专利名称：黄连中的单体成分药根碱在制备促胃动力药物中的应用的制作方法
技术领域：
本发明属于中药技术领域。具体涉及中药黄连中的单体成分药根碱在制备促胃动力药物中的应用。
背景技术：
胃平滑肌收缩功能的下降和膜去极化能力减弱，在临床上表现为胃排空不足，能导致胃肠运动性疾病的发生，这些疾病饮用胃食道反流病、功能性消化不良、胃轻瘫、假性肠梗阻、肠胃激综合征及慢性便秘等。虽然，这些疾病是功能性或器质性的原因，但应用促胃肠动力药恢复工增强已减弱的胃肠运动功能是这类疾病治疗的主要措施。因此，促胃肠动力药的研究已成为当今世界医学研究的重要课题之一。
最近，本发明人对黄连影响豚鼠胃平滑肌环行肌自发节律的实验中，发现黄连总生物碱在小剂量时，能增加环行肌自发节律的振幅；在大剂量时，能够降低环行肌自发节律的振幅，说明上述反应是黄连中不同的药效物质在起作用。又进一步观察了黄连中3种单体成分小檗碱、巴马丁碱和药根碱(Jatrorrhizine)对环行肌自发节律的作用，发现小檗碱和巴马丁能够剂量依赖性地抑制环行肌自发节律的振幅；而药根碱能够剂量依赖性地增加环行肌自发节律的振幅，说明药根碱具有促胃动力的作用。
目前，有关药根碱的药效作用和机制的研究，报道甚少，主要的作用为抗菌、抗氧化和抗自由基损伤，抗突变等。迄今为止，有关药根碱促进胃肠动力作用的研究未见报道。药根碱的结构式如下
发明内容
本发明所要解决的技术问题在于通过研究黄连中的单体成分，设计药根碱的促胃动力作用研究。
为解决上述问题，本发明人设计了具体的实验方案材料与方法1)豚鼠胃平滑肌分离方法豚鼠体重300-400g，雄性，经头部击昏后，打开腹腔，取出胃体部或胃窦部，置入Krebs液(mMNaCl 118，NaHCO3 25，KCl 4.7，KH2PO4 1.2，CaCl2 2.5，MgSO2 1.2，葡萄糖11，pH＝7.35-7.45)中，用精细镊子将粘膜层仔细分离干净，完整地保留肌层，沿环行肌方向剪成约2×8mm的肌条，固定在含有10ml的充灌5％CO2+95％O2混合气体、温度维持在37℃的Krebs液的浴槽中。
2)胃平滑肌张力测定胃平滑肌肌条的底端固定在垂直浴槽内两片铂金板的中间，上端连接MLT 0202/D型张力换能器(ADInstrument)，换能器的输出通过PowerLab/4SP生物信号处理系统处理和通过Chart v 3.4.6(PowerLab)软件记录、储存和分析。浴槽中内两片铂金板连接SEN-3301型电子刺激器(Nihon Kohden，Japan)。肌条的起始张力调节到0.5g，平衡时间不少于60分钟，每15分钟，换液1次，防止代谢产物的累积。平衡到自发节律不再变化时，开始平滑肌张力测定的实验。
结果1.黄连单体成分药根碱对豚鼠胃平滑肌自发节律振幅的影响当豚鼠胃平滑肌标本在浴槽内稳定60分钟后，开始实验。向浴槽内加入0.3、1、3、10、30、100、300μM不同浓度的黄连单体成分，观察自发节律的变化。见图1、2、3。
表1.黄连中不同生物碱引起环行肌50％收缩振幅增加所需浓度(EC50)或抑制所需浓度(IC50)(Mean±SD)受试药物 n EC50(μM)IC50(μM)药根碱 4 44.7±0.9 -巴马丁 4 - -小檗碱 4 - 64.3±13.8结果表明黄连中3种单体成分药根碱、巴马丁、小檗碱对环行肌自发节律的作用是不同的，小檗碱能够剂量依赖性地抑制环行肌自发节律的振幅。与此相反，药根碱能够剂量依赖性地增强环行肌自发节律的振幅。巴马丁未表现出明显的增强或抑制作用。从表1的EC50和IC50值来看，药根碱引起环行肌50％收缩振幅增加所需浓度为44.7±0.9μM，小檗碱引起环行肌50％收缩振幅减弱所需浓度为64.3±13.8μM，在巴马丁，未能测出其EC50和IC50值。当药根碱浓度为300μM时，胃环行肌自发节律的振幅提高约100％，说明药根碱具有很好的促胃动力的效应，是临床用于治疗胃食道反流病、功能性消化不良、胃轻瘫、假性肠梗阻、肠易激综合征及慢性便秘等疾病的候选药物之一。
2.黄连单体成分药根碱对碳酰胆碱引起的豚鼠胃平滑肌自发节律振幅的抑制作用当豚鼠胃平滑肌标本在浴槽内稳定60分钟后，开始实验。首先应用10μM碳酰胆碱造成胃平滑肌张力增强，当碳酰胆碱刺激的豚鼠胃平滑肌自发节律的振幅达到一个稳定的水平，向浴槽内加入0.3、1、3、10、30、100、300μM不同浓度的黄连单体成分，观察它们对豚鼠胃平滑肌自发节律振幅的抑制作用(图4)。
表2.黄连中不同生物碱对由1μM碳酰胆碱引起的豚鼠胃环行肌自发节律增强后，抑制环行肌50％收缩振幅所需浓度(IC50)变化(Mean±SD)受试药物n IC50(μM)药根碱 5 43.7±10.8巴马丁 5 18.0±9.8小檗碱 5 33.4±0.9结果表明黄连中3种单体成分小檗碱、巴马丁和药根碱对环行肌自发节律振幅的抑制作用的强度是不同的，表2列出了这些药物在通过1μM碳酰胆碱所造成的豚鼠胃平滑肌环行肌自发节律增强稳定后，引起50％收缩振幅降低所需浓度(IC50)。以上结果证明黄连中不同的主要单体成分均能抑制由碳酰胆碱造成胃平滑肌张力增强的作用。为什么在生理条件下药根碱能够增强环行肌自发节律振幅，而在胆碱能受体激活的情况下，能够抑制环行肌自发节律的振幅，说明药根碱属于部分激动剂。
结论在离体器官水平的研究证明药根碱具有促胃动力的作用。由此可进一步研究设计药根碱用于制备促胃动力的药物组合物。
用于治疗胃食道反流病、功能性消化不良、胃轻瘫、假性肠梗阻、肠易激综合征及慢性便秘等疾病。在临床上有广阔的应用前景。
图1100μM浓度的药根碱对豚鼠胃平滑肌自发节律振幅的影响。
箭头(↓)表示加入100μM浓度的药根碱。
图2300μM浓度的药根碱对豚鼠胃平滑肌自发节律振幅的影响。
箭头(↓)分别表示加入0.3、1.0、3.0、10、30、100、300μM浓度的药根碱。
图3黄连中不同生物碱对环行肌自发节律影响的量一效曲线。
黄连中不同生物碱药根碱[(●)、小檗碱(▲)和巴马丁(■)]对环行肌自发节律影响的量-效曲线。
图4药根碱、小檗碱和巴马丁对由碳酰胆碱引起的豚鼠胃平滑肌环行肌自发节律增强的抑制作用。药根碱(▲)、小檗碱(●)和巴马丁(■)对由碳酰胆碱引起的豚鼠胃平滑肌环行肌自发节律增强的抑制作用。
权利要求
1.一种黄连中单体成分药根碱在制备促胃动力药物中的应用。
全文摘要
本发明公开了黄连中的单体成分药根碱在制备促胃动力药物中的应用。本发明通过药根碱对豚鼠胃平滑肌的作用，证实具有很好的促胃动力的效应，能用于制备促胃动力药物。在临床上用于治疗胃食道反流病功能性消化不良等，有较好的应用前景。
文档编号A61P1/14GK1732932SQ200510029129
公开日2006年2月15日 申请日期2005年8月26日 优先权日2005年8月26日
发明者吴大正, 周吉燕, 胡之璧 申请人:上海中医药大学