专利名称：一种注射用灰树花β－葡聚糖冻干粉的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种利用灰树花菌丝体提取分离出的β-葡聚糖制成的冻干粉注射剂及其制备方法和在免疫调节、抗辐射和肿瘤辅助治疗中的用途。
背景技术：
灰树花(Grifola frondosa)是担子菌亚门，层菌纲，无隔担子菌亚纲，非褶菌目，多孔菌属中的大型真菌，又名贝叶多孔菌(Polyporus frondosus)、栗子蘑、千佛菌、重菇等，日本称之为舞茸(maitake)，为名贵药食两用真菌。主要分布在亚热带至温带森林中，外观灰白色，其子实体中富含氨基酸、多糖以及微量元素等在内的多种营养成份。1984年Ohno等在“Antitumor activity and structuralcharacterization of Glucans extracted from cultured fruit bodies of Grifola rondosa.Chemical and Pharmaceutical Bulletin，1984，32(3)1142-1151”中首次报道了灰树花多糖具有抗肿瘤活性以来，各国对灰树花多糖的化学结构及保健功能的研究已逐步展开，其对人体生理功能良好的调节作用也逐渐被人们认识。传统的生产方法为固体栽培，利用液体发酵方法可以大规模获得灰树花菌丝体。研究表明，灰树花菌丝体中含有多种不同结构的多糖，如α构型的多糖和β构型的多糖。其中β-葡聚糖具有广泛的药理活性，其免疫调节活性、抑制肿瘤活性和抗辐射活性尤其突出。此外还具有抗人免疫缺陷病毒(HIV)以及各种肝炎病毒，降低血糖，改善睡眠和调节血脂代谢等活性。
灰树花多糖的制剂多为口服剂型，且以胶囊剂为主，目前，以灰树花及灰树花多糖为原料的保健品已风靡日本和美国，已上市的产品主要有日本的MAITEX系列产品、美国的GRIFRON、MAITAKE系列产品及我国的保力生胶囊、栗蘑胶囊等。
以上产品所用主要原料多是从固体栽培的子实体中提取的粗多糖，该类产品存在生物降解严重，生物利用度低，口服效果差的缺点。而利用灰树花菌丝体可生产高纯度β-葡聚糖，利用纯化的灰树花β-葡聚糖生产注射用β-葡聚糖冻干粉针制剂尚未见报导。
发明内容
本发明的目的是提供一种注射用灰树花β-葡聚糖冻干粉制剂以及制备方法和应用。由于灰树花β-葡聚糖冻干粉制剂能够有效保持β-葡聚糖的特有结构和药理活性，体内吸收快，并能克服现有技术所制备产品存在生物降解严重，生物利用度低，口服效果差的缺点。
本发明涉及一种注射用灰树花β-葡聚糖冻干粉制剂，其主要原料为灰树花β-葡聚糖。
本发明涉及一种注射用灰树花β-葡聚糖冻干粉制剂，其特征是糖链中同时含有β-1，6-葡聚糖和β-1，3-葡聚糖结构，且以β-1，6-葡聚糖为主链，β-1，3-葡聚糖为支链。其分子量为10,000～1,000,000道尔顿。
本发明涉及一种注射用灰树花β-葡聚糖冻干粉制剂的制备方法，其特征是以灰树花β-葡聚糖为主要原料，加入赋形剂，经浓配、稀配、过滤、除菌、分装，在-40℃～30℃的范围内，连续冷冻干燥28～38小时，轧盖、封装制成。
本发明涉及一种注射用灰树花β-葡聚糖冻干粉制剂用作免疫调节剂、抗辐射剂和肿瘤辅助治疗剂上的用途。
本发明的制剂产品有效成分结构独特，制剂剂型新颖，具有免疫调节、抗辐射和抑制肿瘤活性。该制剂产品制备工艺简单，容易操作，所用的原料来源丰富。制剂有效成分的结构和药理活性保持良好，生物利用度高。
具体实施例方式取灰树花β-葡聚糖原料2g，加入1000ml注射用水，充分溶涨3小时，再加入甘露醇200g，加热搅拌使充分溶解，加注射用水至2000ml，搅拌均匀，按药液体积的0.1％加入针用活性炭，搅拌吸附30分钟，过滤脱炭。检验合格后，用0.22μm的滤膜精滤除菌，按2ml/支的量分装到1000支5ml的西林瓶中。在-40℃的温度下冷冻4小时，在-40℃～-5℃的温度范围内冷冻干燥15小时，在-5℃～30℃的温度范围内冷冻干燥15小时。完成冻干后，轧盖，检验包装。该制剂产品含有效成分灰树花β-葡聚糖2mg/支。
本实施例中，β-葡聚糖溶涨所用的时间可以是0.5～4小时，甘露醇用量可以是100～200g，针用活性炭用量可以是药液体积的0.1％～1％，注射用水总量为400～2000ml，冷冻干燥的时间为28～38小时。
用本发明的制剂按现有方法进行了免疫调节、抗辐射和抑制肿瘤活性试验，结果如表1、表2和表3所示。
从表1、表2和表3的试验实验结果可以看出，本发明的制剂产品能明显提高荷瘤小鼠的胸腺指数和脾指数，具有细胞免疫和体液免疫的功能，可提高辐射后肌体的白细胞数、存活时间和存活率，对实体瘤S180的抑瘤率可达65％，具有明显的提高免疫、抗辐射和抑制肿瘤活性。
表1 注射用灰树花β-葡聚糖冻干粉的免疫调节作用
表2注射用灰树花β-葡聚糖冻干粉的抗辐射作用
ap＜0.01，bp＜0.05表3 注射用灰树花β-葡聚糖冻干粉对实体瘤S180的抑制作用
权利要求
1 一种注射用灰树花β-葡聚糖冻干粉制剂，其特征是以灰树花β-葡聚糖为主要成分制成。
2 根据权利要求1所述的注射用灰树花β-葡聚糖冻干粉制剂，其特征是糖链中同时含有β-1，6-葡聚糖和β-1，3-葡聚糖结构，且以β-1，6-葡聚糖为主链，β-1，3-葡聚糖为支链。其分子量为10,000～1,000,000道尔顿。
3 一种注射用灰树花β-葡聚糖冻干粉的制备方法，其特征是以灰树花β-葡聚糖为主要原料，加入赋形剂，经浓配、稀配、过滤、除菌、分装，在-40℃～30℃的范围内，连续冷冻干燥28～38小时，轧盖、封装制成。
4 根据权利要求3所述的制备方法，其特征是β-葡聚糖溶涨所用的时间为0.5～4小时，针用活性炭用量为药液体积的0.1％～1％，冷冻干燥的温度为-40℃～30℃，冷冻干燥时间为28～38小时。
5 一种注射用灰树花β-葡聚糖冻干粉制剂制剂的用途，其特征在于用作免疫调节剂、作抗辐射剂和肿瘤辅助治疗剂。
全文摘要
一种注射用灰树花β－葡聚糖冻干粉制剂，其主要原料为灰树花β－葡聚糖，其特征是糖链中同时含有β－1，6－葡聚糖和β－1，3－葡聚糖结构，且以β－1，6－葡聚糖为主链，β－1，3－葡聚糖为支链。分子量为10,000～1,000,000道尔顿。一种注射用灰树花β－葡聚糖冻干粉的制备方法，其特征是以灰树花β－葡聚糖为主要原料，加入赋形剂，经浓配、稀配、过滤、除菌、分装，在－40℃～30℃的范围内，连续冷冻干燥28～38小时，轧盖、封装制成。该制剂能有效保持β－葡聚糖的特有结构和药理活性，可以作为免疫调节剂、抗辐射剂、肿瘤辅助治疗剂。
文档编号A61K31/715GK1709277SQ20051008064
公开日2005年12月21日 申请日期2005年7月6日 优先权日2005年7月6日
发明者徐泽平, 李春林, 苏亚平 申请人:山东京博控股发展有限公司