMSO浓度是4.3％。提纯后的人白细胞弹性蛋白酶被稀释到分析缓冲液中达到750nM的浓度。最终试剂浓度是[弹性蛋白酶]＝25nM，[N-琥珀酰基-Ala-Ala-Pro-Val-对-硝基苯胺]＝19mM。
尿激酶尿激酶活性是作为水解该N-CBZ-Val-Gly-Arg-对-硝基苯胺的能力来分析。底物溶液是以在分析缓冲液中100mM的浓度(100mM＜Km＝1.2mM)制备的。最终的DMSO浓度是4.3％。提纯后的人肾尿激酶被稀释到分析缓冲液中达到1.2mM的浓度。最终试剂浓度是[尿激酶]＝40nM，和[N-CBZ-Val-Gly-Arg-对-硝基苯胺]＝100mM。
结果表明，实施例1-11的化合物具有对于人凝血酶而言在0.0028-20μM之间的Ki值。实施例5的化合物具有0.0028μM的Ki值。
现在已充分地描述了本发明，本技术领域中的那些技术人员会明白，本发明能够在不影响本发明的范围或它的任何实施方案的宽而等同范围的条件，配方和其它参数内完成。这里所列举的全部专利和出版物以它们的整个内容充分引入供参考。
权利要求
1.通式I的化合物 或它的溶剂化物，水合物或可药用的盐；其中W是氢，R1，R1OC(O)，R1C(O)，R1(CH2)sNHC(O)，R1S(O)2，或(R1)2CH(CH2)sNHC(O)，其中s是0-4；R1是R2，R2(CH2)tC(R12)2，其中t是0-3，并且各R12能够是相同的或不同的，(R2)(OR12)CH(CH2)p，其中p是1-4，(R2)2(OR12)C(CH2)p，其中p是1-4，R2C(R12)2(CH2)t，其中t是0-3，并且各R12能够是相同的或不同的，其中(R12)2还可以与C一起形成以C3-9环烷基为代表的环，R2CF2C(R12)2(CH2)q，其中q是0-2，并且各R12能够是相同的或不同的，其中(R12)2还可以与C一起形成以C3-9环烷基为代表的环，R2CH2C(R12)2(CH2)q，其中q是0-2，并且各R12能够是相同的或不同的，其中(R12)2还可以与C一起形成以C3-9环烷基为代表的环，(R2)2CH(CH2)r，其中r是0-4和各R2能够是相同的或不同的，并且其中(R2)2也能够与CH形成环，该环的代表有C3-9环烷基，C7-12二环烷基，C10-16三环烷基，或5-到7-员单环或二环的杂环，后者能够是饱和的或不饱和的，并且它含有1至3个选自N，O和S中的杂原子，R2O(CH2)p，其中p是2-4，(R2)2CF(CH2)r，其中r是0-4和各R12能够是相同的不同的，其中(R12)2还可以与C一起形成环，该环的代表有C3-9环烷基，C7-12二环烷基，C10-16三环烷基，或5-到7-员单环或二环的杂环，后者能够是饱和的或不饱和的，并且它含有1-3个选自N，O和S中的杂原子， 其中s是0或1，或R2CF2C(R12)2；R2是苯基，萘基，或联苯，其中每一个是未被取代的或被下列基团中的一个或多个取代C1-4烷基，C1-4烷氧基，卤素，羟基，CF3，OCF3，COOH，CONH2或SO2NH2，5-到7-员单环族或9-到10-员二环族的饱和或不饱和杂环或非杂环，其中该杂环含有1-4个选自N，O和S中的杂原子，并且其中该杂环或非杂环是未被取代的或被卤素或羟基取代，C1-12烷基，未被取代的或被下列基团中的一个或多个取代羟基，COOH，氨基，任选C1-3烷基取代的芳基，C3-9环烷基，CF3，N(CH3)2，杂芳基，或杂环烷基，CF3，C3-9环烷基，未被取代的或被芳基取代，C7-12二环烷基，或C10-16三环烷基；Y是-NH-或-O-；R3，R4，R5和R6独立地是氢，烷基，环烷基，链烯基，炔基，任选取代的芳基，任选取代的芳烷基，任选取代的杂芳基，卤代烷基，羟基，烷氧基，芳氧基，杂芳氧基，卤素，卤代烷氧基，羟烷基，氰基，硝基，-CO2Rx，-CH2ORx或-ORx，其中Rx在每种情况下独立地是氢，C1-12烷基或C3-9环烷基中的一个，其中该C1-12烷基或C3-9环烷基可以任选具有一个或多个不饱和键；R11是氢，烷基，或链烯基；R12是氢或卤素，苯基，萘基，或联苯，其中每一个是未被取代的或被下列基团中的一个或多个取代C1-4烷基，C1-4烷氧基，卤素，羟基，CF3，OCF3，COOH，或CONH2，5-到7-员单环族或9-到10-员二环族的杂环，它能够是饱和或不饱和的，并且它含有1-4个选自N，O和S中的杂原子，C1-12烷基，未被取代的或被下列基团中的一个或多个取代羟基，COOH，氨基，C6-14芳基，杂芳基，或杂环烷基，CF3，C3-9环烷基，C7-12二环烷基，或C10-16三环烷基；B是选自 或 其中R7，R8，R9，和R10独立地是氢，烷基，芳烷基，芳基，羟烷基，氨基烷基，单烷基氨基烷基，二烷基氨基烷基或羧基烷基；或R7和R8联在一起形成-(CH2)u-，其中u是2到7，优选2到5，而R9和R10如以上所定义；或R9和R10联在一起形成-(CH2)v-，其中v是2到7，优选2到5，而R7和R8如以上所定义；或R7和R9联在一起形成-(CH2)y-，其中y是0(一个键)或1-7，优选0-4，而R8和R10如以上所定义；X是-O-，-NR18-，或-CH＝N-(其中N键接于NR13上)，其中R18是氢，烷基，环烷基或芳基，其中该烷基、环烷基或芳基任选被氨基，单烷基氨基，二烷基氨基，烷氧基，羟基，羧基，烷氧基羰基，芳氧基羰基，芳烷氧基羰基，芳基，杂芳基，酰氨基，氰基或三氟甲基取代；Ra，Rb和Rc独立地是氢，烷基，羟基，烷氧基，芳氧基，芳烷氧基，烷氧基羰基氧基，氰基或-CO2Rw，其中Rw是C1-12烷基，C3-9环烷基，C6-14芳基，C6-14芳基(C1-12)烷基， 或 其中Re和Rf独立地是氢，C1-6烷基，C2-6链烯基或C6-14芳基，Rg是氢，C1-6烷基，C2-6链烯基或C6-14芳基，Rh是氢，C1-6烷基，C2-6链烯基或C6-14芳基，和Ri是C6-14芳基(C1-12)烷基或C1-6烷基；n是0到8；和m是0到6；R13是氢，烷基，链烯基，芳烷基，芳基，羟烷基，氨基烷基，单烷基氨基烷基，二烷基氨基烷基或羧基烷基；R14和R15独立地是氢，烷基，环烷基，卤素或烷氧基；和R16和R17独立地是氢，烷基，羟基，烷氧基，芳氧基，烷氧基羰基，氰基或-CO2Rj，其中Rj是C1-12烷基，C3-9环烷基，C6-14芳基，C6-14芳基(C1-12)烷基，卤代(C1-12)烷基，或 其中Re、Rf和Rg独立地是氢或C1-12烷基。
2.权利要求1的化合物，其中R3，R4，R5和R6独立地是氢，C1-12烷基，C3-9环烷基，卤素，C2-20链烯基，C2-20炔基，任选取代的C6-14芳基，任选取代的C6-14芳基(C1-12)烷基，任选取代的杂芳基，卤素(C1-12)烷基，C1-12烷氧基，C6-14芳氧基，杂芳氧基，卤代(C1-20)烷氧基或羟基(C1-12)烷基；R11是氢，C1-12烷基或C2-20链烯基；R7，R8，R9和R10独立地是氢，C1-12烷基，C6-14芳基(C1-12)烷基，C6-14芳基，羟基(C1-12)烷基，氨基(C1-12)烷基，单(C1-12)烷基氨基(C1-12)烷基，二(C1-12)烷基氨基(C1-12)烷基，或羧基(C1-12)烷基；R18是C1-12烷基，C3-9环烷基或C6-14芳基，其中每一个任选被氨基，单(C1-12)烷基氨基，二(C1-12)烷基氨基，C1-20烷氧基，羟基，羧基，C1-20烷氧基羰基，C6-14芳氧基羰基，C6-14芳基(C1-20)烷氧基羰基，C6-14芳基，C5-10杂芳基，酰氨基，氰基或三氟甲基取代；Ra，Rb和Rc独立地是C1-12烷基，C1-20烷氧基，C6-14芳氧基，C6-14芳基(C1-20)烷氧基，或C1-20烷氧基羰基氧基；R13是C1-12烷基，C1-20烷氧基，C6-14芳氧基或C1-20烷氧基羰基；R14和R15独立地是C1-12烷基，C3-9环烷基或C1-20烷氧基；和R16和R17独立地是C1-12烷基，C1-20烷氧基，C6-14芳氧基或C1-20烷氧基羰基。
3.根据权利要求1的化合物，其中B是
4.根据权利要求1的化合物，其中B是
5.根据权利要求1-4中任何一项的化合物，其中Y是-NH-。
6.根据权利要求1-5中任何一项的化合物，其中W是R1或R1S(O)2，其中R1是R2且R2是任选被取代的芳基或被芳基取代的C1-7烷基。
7.根据权利要求1-5中任何一项的化合物，其中W是R1，其中R1是R2或R2CF2C(R12)2(CH2)q，和R2是任选被取代的芳基或被芳基取代的C1-7烷基；R12是氢；和q等于零。
8.根据权利要求1和3-7中任何一项的化合物，其中R6是C1-6烷基或卤素。
9.根据权利要求8的化合物，其中R6是甲基，氯或氟。
10.根据权利要求9的化合物，其中R6是氯而R3是氟或羟基。
11.根据权利要求1，3-10中任何一项的化合物，其中R11是氢。
12.根据权利要求1，3和5-11中任何一项的化合物，其中Ra，Rb，Rc和R13各自是氢。
13.根据权利要求1和3-12中任何一项的化合物，其中R7，R8，R9和R10中每一个是氢。
14.权利要求1的化合物，它是以下当中的一种N-[2-脒基氨基氧基)乙基]-2-{3-[(2，2-二氟-2-苯基乙基)氨基]-6-氯-2-氟苯基}乙酰胺；N-[(6-氨基-2-甲基(3-吡啶基))甲基]-2-{3-[(2，2-二氟-2-苯基乙基)氨基]-6-氯-2-氟苯基}乙酰胺；N-(6-氨基-2，4-二甲基(3-吡啶基))甲基]-2-{3-[(2，2-二氟-2-苯基乙基}乙酰胺；N-[2-(脒基氨基氧基)乙基]-2-(3-{[2，2-二氟-2-(4-氟萘基)乙基]氨基}-6-氯-2-氟苯基)乙酰胺；N-[(6-氨基-2-甲基(3-吡啶基))甲基]-2-{[2，2-二氟-2-(4-氟萘基)乙基]氨基}-6-氯-2-氟苯基)乙酰胺；N-2-(胍基氧基)乙基]-2-(3-{[苄基磺酰基]氨基}苯基)乙酰胺；N-[2-(胍基氧基)乙基]-2-(2-氯-5-{[苄基磺酰基]氨基}苯基)乙酰胺；N-[2-(胍基氧基)乙基]-2-(2-甲基-5-{[苄基磺酰基]氨基}苯基)乙酰胺；N-[2-(胍基氧基)乙基]-2-(2-羟基-6-甲基-3-{[(3-甲基苯基)磺酰基]氨基}苯基)乙酰胺；N-[(6-氨基-2-甲基(3-吡啶基))甲基]-2-(2-羟基-6-甲基-3-{[(3-甲基苯基)磺酰基]氨基}苯基)乙酰胺；或N-({N-[2-(胍基氧基)乙基]氨基甲酰基}甲基)-2-羟基-4-甲基苯基3-甲基苯磺酸酯；或它们的溶剂化物，水合物或可药用的盐。
15.药物组合物，它包括权利要求1-14中任何一项的化合物和可药用的载体。
16.根据权利要求15的药物组合物，进一步包括抗凝剂，抗血小板剂或溶栓剂中的至少一种。
17.根据权利要求15的药物组合物，其中化合物是以大约0.1和大约500mg之间的量存在。
18.抑制或治疗哺乳动物异常蛋白水解，血栓形成，局部缺血，中风，再狭窄或炎症的方法，包括对该哺乳动物施用有效量的权利要求1-14中任何一项的化合物。
19.治疗或预防哺乳动物以牵涉到凝血酶产生或作用的异常静脉或动脉血栓形成为特征的症状的方法，包括对该哺乳动物施用权利要求15的组合物。
20.用于血液收集、血储存或血液循环的医用装置，它包括被包埋于或以物理方式附着于该医用装置中的权利要求1-14中任何一项的化合物。
21.根据权利要求20的医用装置，它是导管，支架，血液透析机，血收集注射器或管，或血线。
22.抑制蛋白水解酶的作用的方法，包括让该酶与权利要求1-14中任何一项的化合物接触。
23.根据权利要求22的方法，其中该酶是白细胞嗜中性粒细胞弹性蛋白酶，糜蛋白酶，胰蛋白酶，尿激酶，纤溶酶原激活物，胰弹性蛋白酶，组织蛋白酶G，凝血酶或因子Xa。
24.适合于口服的根据权利要求14-16中任何一项的药物组合物。
全文摘要
描述了苯基乙酰胺化合物，包括通式(I)的化合物或它的溶剂化物，水合物或可药用的盐；其中R
文档编号A61L31/00GK1568307SQ01818254
公开日2005年1月19日 申请日期2001年10月5日 优先权日2000年10月6日
发明者W·潘, 鲁天保, T·P·马尔科坦, B·E·托姆苏克 申请人:三维药物公司