专利名称：黄体酮胶囊处方及其制备方法
技术领域：
本发明属制药工程，主要涉及孕激素类药物，尤其是关于黄体酮胶囊的处方及其制备方法，适用于性激素类药物治疗的口服给药。
有机溶剂10％～30％表面活性剂 0.5％～3.0％微粉硅胶1.0％～3.0％淀粉5.0％～20％制备方法主要包括以下步骤先将处方量的载体加入有机溶剂中，加热至60℃，加入黄体酮、或再加表面活性剂使其溶解，40℃真空干燥4小时，气流粉碎，加入微粉硅胶、淀粉均匀混合，胶囊包装即可。
本发明胶囊的处方中，黄体酮∶载体为1∶0.5～1∶3.0。
本发明胶囊的处方中，载体可以是单硬脂酸甘油酯、聚乙二醇(PEG)6000、十六醇、十八醇等。
本发明胶囊的处方中，有机溶剂可以是乙醇、甲醇、丙酮等。
本发明胶囊的处方中，表面活性剂可以是十二烷基硫酸钠、吐温80、卵磷脂等。
本发明胶囊的制备中，粉碎粒度要求在1～100um。
用本发明处方制备的黄体酮胶囊制剂，口服吸收良好，能显著提高孕酮水平，并作用于子宫内膜使之由增生转化为分泌反应，试用中未有严重不良反应发生。因此口服微粒化孕酮使用安全，有效方便，对必须应用天然孕酮患者为较好的选择。目前，寻求应用方便有效的天然孕酮制剂以取代肌注制剂在当前有重要的经济与社会意义。本发明的制备工艺简便，成本较低，适合工业化生产。
图2为对照组兔子宫(E2sc 5μg/只+赋形剂po 2ml/只)。
图3为黄体酮胶囊组兔子宫(E2sc 5μg/只+黄体酮胶囊po7.80mg/kg)。
图4为黄体酮胶囊组兔子宫(E2sc 5μg/只+黄体酮胶囊po31.3mg/kg)。
图5为黄体酮胶囊组兔子宫(E2sc 5μg/只+黄体酮胶囊po12.5mg/kg)。
图6为黄体酮注射液组兔子宫(E2sc 5μg/只+黄体酮注射液im0.78mg/kg)。
图7为黄体酮注射液组兔子宫(E2sc 5μg/只+黄体酮注射液im31.3mg/kg)。
图8为黄体酮注射液组兔子宫(E2sc 5μg/只+黄体酮注射液im12.5mg/kg)。
实施例一处方1 黄体酮50g单硬脂酸甘油酯150g乙醇 15ml微粉硅胶 2g淀粉 12.5g制成 1000粒制备方法①将150g单硬脂酸甘油酯加入15ml乙醇中，加热至60℃，加入50g黄体酮使其溶解，取出，40℃真空干燥4小时，气流粉碎，粉碎粒度要求在0～20um。
②按处方量，加入微粉硅胶、淀粉均匀混合。
③装0号胶囊，包装。
实施例二处方2黄体酮50g单硬脂酸甘油酯80g十二烷基硫酸钠1.5g乙醇 20ml微粉硅胶 1.25g淀粉 12.5g制成 1000粒制备方法①将80g单硬脂酸甘油酯加入20ml乙醇中，加热至60℃，加入50g黄体酮、1.5g十二烷基硫酸钠使其溶解，取出，40℃真空干燥4小时，气流粉碎，粉碎粒度要求在20～40um。
②按处方量加入微粉硅胶、淀粉均匀混合。
③装0号胶囊，包装。
②按处方量，加入微粉硅胶、淀粉均匀混合。
②装0号胶囊，包装。
②按处方量，加入微粉硅胶、淀粉均匀混合。
③装0号胶囊，包装。
实施例五黄体酮胶囊药效学试验一.实验材料
(一)、动物雌性新西兰白兔，体重0.6-0.8kg；ICR雌性小鼠，体重19-20g，27-35g，购自浙江省实验动物中心，动物合格证号浙实验准字96001。
(二)、药物1.黄体酮胶囊颗粒含量35.15％，下述实验剂量均按黄体酮含量计算，实验时以羧甲基纤维素配制成混悬液，灌胃给药，每日2次，间隔6小时。
2.黄体酮注射剂20mg/ml，浙江仙居制药股份有限公司，批号960112，实验时以灭菌精制植物油稀释，皮下或肌肉注射给药，每日1次。
3.雌二醇(E2)含量99.5％，上海第十二制药厂，批号95020，实验时用灭菌精制植物油配制，皮下注射给药。
二.实验方法与结果(一)、幼兔子宫内膜转化试验雌性新西兰幼兔36只，体重0.6-0.8Kg，随机分为7组，每组5只。另留1只为正常幼兔，同条件饲养，不给药。各组动物于实验第1-6天，E2皮下给药(sc)5μg/只/d，实验第7-11天，给药组分别黄体酮注射剂肌肉注射(im)0.78、3.13、12.50mg/kg/d或黄体酮胶囊口服给药(po)7.80、31.30、125.00mg/kg/d，对照组po等体积赋型剂2ml/只/d。末次给药后24小时，解剖取出子宫，同定于Bouin′s液中，每侧子宫分别取远、中、近3段，石蜡切片，HE染色后，镜检，观察子宫内膜形态，按子宫内膜腺体增生程度，定出Mcphail指数分级。
Mcphail指数分级标准1级，腺腔沿管腔发展，很短，较深的基质未深及；2级，腺体数目增加，长度加长，较深的基质部分仍完整，染色明亮；3级，腺体扩展伸入较深基质，腺体较狭窄；4级，腺体深入近肌肉层，腺体扩展，内膜断裂。表1幼兔子宫内膜转化试验(X±SD)组 别 剂量(mg/kg/d) 动物数(只) Mcphail平均指数对照组 50.0±0.0黄体酮注射剂 0.78 53.2±0.23.13 53.6±0.312.50 53.8±0.2黄体酮胶囊(粉)7.80 53.0±0.331.30 53.1±0.2125.00 53.6±0.4结果见表1，雌激素促进子宫生长和内膜细胞分裂，从而引起内膜增生增厚，并转化为增殖型内膜，黄体酮在此基础上将子宫内膜转化为分泌型内膜镜检结果表明，正常幼兔子宫细小，内膜中末见腺体(参见
图1)；对照组兔子宫在雌激素作用下，子宫变粗，宫腔增大，呈不规则形，有少数腺体(＜10)，小、园、直，无分枝，有大量间质(参见图2)，Mcphail指数定级为0；黄体酮注射剂im 0.78、3.13、12.50mg/kg/d或黄体酮胶囊(粉)po7.80、31.30、125.00mg/kg/d，各组兔子宫均较粗大，略呈暗红色，镜下可见内膜腺体增多、延长、弯曲，并出现分枝，有些内膜腺体扩展伸入较深基质，腺体变窄，间质大为减少(参见图3-8)，Mcphail指数见参表1表明黄体酮胶囊口服后具有较强的孕激素活性，能促进经雌激素刺激的幼兔子宫内膜腺体增生，其作用与1/10剂量注射剂的作用相当。
(二)、小鼠蜕膜瘤形成试验ICR雌性小鼠83只，体重19-20g，随机分成8组，以戊巴比妥钠60mg/kg，腹腔(ip)麻醉，在无菌操作条件下，从背部两侧切除卵巢，对照组仅做假手术，不切除卵巢，也不给药，实验第7-9天，其它组每日E2sc 2μg/只，从第10-17天起每日E2sc 1μg/只，给药组同时黄体酮sc注射剂6.25、12.5、25.0mg/kg/d或黄体酮胶囊(粉)po62.5、125、250mg/kg/d，对照组、模型组po等体积的赋型剂0.5ml/只，于第12天，小鼠戊巴比妥钠麻醉，在左侧子宫角1/3系膜处穿一丝线，第18天将动物处死，取出两侧子宫，精密称取湿重，并按Peter Hebborn方法以两侧子宫角重量之差，为蜕膜瘤生长的指标，计算蜕膜瘤增长百分率。
表2小鼠蜕膜瘤形成试验(X±SD)组 别 剂量(mg/kg/d) 动物数(只) Mcphail平均指数对照组 10 7.9±10.0模型组 11 9.9±18.4黄体酮注射剂 6.2510 29.7±20.0*12.510 35.8±22.1**25.010 55.9±14.8***黄体酮胶囊(粉) 62.510 19.3±18.5125 12 35.2±25.0*250 10 53.6±27.1***注经t检验，与模型组比较，*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001结果见表2，黄体酮胶囊(粉)可明显地诱发小鼠蜕膜瘤的生长，表明具有颇强的孕激素活性，并有明显的剂量反应关系，黄体酮胶囊(粉)的作用强度约相当于1/10剂量注射剂的作用强度。
(三)、小鼠妊娠维持试验ICR雌性小鼠，体重27-30g，以2∶1与雄鼠同笼，次日早上8点钟，观察雌鼠阴栓，以发现阴栓为妊娠第1天，于怀孕第8天，经戊巴比妥钠60mg/kg，ip麻醉从背部两侧切除卵巢，观察子宫内有无胚胎着床，以确定其有否怀孕并弃去未孕鼠，手术当天E2sc 2μg/只/d，同时黄体酮注射剂sc12.5、25、50mg/kg/d或黄体酮胶囊(粉)po 125、250、500mg/kg/d，对照组、模型组po等体积赋型剂0.5ml/只，连续6天，直至妊娠第14天，解剖，观察胚胎植入部位并记录活胚胎数。对照组进行假手术，不给E2和黄体酮。
表3去势小鼠妊娠维持试验组 别 剂量(mg/Kg/d) 动物数(只) 妊娠率(％) 平均活胎数对照组 10 90 9.3模型组 10 0 0黄体酮注射剂 12.5 10 0 025.0 10 60*4.550.0 10 80*6.1黄体酮胶囊(粉) 125 10 0 0250 10 30 5.7500 10 70** 6.0注经X2检验，与模型组比较，*p＜0.05，**p＜0.01。结果见表3，小鼠在切除卵巢后，因体内雌、孕激素水平下降，不能维持妊娠，导致流产。黄体酮具有抑制子宫平滑肌细胞间隙接合的形成，减少子宫肌的自发活动，降低子宫肌细胞的兴奋性，因而有利于妊娠维持。实验也证明黄体酮胶囊(粉)500mg/kg可维持去卵巢小鼠妊娠70％，其作用与1/10剂量注射剂(80％)的作用接近。
黄体酮临床主要用于功能失调性子宫出血，先兆流产和反复自然流产。由于孕激素可通过负反馈抑制垂体前叶分泌睾丸间质细胞刺激激素(ICSH)，从而减少睾丸素分泌。此外，它还能选择性地抑制前列腺素对睾丸酮的吸收和5-α还原酶，阻止睾丸酮转化为双氢睾丸酮。因此，可用于治疗良性前列腺增生症和前列腺癌，近年来临床报道黄体酮还可治疗泌尿系结石。
上述结果证明，黄体酮胶囊(粉)口服有效，黄体酮胶囊(粉)po 7.80-125.00mg/kg/d，即可使E2激发下的幼兔子宫内膜由增生期向分泌期转化，为受精卵的着床以及随后的胚泡发育作准备。小鼠蜕膜瘤形成试验证明，黄体酮胶囊(粉)po 125-250 mg/kg/d，可引起细胞分裂，促进小鼠蜕膜瘤的生长，另外，黄体酮胶囊(粉)还能维持去卵巢小鼠的妊娠。黄体酮胶囊(粉)的孕激素活性约相当于1/10剂量黄体酮注射剂的作用。
实施例六黄体酮胶囊II期临床验证一、病例选择1.入选标准①月经紊乱或闭经；②基础体温单相；③月经后半期测血孕酮水平＜7nmol/L；④子宫内膜活检证实为无排卵月经者。
入选病例至少符合上述标准中的3条，又根据各自特征将上述病例分别归纳为多囊卵巢综合征(Pcos)、更年期、功血、继发闭经及其他。
2、排除标准有下列情况者不应选入①有消化道疾病者；②肝肾功能不全者；③有其它内分泌疾病者；
④有糖尿病或其它代谢性疾病者；⑤有药物过敏史者；⑥过去3月内接受性激素治疗者。
3、剔除标准未能证实为无排卵者；各种原因致使该病例未能完成3个疗程者。
二、分组计划入选病例120例，按随机方式分为2组，一组接受MP治疗，为验证组共60例，另一组接受IP治疗称对照组共60例。
入选者按就诊顺序排号，根据系统随机抽样方法分组。
三、治疗方法1、药品黄体酮胶囊黄体酮注射液浙江仙居制药有限公司倍美力片2、剂量倍美力片 1.25mg每日一次，口服，共22天黄体酮胶囊200mg每日两次，口服于服用倍美力片第13天起服，共10天(验证组)黄体酮注射液 20mg每日一次肌注，于服用倍美力片第13天起注射，共10天(对照组)3、用法 每例观察3个疗程①闭经者经激素测定确诊为无排卵者即时开始第一疗程治疗，第二、三疗程于撤退性出血第5天开始用药。
②无排卵能自然行经者第一疗程于行经第5天起治疗，第二、三疗程于撤退性出血第5天开始用药。
③无排卵功血如行全面刮宫者于手术第5天开始第一疗程治疗，第二、三疗程开始日同前。
四、观察时间及项目1、疗效观察①每疗程需询问用药后撤退性出血情况。
②激素测定治疗前及第3疗程结束前3天分别测定血FSH、LH、E2、P、T、PRL浓度。
③部分病例于治疗前及第三疗程末取子宫内膜标本进行组织学检查。
2、安全性观察①治疗前及治疗结束后分别测定血常规、肝、肾功能。
②不良反应观察。
五、疗效判定标准1、停药后阴道出血①完全缓解出血3-7天②显效出血8-10天③无效出血＞10天2、血孕激素水平变化①完全缓解 ＞32nmol/L②显效 20-32nmol/L③进步 7-19nmol/L④无效 ＜7nmol/L3、子宫内膜组织学变化①完全缓解子宫内膜呈分泌反应②显效子宫内膜呈早分泌反应或分泌不足③无效子宫内膜呈增生反应六、病例登记与总结按设计表格逐项登记，并由实施医师及主要研究者签名。
七、统计分析方法由专职人员进行全部统计，主要采用SPSS 10.0统计软件包。
八、结果1、一般资料验证组入选79例，脱落5例，剔除6例，最终有效例数68例，剔除原因，服用药物剂量错误1例，最终检查资料不全2例，诊断错误(血孕酮水平处于排卵后水平)3例。脱落5例均为中途失访。对照组入选71例，脱落6例，剔除4例，最终有效例数61例，剔除原因，最终检查资料不全2例，诊断不确切2例，脱落原因多为中途失访，其中1例发现肝功能异常(参见表4)。
表4 两组入选、脱落、剔除病例比较验证组 对照组入选例数 79 71脱落例数 5 6剔除例数 6 4有效例数 68 61χ2＝0.98 P＞0.05两组入选、脱落、剔除病例比较无显著性差异。
表5 两组年龄与体重指数比较例数年龄 体重指数验证组68 31.3±8.6 21.3±3.1对照组61 38.0±9.3 21.6±2.9t 0.775 0.627p 0.439 0.532表6 两组体重指数分布(BMI)验证组(例) 对照组(例)＜23 46 4123～2721 18＞27 1 2χ2＝0.473 P＝0.789BMI＝体重kg/身高m2按国内标准＞23为超重，＞27为肥胖。参见表5、6，两组年龄、体重指数(BMI)及BMI分布比较均无显著性差异，2、治疗结果(1)治疗前后两组激素变化参见表7，验证组与对照组治疗后血孕酮水平均较治前显著增高，分别由1.90升至48.9nmol/L及1.7升至13.3nmol/L。FSH及LH水平有显著下降。表7两组治疗前后血激素水平变化验证组 对照组治疗前 治疗后Z P 治疗前 治疗后 Z PFSH IU/L 11.405(1.56～100) 7.26 3.18 ＜0.01 23.32 8.3(0.7～682)3.848 ＜0.01(0.01～60.2) (2.1～127.4)LH IU/L 25.29(0.05～157.28)7.9 4.931 ＜0.01 20.54 10.35(0.24～53) 4.598 ＜0.01(0.05～64.6) (1.26～129.2)E2pmo1/L 86(9～1388)218.3 3.913 ＜0.01 99.42 235 4.373 ＜0.01(29～1153.85)(9.9～2084.56) (5.49～1592.78)Pnmol/L 1.91(0.06～6.33)48.88 9.726 ＜0.01 1.7 13.268.795 ＜0.01(0.73～452.93) (0.32～6.55)(0.64～46.11)T nmol/L 1.83(0.1～145.6)2(0.1～180.1) 0.212 0.8321.5 1.0751.496 0.135(0.5～179.10) (0.07～75.2)PRLng/ml 9.18(0.5～86.83)11(0.46～45.9)1.453 0.14610.15 11.425 1.949 0.051(0.65～48.01) (12～126.3)(2)治疗后两组血孕酮水平分组比较表8治疗后两组血孕酮水平分组比较孕酮水平验证组对照组χ2Pnmol/L n＝68 n＝61＞3245921-32 5 117-201630＜7 2 1136.5＜0.01注按排卵后血孕酮水平应达6.36nmol/L(2ng/ml)黄体高峰期浓度至少达31.8nmol/L(10ng/ml)，参见表8，经卡方检验，验证组优于对照组。
(3)治疗后子宫内膜变化部分病例治疗前后作子宫内膜活检，治疗前子宫内膜均呈增生期或未能取得内膜，治疗后内膜组织学变化参见表9。表9两组治疗后子宫内膜组织学变化比较子宫内膜组织学 验证组 对照组A(例) 17 22B(例) 8 1C(例) 3 4合计28 27χ2＝6.21 P＜0.05注A子宫内膜分泌期B子宫内膜早分泌期或分泌不足C子宫内膜增生期或无内膜(4)停药后阴道出血比较表10两组停药后阴道出血天数比较验证组 对照组 χ2P出血天数 3-7天 8-10天 ＞10天3-7天 8-10天 ＞10天(例) (例)(例) (例)(例)(例)疗程1 63 4 159 2 0 1.42＞0.052 65 360 1 0 0.83＞0.053 67 157 2 2参见表10，两组停药后阴道出血天数比较无显著性差异。3、治疗结束后疗效比较(1)孕酮水平评价表11血孕酮水平评价疗效 验证组(例) 对照组(例)完全缓解 45 9显效 511进步 16 30无效 211总有效率 97％ 82％Ridit｀s检验u＝5.23 P＜0.01参见表11，于第3疗程结束前3天检查，验证组血孕酮水平97％升高，超过排卵后水平，对照组87％超过排卵后水平，验证组孕酮水平达黄体期高峰者占67％，经Ridit｀s检验，验证组优于对照组。
(2)子宫内膜组织学变化评价表12子宫内膜组织学变化评价疗效 验证组(例) 对照组(例)完全缓解1720显效8 1无效3 4总有效率89.3％84％Ridit｀s检验u＝0.95 P＞0.05疗程结束后有子宫内膜活检标本者分析参见表12，验证组与对照组总有效率分别达89.3％及84％，经Ridit｀s检验，二组无显著差异。(3)阴道出血天数表13两组停药后阴道出血天数疗效评价验证组％(例) 对照组％(例)疗效 完全缓解 显效 无效 总有效率 完全缓解显效无效总有效率1 92.6(63) 5.9(4)1.5(1)98.5(67) 96.7(59)3.3(2) 0 1002 95.6(65) 4.4(3)0 100(68) 98.4(60)1.6(1) 0 1003 98.5(67) 1.5(1)0 100(68) 93.4(57)3.3(2) 3.3(2) 96.7(59)参见表13，二组停药后阴道出血天数按规定限于7天之内，结果提示内膜剥落完全，各疗程间及两组间比较经Ridit｀s检验无显著性差异。
以上实验结果表明，黄体酮胶囊400mg/日口服后吸收良好，能显著提高孕酮水平，并作用于子宫内膜使之由增生转化为分泌反应，试用中未发现严重不良反应。口服黄体酮胶囊使用安全，有效方便，对必须应用天然黄体酮的患者为较好的选择。
无需进一步详细阐述，相信采用前面所公开的内容，本领域技术人员可最大限度地应用本发明。因此，前面的优选具体实施方案应理解为仅是举例说明，而非以任何方式限制本发明的范围。
权利要求
1.黄体酮胶囊处方及其制备方法，处方主要包括黄体酮、载体等，其特征是处方中还包括有机溶剂、表面活性剂、微粉硅胶、淀粉等，处方组成主要为黄体酮 15％～65％载体13％～68％有机溶剂10％～30％表面活性剂 0.5％～3.0％微粉硅胶1.0％～3.0％淀粉5.0％～20％制备方法包括以下步骤先将处方量的载体加入有机溶剂中，加热至60℃，加入黄体酮、或再加表面活性剂使其溶解，40℃真空干燥4小时，气流粉碎，加入微粉硅胶、淀粉均匀混合，胶囊包装即可。
2.如权利要求1所述的黄体酮胶囊处方及其制备方法，其特征是处方中黄体酮∶载体为1∶0.5～1∶3.0。
3.如权利要求1所述的黄体酮胶囊处方及其制备方法，其特征是处方中载体可以是单硬脂酸甘油酯、聚乙二醇6000、十六醇、十八醇等。
4.如权利要求1所述的黄体酮胶囊处方及其制备方法，其特征是处方中有机溶剂可以是乙醇、甲醇、丙酮等。
5.如权利要求1所述的黄体酮胶囊处方及其制备方法，其特征是处方中表面活性剂可以是十二烷基硫酸钠、吐温80、卵磷脂等。
6.如权利要求1所述的黄体酮胶囊处方及其制备方法，其特征是在制备中粉碎粒度要求在1～100um。
全文摘要
本发明提供的黄体酮胶囊处方及其制备方法，其处方主要包括黄体酮、载体、有机溶剂、表面活性剂、微粉硅胶、淀粉等，制备方法主要是先将处方量的载体加入有机溶剂中，加热至60℃，再加入黄体酮使其溶解，40℃真空干燥4小时，气流粉碎，加入微粉硅胶、淀粉均匀混合，胶囊包装即可。用本发明制备的黄体酮胶囊制剂，口服吸收良好，能显著提高孕酮水平，并作用于子宫内膜使之由增生转化为分泌反应，试用中未有严重不良反应发生。因此口服微粒化孕酮使用安全，有效方便，对必须应用天然孕酮患者为较好的选择。本发明的制备工艺简便，成本较低，适合工业化生产。
文档编号A61K31/57GK1398590SQ02136639
公开日2003年2月26日 申请日期2002年8月20日 优先权日2002年8月20日
发明者沈志群 申请人:杭州容立医药科技有限公司