专利名称：作为毒蕈碱受体拮抗剂的3，3－二苯基丙胺衍生物注射用缓释微球制剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及3，3-二苯基丙胺衍生物的注射用缓释微球制剂及其制备方法，本发明还涉及所述制剂用于制备治疗或辅助治疗与毒蕈碱受体有关的疾病和不稳定或过度性膀胱包括冲动失禁、尿急或尿频等症的药物的用途。
背景技术：
据报道，(R)-N，N-二异丙基-3-(2-羟基-5-羟甲基苯基)-3-苯基丙胺(Ia)和(R)-N，N-二异丙基-3-(2-羟基-5-甲基苯基)-3-苯基丙胺(托特罗定)(II)是毒蕈碱受体拮抗剂(EP0325571；WO94/11337)，其可用来治疗不稳定或过度性膀胱包括冲动失禁，尿急或尿频等症。通过对其结构进行改造，发现它们的一些衍生物或前药具有相似的作用(EP0325571，EP1077912)。例如，法玛西雅公司的托特罗定酒石酸盐口服片或胶囊(EP0325571)已经进入市场。
临床研究证明，托特罗定((R)-N，N-二异丙基-3-(2-羟基-5-甲基苯基)-3-苯基丙胺)是毒蕈碱受体拮抗剂，经口服进入体内后在肝脏中经酶CYP2D6转化为(R)-N，N-二异丙基-3-(2-羟基-5-羟甲基苯基)-3-苯基丙胺以及5-羧基和N-去烷基-5-羧基代谢物，其中(R)-N，N-二异丙基-3-(2-羟基-5-羟甲基苯基)-3-苯基丙胺具有药理活性。虽然托特罗定其代谢物(R)-N，N-二异丙基-3-(2-羟基-5-羟甲基苯基)-3-苯基丙胺都是毒蕈碱受体拮抗剂，但对大多数患者而言起主要药理作用的是其代谢物(R)-N，N-二异丙基-3-(2-羟基-5-羟甲基苯基)-3-苯基丙胺(Eur.J.Pharmacol.327(1997)，195-207；EP1077912)。实验表明，(R)-N，N-二异丙基-3-(2-羟基-5-羟甲基苯基)-3-苯基丙胺的毒蕈碱受体拮抗作用比托特罗定本身高十倍(WO94/11337)。临床研究还表明，只有部分托特罗定转化为(R)-N，N-二异丙基-3-(2-羟基-5-羟甲基苯基)-3-苯基丙胺，尤其是对肝功能有损坏的患者，托特罗定转化为(R)-N，N-二异丙基-3-(2-羟基-5-羟甲基苯基)-3-苯基丙胺的能力大大下降，而其它非活性的代谢产物增加，导致药效降低，副作用增加。
另一种(R)-N，N-二异丙基-3-(2-羟基-5-羟甲基苯基)-3-苯基丙胺的前药，(R)-N，N-二异丙基-3-(2-羟基-5-羟甲基苯基)-3-苯基丙胺的异丁酸酯正在临床实验中(EP1077912和Inpharma 1(2004)7-7(1))，此药物经口服吸收后进入体内转化为(R)-N，N-二异丙基-3-(2-羟基-5-羟甲基苯基)-3-苯基丙胺，从而产生药理活性，临床实验结果表明，此药物具有很好的毒蕈碱受体拮抗作用，但其生物利用度低于托特罗定，表明其经肠胃道的吸收率低。
口服3，3-二苯基丙胺类毒蕈碱受体拮抗剂，体内血液中药物浓度波动大，导致药效降低，副作用增加，例如口干、便秘、消化不良、头痛、眩晕、眼干、尿潴留。其未吸收的部分将产生系统前副作用或相互作用(EP1077912)，肝首过效应也导致药效降低，副作用增加，而且(R)-N，N-二异丙基-3-(2-羟基-5-羟甲基苯基)-3-苯基丙胺的口服生物利用度很低，不适合于口服剂型。虽然3，3-二苯基丙胺类毒蕈碱受体拮抗剂可以普通注射方式给药，但对患者而言，作为长期治疗药物，每日一次或多次的注射方式显然将增加患者的痛苦与不适。US6517864报道了托特罗定以及(R)-N，N-二异丙基-3-(2-羟基-5-羟甲基苯基)-3-苯基丙胺的24小时透皮剂型，虽然此剂型可以较稳定的速度释放药物，但由于生物利用度非常低(＜20％)导致其治疗成本的提高，并且不能长效缓释，因此，仍需要开发用作毒蕈碱受体拮抗剂的3，3-二苯基丙胺衍生物新的注射型长效缓释剂型。
发明内容
本发明的目的是提供一种3，3-二苯基丙胺衍生物的注射用长效制剂，所述制剂能够将药物使用频率从一天一次或多次降低至一周、二周、一个月甚至2个月一次，大大减少用药次数，同时提高药物的生物利用度和治疗效果，从而极大地减轻广大患者的痛苦，提高其生活质量。
因此，本发明的一个方面涉及3，3-二苯基丙胺衍生物的注射缓释微球制剂，其由如下通式(I)所示的3，3-二苯基丙胺衍生物和可生物降解的药用高分子辅料组成。
本发明的另一个方面涉及上述3，3-二苯基丙胺衍生物的注射用缓释微球的制备方法。
本发明的再一个方面涉及上述3，3-二苯基丙胺衍生物注射用微球制剂用于制备治疗与毒蕈碱受体有关的疾病和不稳定或过度性膀胱包括冲动失禁、尿急或尿频等症的药物的用途。
具体而言，本发明的缓释微球制剂由如下通式(I)所示的3，3-二苯基丙胺衍生物、其光学对映异构体或外消旋体以及可生物降解的药用高分子辅料组成 其中，R1表示氢原子，C1-C6烷酰基或C6-C10芳烷基；R2表示氢原子，C1-C6烷基，羟基或C1-C6羟烷基；
R3和R4表示氢原子或C1-C6烷基；R5表示氢原子，卤素，C1-C6烷基，C1-C6羟烷基，C1-C6烷氧基或含硫原子或含氮原子的基团。
本发明中所采用的术语“3，3-二苯基丙胺衍生物”包括具有以下通式(I)所示结构的3，3-二苯基丙胺类化合物、其前药、类似物和P这些化合物的可药用盐，其中，R1-R5的定义如上所述。
本发明的缓释微球制剂适合所有的3，3-二苯基丙胺类化合物、其前药、类似物及这些化合物的可药用盐。
优选地，上述3，3-二苯基丙胺衍生物选自下表中的化合物(Ia)、(II)、(III)、(IV)、(V)或(VI)或其可药用酸加成盐的至少一种。
化合物(Ia)为(R)-N，N-二异丙基-3-(2-羟基-5-羟甲基苯基)-3-苯基丙胺；化合物(II)为(R)-N，N-二异丙基-3-(2-羟基-5-甲基苯基)-3-苯基丙胺化合物(托特罗定)；(III)为(R)-N，N-二异丙基-3-(2-羟基-5-羟甲基苯基)-3-苯基丙胺单乙酸酯；化合物(IV)为(R)-N，N-二异丙基-3-(2-羟基-5-羟甲基苯基)-3-苯基丙胺单异丁酸酯；化合物(V)为(R)-N，N-二异丙基-3-(2-羟基-5-甲基苯基)-3-苯基丙胺乙酸酯；化合物(VI)为(R)-N，N-二异丙基-3-(2-羟基-5-甲基苯基)-3-苯基丙胺异丁酸酯。
在上述化合物中，最优选(R)-N，N-二异丙基-3-(2-羟基-5-羟甲基苯基)-3-苯基丙胺，(R)-N，N-二异丙基-3-(2-羟基-5-甲基苯基)-3-苯基丙胺，(R)-N，N-二异丙基-3-(2-羟基-5-羟甲基苯基)-3-苯基丙胺单异丁酸酯，即化合物Ia、II和IV。
上述3，3-二苯基丙胺衍生物可以以游离碱或者酸加成盐的形式使用。作为形成酸加成盐的酸包括但不限于盐酸、乙酸、磷酸、硫酸、酒石酸、富马酸、乳酸或柠檬酸等。
根据本发明，用于本发明缓释微球制剂的药用高分子辅料为各种可生物降解但不易溶于水的高分子材料，包括但不限于聚丙交酯-乙交酯、聚乳酸、聚乙醇酸、聚3-羟基丁酸酯、聚内酯、聚酸酐、聚羟基丁酸酯-羟基戊酸酯、聚丙烯萄聚糖、聚乳酸-聚乙二醇、聚羟乙酸-聚乙二醇等。其分子量2,000-1,000,000道尔顿之间。
优选的，药用高分子辅料选自聚丙交酯-乙交酯、聚乳酸、聚内酯、聚羟基丁酸酯-羟基戊酸酯等。其优选分子量为3,000-100,000道尔顿之间。
更优选的可生物降解药用高分子辅料为聚丙交酯-乙交酯、聚酸酐。
最优选的可生物降解药用高分子辅料为聚丙交酯-乙交酯。
对于聚丙交酯-乙交酯而言，其中丙交酯和乙交酯的聚合比在95∶5-5∶95之间，优选为40∶60-75∶25，最优选为大约50∶50。
本发明所述的3，3-二苯基丙胺衍生物的缓释微球制剂的粒径应当处于1-250μm之间，以便能保持一定的时效、良好的生物降解性以及注射入体内后不影响血液循环。粒径过小，难以维持长时间的药效，同时有可能阻塞毛细血管，影响微循环；粒径过大，初期释放太慢，达不到治疗有效血药浓度。
根据本发明，本发明的缓释微球制剂只要能够实现缓释的目的，则对其中的3，3-二苯基丙胺衍生物的含量没有特别限制，但是从保证足够高的血药浓度和保证缓释效果的平衡角度来说，优选3，3-二苯基丙胺衍生物占微球制剂总重量的0.2-50重量％，优选不低于3重量％；药用高分子辅料占50-99.8重量％，优选不高于97重量％。如果3，3-二苯基丙胺衍生物含量少于0.2重量％，不能保证足够高的血药浓度；反之，如果高于50重量％，则有可能不能保证药物平稳释放，可能造成副作用的发生。
本发明所述的微球制剂可以采用微球制剂的常规制备方法制得，如采用喷雾干燥法、溶剂挥发法以及喷雾萃取法。
具体来说，喷雾干燥法是用有机溶剂把3，3-二苯基丙胺衍生物和可生物降解的药用辅料溶解，将有机溶剂相注入到采用可药用水溶性高分子配制的乳化液中，然后通过溶剂挥发法得到缓释微球。
溶剂挥发法是用有机溶剂溶解3，3-二苯基丙胺衍生物和可生物降解药用高分子辅料，并采取喷雾干燥法制得微球。
喷雾萃取法是用有机溶剂溶解3，3-二苯基丙胺衍生物和可生物降解的药用高分子辅料，并采用喷雾法喷入另一种有机溶剂中，经萃取而制得微球。
当用溶剂挥发法制备本发明的微球时，首先用有机溶剂把3，3-二苯基丙胺衍生物和可生物降解的药用辅料溶解，配制成有机相。另外，用水溶性可药用高分子化合物配制连续水相，将有机相通过细管注入到连续相中，在机械搅拌或者超声波作用等剧烈搅拌作用下，充分乳化以形成微球，然后挥发干有机溶剂，过滤分离所形成的微球，干燥即得。在必要的情况下，也可以按照常规方法对微球进行水洗、分级等后处理，进行减压烘干或者冻干等干燥处理，然后分装。
以上操作中，3，3-二苯基丙胺衍生物和可生物降解的药用辅料如前所述。有机溶剂从操作角度应为具有足够挥发性、低残留的低沸点有机溶剂，例如二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、乙醚以及它们的混合溶剂等。配制连续水相的药用高分子包括但不限于例如聚乙烯醇、羧甲基纤维素钠、聚乙烯基吡咯烷酮、聚甲基丙烯酸钠、聚丙烯酸钠等。
在配制有机相的时候，3，3-二苯基丙胺衍生物和可降解药用辅料在有机溶剂中的含量只要有机溶剂能够溶解，就没有限制，不过从可行浓度及粘度的平衡和少用有机溶剂的角度出发，优选浓度为1-30％(w/v)。在用聚乙烯醇、羧甲基纤维素钠、聚乙烯基吡咯烷酮、聚甲基丙烯酸钠、聚丙烯酸钠配制连续水相时，其浓度也没有特别限制，但根据其在水中的溶解度，在水相中的含量优选0.01-12.0％(w/v)，更优选0.01-10.0％(w/v)，最优选0.1-5％(w/v)。在将有机相注入水相并剧烈搅拌以形成微球时，有机相和水相的体积比应足以使有机相在水相中充分分散以形成足够细的粒度和均匀度的微球，但是如果水相过多，后处理复杂，成本提高，从以上角度出发，有机相与水相的体积比大致为1∶4-1∶100。
也可以采用喷雾干燥法制备微球。当采用喷雾干燥法制备3，3-二苯基丙胺衍生物的缓释微球制剂时，可用有机溶剂把3，3-二苯基丙胺衍生物和可生物降解的药用辅料充分溶解配制成有机溶液；过滤，以常规喷雾干燥法制成微球。在必要的情况下，也可以按照常规方法对微球进行水洗，分级等后处理，然后分装。
上述喷雾干燥法制备微球时，有机溶剂可以使用二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、二氧六环、乙醚、丙酮、四氢呋喃、冰醋酸及由它们所组成的混合溶剂等，但不仅限于此。
在配制有机相的时候，药用辅料在有机溶剂中的含量，只要有机溶剂能够溶解该辅料，就没有限制，不过从可行浓度和少用有机溶剂的平衡角度出发，优选浓度为1-30％(w/v)。
也可以采用喷雾萃取法制备微球制剂，当采用喷雾萃取法制备3，3-二苯基丙胺衍生物微球时，可用有机溶剂把3，3-二苯基丙胺衍生物和可生物降解的药用高分子辅料充分溶解配制成有机溶液，在常温或高温或低温下将其喷雾至一有机非溶剂或水中，经萃取而制成微球，在必要的情况下，也可按照常规方法对微球进行水洗，分级等的处理，然后分装。
上述喷雾萃取法制备微球时，有机溶剂可以使用二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、二氧六环、乙醚、丙酮、四氢呋喃、冰醋酸以及由它们组成的混合溶剂，但不仅限于此。
上述喷雾萃取法制备微球时，有机非溶剂可使用甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、石油醚、烷烃、石腊油等以及由它们组成的混合非溶剂，但不仅限于此。
在配制有机溶液时，药用辅料在有机溶剂中的含量，只要有机溶剂溶解该辅料，就没有限制，不过从可行浓度和节约有机溶剂的平衡角度出发，优选浓度为1-30％(w/v)。
制备微球溶剂挥发法和喷雾干燥法相比，从操作简便性等来说，优选喷雾干燥法。从控制微球的粒径大小以及降低初始释放的角度来说，优选溶剂挥发法。
本发明所述的3，3-二苯基丙胺衍生物的微球制备后，经过粒径分级或者如果粒径足够均匀的话也可以不分级，清洗、干燥后按照规定剂量分装，可以制成粉针剂注射剂，使用时就地配成注射剂。粉针剂可以是直接由上述微球制成，使用前用注射用生理盐水均匀混悬，制成注射液。也可以在微球制剂中混配规定量的等渗用盐、甘露醇、葡萄糖等，使用前在其中加入规定量的注射用纯水，制成注射液。或者可以先按照注射用量将微球混悬后冻干，使用前再加水。
本发明所述的用于治疗与毒蕈碱受体有关的疾病和不稳定或过度性膀胱包括冲动失禁、尿急或尿频等症的用途是通过给予需要上述治疗的患者本发明的3，3-二苯基丙胺衍生物的注射液来实现的。给药方式包括但不限于肌肉注射、皮下注射、皮内注射、腹内注射等。从给药方便角度来说，优选肌肉注射给药及皮下注射给药。
本发明所述的3，3-二苯基丙胺衍生物的缓释微球剂的给药剂量，以(R)-N，N-二异丙基-3-(2-羟基-5-羟甲基苯基)-3-苯基丙胺为例，对于体重60kg的患者，每次注射量为10-120mg，每周或数周注射一次。具体可以根据患者的年龄、体重、疾病状况等实际情况加以适当变化。
采用本发明的3，3-二苯基丙胺衍生物的缓释微球制剂可以实现3，3-二苯基丙胺衍生物的缓释。虽不拘于已有理论，但可以认为本发明缓释微球的作用机理是当其注射入体内以后，随血液循环逐步扩散，体内循环过程中，因为可生物降解树脂如聚丙交酯-乙交酯不溶于水，但可以被机体逐步降解，随着其逐步降解，微球中所包含的药物被逐步释放出来，由此实现缓释和长效。
采用本发明的3，3-二苯基丙胺衍生物的缓释微球制剂，可以实现以往没有实现的3，3-二苯基丙胺衍生物的长效化，例如可以不少于一周的间隔、优选不少于15天、甚至可以长达1个月以上的间隔给药，因此有望极大地改善不稳定或过度性膀胱包括冲动失禁，尿急或尿频等症患者的生活质量，同时减少每日按时定量给药所需花费的人力物力。
图1是实施例1所得的缓释微球制剂在PH7.4的模拟释放液中每日或累积释放率折线图。
图2是实施例3所得的缓释制剂微球制剂在PH7.4的模拟释放液中每日或累积释放率的折线图。
图3是实施例4所得的缓释制剂微球制剂在PH7.4的模拟释放液中每日或累积释放率的折线图。
图4是实施例9所得的缓释制剂微球制剂在PH7.4的模拟释放液中每日或累积释放率的折线图。
图5是实施例11所得的缓释制剂微球制剂在PH7.4的模拟释放液中每日或累积释放率的折线图。
图6是实施例13所得的缓释微球制剂在PH7.4的模拟释放液中每日或累积释放率的折线图。
具体实施例方式
以下将通过实施例来进一步说明本发明所述的3，3-二苯基丙胺衍生物微球制剂的制备方法和缓释效果，但不对本发明构成任何限制。
实施例中微球的粒径采用本领域技术人员熟悉的L2000型全自动激光粒度仪(Beckman coulter公司)测定。浓度采用高效液相色谱法(HPLC)测定，方法按照文献方法，例如可以按照如现代应用药学杂志，1993，10(1)，51-52；中国医药工业杂志，1999，30(8)，363-365等所公开者。
实施例1将0.6g(R)-N，N-二异丙基-3-(2-羟基-5-羟甲基苯基)-3-苯基丙胺(化合物Ia)、9.4g聚丙交酯-乙交酯(丙交酯∶乙交酯＝50∶50，分子量25,000)溶于50ml二氯甲烷中，在剧烈搅拌(1200-1600rpm)下将其滴至2500ml 0.5％PVA水溶液中，滴完后继续剧烈搅拌3-10分钟，然后降低搅拌速度到300rpm，挥发溶剂4-6小时，过滤，用蒸馏水洗微球三次，冻干。粒径为1-200μm，含药3.8％，包埋率为63％。
将本缓释微球对家兔进行体内释放试验。剂量为10mg/kg，微球混悬于注射用生理盐水中，肌注给药，在1到20日内，取血，HPLC-MS检测，血药浓度为1-20ng/ml。证明本发明缓释微球在至少20日可以实现平稳释放。
实施例2称取(R)-N，N-二异丙基-3-(2-羟基-5-羟甲基苯基)-3-苯基丙胺(化合物Ia)0.5g，聚丙交酯-乙交酯(丙交酯∶乙交酯＝50∶50，分子量13000)9.5g，按实施例1的方法制备得含药4.7％粒径为1-200μm的微球，包埋率为94％。
实施例3称取(R)-N，N-二异丙基-3-(2-羟基-5-羟甲基苯基)-3-苯基丙胺(化合物Ia)1.0g，聚丙交酯-乙交酯(丙交酯∶乙交酯＝50∶50，分子量35000)9.0g，按实施例1的方法制备得含药6.5％，粒径为1-200μm的微球，包埋率为65％。
实施例4称取(R)-N，N-二异丙基-3-(2-羟基-5-羟甲基苯基)-3-苯基丙胺(化合物Ia)1.0g，聚丙交酯-乙交酯(丙交酯∶乙交酯＝75∶25，分子量为11000)9.0g，按实施例1的方法制备得含药7％，粒径为1-200μm的微球，包埋率为70％。
实施例5称取(R)-N，N-二异丙基-3-(2-羟基-5-羟甲基苯基)-3-苯基丙胺(化合物Ia)1.0g，聚丙交酯-乙交酯(丙交酯∶丙交酯＝50∶50，分子量为25000)9.0g，加二氯甲烷200ml，搅拌至充分溶解，采用常规喷雾干燥法制备得含药10％的微球，测得粒径为1-100μm，灭菌，分装。
实施例6称取(R)-N，N-二异丙基-3-(2-羟基-5-羟甲基苯基)-3-苯基丙胺(化合物Ia)1.0g，聚丙交酯-乙交酯(丙交酯∶乙交酯＝50∶50，分子量25000)9.0g，加二氯甲烷100ml，搅拌至充分溶解，采用常规喷雾法喷入2000ml石油醚中，萃取然后过滤，干燥制备得含药10％的微球，测得粒径为1-100μm，灭菌，分装。
实施例7将1.0g(R)-N，N-二异丙基-3-(2-羟基-5-羟甲基苯基)-3-苯基丙胺单异丁酸酯(化合物IV)、9.0g聚丙交酯-乙交酯(丙交酯∶乙交酯＝50∶50，分子量13,000)，按实施例1的方法制备得含药9.5％的微球。粒径为1-200μm，包埋率为95％。
实施例8将1.0g(R)-N，N-二异丙基-3-(2-羟基-5-羟甲基苯基)-3-苯基丙胺单异丁酸酯(化合物IV)、9.0g聚丙交酯-乙交酯(丙交酯∶乙交酯＝50∶50，分子量25,000)按实施例1的方法制备得含药7.1％的微球，粒径为1-200μm，包埋率为71％。
实施例9将1.0g(R)-N，N-二异丙基-3-(2-羟基-5-甲基苯基)-3-苯基丙胺(化合物II)、9.0g聚丙交酯-乙交酯(丙交酯∶乙交酯＝50∶50，分子量25,000)溶于50ml二氯甲烷中，在剧烈搅拌(1200-1600rpm)下将其滴至2500ml 0.5％PVA水溶液中，滴完后继续剧烈搅拌3-10分钟，然后降低搅拌速度到300rpm，挥发溶剂4-6小时，过滤，用蒸馏水洗微球三次，冻干。粒径为1-200μm，含药6.8％，包埋率为68％。
将本缓释微球对家兔进行体内释放试验。剂量为10mg/kg，微球混悬于注射用生理盐水中，肌注给药，在1到30日内，取血，HPLC-MS检测，血药浓度为0.5-10ng/ml。证明本发明缓释微球在至少30日可以实现平稳释放。
实施例10称取(R)-N，N-二异丙基-3-(2-羟基-5-甲基苯基)-3-苯基丙胺(化合物II)1.0g，聚丙交酯-乙交酯(丙交酯∶乙交酯＝50∶50，分子量13000)9.0g，按实施例1的方法制备得含药7.4％粒径为1-200μm的微球，包埋率为74％。
实施例11称取(R)-N，N-二异丙基-3-(2-羟基-5-甲基苯基)-3-苯基丙胺(化合物II)1.0g，聚丙交酯-乙交酯(丙交酯∶乙交酯＝50∶50，分子量35000)9.0g，按实施例1的方法制备得含药7.4％，粒径为1-200μm的微球，包埋率为74％。
实施例12称取(R)-N，N-二异丙基-3-(2-羟基-5-甲基苯基)-3-苯基丙胺(化合物II)1.5g，聚丙交酯-乙交酯(丙交酯∶乙交酯＝50∶50，分子量35000)4.25g，聚丙交酯-乙交酯(丙交酯∶乙交酯＝50∶50，分子量13000)4.25g，按实施例1的方法制备得含药10.8％，粒径为1-200μm的微球，包埋率为72％。
实施例13称取(R)-N，N-二异丙基-3-(2-羟基-5-甲基苯基)-3-苯基丙胺(化合物II)1.0g，聚丙交酯-乙交酯(丙交酯∶乙交酯＝75∶25，分子量为11000)9.0g，按实施例1的方法制备得含药9.0％，粒径为1-200μm的微球，包埋率为90％。
实施例14称取(R)-N，N-二异丙基-3-(2-羟基-5-甲基苯基)-3-苯基丙胺(化合物II)1.0g，聚丙交酯-乙交酯(丙交酯∶丙交酯＝50∶50，分子量为25000)9.0g，加二氯甲烷200ml，搅拌至充分溶解，采用常规喷雾干燥法制备得含药10％的微球，测得粒径为1-100μm，灭菌，分装。
实施例15称取(R)-N，N-二异丙基-3-(2-羟基-5-甲基苯基)-3-苯基丙胺(化合物II)1.0g，聚丙交酯-乙交酯(丙交酯∶乙交酯＝50∶50，分子量25000)9.0g，加二氯甲烷100ml，搅拌至充分溶解，采用常规喷雾法喷入2000ml石油醚中，萃取然后过滤，干燥制备得含药10％的微球，测得粒径为1-100μm，灭菌，分装。
实施例16(R)-N，N-二异丙基-3-(2-羟基-5-羟甲基苯基)-3-苯基丙胺微球或者(R)-N，N-二异丙基-3-(2-羟基-5-羟甲基苯基)-3-苯基丙胺单异丁酸酯微球制剂的体外释放试验采用实施例1-4，7，8的微球，通过模拟体内条件进行释放试验。
经研究发现，采用一定pH值(pH7.4)的缓冲溶液(磷酸钠缓冲溶液)，药物释放行为与体内类似，因此虽然其环境与人体内环境不完全相同，但是大致认为可以表现体内的释放模式。
实验仪器恒温振荡器、离心机。
实验条件温度37±0.5℃，转速30rpm。
实验方法精密称取实验样品约1mg，置于容积为5ml的具盖塑料离心管中，加5ml释放介质(pH＝7.4磷酸钠缓冲溶液)置于恒温振荡器中，保持一定的温度和转速，按时取样。
取样方法离心管在3600rpm条件下离心20min，精确吸取3ml溶液，同时向离心管中再补加3ml的释放介质，取出液用HPLC检测。
取样时间点(天)0、1、2、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29或者0、1、2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30。其中第0天是指给药当天的给药前的药物浓度。
试验结果归纳于表1。
表1
表1(续)
当天释放量是由当天的累积释放量计算得到的。具体来讲，推定在2次测定间隔中药物释放速度不变。以公式表示，当天释放量＝(以当天的累积释放量-前次测得的累积释放量)÷当次测定与前次测定相隔天数。
例如实施例1中，第0天的释放量是0，第1天的累积释放量为6.5，第1天的当天释放量＝(6.5-0)÷(1-0)＝6.5。第2天的累积释放量10.9。第2天的当天释放量＝(10.9-6.5)÷(2-1)＝4.4.第3天的累积释放量15.1第3天的当天释放量(15.2-10.9)÷(3-2)＝4.3依此类推。
实施例1、3、4的微球制剂在pH7.4条件下的体外释放效果图分别见附图1-3。
实施例17(R)-N，N-二异丙基-3-(2-羟基-5-甲基苯基)-3-苯基丙胺微球的体外释放试验。
采用实施例9-14的微球，通过模拟体内条件进行释放试验，所用的实验仪器、条件和方法见实施例16中所述。结果见表2。
表2
表2(续)
由上表可以看出，本发明的3，3-二苯基丙胺衍生物的缓释微球制剂可以在长达14天以上的时间内稳定释放药物。因此对于患有与毒蕈碱受体有关疾病和患有不稳定或过度性膀胱包括冲动失禁、尿急或尿频等症的患者来说，可以大大减少给药次数，同时有效控制了剂量，避免了副作用的出现。
实施例9、11、13的微球制剂在pH7.4的条件下体外释放效果图分别见附图4-6。
工业实用性本发明采用生物可降解高分子包埋3，3-二苯基丙胺衍生物，制成注射用微球制剂，注射一次可以维持14天或更长时间，对于患有与毒蕈碱受体有关疾病和不稳定或过度性膀胱包括冲动失禁、尿急或尿频等症的患者来说，无疑是一个福音。
权利要求
1.3，3-二苯基丙胺衍生物的注射用缓释微球制剂，其特征在于该缓释微球制剂由如下通式(I)3，3-二苯基丙胺衍生物、其光学对映异构体或外消旋体以及可生物降解的药用高分子辅料组成， 其中，R1表示氢原子，C1-C6烷酰基或C6-C10芳烷基；R2表示氢原子，C1-C6烷基，羟基或C1-C6羟烷基；R 3和R4表示氢原子或C1-C6烷基；R5表示氢原子，卤素，C1-C6烷基，C1-C6羟烷基，C1-C6烷氧基或含硫原子或含氮原子的基团。
2.权利要求1的缓释微球制剂，其中所述的3，3-二苯基丙胺衍生物选自(R)-N，N-二异丙基-3-(2-羟基-5-羟甲基苯基)-3-苯基丙胺；(R)-N，N-二异丙基-3-(2-羟基-5-甲基苯基)-3-苯基丙胺；(R)-N，N-二异丙基-3-(2-羟基-5-羟甲基苯基)-3-苯基丙胺单乙酸酯；(R)-N，N-二异丙基-3-(2-羟基-5-羟甲基苯基)-3-苯基丙胺单异丁酸酯；(R)-N，N-二异丙基-3-(2-羟基-5-甲基苯基)-3-苯基丙胺乙酸酯；或(R)-N，N-二异丙基-3-(2-羟基-5-甲基苯基)-3-苯基丙胺异丁酸酯；或其可药用盐。
3.按照权利要求1或2的缓释微球制剂，其中所述的药用高分子辅料选自聚丙交酯、乙交酯、聚乳酸、聚乙醇酸、聚-3-羟基丁酸酯、聚内酯、聚酸酐、聚羟基丁酸酯羟基戊酸共聚物、聚丙烯葡聚糖、聚乳酸-聚乙二醇、聚羟乙酸-聚乙二醇中的一种或两种或两种以上的混合物，其分子量2,000-1,000,000道尔顿之间。
4.按照权利要求3的缓释微球制剂，其中所述的药用高分子辅料选自聚丙交酯-乙交酯、聚乳酸、聚己内酯、聚羟基丁酸酯-羟基戊酸酯共聚物其中的一种或两种或两种以上的混合物。
5.据权利要求4的缓释微球制剂，其中药用高分子辅料为聚丙交酯-乙交酯。
6.按照权利要求5中的缓释微球制剂，其中所述聚丙交酯-乙交酯分子量在2000-100,000道尔顿之间。
7.按照权利要求5或6所述的缓释微球制剂，其中聚丙交酯-乙交酯中丙交酯和乙交酯聚合比例在95∶5-5∶95之间。
8.3，3-二苯基丙胺衍生物的缓释微球制剂的制备方法，所述方法包括(a)用有机溶剂把权利要求1或2所定义的3，3-二苯基丙胺衍生物和权利要求3-7中任一项所述的可生物降解的药用辅料溶解，将有机溶剂相注入到采用可药用水溶性高分子配制的连续水相中以形成微球，然后挥发掉有机溶剂，过滤得到缓释微球制剂；或(b)用有机溶剂溶解3，3-二苯基丙胺衍生物和可生物降解的高分子药用辅料，并采用喷雾干燥制得微球制剂；或(c)用有机溶剂溶解3，3-二苯基丙胺衍生物和可生物降解的高分子药用辅料，并采用喷雾法喷入另一种有机溶剂，经萃取制得微球制剂。
9.权利要求8的制备方法，其中所述(a)中的有机溶剂选自二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、乙醚或它们的混合溶剂，可降解药用辅料在有机溶剂中的含量1-30％(w/v)，药用水溶性高分子选自聚乙烯醇、羧甲基纤维素钠、聚乙烯基吡咯烷酮、聚甲基丙烯酸钠、聚丙烯酸钠，在水相中的含量为0.1-5(w/v)；所述的(b)中的有机溶剂选自二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、二氧六环、乙醚、丙酮、四氢呋喃、冰醋酸；所述的(c)中的有机溶剂选自二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、二氧六环、丙酮、四氢呋喃、冰醋酸、酯酸、苯、甲苯等，另一种有机溶剂选自甲醇、乙醇、异丙醇、丙醇、石油醚、烷烃、石腊油等。
10.权利要求1或2中所述的3，3-二苯基丙胺衍生物的缓释微球制剂用于制备治疗与毒蕈碱受体有关的疾病和不稳定或过度性膀胱包括冲动失禁、尿急或尿频等症的药物的用途。
全文摘要
本发明涉及3，3－二苯基丙胺衍生物的注射用缓释微球制剂，其制备方法及其用途，所述缓释微球制剂由如右通式(I)所示的3，3－二苯基丙胺衍生物、其光学对映异构体或外消旋体以及可生物降解的药用高分子辅料组成，其中，R1，R2，R3，R4和R5的定义见权利要求书。本发明注射用缓释微球制剂可用于治疗与毒蕈碱受体有关的疾病和不稳定或过度性膀胱包括冲动失禁、尿急或尿频等症。
文档编号A61K9/16GK1795845SQ20041010172
公开日2006年7月5日 申请日期2004年12月23日 优先权日2004年12月23日
发明者李又欣 申请人:李又欣