滇白珠在治疗梅尼埃病及各型眩晕病上的应用及制法的制作方法

专利名称：：滇白珠在治疗梅尼埃病及各型眩晕病上的应用及制法的制作方法
技术领域：
：本发明涉及中药滇白珠在治疗梅尼埃病、梅尼埃综合症及各型眩晕病上的应用及其制备方法，属于药品的
技术领域：
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背景技术：
：眩晕病及眩晕痰瘀交阻证的梅尼埃病、梅尼埃综合症属常见病、多发病；诱发眩晕的疾病涉及临床各科，而对该病的治疗至今国内尚无理想的药物，“眩晕停”片为国内常用的抗眩晕药，对前庭神经系统有特异性抗眩晕作用，但临床效果不理想，复发率高，还可能产生严重副反应，故限制于住院患者或严密监视的门诊患者；我国传统中医用中药方剂“半夏白术天麻汤”、“苓桂术甘汤”、“柴胡加龙骨牡蛎”治疗眩晕，其方药较复杂，服药时间长，使用极为不便，且未见治愈率和远期追踪观察的报导。滇白珠，又名透骨香，为杜鹃花科植物滇白珠Gaultheriayunnanensis(Franch)Rchd的干燥根。在《贵州省中药材质量标准》、《中国民族药志》、《新编中草药大辞典》、《滇南本草》、《云南中草药》、《文本药用植物目录》、《云南药用植物目录》、《贵州草药》等书均有收载，科研资料证明滇白珠根含有挥发油，其含量为0.24％，鉴定挥发油中主要成分为水杨酸甲酯。主要分布于云南、贵州、四川、江西、福建、台湾、湖北、广东、西藏等省。该药材具有清热解毒、活血化瘀、消炎镇痛、祛风除湿等功能。主要用于治疗风湿性关节炎、跌打损伤、胃痛、慢性支气管炎、急慢性前列腺炎、风寒感冒、哮喘、皮肤湿疹、水肿等症；但未见用于治疗由眩晕痰瘀交阻证的梅尼埃病、梅尼埃综合症及各型眩晕病的报道。
发明内容本发明的目的在于提供中药滇白珠的新的用途，即在制药中的新应用。实际中，本发明涉及中药滇白珠在制备治疗眩晕痰瘀交阻证的梅尼埃病、梅尼埃综合症的药上的应用。中药滇白珠在制备治疗各型眩晕病药的药上的应用。本发明也涉及如何制备这些治疗眩晕痰瘀交阻证的梅尼埃病、梅尼埃综合症及各型眩晕病的药物制剂。本发明是这样的中药滇白珠在制备治疗用于眩晕痰瘀交阻证的梅尼埃病、梅尼埃综合症的药上的应用；中药滇白珠在制备治疗各型眩晕病药的药上的应用。中药滇白珠在制备治疗用于眩晕痰瘀交阻证的梅尼埃病、梅尼埃综合症及各型眩晕病的药的制备方法将滇白珠采用现有技术提取有效成分加上适当的辅料后制备成口服制剂或注射制剂，如糖浆剂、软胶囊剂、注射液、滴丸剂、粉针剂、口服液等以及所有药剂学上允许的制剂。具体的说取滇白珠30～100g，分别加入3～7倍量原药材的30～70％浓度的乙醇回流提取2～5次，每次1～3小时，合并提取液，回收乙醇，即得滇白珠的有效成分，将得到的滇白珠的有效成分加入辅料、制备成所需的药物制剂。取滇白珠30～100g，洗净、切成1cm长的小段，分别加入4倍量原药材的30～70％浓度的乙醇，在70～90℃回流提取3次，第一次1.5小时，第二次2小时，第三次1.5小时，合并3次提取液，回收乙醇至20℃时测相对密度为1.04～1.08，过滤，取滤液，加入蔗糖30～65g煮沸溶解，过滤，冷却至室温，取滤液，加入0.05g的防腐剂尼泊金乙酯和0.5ml的桔子香精，搅拌均匀，用纯化水调至100ml，灌装，即制成糖浆剂。取滇白珠30～100g，洗净、切成1cm长的小段，分别加入4倍量的30～70％浓度的乙醇，在70～90℃回流提取3次，第一次1小时，第二次2小时，第三次1.5小时，合并3次提取液，回收乙醇至20℃时测相对密度为1.04～1.08的清膏，浓缩，干燥后压丸，即制成软胶囊制剂。取滇白珠30～100g，洗净、切成1cm长的小段，分别加入4倍量的30～70％浓度的乙醇，在70～90℃回流提取3次，第一次1小时，第二次1.5小时，第三次2小时，合并3次提取液，回收乙醇至20℃时测相对密度为1.04～1.08，过滤，滤液，加2g活性炭，100℃加热5分钟，滤过，用氢氧化钠试液调节PH值至7，过滤至澄清。灌封，100℃灭菌45分钟，即制成注射剂。取滇白珠30～100g，洗净、切成1cm长的小段，分别加入4倍量的30～70％浓度的乙醇，在70～90℃回流提取3次，第一次2小时，第二次1.5小时，第三次2小时，合并3次提取液，回收乙醇至50～60℃时测相对密度为1.20～1.30，过滤，浓缩、干燥、粉碎，加入PEG6000和硬脂酸等混合基质，制丸，即制成滴丸剂。取滇白珠30～100g，洗净、切成1cm长的小段，分别加入4倍量的30～70％浓度的乙醇，在70～90℃回流提取3次，每次1.5小时，合并3次提取液，回收乙醇至50～60℃时测相对密度为1.3～1.35，过滤，取滤液，无菌过滤，真空冷冻干燥、粉碎、分装，密封即制成粉针剂。取滇白珠30～100g，洗净、切成1cm长的小段，分别加入4倍量的30～70％浓度的乙醇，在70～90℃回流提取3次，每次1小时，合并3次提取液，回收乙醇至20℃时测相对密度为1.04～1.08的清膏，过滤，加入溶剂和适量蜂蜜及山梨酸，用纯化水稀释至100ml，即制成口服液制剂。将滇白珠还可以用其它方法进行有效成分的提取并制备成更多的剂型供患者选用。眩晕既是中医病名，也是本病的主要症状，眩即眼花，晕是头晕，二者常同时并见。其轻者闭目可止，重者如坐车船，旋转不定，不能站立，或伴有恶心、呕吐、汗出，面色苍白等症状。中医学认为，其发病多由于风、火、痰、虚、瘀引起清窍失养所致。痰不仅可阻滞清阳不升，亦可导致血瘀，以致痰瘀互结，气血不畅，而眩晕亦重。在眩晕的发病过程中，各种病因病机，可以相互影响，相互转化，形成虚实夹杂。一般急者多偏实，缓者多偏虚，实证多见于眩晕发作期，虚证多见于眩晕发作的缓解期。眩晕的治疗原则，主要是虚补实泻。实证以痰火为多，痰湿中阻者宜除湿化痰；肝火偏盛者则当清肝泻火；肝阳上亢，化炎生风者应熄风潜阳。虚证以精气虚居多，精虚者填精生髓，滋补肾阴；气血虚者宜益气养血，调补脾肾。即实证眩晕以清火化痰、熄风潜阳法以治其标为主；虚证眩晕当补养气血、益肾、养肝、健脾等法以其本为主。根据《滇南本草》、《贵州草药》等记载，滇白珠，性温(平)，味甘辛，微苦，功能祛除风湿、活血通络。针对眩晕病实证发病的病因病机为痰湿中阻、瘀血阻滞，治疗应除湿化瘀的原则，本发明将滇白珠应用在制备治疗眩晕病及用于眩晕痰瘀交阻证引发的梅尼埃病、梅尼埃综合症的制剂上，症见头晕、胸闷、腹胀、舌暗苔腻，脉弦腻等，以奏祛湿化痰，活血化瘀，泄热定眩之功。以滇白珠提取物制备成的药物制剂经临床使用证明，对用于眩晕痰瘀交阻证的梅尼埃病、梅尼埃综合症、颈性眩晕、前庭神经元炎、局限性迷路炎等眩晕症具有独特的疗效，有效率达91.6％，其中治愈率占58.3％，显效率占33.3％，安全、无毒。本发明的药效学试验鉴于眩晕的病因复杂，眩晕的发作与全身很多系统和器官的功能异常有关，通常分为周围性及中枢性眩晕两大类。周围性者在内耳或前庭神经，包括梅尼埃病、迷路炎、前庭神经元炎、药物性眩晕(氨基糖甙类等)、良性阵发性位置性眩晕等。中枢性者病变在脑干、小脑或大脑颞叶中枢、例如椎枛基底动脉供血不足，小脑脑干的血管疾患(栓塞或出血)或肿瘤疾患等均可出现眩晕症状和平衡障碍。因此，本试验在卫生部尚无眩晕症主要药效学研究指南的情况，参考全国高等医学院校中、西医《耳、鼻、喉科学》统编教材，结合现代医学论述的导致眩晕的主要常见病及临床用药情况。在主要药效学试验研究中观察了滇白珠对中枢镇静、解痉、抗眼震、对椎枛基底动脉血流量、脑微循环障碍、抗炎、免疫、止吐等方面的影响。其结果如下实验材料1、受试药物与试剂本发明滇白珠流浸膏，由本申请人提供；戴芬逸多(眩晕停)，湖北湘江制药厂，注射用氢化可的松，黑龙江佳木斯医学院制药厂，批号830409；维脑路通，张家口市制药厂，批号870905；肾上腺素注射液，西南制药三厂，批号860603；磷酸组织胺，中国药品生物制品检定所，批号850303；氯化乙酰胆碱，上海新亚药厂，批号850520；冻干皮内注射卡介苗，兰州生物制品研究所，批号870103；印度墨汁北京化工厂，批号670414；EVANS兰，上海生化制药厂，批号780806；硫酸铜(化学试剂)。2、动物昆明种小鼠，20±2g；Wistar大鼠190±30g；豚鼠200±50g；家鸽300±50g；日本大耳兔、犬(市售)10±0.5kg(以上动物雌雄兼用，试验时，按体重性别随机分组)。由贵州省药品检验所动物房提供。3、仪器rm-6000型四导生理记录仪(日本产)UV-72型分光光度计，北京分析仪器厂；JL-光电计数仪，天津医疗器械修配厂。文中计量资料，组间比较与给药前后比较，统计学处理用t检验。实验方法与结果1、镇静作用眩晕发作期常施以镇静药物如安定、利眠宁等，以控制症状。本试验拟证明本发明的滇白洙糖浆剂有否中枢镇静作用。1.1对小鼠自主活动的影响动物分组。ig给药，每天一次，连续4天。阳性对照组于第4天ig安定一次(7.5mg/kg)。各组动物于末次给药后1h，用光电记数仪分别记录10和30min内小鼠活动情况，结果，滇白珠流浸膏可明显减少小鼠的自主活动。见表1。表1滇白珠流浸膏对小鼠自主活动的影响与空白组比较，*P＜0.05**P＜0.01***P＜0.001(下列各表均同)。1.2对小鼠戊巴比妥纳睡眠时间的影响除安定剂量为5mg/kg外，其余分组与给药均同1.1项，于末次给药后1h，ig戊巴比纳40mg/kg，以翻正反射消失为指标，观察记录小鼠入睡时间和睡眠时间。结果，滇白珠流浸膏大剂量组能延长小鼠戊巴比妥钠的睡眠时间，显示与戊巴比妥钠有协同作用。见表2。表2滇白珠流浸对戊巴比妥钠所致小鼠睡眠时间的影响X±SD(min)以上试验证明，滇白珠流浸膏具有中枢镇静作用。2、抗眼震颤作用眩晕常伴有眼震，尤以前庭周围性疾病引起的眩晕伴有的眼震与其程度相称。本试验目的为证明滇白洙糖浆剂有否抗眩晕的作用。豚鼠分组，ig给药，每天一次。连续6天，于末次给药后1h，于豚鼠右外耳道滴注0.02ml氯仿诱发迷路积水性眩晕眼震，以滴注氯仿至出现眼震的时间为眼震潜伏时间，出现眼震停止时间为眼震持续时间，分别观察记录各组动物的眼震潜伏时间和持续时间。结果，滇白珠流浸膏和阳性对照戴芬逸多均能缩短眼震的持续时间，对眼震潜伏时间均没有影响。显示滇白珠流浸膏有抗眩晕的作用。见表3、表4。表3滇白珠流浸膏对氯仿诱发豚鼠眼颤潜伏时间的影响表4滇白珠流浸膏对氯仿诱发豚鼠眼震持续时间的影响注与空白比较，*P＜0.01，**P＜0.001，与戴芬逸多组比较△P＞0.05。3、解痉作用动脉痉挛性缺血(如内耳血管痉挛椎动脉痉孪性缺血)，可引起眩晕，本试验观察滇白洙糖浆对动脉平滑肌有否解痉作用。取兔耳主动脉条，按常规离体平滑肌实验方法，在通氯的克氏液中，待动脉条缩平稳后，以肾上腺素(3.1×10-6M/L)引起血管痉挛性收缩，收缩达高峰后，换液冲洗2次，使恢复到基线，以此作为对照。然后分别给以不同剂量的滇白珠流浸膏，并与离体血管接触30min后，再加入同剂量的肾上腺素，记录收缩曲线，测量振幅，并与对照比较，计算张力抑制率。结果，滇白珠流浸膏对肾上腺素性血管痉挛，具有解痉作用。见表5。表5滇白珠流浸膏对抗肾上腺素血管痉挛的作用4、对犬椎枛基底动脉血流量的影响椎枛基底动脉供血不足引起眩晕较为常见，本试验观察滇白珠流浸膏有否增加椎动脉血流量的作用。取犬分组，ip戊巴比妥麻醉，剥离颈动脉与椎动脉，分别连接TP-200T压力换能器及MPV-1200电磁流量计，用四导生理记录仪分别测取颈动脉平均血压(KAP)及椎动脉血流量(VAP)，并同时描记心律与心电。十二指肠给药，服后每10min测量记录一次，连续观察2h，以其平均值与给药前正常值比较，同时用磷酸组织胺作对照，分别计算增加的百分率。结果，给N.S后，上述各项指标与正常比较均无明显改变。而分别给滇白珠流浸膏和磷酸组织胺，均使椎动脉血流量增加，对颈动脉平均血压、心律、心电图均无明显影响，表明滇白珠流浸膏有增加椎动脉血流量的作用。5、对脑微循环障碍的影响脑微循环障碍可导致眩晕，大鼠分组，ip戊巴比妥麻醉，暴露大脑半球的额项部给5mm×5mm，在冷光源45o角照射下，用XTB-01型显微镜放大40倍，观察软脑膜微循环，分离一侧颈动脉并注入10％葡聚糖(3ml/kg)，以形成软脑膜微循环障碍，20min后，ip等物，分别于药前药后20min在相同视野下观察毛细管网交叉点数、血流速度(分5级)、血液流态(分5级)变化。结果，滇白珠流浸膏大剂量对脑内血液循环障碍有一定改善作用，可使血流速度加快，但作用较为缓和对毛细血管网交叉点数及血液流态未见明显影响。见表6、表7、表8、表9。表6滇白珠流浸膏对麻醉犬椎动脉血流量、颈动脉平均血压的影响X±D表7滇白珠提取液对毛细血管网交叉点数的影响表8滇白珠提取液对血流速度的影响表9滇白珠提取液对血液流态的影响6、抗炎消肿作用内耳炎症如迷路炎、神经元炎等常导致眩晕，为此观察滇白珠流浸膏的抗炎消肿作用。6.1对二甲苯所致小鼠耳壳肿胀的影响动物分组ig给药，每天一次，连续5天，阳性对照组于试验前一次ip氢化考的松(25mg/kg)，各组动物于末次给药后30min，于每鼠右耳壳上滴注0.5ml二甲苯致炎，以左耳为对照组，15min后用直径8mm打孔器切取耳片，称重以左右耳重量之差为肿胀值，并计算抑制率。结果，滇白珠流浸膏能抑制二甲苯致小鼠耳壳肿胀，具有抗炎消肿作用，见表10。表10滇白珠流浸膏对二甲苯所致小鼠耳壳肿胀的影响6.2对大鼠角叉菜胶性足肿胀的影响动物分组，ip给药，每天一次，连续8天，阳性对照组ip氢化考的松(12.5mg/kg)，每天一次，连续3天，各组动物于末次给药后1h足跖部皮下注入1％角叉菜胶0.1ml致炎，然后分别测定致炎后1/2、2、3、4、5、6h的左右足跖容积(毫米水柱)，以给药前后之差值为炎症肿胀指标，分别计算各组肿胀度平均值并与空白组对应时间的肿胀值比较。结果滇白珠流浸膏和氢化考的松均有抑制角叉菜胶足肿胀的作用。作用持续时间在6h以上。见表11。表11滇白珠流浸膏对大鼠角叉菜胶性足胀的影响6.3对大鼠佐剂性关节炎的影响动物分组，ip给药，每天一次，连续24天，阳性对照组间日ip氢化考的松(12.5mg/kg)，每天2次Freunds，各组动物的第一次给药后的第三天，于每鼠右足前后跖部皮内注射Freund’s完全佐剂(内含卡介苗3.6mg/ml)0.05ml致炎，测量致炎后18h、14h、17d、19d、21d足肿胀值，以观察佐剂性关节炎原发性病变，致炎后第14天，各组动物均有不同程序继发性病灶出现，其空白组发病率达100％，根据耳、尾、前足、左后足肿胀的发生，评定级数，凡具备4种病灶，同时出现者评4级，具备3种者评3级，以此类推。同时测量左右足跖肿胀值，与致炎前测量值比较，计算左右足跖肿胀值，记录继发病变发生率和致炎第21天体重情况。从而判定佐剂性关节炎继发性病变程度，结果，滇白珠流浸膏能抑制Freund’s完全佐剂性关节炎的原发性和继发性病变。见表12、表13、表14、表15。表12滇白珠流浸膏对大鼠佐剂性关节炎(致炎对侧后足肿胀)的影响表13滇白珠流浸膏对大鼠佐剂性关节炎(致炎侧足肿胀)的影响表14滇白珠流浸膏对佐剂性关节炎(其他部位炎症)的影响表15滇白珠流浸膏对大鼠佐剂性关节炎(继发病变发生率)的影响与氢化考的松组比较△△P＜0.01。6.4对组织胺致大鼠毛细血管通透性的影响动物分组，ig给药(阳性对照组ig氢化考的松12.5mg/kg)每天一次连续8天，末次给药后30min，于鼠腹中线侧ic组织胺(0.05mg/0.05ml)，并立即iV1％EVans蓝(1ml/kg)，30min后，剖取腹部皮肤，测量皮肤内侧的蓝色染色区域直径(以横纵二半径的平均值r计算)按r2计算着色面积；剪下着色皮斑切碎，提取。提取液用比色法，测定其吸收度(OD)，作为染色程度，并计算抑制率。结果，滇白珠流浸膏有抑制组织胺所致大鼠毛细管通透性增加的作用。见表16。表16滇白珠流浸膏对组织胺所致大鼠毛细血管通透性的影响以上4个实验证明，本发明滇白珠流浸膏，有明显抗炎作用。7.对免疫功能影响中医认为眩晕之病因，以内伤为主。然各家说法不一，陈修园在《医学从众录》里结合各家之见指出“本病的病根属虚，病象如实，本症以肾脾之虚居多”。而肾、肝虚患者免疫功能常低下，故进行本项试验。7.1对小鼠单核巨噬细胞吞噬功能的影响动物分组，ig给药，每天一次，连续6天。以1∶1黄芪党参水煎液为阳性对照，于末次给药后1h，按炭廊清率测定方法，测定计算廊清指数。结果，滇白珠流浸膏可使吞噬指数升高，有增强机体特异性免疫功能的作用。见表17。表17滇白珠流浸膏对小鼠单核巨噬细胞吞噬功能的影响7.2对小鼠外周血中T细胞的影响动物分组，ig给药，每天一次，连续5天，于末次给药后1h，鼠尾取血涂片，按T淋巴细胞酯酶活性检测法，孵育、染色、镜检，每张血片均查200个淋巴细胞，计算T和B细胞的百分率。结果，滇白珠流浸膏能提高小鼠外周血T细胞百分比，有增强细胞免疫功能的作用，见表18。表18滇白珠流浸膏对正常小鼠外周血中T细胞的影响7.3对小鼠同种被动皮肤过敏反应(PCA)的影响动物分组，ig给药(阳性对照im氢化考的松25mg/kg)，每天一次，连续5天，各组小鼠于末次给药的前二天，用天花粉为抗原制备的抗血清致敏，48h后iV含天花粉2.5mg/ml的1％EVans兰生理盐水0.2ml/只攻击，30min后处死动物，翻转皮肤用6.4项方法测定蓝斑直径，计算蓝斑面积，并前下蓝斑皮肤，进行比色测定。结果，滇白珠流浸膏能抑制天花粉引起的PCA反应，表示本品具有抗I型变态反应的作用。见表19。8.止吐试验取家鸽分组，ig给药，每天一次，连续4天，阳性对照组第四天时，ig氯丙嗪0.06g/kg一次。各组动物于末次给药后1h，ig硫酸铜0.2g/kg致吐，观察各组动物的呕吐潜伏期和持续时间，并记录呕吐次数。结果，滇白珠流浸膏对鸽硫酸铜性呕吐未见影响。见表20。表19滇白珠流浸膏对小鼠同种被动皮肤过敏反应的影响表20滇白珠流浸膏对鸽硫酸铜性呕吐的影响X±D小结从上述滇白珠流浸膏的主要药效学试验结果归纳有如下作用1、减少小鼠自主活动，延长小鼠戊巴比妥钠的睡眠时间，显示有中枢镇静作用；2、能缩短氯仿诱发豚鼠眼震颤的持续时间，显示有抗眩晕的作用；3、对肾上腺素所致的离体兔主动脉痉挛，显示有解痉作用；4、能使椎枛基底动脉血流量增加，显示有改善脑供血不足的作用；5、对葡聚糖所致的大鼠脑循环障碍，显示有改善作用；6、对二甲苯、角叉菜胶，福氏完全佐剂和组织胺所致大鼠毛细血管通透性增高，显示有明显的抗炎、消肿和抑制作用；7、能增强小鼠巨噬细胞吞噬活性，提高小鼠外周血中的T细胞百分比和抑制小鼠同种被动皮肤过敏反应，显示有增强机体免疫功能和抗I型变态反应的作用；8、对鸽硫酸铜性呕吐，无止吐作用。分析这些作用，可认为，以滇白珠提取物配制的本发明滇白珠糖浆，对由于内耳疾患(膜迷路积水、迷路前庭神经元炎等)椎枛基底动脉供血不足，脑内微循环障碍，植物神经功能紊乱等引起的眩晕症有治疗作用。滇白珠提取液对大鼠脑膜微循环障碍的影响滇白珠临床用于眩晕症，具有明显疗效，实验观察到滇白珠可明显减弱小鼠自主活动，与戊巴比妥钠有明显协同催眠作用，并可缩短氯仿诱发的豚鼠眼震颤持续时间，本实验进一步观察了滇白珠对大鼠脑膜微循环障碍的保护作用。材料与方法一、药物本发明滇白珠提取液2.0g生药/ml，由本申请人提供。葡聚糖(DextranT500)瑞士生产，批号17-0320-01维脑路通张家口市制药厂生产，批号870905。生理盐水石家庄市第四制药厂生产，89013005。戊巴比妥钠上海化学试剂分装厂生产，批号84-06-12。二、动物Westar种雄性大白鼠31只，体重250-300克。三、方法将动物随机分为五组，用0.6％戊巴比妥钠(0.75ml/100g)腹腔给药麻醉，打开颅骨，暴露大脑半球的额顶部约5mm×5mm，在冷光源45o角照射下，用XTB-01型显微镜放大40倍观察软脑膜微循环。分离一例股静脉并注入10％葡聚糖(3ml/kg)，以形成软脑膜微循环障碍。20分钟后腹腔注入实验药物，于药前及药后20分钟在相同视野观察下列指标1.毛细血管网义点计数观察固定区域内固定面积毛细血管与周边界的交叉点数目。2.血流速度共分5级。0级微血管可见，但无血液细胞通过；I级微血管内可见血细胞，有时出现血细胞聚集成团，数量较少，逐渐向前推进，时停时进；II级微血管内血细胞充满管腔，慢慢向前流动；III级血细胞充满管腔，流动呈线型，但腹下可分出流动中的血细胞；IV级微血管中血细胞分辨不出，流动速度极快。3.血液流态共分为5级。0级(-)，无血细胞聚集；I级(+)，2-3个血细胞聚集成微细的颗粒状，不影响血流速度；II级(++)，4-6个血细胞聚集成粗颗粒状；III级(+++)，血细胞聚集成团块状而影响血流速度；IV级(++++)，血流停止或形成微血栓。结果一、对毛细血管网义叉点计数的影响对照级及各给药组给药前后，毛细血管网交叉点数未见明显变化和差异。见表21。表21滇白珠提液对毛细血管网交叉点数的影响二、对血流速度的影响对照组给药前后血流速度未发生明显变化；维脑路通组血流速度有改善趋势，但与对照组差异不明显；滇白珠提取液大剂量组作用与维脑路通组相似，对血流速度亦有改善趋势，但与对照组没有显著性差异。表22滇白珠提取液对血流速度的影响三、对血流流态的影响对照组给药前后血细胞聚集程度没有明显改变；而维脑路通组药后血细胞聚集程度明显改善，与给药前比较具有显著性差异(P＜0.05)滇白珠提取液各剂量对血液流态均没有明显变化。表23滇白珠提取液对血液流态的影响<tablesid="table23"num="023"><tablewidth="594">分组剂量(g/kg)动物数血液流态(X±SD)给药前给药后对照组维脑路通组滇白珠大量组滇白珠中量组滇白珠小量组0.0210.05.01.0557772.42±1.102.95±0.212.29±0.492.30±0.402.29±0.492.67±0.702.00±0.92*2.29±0.492.20±0.442.43±0.53</table></tables>*与给药前比较，P＜0.05本实验利用葡聚糖形成大鼠脑微循环障碍模型，并观察了滇白珠提取液对大鼠脑微循环障碍的改善作用。实验中观察到，静脉给予葡聚糖后，循环血流速度减慢，血细胞发生聚集，个别动物在药后20分钟左右死亡。对照组给予生理盐水后，血流速度减慢，血液流态恶化；而维脑路通明显改善微循环状态，使血流速度加快，血液流态改善；滇白珠提取液大剂量作用与维脑路通相似，对脑内血液循环障碍亦有一定改善作用，可使血流速度加快，但作用较为缓和。工艺研究滇白珠为杜鹃花科植物滇白珠GanutterlaYunnanensis(Franch)Rehd的根，根据文献报道及成分预试，表明原生药中含有糖类、有机酸、黄酮、鞣质、香豆素、内酯类等成分，其中黄酮含量较大。为了确定最佳提取工艺，申请人用正交试验方法，以黄酮含量为判断标准，找出了影响提取效果的主要因素，得出了提取的最佳工艺。(一)实验方法1.制定因素水平表，选浸泡时间，乙醇浓度，回流时间(三次总和)为三项因素，每个因素取3个水平，见表24。表24影响滇白珠总黄酮含量的因素水平表2.列出工艺试验方案并进行试验，根据因素水平表，列出L9(33)正交试验表，见表25。表25滇白珠总黄酮含量正交试验方案设计表3.根据正交试验表进行试验，实验中，称取药材50g粉碎，按规定加入溶剂浸泡一段时间，再回流提取三次，合并提取液，深缩成100ml浓缩液。按照滇白珠药材质量标准(含量测定)项下方法用乙酸乙酯200ml萃取三次，合并萃取液，置水浴上蒸干后，残渣以甲醇适量溶解，移入50ml量瓶中，用少量甲醇洗涤后并入量瓶中，加甲醇至刻度。精密量取溶液5ml，置100ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，再精密吸取5ml置25ml量瓶中，加水1ml，加5％亚硝酸钠溶液1ml使混匀，放置6分钟，加氢氧化钠试液10ml，再加水至刻度，摇匀，放置15分钟，按照分光光度法(《中国药典》1995年版一部附录30页)，在500nm的波长处测定吸收度，并计算总黄酮量(以芦丁计)。(二)试验结果与分析以上试验的药材，都是同一产地、同一时间采挖药材，其处理，提取工艺，总黄酮含量测定方法都相同，试验结果见表26。表26试验结果从表26可知乙醇的浓度因素极差最大，是影响滇白珠总黄酮含量的主要因素，浸泡时间，回流提取时间对总黄酮含量影响较小，据该试验最优工艺应为A2B2C3。即提取深媒的浓度就为40％乙醇；但是用30％的乙醇浓度提取总黄酮平均含量为0.56％，而用40％及50％的乙醇浓度时，平均含量为0.87％、0.76％，含量提高不多，乙醇浓度却增加10％、20％。权衡生产成本，选择最优条件为A2B1C2。即提取溶剂采30％乙醇。用30％的乙醇提取制成的样品进行药效学试验，结果表明本品具有镇静、解痉、抗眼震，增加椎枛基底动脉血流量，改善脑循环障碍，抗炎消肿，增强机体免疫功能等作用。于是得出A2B1C2为最佳工艺。本工艺制成的样品经临床试验得以肯定。(三)确定30％乙醇的加入量和回流次数1.制定因素水平表，选30％乙醇的加入倍量，回流次数为二项因素，每个因素取3个水平，见表27。表272.列出工艺试验方案并进行试验，根据因素水平表，L9(34)正交试验表，实验中，称取药材50g粉碎，按规定量的30％乙醇加入浸泡24小时，再按规定的回流次数提取，合并提取液，浓缩成100ml浓缩液，其余步骤均同实验(一)，所得结果如表28所示。表283.试验结果分析从表28所得结果看出回流次数极差较大，根据实验结果最优工艺应为A2B3，即采用4倍量的30％乙醇，回流提取4次，但回流3次所提取总黄酮平均为0.89％，而回流次数为4次时，平均含量为0.95％，含量提高不多，但乙醇却提1.3倍，权衡生产成本及实际生产条件，实际选择条件为A2B2。即采用4倍量的30％乙醇回流提取3次。(四)三批产品中试1.中试生产本申请人进行了980502、980511、980604三个批次的产品中试，所得中试生产数据如表29所示。表29中试生产数据2.三批中试按滇白珠糖浆质量标准及中国药典95年版一部附录微生物限度检查项下进行检测，所得检测数如表30所示。表30三批中试产品质量检测表(五)结论根据实验结果，申请人制定了药材提取的最佳工艺药材浸泡24小时后，分别用4倍量30～70％的乙醇回流提取三次，第1次1.5小时，第2次2小时，第3次1.5小时。成品浓度《贵州省中药材质量标准》1998年版“用法与用量”项下为5～15g，一日剂量为15～45g。本专利申请的一次服用量相当于药材6～20g，一日剂量相当于药材18～60g。从以上的各项实验结果，可以看出与现有技术相比，本发明优点在于(1)对已知的药材滇白珠发掘了新的医疗用途，开拓了新的应用领域；(2)滇白珠能祛湿化痰、活血化淤。用于眩晕痰瘀交阻证引发的梅尼埃病、梅尼埃综合症，症见头晕、胸闷、腹胀、舌暗苔腻，脉弦滑等。治疗效果比较理想且没有毒副作用；(3)原料的来源广泛、价格便宜、制备工艺简单、可以制备成口服制剂、注射制剂等供医患双方选择；(4)治疗效果显著，中药滇白珠对各型眩晕均有明显疗效，其中对痰瘀交阻证的梅尼埃病的疗效尤为显著。具体实施例方式下面描述本发明的几个实施例，但本发明的内容完全不局限于此本发明的实施例1取滇白珠30g，洗净、切成1cm长的小段，分别加入4倍量原药材的70％浓度的乙醇，在90℃回流提取3次，第一次1.5小时，第二次2小时，第三次1.5小时，合并3次提取液，回收乙醇至20℃时测相对密度为1.04～1.08，过滤，取滤液，加入蔗糖30～65g煮沸溶解，过滤，冷却至室温，取滤液，加入0.05g的防腐剂尼泊金乙酯和0.5ml的桔子香精，搅拌均匀，用纯化水调至100ml，灌装，即制成糖浆剂。本发明的实施例2取滇白珠100g，洗净、切成1cm长的小段，分别加入4倍量的30％浓度的乙醇，在70℃回流提取3次，第一次1小时，第二次2小时，第三次1.5小时，合并3次提取液，回收乙醇至20℃时测相对密度为1.04～1.08的清膏，浓缩，干燥后压丸，即制成软胶囊制剂。本发明的实施例3取滇白珠60g，洗净、切成1cm长的小段，分别加入4倍量的60％浓度的乙醇，在80℃回流提取3次，第一次1小时，第二次1.5小时，第三次2小时，合并3次提取液，回收乙醇至20℃时测相对密度为1.04～1.08，过滤，滤液，加2g活性炭，100℃加热5分钟，滤过，用氢氧化钠试液调节PH值至7，过滤至澄清。灌封，100℃灭菌45分钟，即制成注射剂。本发明的实施例4取滇白珠30～100g，洗净、切成1cm长的小段，分别加入4倍量的30～70％浓度的乙醇，在70～90℃回流提取3次，第一次2小时，第二次1.5小时，第三次2小时，合并3次提取液，回收乙醇至50～60℃时测相对密度为1.20～1.30，过滤，浓缩、干燥、粉碎，加入PEG6000和硬脂酸等混合基质，制丸，即制成滴丸剂。本发明的实施例5取滇白珠30～100g，洗净、切成1cm长的小段，分别加入4倍量的30～70％浓度的乙醇，在70～90℃回流提取3次，每次1.5小时，合并3次提取液，回收乙醇至50～60℃时测相对密度为1.3～1.35，过滤，取滤液，无菌过滤，真空冷冻干燥、粉碎、分装，密封即制成粉针剂。本发明的实施例6取滇白珠30～100g，洗净、切成1cm长的小段，分别加入4倍量的30～70％浓度的乙醇，在70～90℃回流提取3次，每次1小时，合并3次提取液，回收乙醇至20℃时测相对密度为1.04～1.08的清膏，过滤，加入溶剂和适量蜂蜜及山梨酸，用纯化水稀释至100ml，即制成口服液制剂。口服制剂一次的服用量相当于药材6～20g，一日剂量相当于药材18～60g。权利要求1.中药滇白珠在制备治疗眩晕痰瘀交阻证的梅尼埃病、梅尼埃综合症的药中的应用。2.中药滇白珠在制备治疗各型眩晕病药的药中的应用。3.如权利要求1或2所述滇白珠在制备治疗眩晕痰瘀交阻证的梅尼埃病、梅尼埃综合症及各型眩晕病的药的制备方法，其特征在于将滇白珠采用现有技术提取有效成分加上适当的辅料后制备成糖浆剂、软胶囊剂、注射液、滴丸剂、粉针剂、口服液以及所有药剂学上允许的制剂。4.按照权利要求3所述滇白珠在制备治疗眩晕痰瘀交阻证的梅尼埃病、梅尼埃综合症及各型眩晕病的药的制备方法，其特征在于取滇白珠30～100g，分别加入3～7倍量原药材的30～70％浓度的乙醇回流提取2～5次，每次1～3小时，合并提取液，回收乙醇，即得滇白珠的有效成分，将得到的滇白珠的有效成分加入辅料、制备成糖浆剂、软胶囊剂、滴丸剂、口服液这些口服制剂或注射液、粉针剂类的注射制剂。5.按照权利要求3或4所述滇白珠在制备治疗眩晕痰瘀交阻证的梅尼埃病、梅尼埃综合症及各型眩晕病的药的制备方法，其特征在于取滇白珠30～100g，洗净、切成1cm长的小段，分别加入4倍量原药材的30～70％浓度的乙醇，在70～900C回流提取3次，第一次1.5小时，第二次2小时，第三次1.5小时，合并3次提取液，回收乙醇至200C时测相对密度为1.04～1.08，过滤，取滤液，加入蔗糖30～65g煮沸溶解，过滤，冷却至室温，取滤液，加入0.05g的防腐剂尼泊金乙酯和0.5ml的桔子香精，搅拌均匀，用纯化水调至100ml，灌装，即制成糖浆剂。6.按照权利要求3或4所述滇白珠在制备治疗眩晕痰瘀交阻证的梅尼埃病、梅尼埃综合症及各型眩晕病的药的制备方法，其特征在于取滇白珠30～100g，洗净、切成1cm长的小段，分别加入4倍量的30～70％浓度的乙醇，在70～900C回流提取3次，第一次1小时，第二次2小时，第三次1.5小时，合并3次提取液，回收乙醇至200C时测相对密度为1.04～1.08的清膏，浓缩，干燥后压丸，即制成软胶囊制剂。7.按照权利要求3或4所述滇白珠在制备治疗眩晕痰瘀交阻证的梅尼埃病、梅尼埃综合症及各型眩晕病的药的制备方法，其特征在于取滇白珠30～100g，洗净、切成1cm长的小段，分别加入4倍量的30～70％浓度的乙醇，在70～900C回流提取3次，第一次1小时，第二次1.5小时，第三次2小时，合并3次提取液，回收乙醇至200C时测相对密度为1.04～1.08，过滤，滤液，加2g活性炭，100℃加热5分钟，滤过，用氢氧化钠试液调节PH值至7，过滤至澄清，灌封，100℃灭菌45分钟，即制成注射剂。8.按照权利要求3或4所述滇白珠在制备治疗眩晕痰瘀交阻证的梅尼埃病、梅尼埃综合症及各型眩晕病的药的制备方法，其特征在于取滇白珠30～100g，洗净、切成1cm长的小段，分别加入4倍量的30～70％浓度的乙醇，在70～900C回流提取3次，第一次2小时，第二次1.5小时，第三次2小时，合并3次提取液，回收乙醇至50～600C时测相对密度为1.20～1.30，过滤，浓缩、干燥、粉碎，加入PEG6000和硬脂酸等混合基质，制丸，即制成滴丸剂。9.按照权利要求3或4所述滇白珠在制备治疗眩晕痰瘀交阻证的梅尼埃病、梅尼埃综合症及各型眩晕病的药的制备方法，其特征在于取滇白珠30～100g，洗净、切成1cm长的小段，分别加入4倍量的30～70％浓度的乙醇，在70～900C回流提取3次，每次1.5小时，合并3次提取液，回收乙醇至50～600C时测相对密度为1.3～1.35，过滤，取滤液，无菌过滤，真空冷冻干燥、粉碎、分装，密封即制成粉针剂。10.按照权利要求3或4所述滇白珠在制备治疗眩晕痰瘀交阻证的梅尼埃病、梅尼埃综合症及各型眩晕病的药的制备方法，其特征在于取滇白珠30～100g，洗净、切成1cm长的小段，分别加入4倍量的30～70％浓度的乙醇，在70～900C回流提取3次，每次1小时，合并3次提取液，回收乙醇至200C时测相对密度为1.04～1.08的清膏，过滤，加入溶剂和适量蜂蜜及山梨酸，用纯化水稀释至100ml，即制成口服液制剂。全文摘要本发明公开了滇白珠在制备治疗眩晕痰瘀交阻证的梅尼埃病、梅尼埃综合症及各型眩晕病的药上的应用及其制备方法，将中药滇白珠应用在制备治疗眩晕痰瘀交阻证的梅尼埃病、梅尼埃综合症及各型眩晕病的制剂上，采用糖浆剂、胶囊剂、口服液、注射液、滴丸剂、粉针剂等所有药剂学上允许的制剂给药，本发明的原料来源广泛、价格便宜、制备工艺简单且治疗效果显著、安全无毒，对各型眩晕病有明显的疗效，特别是对眩晕痰瘀交阻证的梅尼埃病、梅尼埃综合症的疗效尤为显著。文档编号A61P1/00GK1817353SQ20051020070公开日2006年8月16日申请日期2005年11月14日优先权日2004年11月17日发明者王晓春申请人:贵州同济堂制药有限公司