专利名称：越桔果渣黄酮用于制备防治高脂血症的药物的方法
技术领域：
本发明涉及一种越桔果渣黄酮(FFV)用于制备提高HDL-C、降低TC水平和防治高脂血症的药物的方法，确切说，涉及一种用越桔果渣中提取的黄酮制备提高HDL-C、降低TC水平和防治高脂血症的药物的方法，属中药制备的技术领域。越桔果渣黄酮是指从越桔的果渣部分中提取的黄酮。
背景技术：
越桔为杜鹃花科(Ericacea)越桔属(vaccinum)植物，该属中植物全世界约有120多种，我国约有20余种，各省均有分布。不少种类在欧洲已被开发成重要的水果和药物。目前所谓的蓝莓(Blueberry，亦称蓝浆果)，就是从中选育的栽培品种的商品名。该属比较著名的有黑果越桔bilberry(Vaccinium myrtillus L.)、低丛越桔lowbushblueberry(Vaccinium angustifolium Ait.)、高丛越桔highbushblueberry(Vaccinium corymbosum)、sparkleberry(Vacciniumarboretum、大果越桔cranberry(Vaccinium macrocarpon Ait)、卵叶越桔(Vaccinium ovatum Pursh.)、deerberry(Vacciniumstamineum)、rabbiteye blueberry(Vaccinium ashei Reade)、圆筒穗越桔(V.cylindeum L.)等。我国东北地区的长白山和大兴安岭地区有4种，越桔lingonberry(Vaccinium vitis-idaea L.)、笃斯越桔(V.uliginosum L.)、大果蔓越桔(V.oxycoccus L.)和小果蔓越桔[V.microcarpon(Turcz)HOOK.]，见王璇琳，范玉玲，王喜军，等。“越桔的资源、品质及药用研究概况”[J]。中国林副特产，1999，342-44。
不同物种所表现的生物学功能亦因种而异，如欧洲野生种越桔花色素(Vaccinium myrillis anthocyanosides，VMA)已发现有增强免疫等多种药理活性。在欧美市售“越桔生(Myrtocyan)”为黑果越桔的高纯度提取物制剂，其主要成分为花色素甙类化合物，含量为36％，的高纯度提取物制剂，其主要成分为花色素甙类化合物，含量为36％，见柳云溪。“黑果越桔研究进展”[J]。国外医药·植物药分册，199813(1)13-17，该制剂广泛用于治疗糖尿病的血管和代谢并发症见Savickiene N，Dagilyte A，Lukosius A，“Importance of biologicallyactive components and plants in the prevention of complicationsof diabetes mellitus”[J].Medicina(Kaunas)，2002，38(10)970-975，黑果越桔叶浸提物是民间治疗糖尿病的传统用药，在高脂血症模型中，也观察到了降脂作用，并呈剂量依赖性。但在基因型高脂血症Yoshida鼠中，没有降脂作用，见Cignarella，Andrea；Nastasi，Milena；Cavalli，Elena；et al.“Novellipid-lowering properties of Vaccinium myrtillus L.leaves，atraditional antidiabetic treatment，in several models of ratdyslipidaemiaa comparison with ciprofibrate”[J].ThrombosisResearch，1996，84(5)311-322。
英国学者对四种越桔属植物乌饭树紫黑浆果、欧洲越桔、酸果蔓果实、越桔果实中的抗致癌成分进行筛选。结果提示欧洲越桔己烷/氯仿组分、乌饭树紫黑浆果、酸果蔓果实和越桔的原花色素组分具有抗癌活性，研究对craneberry的果实部分进行分离，发现多种化合物主要是槲皮素、杨梅素及其关3-O-葡萄糖甙，(-)-表儿茶素，(+)-儿茶素，和低聚原花青素，见Kandil FE，Smith MA，Rogers RB“Composition of a chemopreventive proanthocyanidin-richfraction from cranberry fruits responsible for the inhibitionof 12-O-tetradecanoyl phorbol-13-acetate(TPA)-inducedornithine decarboxylase(ODC)activity”[J].J.Agric.Food Chem.，2002，50(5)1063-1069。
有关越桔(Vaccinium vitis-idaea L.)黄酮的主要生物学功能已报道的有抗菌抗病毒作用可以抗多种细菌，对白喉杆菌的抗菌作用最强，并且可以减少感染流感病毒的小鼠的死亡率和延长存活时间，见姚振江，李容，应长青等。“越桔总黄酮的抗菌抗病毒作用初探”中国药学报，1992，545-46。
镇咳、祛痰、平喘作用其有效成分为金丝桃甙和槲皮素，见徐威。“越桔总黄酮镇咳、平喘作用的实验研究呼吸系统疾病研究进展”。青岛海洋大学出版社，1992126；吴兴壮，李利峰，李晓东等。“越桔果实资源的开发利用现状及前景预测”。辽宁农业科学，2003(6)23～24；抗氧化活性从越桔cranberry果汁中分离出七种黄酮杨梅素3-α-L阿拉伯呋喃糖甙、槲皮素3-木糖、3-甲氧基槲皮素3-β-半乳糖、杨梅素-3-β-半乳糖、槲皮素-3-β-半乳糖、槲皮素3-α-阿拉伯呋喃糖甙和槲皮素3-α-鼠李吡喃糖甙，有较强的清除自由基和抑制LDL的活性，经研究blueberries与cranberries的果汁有较强的清除超氧自由基、过氧化氢、羟自由基、纯氧的活性，见Yan X，Murphy BT，Hammond GB，et al“Antioxidant activities andantitumor screening of extracts from cranberry fruit(Vacciniummacrocarpon)”J.Agric.Food Chem.，2002，50(21)5844-5849和Wang SY，Jiao H.“Scavenging capacity of berry crops on superoxideradicals，hydrogen peroxide，hydroxyl radicals，and singletoxygen”[J].J.Agric.Food Chem.，2000，48(11)5677-84。
本发明人的前期研究发现从越桔果渣中提取的黄酮主要含有杨梅素和槲皮素，并有良好的抗氧化活性，见潘一峰“越桔黄酮及其生物学活性的研究”华东师范大学2005届研究生硕士学位论文。
发明内容
越桔黄酮的生物学功能已有多方面的报道，而有关越桔果渣黄酮(Flavonoids from fruit residues of Vaccinium vitis-idaea.FFV)，即从越桔果渣部分中提取的黄酮用于制备提高HDL-C降低TC水平和防治高脂血症的药物的方法，至今未见任何报道。
本发明要解决的技术问题是提出一种越桔果渣黄酮用于制备提高HDL-C、降低TC水平和防治高脂血症的药物的方法。
本发明解决上述技术问题的技术方案是以越桔果渣黄酮为活性物质，配以微晶纤维素(MCC)、羟丙基纤维素钠(HPC)、羧甲基淀粉钠(CMS-Na)、硬脂酸镁中的全部或部分，混匀，制得药用原料，再将药用原料加工成片剂或充入胶囊，制得提高HDL-C、降低TC水平和防治高脂血症的药物。
现详细说明本发明的技术方案。
一种越桔果渣黄酮用于制备提高HDL-C、降低TC水平和防治高脂血症的药物的方法，其特征在于， 以越桔果渣黄酮为活性物质，制备药物的剂型为片剂，具体操作步骤第一步配料按所需制备片剂片数和每片含越桔果渣黄酮1份重量，微晶纤维素0.15～0.25份重量，羟丙基纤维素0.02～0.1份重量，羧甲基淀粉钠0.01～0.06份重量，硬脂酸镁0.001～0.01份重量的配比配料，1份重量为0.2～0.5g；第二步制备将越桔果渣黄酮过筛，与微晶纤维素和羟丙基纤维素钠混匀，干燥后，与羧甲基淀粉钠和硬脂酸镁混匀，制得药用原料，药用原料压片，制得所需片数的药片。
一种越桔果渣黄酮用于制备提高HDL-C、降低TC水平和防治高脂血症的药物的方法，其特征在于，以越桔果渣黄酮为活性物质，制备药物的剂型为胶囊，具体操作步骤第一步配料按所需制备药物胶囊个数和每个药物胶囊含越桔果渣黄酮1份重量，微晶纤维素0.03～0.1份重量的配比配料，1份重量为0.2～0.5g；第二步制备将越桔果渣黄酮和微晶纤维素混匀，过筛，干燥后，制得药用原料，药用原料填充入胶囊中，制得所需个数的药物胶囊。
本发明的优点是方法简单，生产设备要求低，生产成本低廉，易于实施。
具体实施例方式
所有实施例按上述的制备方法的操作步骤操作。
实施例1第一步，所需制备片剂的片数为1000片，每片含越桔果渣黄酮0.3g，微晶纤维素0.045g，羟丙基纤维素0.006g，羧甲基淀粉钠0.003g，硬脂酸镁0.0003g；第二步，按常规制片剂方法将越桔果渣黄酮过80目筛，与微晶纤维素和羟丙基纤维素钠混匀，干燥后，再与羧甲基淀粉钠和硬脂酸镁混匀，压片，制得每片含越桔果渣黄酮0.3g的药片1000片。
实施例2第一步，所需制备片剂的片数为1000片，每片含越桔果渣黄酮0.3g，微晶纤维素0.06g，羟丙基纤维素0.015g，羧甲基淀粉钠0.009g，硬脂酸镁0.0015g；第二步，按常规制片剂方法将越桔果渣黄酮过80目筛，与微晶纤维素和羟丙基纤维素钠混匀，干燥后，再与羧甲基淀粉钠和硬脂酸镁混匀，压片，制得每片含越桔果渣黄酮0.3g的药片1000片。
实施例3第一步，所需制备片剂的片数为1000片，每片含越桔果渣黄酮0.3g，微晶纤维素0.075g，羟丙基纤维素0.03g，羧甲基淀粉钠0.018g，硬脂酸镁0.003g；第二步，按常规制片剂方法将越桔果渣黄酮过80目筛，与微晶纤维素和羟丙基纤维素钠混匀，干燥后，再与羧甲基淀粉钠和硬脂酸镁混匀，压片，制得每片含越桔果渣黄酮0.3g的药片1000片。
实施例4第一步，所需制备药物硬胶囊个数为1000粒，每粒胶囊含越桔果渣黄酮0.5g，微晶纤维素0.015g；第二步，按常规方法将第一步所述物料混匀，过80目筛，干燥后制得药用原料，药用原料填充入胶囊中，制得每个胶囊含越桔果渣黄酮0.5g的药物胶囊1000个。
实施例5第一步，所需制备药物硬胶囊个数为1000粒，每粒胶囊含越桔果渣黄酮0.5g，微晶纤维素0.025g；第二步，按常规方法将上述物料混匀，过80目筛，干燥后制得药用原料，药用原料填充入胶囊中，制得每个胶囊含越桔果渣黄酮0.5g的药物胶囊1000个。
实施例6第一步，所需制备药物硬胶囊个数为1000粒，每粒胶囊含越桔果渣黄酮0.5g，微晶纤维素0.05g；第二步，按常规方法将上述物料混匀，过80目筛，干燥后制得药用原料，药用原料填充入胶囊中，制得每个胶囊含越桔果渣黄酮0.5g的药物胶囊1000个。
现说明本发明的方法制备的药物的使用方法和提高HDL-C、降低TC水平和防治高脂血症的效果。
本发明的方法制备的药物的使用方法根据动物试验结果折算，患者每天服用该药物一次，每次服用的剂量按患者自身体重计，介于每kg体重0.005～0.025g，连续服用21-35d。
本发明的方法制备的药物提高HDL-C、降低TC水平和防治高脂血症的药物的效果，以动物试验说明如下1、FFV对高脂血症防治作用的有效剂量评估试验分组将雄性昆明小鼠，体重22g左右，随机分为正常对照组；高脂对照组；高脂给药(非诺贝特片)对照组；FFV低剂量组(50mg/kg)和FFV高剂量组(150mg/kg)，每组12只。
预防试验和模型诱导上述各组动物先以普通饲料喂养，同时正常对照组和高脂对照组每日灌喂蒸馏水，FFV低剂量组(50mg/kg)和FFV高剂量组(150mg/kg)，和高脂给药(非诺贝特片)对照组每日灌喂相应剂量药物。一周后，除正常对照组外，其它各组动物都改以高脂饲料(基础饲料82.5％，胆固醇2％，胆酸0.5％，炼猪油15％)喂养，诱导高脂血症。
检测试验中在第10天、20天，测定动物体重及血清TC水平，第35天时处死动物取血样，其后按试剂盒说明书要求检测血液生化指标；其中血清HDL-C含量的测定用沉淀剂选择性地将血清中的低密度脂蛋白和极低密度脂蛋白沉淀，上清液中只含有高密度脂蛋白。用酶法测定上清液中胆固醇量，即可代表HDL-C的含量。计算公式如下HDL-C含量(mmol/L)＝测定管OD值÷标准管OD值×1.29血清LDL-C水平根据Fridedwald公式计算血清低密度脂蛋白胆固醇(mmol/L)＝总胆固醇-高密度脂蛋白胆固醇-甘油三酯÷2.2数据分析用Execl进行数据处理，用标准差X±S表示，组间进行“t”检验。
结果(1)FFV对小鼠血清TC的影响表1中数据显示，FFV高、低剂量在第10、20、35天时均能有效的控制TC的升高幅度，高剂量抑制率分别为28.93％、22.38％、21.76％，低剂量的抑制率分别为23.10％、14.48％、16.63％；与高脂对照相比具有明显的降脂效应，差异显著，其中高剂量的效果更加明显。高剂量与对照药相比药效差异不大，低剂量则稍弱于对照药。
表1 FFV对血清胆固醇的作用影响
*)p＜0.05**)p＜0.01，与对照相比
(2)FFV对小鼠血清HDL-C的影响从表2中可见，与高脂对照相比，FFV使小鼠血清HDL-C显著提高，而使LDL-C显著降低，高剂量与对照药相比药效相当，无显著性差异，低剂量的趋势与前相同。
表2 FFV对血清HDL-C、LDL-C的作用影响
*)p＜0.05**)p＜0.01，与对照相比2、FFV对高脂血症治疗作用的有效剂量评估模型诱导和试验分组将雄性昆明小鼠，体重20g左右，除正常组外其余以高脂饲料(基础饲料82.5％，胆固醇2％，胆酸0.5％，炼猪油15％)诱导高脂血症，14天后，检测血清TC水平。试验将血清TC水平与正常组相比有极显著差异的成型动物(p＜0.01)，随机分组，每组13只，分为正常对照组；高脂对照组；非诺贝特治疗组(100mg/kg)；低剂量组(50mg/kg)；高剂量组(150mg/kg)。高脂对照组进行单纯饮食治疗，饲喂普通饲料，口服蒸馏水；其余各组均进行饮食和药物共同治疗，除饲喂普通饲料外，每日口服相应剂量的药物或FFV。
检测每隔7天禁食8h，尾静脉取血检测血清TC水平，给药21天，眶后采血处死动物，按试剂盒说明书要求检测HDL-C。
结果(1)FFV对小鼠血清TC的影响从表3中可看出高脂对照胆固醇水平在三周内逐渐恢复，对照药在三周内使高脂小鼠更快地恢复并在21天时接近于正常。而FFV高剂量组与对照药相似，有相同的作用，与高脂对照相比恢复速度更快，在第7、14、21时，分别快29.20％、20.52％、17.77％。低剂量组在第一周时对高脂小鼠表现出较好的作用，而后两周作用不明显。
表3 FFV对血清胆固醇的作用影响
*)p＜0.05**)p＜0.01与对照相比
(2)FFV对小鼠血清HDL-C的作用影响表4 FFV对小鼠血清HDL-C作用影响
*)p＜0.05**)p＜0.01，与对照相比表4可看出，FFV与对照药都使高脂小鼠的HDL-C水平提高，并且对照药使HDL-C的水平回复到了了正常的水平。
结论FFV用于防治高脂血症，在一定剂量范围内可有效地提高血清HDL-C的水平，降低血清TC的含量，对改善高脂血症的血液生化指标有一定的作用。
权利要求
1.一种越桔果渣黄酮用于制备提高HDL-C、降低TC水平和防治高脂血症的药物的方法，其特征在于，以越桔果渣黄酮为活性物质，制备药物的剂型为片剂，具体操作步骤第一步配料按所需制备片剂片数和每片含越桔果渣黄酮1份重量，微晶纤维素0.15～0.25份重量，羟丙基纤维素0.02～0.1份重量，羧甲基淀粉钠0.01～0.06份重量，硬脂酸镁0.001～0.01份重量的配比配料，1份重量为0.2～0.5g；第二步制备将越桔果渣黄酮过筛，与微晶纤维素和羟丙基纤维素钠混匀，干燥后，与羧甲基淀粉钠和硬脂酸镁混匀，制得药用原料，药用原料压片，制得所需片数的药片。
2.根据权利要求1所述的越桔果渣黄酮用于制备提高HDL-C、降低TC水平和防治高脂血症的药物的方法，其特征在于，第一步，所需制备片剂的片数为1000片，每片含越桔果渣黄酮0.3g，微晶纤维素0.045g，羟丙基纤维素0.006g，羧甲基淀粉钠0.003g，硬脂酸镁0.0003g；第二步，按常规制片剂方法将越桔果渣黄酮过80目筛，与微晶纤维素和羟丙基纤维素钠混匀，干燥后，再与羧甲基淀粉钠和硬脂酸镁混匀，压片，制得每片含越桔果渣黄酮0.3g的药片1000片。
3.根据权利要求1所述的越桔果渣黄酮用于制备提高HDL-C、降低TC水平和防治高脂血症的药物的方法，其特征在于，第一步，所需制备片剂的片数为1000片，每片含越桔果渣黄酮0.3g，微晶纤维素0.06g，羟丙基纤维素0.015g，羧甲基淀粉钠0.009g，硬脂酸镁0.0015g；第二步，按常规制片剂方法将越桔果渣黄酮过80目筛，与微晶纤维素和羟丙基纤维素钠混匀，干燥后，再与羧甲基淀粉钠和硬脂酸镁混匀，压片，制得每片含越桔果渣黄酮0.3g的药片1000片。
4.根据权利要求1所述的越桔果渣黄酮用于制备提高HDL-C、降低TC水平和防治高脂血症的药物的方法，其特征在于，第一步，所需制备片剂的片数为1000片，每片含越桔果渣黄酮0.3g，微晶纤维素0.075g，羟丙基纤维素0.03g，羧甲基淀粉钠0.018g，硬脂酸镁0.003g；第二步，按常规制片剂方法将越桔果渣黄酮过80目筛，与微晶纤维素和羟丙基纤维素钠混匀，干燥后，再与羧甲基淀粉钠和硬脂酸镁混匀，压片，制得每片含越桔果渣黄酮0.3g的药片1000片。
5.一种越桔果渣黄酮用于制备提高HDL-C、降低TC水平和防治高脂血症的药物的方法。其特征在于，以越桔果渣黄酮为活性物质，制备药物的剂型为胶囊，具体操作步骤第一步配料按所需制备药物胶囊个数和每个药物胶囊含越桔果渣黄酮1份重量，微晶纤维素0.03～0.1份重量的配比配料，1份重量为0.2～0.5g；第二步制备将越桔果渣黄酮和微晶纤维素混匀，过筛，干燥后，制得药用原料，药用原料填充入胶囊中，制得所需个数的药物胶囊。
6.根据权利要求5所述的越桔果渣黄酮用于制备提高HDL-C、降低TC水平和防治高脂血症的药物的方法，其特征在于，第一步，所需制备药物硬胶囊个数为1000粒，每粒胶囊含越桔果渣黄酮0.5g，微晶纤维素0.015g；第二步，按常规方法将第一步所述物料混匀，过80目筛，干燥后制得药用原料，药用原料填充入胶囊中，制得每个胶囊含越桔果渣黄酮0.5g的药物胶囊1000个。
7.根据权利要求5所述的越桔果渣黄酮用于制备提高HDL-C、降低TC水平和防治高脂血症的药物的方法，其特征在于，第一步，所需制备药物硬胶囊个数为1000粒，每粒胶囊含越桔果渣黄酮0.5g，微晶纤维素0.025g；第二步，按常规方法将上述物料混匀，过80目筛，干燥后制得药用原料，药用原料填充入胶囊中，制得每个胶囊含越桔果渣黄酮0.5g的药物胶囊1000个。
8.根据权利要求5所述的越桔果渣黄酮用于制备提高HDL-C、降低TC水平和防治高脂血症的药物的方法，其特征在于，第一步，所需制备药物硬胶囊个数为1000粒，每粒胶囊含越桔果渣黄酮0.5g，微晶纤维素0.05g；第二步，按常规方法将上述物料混匀，过80目筛，干燥后制得药用原料，药用原料填充入胶囊中，制得每个胶囊含越桔果渣黄酮0.5g的药物胶囊1000个。
全文摘要
一种越桔果渣黄酮(FFV)用于制备提高HDL－C、降低TC水平和防治高脂血症的药物的方法，属中药制备的技术领域。以越桔果渣黄酮为活性物质，配以微晶纤维素(MCC)、羟丙基纤维素钠(HPC)、羧甲基淀粉钠(CMS－Na)、硬脂酸镁中的全部或部分，混匀，制得药用原料，再将药用原料加工成片剂或充入胶囊，制得提高HDL－C、降低TC水平和防治高脂血症的药物。本发明的优点是方法简单，生产设备要求低，生产成本低廉，易于实施。本发明的方法制备的药物适于用来防治高脂血症。
文档编号A61K36/185GK1726907SQ20051002714
公开日2006年2月1日 申请日期2005年6月24日 优先权日2005年6月24日
发明者瞿伟菁, 潘一峰, 张雯, 庄秀园, 杨煌健 申请人:华东师范大学