专利名称：癌症治疗方法
背景技术：
本发明涉及通过给药哺乳动物4-喹唑啉胺(喹唑啉胺s)及包含其的药物组合物来治疗癌症的方法。具体而言，该方法涉及通过给药N-{3-氯-4-[(3-氟苯甲基)氧]苯基}-6-[5-({[2-(甲烷磺酰基(methanesulphonyl))乙基]氨基}甲基)-2-呋喃基]-4-喹唑啉胺和其盐及溶剂化物来治疗由酪氨酸激酶EGFR和/或erbB2介导的癌症的方法。
在肿瘤领域，癌症治疗的有效化学疗法为持续治疗(continuinggoal)。通常，癌症由控制细胞分裂、分化和凋亡细胞死亡的正常过程反常引起。细胞凋亡(编程性细胞死亡)在胚胎发育和多种疾病例如退化性神经元疾病(degenerative neuronal diseases)、心血管疾病和癌症的发病中起重要作用。最通常研究的一个通路，其涉及细胞凋亡的激酶调节，为细胞表面的生长因子受体向核的细胞信号传递(Crews和Erikson，Cell，74215-17，1993)。一个特别值得注意的通路为来自erbB家族生长因子受体的细胞信号传递。
erbB家族中存在明显的相互作用，其调节这些受体介导的细胞作用。结合EGFR的六个重要的配体包括EGF、转化生长因子、双向调节因子、肝素结合EGF、β细胞调节素(betacellulin)和epiregulin(Alroy&Yarden，FEBS Letters，41083-86，1997；Burden&Yarden，Neuron，18847-855，1997；Klapper等人，ProcNatiAcadSci，4994-5000，1999)。Heregulins，另一类型的配体，直接结合HER3和/或HER4(Holmes等人，Science，2561205，1992；Klapper等人，1997，Oncogene，142099-2109；Peles等人，Cell，69205，1992)。特定配体的结合包括erbB家族成员内的同源二聚化(homodimerization)或异二聚化(heterodimerization)(Carraway&Cantley，Cell，785-8，1994；Lemmon&Schlessinger，TrendsBiochemSci，19459-463，1994)。与其它的ErbB受体成员相比，还没有证实可溶性配体能结合HER2，其似乎是在异二聚化后转激活的(transactivated)。erbB-2受体与EGFR、HER3或HER4受体的异二聚化指同源二聚化(Klapper等人，1999；Klapper等人，1997)。受体二聚化导致ATP结合至受体的催化位点、受体的酪氨酸激酶的激活、C-末端酪氨酸残基的自磷酸化。然后，磷酸化的酪氨酸残基起蛋白质例如Grb2、Shc和磷脂酶C的停泊位点的作用，依次激活下游的信号通路，包括Ras/MEK/Erk和P13K/Akt通路，其调节转录因子和参与生物反应的其它蛋白，所述生物反应例如增殖、细胞运动性、血管生成、细胞存活和分化(Alroy&Yarden，1997；Burgering&Coffer，Nature，376599-602，1995；Chan等人，AnnRevBiochem，68965-1014，1999；Lewis等人，AdvCanRes，7449-139，1998；Liu等人，Genes and Dev，13786-791，1999；Muthuswamy等人，Mol&CellBio，19，106845-6857，1999；Riese&Stern，Bioessays，2041-48，1998)。
已研究包括单克隆抗体(Mab)、免疫交联物、抗-EGF疫苗和酪氨酸激酶抑制剂的某些策略来靶向erbB家族受体，和阻断它们在癌症细胞中的激活(回顾(Sridhar等人，Lancet，4，7397-406，2003))。因为包含异二聚体的erbB2最稳定，因此，用于发送信号、同时阻断erbB2和EGFR的优选启动事件为最感兴趣的治疗策略。已经合成了在癌症的临床前治疗中有功效的一系列6-呋喃喹唑啉双重erbB-2/EGFR TK抑制剂(Cockerill等人，BiorgMedChemLett，111401-1405，2001；Rusnak等人，CanRes，617196-7203，2001a；Rusnak等人，MolCanTher，185-94，2001b)。GW572016为6-呋喃喹唑啉，口服活性，可逆的EGFR和erbB2蛋白酶的双重激酶抑制剂(Rusnak等人，2001b)。在人类异种移植物的研究中，GW572016已显示有剂量依赖性抑制作用，并选择性抑制肿瘤细胞过表达EGFR或erbB2(Rusnak等人，2001 b；Xia等人，Oncogene，216255-6263，2002)。
目前，本发明人已经发现了新的治疗方法，包括给药N-{3-氯-4-[(3-氟苯甲基)氧]苯基}-6-[5-({[2-(甲烷磺酰基)乙基]氨甲基)-2-呋喃基]-4-喹唑啉胺(GW572016)及其盐和/或溶剂化物。
发明概述在本发明的一个方面，提供一种治疗哺乳动物中EGFR和/或erbB2过表达癌症的方法，包括给药所述哺乳动物治疗有效量的式(I”)化合物
在本发明的第二个方面，提供一种治疗哺乳动物中EGFR过表达癌症的方法，包括给药所述哺乳动物治疗有效量的的式(I”)化合物 在本发明的第三个方面，提供一种治疗哺乳动物中erbB2过表达癌症的方法，包括给药所述哺乳动物治疗有效量的式(I”)化合物 在本发明的第四个方面，提供治疗哺乳动物中EGFR和erbB2过表达癌症的方法，包括给药所述哺乳动物治疗有效量的式(I”)化合物
在本发明的第五个方面，提供治疗哺乳动物中肾癌的方法，包括给药所述哺乳动物治疗有效量的的式(I)化合物或其溶剂化物 在本发明的第六个方面，提供一种治疗哺乳动物中膀胱癌的方法，包括给药所述哺乳动物治疗有效量的式(I)化合物或其溶剂化物 发明详述如本文使用的术语″赘生物″指细胞或组织的异常增长，可理解为包括良性的，即，非癌性生长，和恶性的，即癌性生长。术语″赘生物的″指赘生物或与其有关。
如本文使用的术语″有效量″指能引出例如由研究者或临床医师可看到的组织、全身性、动物或人体的生物或医学反应的药物或药用药剂的用量。而且，术语″治疗有效量″指与没有接受这种剂量的相应患者相比，该剂量产生提高的治疗、治愈、预防或改善疾病、病症或副作用，或疾病或病症的发展率降低。该术语也包括在其范围内，能有效地增强正常生理功能的用量。
如本领域已知的，肿瘤经常转移，因为肿瘤生长的第一(原发性)位点会蔓延至一个或多个解剖学分散的位点。如本文所和使用的患者中的术语″肿瘤″不仅包括原发性肿瘤，还包括转移性肿瘤生长。
″EGFR″也称为″erbB-1″和″erbB-2″，为erbB家族的蛋白(质)酪氨酸激酶跨膜生长因子受体。蛋白酪氨酸激酶催化参与调节细胞生长和分化的各种蛋白质中特定酪氨酸残基的磷酸化(A.F.Wilks，Progressin Growth Factor Research，1990，2，97-111；S.A.Courtneidge，Dev.Supp.1，1993，57-64；J.A.Cooper，Semin.Cell Biol.，1994，5(6).377-387；R.F.Paulson，Semin.Immunol.，1995，7(4)，267-277；A.C.Chan，Curr.Opin.Immunol.，1996，8(3)，394-401)。I型受体酪氨酸激酶的ErbB家族包括ErbB1(也称为上皮生长因子受体(EGFR或HER1))、erbB2(也称为Her2)、erbB3和erbB4。这些受体酪氨酸激酶在上皮、间质和神经元组织中广泛表达，其中它们起调节细胞增殖、存活和分化的重要作用(Sibilia和Wagner，Science，269234(1995)；Threadgill等人，Science，269230(1995))。野生型erbB2或EGFR的表达增加，或构成活化的受体突变体的表达，使体外细胞发生转变(Di Fiore等人，1987；DiMarco等人，Oncogene，4831(1989)；Hudziak等人，Proc.NatI.Acad.Sci.USA.，847159(1987)；Qian等人，Oncogene，10211(1995))。在某些乳腺癌和多种其它恶性肿瘤中，erbB2或EGFR的表达增加与较差的临床结果有关(Slamon等人，Science，235177(1987)；Slamon等人，Science，244707(1989)；Bacus等人，Am.J.Clin.Path，102S13(1994))。
如本文使用的，细胞″过表达″EGFR和/或erbB2指与同类型细胞中发现的受体的平均数量相比，该细胞具有的功能性EGFR和/或erbB2受体数量显著增加。例如，已证实EGFR和/或erbB2的过表达存在于多种癌症类型中，包括乳腺癌(Verbeek等人，FEBS Letters425145(1998)；结肠癌(Gross等人，Cancer Research511451(1991))；肺癌(Damstrup等人，Cancer Research523089(1992)，renalcell(Stumm等人，Int.J.Cancer 6917(1996)，Sargent等人，J.Urology 1421364(1989))和膀胱癌(Chow等人，Clin.Cancer Res.71957(2001)；Bue等人，Int.J.Cancer，76189(1998)；(Mellon J，LunecJ.，J Uro 1996；155321-6；Orlando C，Sestini R.，J Urol1996；1562089-2093)，Turkeri等人，Urology 51645(1998))。也可通过本领域已知的任意适宜方法评价ErbB2的过表达，包括但不限于成像、基因扩增、存在的细胞受体的数量、蛋白表达和mRNA表达。参见，例如Piffanelli等人，Breast Cancer Res.Treatment 37267(1996)。
如本文使用的术语″溶剂化物″指由溶解物(在本发明中，为式(I)化合物或其盐)和溶剂形成的可变化学计量的络合物。用于本发明目的的这样的溶剂可不影响溶解物的生物活性。适宜溶剂的实例包括，但不限于水、甲醇、乙醇和醋酸。优选使用的溶剂为可药用溶剂。适宜的可药用溶剂的实例包括，但不限于水、乙醇或醋酸。最优选使用的溶剂为水。
本文公开的癌症治疗方法，包括给药式(I)化合物或其盐或溶剂化物 在另一个实施图示中，所述化合物为式(I′)化合物或其脱水物(anhydrate)或其水合物形式。式(I′)化合物为式(I)化合物的二甲苯磺酸盐(ditosylate)。
在一个实施图示中，化合物为式(I)化合物的无水二甲苯磺酸盐。在另一个实施图示中，化合物为其为式(I)化合物的一水合物二甲苯磺酸盐的式(I″)化合物。
式(I)化合物的一水合物二甲苯磺酸盐具有化学名N-{3-氯-4-[(3-氟苯甲基)氧]苯基}-6-[5-({[2-(甲烷磺酰基)乙基]氨基}甲基)-2-呋喃基]-4-喹唑啉胺(GW572016)二甲苯磺酸盐一水合物，也称为lapatinib。
式(I)化合物的游离碱盐、HCI盐和二甲苯磺酸盐可根据1999年1月8日申请的国际专利申请No.PCT/EP99/00048，和1999年7月15日的国际公开WO 99/35146，涉及上述的专利和2001年6月28日申请的国际专利申请No.PCT/US01/20706，和2002年1月10日的国际公开WO 02/02552中的方法，以及根据下述的适宜实施例中的方法制备。一种这样的制备式(I)化合物二甲苯磺酸盐的方法在下述图示1中列出
方案1 在图示1中，式(III)化合物二甲苯磺酸盐的制备分四个阶段进行阶段1指示的二环化合物和胺反应，得到指示的碘代喹唑啉衍生物；阶段2制备相应的乙醛盐；阶段3制备喹唑啉二甲苯磺酸盐；和阶段4制备一水合物二甲苯磺酸盐。
典型地，本发明的盐为可药用盐。在术语“可药用盐”内包括的盐指本发明化合物的无毒盐。本发明化合物的盐可包括衍生自本发明化合物取代基上氮的酸式加成盐。有代表性的盐包括下述盐醋酸盐、苯磺酸酯、苯甲酸酯、碳酸氢盐、硫酸氢盐、酒石酸氢盐、硼酸盐、溴化物、乙二胺四乙酸钙、樟脑磺酸盐、碳酸盐、氯化物、克拉维酸盐、柠檬酸盐、二盐酸化物、乙二胺四乙酸盐、乙二磺酸盐、丙酸酯月桂硫酸酯、乙磺酸盐、富马酸盐、葡庚酸盐、葡糖酸盐、谷氨酸盐、glycollylarsanilate、己基间苯二酚(hexylresorcinate)、哈胺盐(hydrabamine)、氢溴化物、盐酸化物、羟萘酸盐、碘化物、羟乙基磺酸盐、乳酸盐、乳糖酸盐、月桂酸盐、苹果酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、溴甲烷、甲基硝化盐、甲基硫酸盐、马来酸一钾、粘酸盐、萘磺酸盐、硝酸盐、甲基葡胺盐、草酸盐、扑酸盐(双羟萘酸盐)、棕榈酸盐、泛酸盐、磷酸盐/二磷酸盐、聚半乳糖醛酸盐、钾盐、水杨酸盐、纳盐、硬脂酸盐、次醋酸盐、琥珀酸盐、鞣酸盐、酒石酸盐、8-氯茶碱、甲苯磺酸盐、三乙基碘化物、三乙基铵和戊酸盐。其它非可药用盐可用于制备本发明的化合物，这些形成本发明的另一个方面。
尽管在本发明的癌症治疗方法中使用的治疗有效量的式(I)化合物和其盐或溶剂化物可以以未加工的化学品给药，其也可以将活性成分制成药物组合物。因此，本发明还提供可以在本发明的癌症治疗方法中给药的药物组合物。所述药物组合物包括治疗有效量的式(I)化合物和其盐或溶剂化物，和一种或多种可药用载体、稀释剂或赋形剂。所述载体、稀释剂或赋形剂为与制剂的其它成分可相容的和对接受者无毒的。
药物组合物可以以每单元剂量包含预定量活性成分的单元剂型存在。这样的单元可以包含，例如0.5mg至1g，优选1mg至700mg，更优选5mg至100mg的式(I)化合物，取决于受治疗的病症、给药途径和患者的年龄、体重和身体状况，或者药物组合物可以以每单元剂量包含预定量活性成分的单元剂型存在。优选的单元剂型为包含每日剂量或分剂量(sub-dose)如上所述的或其适宜部分的活性成分。而且，这样的药物组合物可以通过药物领域周知的任意方法制备。
式(I)的化合物可以通过任意给药途径给药。适宜的给药途径包括口服、直肠、鼻腔、局部(包括口腔或舌下)、阴道和胃肠外(包括皮下、肌内、静脉内、真皮内、膜内或硬膜外)。应当理解，优选的给药途径可以根据例如接收者的情况的综合而改变。
本发明的方法也可应用其它治疗癌症的方法。特别地，包括不同于上述提及的抗肿瘤治疗、与其它化疗的组合、激素、抗体药剂以及外科治疗和/或放射治疗。抗肿瘤治疗例如在2002年1月14日申请的国际申请No.PCT US 02/01130中描述的，将其公开的抗肿瘤治疗引入本文作为参考。因此，根据本发明的联合治疗包括给药至少一种式(I)化合物和任选地应用包括抗肿瘤剂的其它治疗剂。这样的药剂组合可以一起或分开给药，当分开给药时，可以以任意顺序同时或顺次，在相近或相隔的时间给药。选择相对定时给药的式(I)的化合物和其它药用活性试剂的用量以得到想要的联合治疗效果。
适于口服给药的药物组合物可以为分离的单元例如胶囊或片剂；粉剂或颗粒剂；水性液体中的溶液或混悬液；可食用泡沫剂(foams)或whips；或水包油型液体乳剂或或油包水型液体乳剂。
例如，对于片剂或胶囊形式的口服给药而言，活性药物组分可以与口服、无毒可药用载体联合，所述载体例如乙醇、甘油、水等。粉剂可通过将化合物捣碎成适宜的细小尺寸并且与类似的捣碎药物载体例如可食用糖类例如淀粉或甘露醇混合制备。也可包含调味剂、防腐剂、分散剂和着色剂。
胶囊可通过制备如上所述的粉末混合物并填充入成形的明胶鞘来制备。在填充阶段之前，可给粉末混合物中加入助流剂和润滑剂例如胶体二氧化硅、滑石、硬脂酸镁、硬脂酸钙或固体聚乙二醇。也可加入崩解剂或增溶剂例如琼脂-琼脂、碳酸钙或碳酸钠来改善当摄取胶囊时的药物利用度。
而且，当想要或必要时，适宜的粘合剂、润滑剂、崩解剂和着色剂也可掺入到混合物中。适宜的粘合剂包括淀粉、明胶、天然树糖类例如葡萄糖或β-乳糖、玉米甜味剂、天然和合成树胶例如阿拉伯胶、西黄著胶或海藻酸钠、羧甲基纤维素、聚乙二醇、蜡类等。在这些剂型中使用的润滑剂包括油酸钠、硬脂酸钠、硬脂酸镁、苯甲酸钠、醋酸钠、氯化钠等。崩解剂包括，但不限于，淀粉、甲基纤维素、琼脂、膨润土、黄原胶等。片剂通过制备粉末混合物、制粒、预压，加入润滑剂和崩解剂，并压成片来制备。粉末混合物是通过将化合物与如上所述的稀释剂或基质，任选地与粘合剂例如羧甲基纤维素、海藻酸盐、明胶或聚乙烯吡咯烷酮，与延缓剂(retardant)溶液例如石蜡，与吸收促进剂例如季铵盐和/或吸收剂例如膨润土、高岭土或磷酸二钙混合，并适当地捣碎来制备。粉末混合物可以通过与粘合剂例如糖浆、淀粉糊、纤维质或聚合材料的acadia mucilage或溶液润湿，并加压过筛网来制备。作为另一种制粒方法，粉末混合物可以用压片机来制备，得到可成为颗粒的不完全形成的预压片。可通过加入硬脂酸、硬脂酸盐、滑石或矿物油来润滑颗粒以防止片剂成形模发粘。然后，将润滑的混合物压制成片。本发明的化合物也可与自由流动的惰性载体混合而直接压制成片，不需要经过制粒或预压阶段。可提供由虫胶组成的清楚或不透明的防护涂层、糖或聚合材料的涂层和蜡的抛光涂层。可将染料加入到这些涂层中以区分不同单元剂型。
口服液体例如溶液、糖浆和酏剂可以制备成剂量单元，以便给定的剂量包含预定量的化合物。糖浆剂可以通过将化合物溶于适宜的有香料的液体溶液中制备，而酏剂可以通过使用无毒的含醇赋形剂来制备。混悬剂可通过将化合物分散在无毒赋形剂中来制备。也可加入增溶剂和乳化剂例如乙氧化的异硬脂醇和聚氧乙烯山梨醇酯、防腐剂、香味添加剂例如薄荷油或天然甜味剂或糖精或其它人工甜味剂等。
当适宜时，口服给药的剂量单元制剂可以被微囊化。也可以制备该制剂以延缓或持续释放，例如通过包衣或将颗粒物质包埋在聚合物、蜡类中等。
根据本发明使用的药剂也可以脂质体递送系统给药，例如小的单层囊泡、大的单层囊泡和多层囊泡。脂质体可由多种磷脂例如胆固醇、硬脂酰胺或磷酸卵磷脂来制备。
根据本发明使用的药剂也可以通过使用单克隆抗体作为其中化合物分子偶合的独立载体来递送。所述化合物也可以与可溶性聚合物例如靶向药物载体偶合。这样的聚合物可包括聚乙烯吡咯烷酮、吡喃共聚物、聚羟丙基甲基丙烯酰胺-酚、聚羟乙基门冬酰胺酚、或用棕榈酰残基取代的聚乙烯氧聚赖氨酸。而且，化合物可以与一类用于得到药物控释释放的生物可降解的聚合物偶合，所述聚合物例如聚乳酸、polepsilon caprolactone、多羟基丁酸、多正酯类、聚羧醛、聚二氢吡喃类、聚腈基丙烯酸酯和水凝胶的交联或两亲嵌段共聚物。
适于经皮给药的药物组合物可以为分离的贴剂，其预期可保持与接受者的表皮直接接触延长的时间段。例如，活性成分可通过离子透入法递送，如通常在Pharmaceutical Research，3(6)，(1986)中描述的。
适于局部给药的药物组合物可制剂成软膏、乳膏、混悬剂、粉剂、溶液、糊剂、凝胶剂、喷雾剂、气溶剂或油。
对于治疗眼部或其它外部组织例如口和皮肤而言，制剂优选以局部软膏或乳膏应用。当制剂成软膏时，活性成分可以与石蜡泪或水混溶性乳膏基质应用。另外，活性成分可以制剂成含有油包水型乳膏基质或水包油型基质的乳膏。
适于用于局部给药至眼部的药物组合物包含滴眼剂，其中活性成分溶解或混悬于适宜的载体中，尤其是水溶液中。
适于局部给药至口的药物组合物包含锭剂、软锭剂和口腔洗剂。
适于直肠给药的药物组合物可以是栓剂或灌肠剂。
适于鼻腔给药的其中载体是固体的药物组合物包括粗粉，其具有的粒径为20至500微米，其以摄取其中嗅剂的方式给药，即，从靠近鼻子的含有粉末的容器中通过鼻腔快速吸入。用于以喷雾剂或滴鼻剂给药的其中载体是液体的适宜制剂包括活性成分的水或油溶液。
适于通过吸入给药的药物组合物包括细颗粒粉剂或雾剂，其可通过多种类型计量的剂量加压气溶胶、喷雾器或吸入器产生。
适于阴道给药的药物组合物可以为阴道栓剂、棉塞、乳膏、凝胶剂、糊剂、泡沫剂或喷雾制剂。
适于胃肠外给药的药物组合物包括含水或不含水无菌注射液，其可包含抗氧剂、缓冲剂、抑菌剂和使制剂与预期的接受者等渗的溶质；和含水或不含水无菌混悬剂，其可包含助悬剂和增稠剂。该制剂可装入单位剂量或多剂量容器中，例如密封的安瓿和药瓶，可贮存在冷冻干燥(低压冻干)条件下，在立即使用前，仅需要加入无菌液体载体，例如注射用水。临时注射溶液或混悬剂可由无菌粉末、颗粒和片剂制备。
应当理解，除了上述成分，所述制剂还可包含其它和正在讨论的制剂类型有关的本领域常用药剂，例如适于口服给药的那些可包括调味剂。
如所指出的，将治疗有效量的式(I)的特定化合物给药哺乳动物。典型地，给药本发明药剂的一种治疗有效量取决于多种因素，包括例如哺乳动物的年龄、体重、需要治疗的精确情况、病症的严重程度、制剂的性质、给药途径。总之，治疗有效量将由护理医师或兽医慎重确定。
典型地，式(I)化合物的给药范围为0.1至100mg/每kg接受者(哺乳动物)体重每天，更通常为1至10mg/kg体重每天。
如上述指出的，本发明涉及癌症治疗的方法，其包括给药N-{3-氯-4-[(3-氟苯甲基)氧]苯基}-6-[5-({[2-(甲烷磺酰基)乙基]氨基}甲基)-2-呋喃基]-4-喹唑啉胺(GW572016)及其盐和/或溶剂化物。
在欧洲，膀胱癌为最常见的第五种恶性肿瘤，在美国，其为第四种恶性肿瘤(Jensen 0，Esteve J.Eur J Cancer 1990；261167-256；JemalA，Thomas A.Cancer Statistics，2002.CA Cancer J Clin 2002；5223-47)。在世界范围内，绝大部分的膀胱癌为转移细胞类型的(TCC)，其包含90至95％的泌尿道上皮肿瘤。这些肿瘤可存在于泌尿道的任何部位发病，包括肾盂、输尿管、膀胱(90％)，和接近尿道的三分之二部位。在临床定位的患者中，肌肉侵袭性TCC，20至80％可用适当的局部治疗治愈，包括外科手术或放射治疗。其它的患者将发展为有很小治愈可能的局部复发或转移性疾病(de Mulder p，van der MeijdenA.Bladder cancer.InOxford Textbook of Oncolog.2nd ed.Oxford，NYOxford University Press；2002)。
已在治疗泌尿道上皮肿瘤治疗中应用评价了许多细胞毒素剂，包括MVAC(氨甲喋呤、长春碱、多柔比星和顺铂)和CMV，目前在美国和欧洲其分别被认为是一线治疗的金标准(Loehrer P，Einhorn L.JClin Oncol 1992；101066-1073)；von der Maase H，Hansen S.，J ClinOncol 2000；183068-3077)。吉西他滨/顺铂(GC)是具有更安全特性的另一种MVAC用药图示，其愈来愈被重视使用，尤其是自从吉西他滨被证实为一线药物。
明确确定的二线治疗泌尿道上皮道的晚期或转移的TCC的药物很少。存在用于治疗患有复发性膀胱癌和/或其它泌尿道上皮癌患者的未批准的药剂，所述患者的疾病为在用铂基化学疗法后发展所致。最常规使用的药剂为紫杉烷类、吉西他滨、丝裂霉素和蒽环类抗生素。应答率在7％至27％之间改变，进展时间(time to progression)(TTP)通常短一些，总存活数(OS)通常少一些。因为膀胱癌的预测较差和其可用的治疗剂不足，因而，这种疾病代表了真正没有满足的医学需要，要求进一步研究有效的治疗剂。
在膀胱癌中EGFR(erbB1)和erbB2的过表达与晚期和高级(highgrade)的肿瘤有关(Mellon J，Lunec J.，J Uro 1996；155321-6；OrlandoC，Sestini R.，J Urol 1996；1562089-2093).ErbB1和erbB2分别在72.2％和44.5％的原发性膀胱癌例子中表达。在33.9％的例子中发现erbB1和erbB2的联合表达(Chow N-H，Chan S-H.，Clin Cancer Res2001；71957-1962)。GW572016，一种的erbB1和erbB2的有效的和选择性双重抑制剂，因此，可提供一种用于治疗患有泌尿道上皮道的局部晚期或转移的TCC患者的有效的、良好耐受性的和方便的治疗选择。
在本发明的一个实施图示中，提供一种治疗哺乳动物中泌尿道上皮癌的方法，包括给药所述哺乳动物治疗有效量的式(I)化合物和其盐或溶剂化物。在另一个实施图示中，化合物为式(I′)的化合物，优选式(I″)的化合物。在本发明的一个实施图示中，提供治疗哺乳动物中膀胱癌的方法，包括给药所述哺乳动物治疗有效量的式(I)化合物和其盐或溶剂化物。在另一个实施图示中，化合物为式(I’)化合物，优选式(I”)化合物。在本发明的另一个实施图示中，提供治疗哺乳动物中晚期或转移的膀胱癌的方法，包括给药所述哺乳动物治疗有效量的式(I)化合物和其盐或溶剂化物。在本发明的另一个实施图示中，提供治疗哺乳动物中转移细胞膀胱癌的方法，包括给药所述哺乳动物治疗有效量的式(I)化合物和其盐或溶剂化物。
在西方，胰腺癌为由癌症引起死亡的前10种病因中的一种。外科切除改善了该病的前景，尽管仅有百分之10的胰腺癌患者适宜采用这种方法。大多数的治疗失败是由于局部复发、肝转移或两者都有，且出现于外科手术一至两年后。晚期胰腺癌有很少的治疗选择和令人忧郁的预后。低于2％的胰腺癌患者活过5年。目前患有局部晚期的胰腺癌患者采用化放疗，通常为氟尿嘧啶(FU)或吉西他滨-基的用药图示，或单独用吉西他滨。对于远距离转移(distant metastases)的肿瘤而言，吉西他滨已经成为护理标准，在小型随机试验后，与用FU-基用药图示相比，其显示出癌症相关症状的显著性改善(23.8％v4.8％的临床有益应答)和总存活数的适度提高(5.6v4.4月)。在通过吉西他滨与FU联合或用BAY12-9566、马马司他或法呢酰基转移酶抑制剂tipifarnib代替吉西他滨的随机对照试验中的最新尝试没有改善吉西他滨治疗的胰腺癌患者的存活率。ErbB1表达为约30％，erbB2表达为约70％。
在本发明的一个实施图示中，提供治疗哺乳动物中胰腺癌的方法，包括给药所述哺乳动物治疗有效量的式(I)化合物和其盐或溶剂化物。在另一个实施图示中，化合物为式(I’)化合物，优选式(I”)化合物。
前列腺癌发病率的评价表明，2003年在美国有超过220,000的新诊断病例，导致超过28,000人死亡。在英国、意大利、西班牙、法国和德国，诊断有超过110,000例前列腺癌病例，有超过46,000例由于该病死亡。而且，前列腺癌是全世界男性的第四种最常见的癌症。在包括放射或前列腺切除术的确定局部治疗后，有接近一半的前列腺癌患者复发为晚期疾病。尽管患有晚期前列腺癌的患者可用雄激素除去法(androgen ablation)来有效治疗，但是其对疾病进程的效果是暂时性的。这些患者最终会对雄激素除去法无效，最终分类为激素不应性前列腺癌(HRPC)[Crawford，1989；Eisenberger，1994]。患有HRPC患者的标准选择包括第二次激素治疗或化学疗法。包括影响微管完整性药剂的联合化学疗法用药图示似乎具有可容忍的副作用的活性。然而，尽管存在高的前列腺特异性抗原(PSA)应答率，但是中等应答持续时间限定为约6月。存活益处(Survival benefit)已经得到了证实。尽管用化学疗法和类固醇得到了症状缓解的发展和生活治疗的提高，但仍需要提高存活率的创新性方法。治疗前列腺癌的新方法包括使用对肿瘤细胞存活关键性通路的靶向治疗剂。对转移性HRPC的治疗而言，通常使用米托蒽醌/泼尼松或雌莫司汀。而且，2004年5月19日批准了多西紫杉醇(75mg/m2，每3周)与泼尼松联合作为治疗的转移性HRPC的一线药剂。目前，多种LHRH激动剂和抗雄激素物质被用于激素敏感性前列腺癌。某些使用化学疗法药剂的小量试验正在进行中。在这种情形(setting)下，erbB1/2抑制剂能延缓使用雄激素阻断剂和与这种疗法相关毒性的能力将是临床重要的优点。在前列腺癌中，erbB1和erbB2都表达。大多数研究已经表明在前列腺癌进程中表达增加，因为其对标准的激素疗法不显效(41-100％erbB1；20-80％erbB2)。在前列腺癌中，用ErbB1或ErbB2靶向疗法的临床研究还没有希望。由于erbB1和erbB2的表达与对激素不应性疾病前列腺癌的进程有关，erbB受体的双重抑制剂可提供比特异性抑制任一独立受体的药物更有效的治疗选择。
在本发明的一个实施图示中，提供治疗哺乳动物中前列腺癌的方法，包括给药所述哺乳动物治疗有效量的式(I)化合物和其盐或溶剂化物。在另一个实施图示中，化合物为式(I’)化合物，优选式(I”)化合物在本发明的一个实施图示中，提供治疗哺乳动物中激素不应(hormone refractory)前列腺癌的方法，包括给药所述哺乳动物治疗有效量的式(I)化合物和其盐或溶剂化物。在另一个实施图示中，化合物为式(I’)化合物，优选式(I”)化合物。
结肠直肠癌是西方社会第四种主要的癌症类型，是北美第二种导致癌症相关性死亡的病因。在美国，结肠直肠癌每年的发病率为约148,300例(影响72,600名男性和75,700名女性)，由有56,600例死亡(其中27,800名男性和28,800名女性)。在一般人群中结肠直肠癌的终生危险性为约百分之5至6。患有家族危险性的患者-有两个或多个一级或二级亲属(或两者)患有结肠直肠癌的那些一构成所有患结肠直肠癌患者的约百分之20，然而，结肠直肠癌每年总量的约百分之5至10得自常染色体显性方式的遗传。
尽管单独的外科切除有可能治愈，但认为发展为局部或远距离复发的许多患者，和具有高危复发的那些患者应接受氟尿嘧啶基系统性辅助化学疗法，其已在大量合作组试验和分析中表明有益。
在原发性肿瘤中，ErbB2为中度至高度表达。erbB2的体外表达与腺瘤至癌瘤序列的进程、肿瘤期、发病可能性有关，其为存活的非依赖性预后因素。ErbB1表达低于erbB2(40％比60％)，尽管其在生长中的作用可能比erbB2更重要。erbB1和erbB2和erbB3的共表达为～30％(所有级别)。
在本发明的一个实施图示中，提供治疗哺乳动物中结肠直肠癌的方法，包括给药所述哺乳动物治疗有效量的式(I)化合物和其盐或溶剂化物。在另一个实施图示中，化合物为式(I’)化合物，优选式(I″)化合物。在一个实施图示中，癌症为结肠癌。在另一个实施图示中，癌症为直肠癌。
全世界每年肺癌的发病率为1.24百万人。而且，估计每年全球1.1百万人死于肺癌[Parkin，2001]。约四分之三的这些患者将患有非小细胞肺癌(NSCLC)，大多数将诊断患有局部晚期或转移性疾病。目前，对这些患者没有能治愈的疗法；因此，NSCLC患者中化学疗法的目标是通过减缓症状来提高生命治疗。晚期NSCLC的一线联合化学疗法可产生20-50％的应答率，另外的患者实现了疾病的稳定。目前用于NSCLC的标准一线治疗包括顺铂联合长春瑞滨或吉西他滨或卡铂联合紫杉醇或多西紫杉醇[Schiller，2002；Fossella，2003]。Schiller等人报道四个铂联合的进程时间(TTP)和总存活率(OS)，分别在4个月和8个月类似。Fossella等人报道了用卡铂和多西紫杉醇联合的5个月和9个月的TTP和OS。
使用二线化学疗法应当获得想要的益处(存活期延长或生活质量提高)和药物相关的毒性之间的平衡。多西紫杉醇、长春瑞滨、吉西他滨、伊立替康、紫杉醇和premetrexed对患有NSCLC的患者显示出作为二线治疗的活性。目前，仅多西紫杉醇被指定用于治疗患有局部晚期或转移的非小细胞肺癌的患者，所述患者预先用铂基化学疗法治疗失败。EGFR抑制剂也被提及(looked at)。在美国，Gefitinib(Iressa)单一疗法已被批准用于治疗两种铂基和多西紫杉醇化学疗法失败后的局部晚期或转移的NSCLC的患者。在复发性NSCLC患者中erlotinib(Tarceva)的三期研究的初步结果表明实现了总存活率的改善。Cetuximab(Erbitux)，靶向于erbB1的单克隆抗体，最近在CRC和持续性(ongoing)试验中证实发现了其对NSCLC的活性。
在本发明的一个实施图示中，提供治疗哺乳动物中肺癌的方法，包括给药所述哺乳动物治疗有效量的式(I)化合物和其盐或溶剂化物。在另一个实施图示中，化合物为式(I’)化合物，优选式(I”)化合物。在一个实施图示中，癌症为非小细胞肺癌。
在美国，每年约14,300名女性死于卵巢癌。其是女性中第五个常癌症，是导致生殖系统癌症(genital cancers)死亡的病因。对患有该局部疾病的女性来说，患有卵巢癌5年的存活率为约95％。然而，约60％的女性在诊断时患有晚期(III/IV期)卵巢癌，患有远距离这种疾病的5-年存活率仅为31％。年龄和人种影响Age卵巢癌的发病率和存活率。年龄为65岁或更年长的女性有较高的疾病发病率(100,000分之56.3，与之相比，年龄小于65岁的女性中为100,000分之11.2)和显著低的5年存活率(32.9％比65.8％)。
在美国，用于患有晚期卵巢癌妇女的标准疗法已经由妇科肿瘤学组(Gynecologic Oncology Group)(GOG)最初进行了一系列随机试验来研究。在1996年，该组报道了随机比较用顺铂和环磷酰胺对比顺铂和紫杉醇治疗患有以前未治疗的晚期III期和IV期疾病的患者的结果。根据该试验的下述结果，断定顺铂加紫杉醇用药图示较优提高了全部应答率(73％v60％；P＝.01)；增加了临床完全应答率(54％v32％)；提高了非进行性(progression-free)存活率(PFS；18.1v13.6月；P＜.001)；最重要的是，提高了所有生存中值(38v24月；P＜.001)。后来，该试验的结果由对患有IIB至IV期上皮卵巢癌患者的European-Canadian试验证实，所述患者同样随机指定为顺铂加环磷酰胺用药图示对比顺铂加紫杉醇。在后来的试验中，顺铂与紫杉醇联合在3小时注射给药，而在GOG试验中，紫杉醇在24小时注射给药。尽管试验设计图示不同，两个研究都证实在患有以前未治疗的晚期卵巢癌患者中，用顺铂加紫杉醇初治疗较优。卡铂，顺铂的类似物，比母体化合物顺铂具有更小的非血液毒性，也发现卡铂与紫杉醇的联合是有效的用药图示。
ErbB1在肿瘤例中普遍表达，而erbB-2很少表达。
erbB1和erbB2的共表达也很常见。在异种移植物动物模型和患者实例中，erbB1为较差存活率和抗化学疗法的非依赖性预后标记。erbB1过表达为约70％，而erbB2过表达为约30-60％。erbB1和erbB2的共表达也常见约30-60％。在多变量分析中，ErbB1表达为存活率和DFS的非依赖性预后因子，然而，erbB2预后值更不可靠。在卵巢癌细胞系中，存在erbB1生长从属物证据。
在本发明的一个实施图示中，提供治疗哺乳动物中卵巢癌的方法，包括给药所述哺乳动物治疗有效量的式(I)化合物和其盐或溶剂化物。在另一个实施图示中，化合物为式(I’)化合物，优选式(I”)化合物。
外阴癌(Vulval cancer)为女性中少见的癌症，影响女阴，女阴为女性性器官外部，更常见于中年或老年女性中。用于外阴癌的标准疗法包括外科、放射和/或化学疗法，典型地在疾病早期局部给药氟尿嘧啶，对于其晚期或转移性疾病，给药顺铂作为单一疗法或其它药剂。
在本发明的一个实施图示中，提供治疗哺乳动物中外阴癌的方法，包括给药所述哺乳动物治疗有效量的式(I)化合物和其盐或溶剂化物。在另一个实施图示中，化合物为式(I’)化合物，优选式(I”)化合物。
子宫颈癌为为世界女性中第二种最常见的癌症，是导致不发达国家中女性中癌症相关性死亡的病因。全球，每年诊断约500,000例子宫颈癌病例。在美国，常规减产降低了侵袭性子宫颈癌的发生率，而每年诊断约13,000例侵袭性子宫颈癌病例和50,000例原位颈部癌病例(即，局部癌症)。侵袭性子宫颈癌为中年和老年女性和差社会经济状况的女性中更常见，她们不易于得到有规律的的检查和早期治疗。在非洲的、美洲的、西班牙的和本地美国女性中也存在较高的发病率。用于子宫颈癌的标准疗法包括外科、放射和/或化学疗法，典型地，指出给药顺铂作为单一疗法或用其它药剂，例如氟尿嘧啶。
在本发明的一个实施图示中，提供治疗哺乳动物子宫颈癌的方法，包括给药所述哺乳动物治疗有效量的式(I)化合物和其盐或溶剂化物。在另一个实施图示中，化合物为式(I’)化合物，优选式(I”)化合物。
在子宫内膜癌中涉及的erbB2过表达，含有或不含有基因扩增。与正常子宫内膜上皮相比，百分之十(10)至15％的子宫内膜癌表现出过表达，由免疫组织化学定量。某些研究证实在肿瘤亚型(subset)的子宫内膜癌中的erbB2基因扩增显示出过表达。如果erbB2过表达，认为其存在于高级和/或晚期肿瘤亚型中。erbB2过表达与临床结果的关系缺乏明确结论，尽管已经观察到过表达与恶化的预后相关的趋势.(Am J Obstet Gynecol 16415-21，1991；Gynecol Oncol 47179-185，1992；Gynecol Oncol 5384-92，1994.)在本发明的一个实施图示中，提供治疗哺乳动物子宫内膜癌的方法，包括给药所述哺乳动物治疗有效量的式(I)化合物和其盐或溶剂化物。在另一个实施图示中，化合物为式(I’)化合物，优选式(I”)化合物。
在美国，肾细胞癌(RCC)为第6种导致由癌症引起死亡的病因，占约3％的成年恶性肿瘤。在2000年，在美国，存在约31,200例诊断病例，约12,000例死亡。在世界其它地方，发病率和死亡率都高于10倍。在斯堪的纳维亚发病率最高，但是在北欧的其它地方低于英格兰和威尔士。据报道，最低的发病率在印度、中国和日本人中，和在中部或南部美洲区域。在过去25年内，发病率稳定增加。ErbB1过表达从40％升至超过80％。过表达和肿瘤期和存活率有关。用IL-2和/或IFN-alpha的细胞因子治疗在延长患有晚期和转移性RCC的患者的存活期中的作用仍有争议，应答速率为约15％，治疗基本上有毒性。应答持续期为6-10月。RCC固有地抗化学疗法和激素疗法，因为没有药剂可始终如一地得到超过10％患者的应答。
在本发明的一个实施图示中，提供治疗哺乳动物中肾癌的方法，包括给药所述哺乳动物治疗有效量的式(I)化合物和其盐或溶剂化物。在另一个实施图示中，化合物为式(I’)化合物，优选式(I”)化合物。在一个实施图示中，肾细胞癌(cancer)为肾细胞癌(carcinoma)。
间皮瘤为胸膜或腹膜内层的癌症。表皮生长因子受体(EGFR)的过表达普遍发现于许多固体瘤中，把包括肺瘤、乳腺瘤和间皮瘤。该过表达已显示出与差的预后和抗放射和化学疗法有关。目前的证据表明EGFR的正调节和激活可在早期致癌事件中起关键性作用。致癌石棉纤维，已知的间皮瘤病因，已知能正调节EGFR的过表达。MET5A细胞对石棉的暴露导致激活核因子-kB(NF-kB)，一种在大量调节内在基因至发炎、增殖和肺防护中重要的转录因子。石棉介导的EGFR/NF-kB信号通路的调节在研究化学预防和治疗恶性间皮瘤的新治疗策略中很重要(Faaux，EGFR Induced Activation of NF-kB inMesothelial Cells by Asbestos Is Important in Cell Survival，Proceedings of the American Association for Cancer Research，AACR，Vol.42，March 2001)。
在本发明的一个实施图示中，提供治疗哺乳动物中间皮瘤的方法，包括给给药所述哺乳动物治疗有效量的式(I)化合物和其盐或溶剂化物。在另一个实施图示中，化合物为式(I’)化合物，优选式(I”)化合物。
在美国，由食管引起的癌症，包括胃食管接合处，相对不常见，在2003年，报道有13,900例新病例，13,000例死亡。危险性随年龄而增加，平均诊断年龄为67岁。食管癌为美国人中由癌症引起死亡的第七个病因。在全世界，食管癌为第六个由癌症引起死亡的病因。超过百分之90的食管癌为扁平细胞癌或腺癌。所有腺癌中约四分之三发现与末端食管，然而，扁平细胞癌为较平均分布于中年和年轻人(middle and lower third)。总之，当发现时，超过百分之50的患者患有已不能切除或转移性疾病。5年的所有存活率差，目前为百分之14。尽管食管的扁平细胞癌和腺癌都对化学疗法有应答，但是目前没有批准的用药图示。在患有食管癌的患者中，表达ErbB1(30％类腺癌；70％鳞状的)，似乎为预后指示剂。在末梢食管和GE接合处中，ErbB2表达为约25％。
在本发明的一个实施图示中，提供治疗哺乳动物中内隐斜视癌的方法，包括给药所述哺乳动物治疗有效量的式(I)化合物和其盐或溶剂化物。在另一个实施图示中，化合物为式(I’)化合物，优选式(I”)化合物。
某些临床病例学(clinicopathological)研究已使用免疫组织化学检查了在恶性唾液腺肿瘤中EGFR和erbB2的过表达。对于adenoidcyctic carcinoma(ACC)而言，EGFR过表达的频率改变为0-85％，同样，erbB2过表达的频率改变为0-100％。这些频率通常基于小系列的有限样品容量。其它因素例如实验室染色和记分法的不同、和抗体的选择，可能导致结果的不均一性。在最近公开的一大组的137例唾液腺癌中(Glisson等人，ClinCanRes，10944-46，2004)，在唾液腺癌的全部组织学亚型中，erbB2过表达的所有频率(在至少10％的肿瘤细胞中，记分2+至3+完全的膜染色作为正性过表达)为17％(137分之23)。发现在ACC中erbB2的过表达很少(4％，70分之3)，然而，在涎腺导管癌中的过表达通常为(83％，12分之10)。感觉这一观察结果与典型的高级组织学特征和涎腺导管亚型的攻击性行为及类似于乳腺癌的组织发生一致。
在本发明的一个实施图示中，提供治疗哺乳动物中唾液腺癌的方法，包括给药所述哺乳动物治疗有效量的式(I)化合物和其盐或溶剂化物。在另一个实施图示中，化合物为式(I’)化合物，优选式(I”)化合物。
肝细胞癌(HCC)为最常见的癌症，全世界每年有1.2亿病例。由于C型肝炎传染的广泛传播，其发病率快速增长。在美国，2003年约有17,300例病例，14,400例死亡。外科手术为患有可切除疾病的少数患者的治疗选择。局部HCC的治疗包括外科手术、射频消蚀(radiofrequency ablation)、注射乙醇或经动脉化疗栓塞。没有确定的辅助疗法，大多数肿瘤复发。复发性或转移性HCC的预后差，生存中值为6个月。多柔比星，作为单一药剂或联合应用，通常用于治疗晚期HCC；然而，应答速率低，在这种情形下，没有提高存活率。也常实施用化学疗法的化疗栓塞(Chemoembolism)或经动脉栓塞形成。已经报道了erbB1在HCC中的过表达，也报道了具有多种程度的过表达。在肿瘤中，ErbB1表达与攻击性生长、预后差和抗化学疗法有关。在肝癌细胞系中，ErbB1和erbB2表达是重要的生长调节剂。
在本发明的一个实施图示中，提供治疗哺乳动物中肝细胞癌的方法，包括给药所述哺乳动物治疗有效量的式(I)化合物和其盐或溶剂化物。在另一个实施图示中，化合物为式(I’)化合物，优选式(I”)化合物。
EGFR通常在恶性脑瘤中过表达(Heimberger等人，ClinCanRes，83496-3502，2002)，所述脑瘤包括神经胶质瘤(Bredel等人，ClinCanRes，51786-1792，1999)。因此，GW572016，作为有效和选择性双重erbB1和erbB2抑制剂，可提供用于患有脑瘤包括神经胶质瘤的患者有效的、良好耐受的和方便的治疗选择。
在本发明的一个实施图示中，提供治疗哺乳动物中脑癌的方法，包括给药所述哺乳动物治疗有效量的式(I)化合物和其盐或溶剂化物。在另一个实施图示中，化合物为式(I’)化合物，优选式(I”)化合物。在一个实施图示中，脑癌为神经胶质瘤。
黑素瘤为非常严重的形式的皮肤癌。其发病于黑素细胞，黑素细胞为给予皮肤称之为黑色素的色素。尽管在黑素瘤仅占所有皮肤癌病例的4％，但是其导致最主要的皮肤癌有关的死亡。典型地，采用外科手术治疗黑素瘤，使用免疫疗法治疗高危病例，采用例如干扰素α-2b。
在本发明的一个实施图示中，提供治疗哺乳动物中黑素瘤的方法，包括给药所述哺乳动物治疗有效量的式(I)化合物和其盐或溶剂化物。在另一个实施图示中，化合物为式(I’)化合物，优选式(I”)化合物。
在前述本发明的癌症治疗方法中，式(I)、(I′)和(I″)化合物为如上所述的。
下述实施例仅旨在用于阐述，而不意味着以任何方式限制本发明的范围。
实施例如本文中使用的，在这些方法、图示和实施例中使用的标记和惯例与当前科学文献中例如Journal of the American Chemical Society或Journal of Biological Chemistry中使用的那些一致。标准的单一字母或三个字母的缩写通常用于表示氨基酸残基，除非另有说明，假定其为L-构型。除非另有说明，所有起始物质得自市售供应商，不需进一步纯化使用。
特别地，可在实施例和说明书中使用下述缩写g(克)； mg(毫克)；L(升)； mL(毫升)；μL(微升)psi(磅/平方英寸)；M(摩尔)；mM(毫摩尔)；N(正常)；Kg(千克)；i.v.(静脉注射)； Hz(赫兹)；MHz(兆赫)mol(摩尔)；mmol(毫摩尔)； RT(室温)；min(分钟)h(小时)；mp(熔点)； TLC(薄层色谱)；Tr(保留时间)； RP(反相)；DCM(二氯甲烷)； DCE(二氯乙烷)DMF(N，N-二甲基甲酰胺)； HOAc(醋酸)；TMSE(2-(三甲基硅烷基)乙基)； TMS(三甲基硅烷基)；TIPS(三异丙基甲硅烷基)； TBS(叔丁基二甲基甲硅烷基)；HPLC(高压液相色谱法)；THF(四氢呋喃)； DMSO(二甲亚砜)；EtOAc(乙酸乙酯)；DME(1，2-二甲氧基乙烷)；EDTA 乙二胺四乙酸；FBS 胎牛血清IMDM Iscove′s Modified Dulbecco′s介质IMS 工业变性酒精；PBS 磷酸盐缓冲生理盐水；
RPMI Roswell Park Memorial InstituteRIPA缓冲液 *RT 室温*150mM NaCl，50mM Tris-HCI，pH7.5，0.25％(w/v)-脱氧胆酸，1％NP-40，5mM sodium orthovanadate，2mM氟化钠和蛋白酶抑制剂鸡尾酒。
除非另有说明，所有的温度用℃(摄氏度)表示。除非另有说明，所有的反应在惰性条件和室温下进行。
GW572016F为lapatanib，其化学名为N-{3-氯-4-[(3-氟苯甲基)氧]苯基}-6-[5-({[2-(甲烷磺酰基)乙基]氨基}甲基)-2-呋喃基]-4-喹唑啉胺二甲苯磺酸盐一水合物。
实施例1GW572016F的制备阶段1 在20至25℃下，用三正丁胺(1.2当量)处理搅拌的3H-6-喹唑啉-4-酮(化合物A)的甲苯(5体积)混悬液，然后，加热至90℃。加入氯氧化磷(Phosphorous oxychloride)(1.1当量)，然后加热回流反应混合物。将反应混合物冷却至50℃，加入甲苯(5体积)。加入固体形式的化合物C(1.03当量)，加热浆液返回至90℃，搅拌1小时。将浆液转移至第二个容器中；用甲苯(2体积)洗涤第一个容器，并且与反应混合物混合。将反应混合物冷却至70℃，在1小时内滴加1.0M水性氢氧化钠溶液(16体积)至搅拌的浆液中，保持成份温度为68-72℃。在65-70℃搅拌1小时，然后在1小时内冷却至20℃。在20℃搅拌混悬液2小时，过滤收集产物，连续用水(3×5体积)和乙醇洗涤，然后在50-60℃真空干燥。体积数根据使用的化合物A的质量引证(quoted)。实测的百分产率范围90％至95％，白色或黄色晶体。
阶段2 将N-{3-氯-4-[(3-氟苯甲基)氧]苯基}-6-碘-4-喹唑啉胺-化合物D(1wt)、硼酸-化合物E(0.37wt，1.35当量)和活性炭上(0.028wt，50％水分)10％钯的混合物在IMS(15体积)中匀浆。搅拌得到的混悬液5分钟，用二异丙基乙胺(0.39体积，1.15当量)处理，然后加热至70℃约3小时，直到反应完全(用HPLC分析确定)。用四氢呋喃(THF，15体积)稀释混合物，然后热滤除去催化剂。容器用IMS洗涤(2体积)。
在5-10分钟内，将对甲苯磺酸一水合物(1.5wt，4当量)的水溶液(1.5体积)加入到滤过的溶液中，保持在65℃。当在60-75℃搅拌混悬液1小时结晶后，在1小时内冷却至25℃，再次室温搅拌2小时。过滤收集固体，用IMS(3体积)洗涤，然后在约50℃真空干燥，得到想要的化合物F，呈桔黄色结晶固体(从包含约5％w/w EtOH的乙醇溶剂合物中分离)。
阶段3 将化合物F#(1重量)和2-(甲磺酰基)乙胺(0.4重量，1.62当量)悬浮于THF(10体积)中。连续加入醋酸(0.354体积，4当量)和二异丙基乙胺(DIPEA，1.08体积，4.01当量)。在30-35℃搅拌得到的溶液约1小时，冷却至22℃。然后，在约15分钟内，不断填料加入三乙酰氧基硼氢化物(0.66重量，2.01当量)(在这一点可看到某些泡腾现象)。在约22℃搅拌得到的混合物，然后取样用于HPLC分析。加入水性氢氧化钠(25％w/w，3体积)，然后再加入水(2体积)淬灭反应，搅拌约30分钟(在开始加入苛性钠时可看到某些泡腾现象)。
然后，分离水相。用THF(2体积)萃取，然后用25％w/v水性氯化铵溶液(2×5体积)2洗涤混合的THF萃取物。制备对甲苯磺酸一水合物(p-TSA，0.74wt，2.5当量)的水溶液(1体积)1，加热至约60℃，加入GW572016F(化合物G)(0.002wt)晶种(seeds)。
在至少30分钟内给GW572016的游离碱THF溶液中加入对TSA溶液，同时保持批温度(batch temperature)在60±3℃。在约60℃搅拌得到的混悬液1-2小时，在1小时内冷却至20-25℃，在该温度老化约1小时。过滤收集固体，用95∶5 THF∶水(3×2体积)洗涤，在约35℃真空干燥，得到GW572016F-化合物G，亮黄色结晶固体。预期产率80％，理论产率117％w/w。
1最小反应体积约1体积。
2最大反应体积为约17体积。
#分析矫正阶段4 将N-{3-氯-4-[(3-氟苯甲基)氧]苯基}-6-[5-({[2-(甲烷磺酰基)乙基]氨基}甲基)-2-呋喃基]-4-喹唑啉胺-化合物G(1wt)的二甲苯磺酸盐一水合物盐的四氢呋喃(THF，14体积)和水(6体积)的混悬液加热至约55-60℃，加热30分钟，得到澄清溶液，过滤，用THF/水(7∶3比例，2体积)引流洗涤到结晶容器中。加热回流得到的溶液，在大气压下，蒸除四氢呋喃(9vol，与水95％w/w的共沸混合物)。
所述溶液含有成份N-{3-氯-4-[(3-氟苯甲基)氧]苯基}-6-[5-({[2-(甲烷磺酰基)乙基]氨基}甲基)-2-呋喃基]-4-喹唑啉胺二甲苯磺酸盐一水合物(0.002wt)。一旦开始结晶，加入水(6体积)，同时保持反应温度高于55℃。在约2小时内，冷却混合物至5-15℃。过滤收集固体，用四氢呋喃/水(3∶7比例，2体积)洗涤，然后用四氢呋喃/水(19∶1比例，2体积)，在45℃真空干燥，得到N-{3-氯-4-[(3-氟苯甲基)氧]苯基}-6-[5-({[2-(甲烷磺酰基)乙基]氨基}甲基)-2-呋喃基]-4-喹唑啉胺二甲苯磺酸盐一水合物，呈亮黄色固体结晶。
实施例2抑制50％细胞生长的GW 572016F浓度的确定(IC50)人膀胱细胞系HT-1197、HT-1376和T24和卵巢细胞系SKOV3得自American Type Culture Collection。所述细胞保存在含有RPMI1640(Invitrogen#22400-089)的组织培养瓶中，RPMI1640中含有10％的胎牛血清(FBS，HyClone#SH30071.03)，并且在37℃于含有5％CO2的大气中培养，直到用于确定IC50的平皿接种。为了确定IC50，将细胞放置于适宜的在96孔组织培养皿中每孔5,000细胞的培养基中，放回培养器过夜。在最初引种约24小时后，将细胞暴露于GW572016、GW 572016F的二甲苯磺酰盐形式中。细胞在50％RPMI和50％低葡萄糖DMEM介质中，其包含5％FBS、50微克/ml庆大霉素和0.3％DMSO，给其中加药三倍连续稀释的GW 572016F。最终浓度为30微摩尔至0.00152微摩尔。在化合物暴露三天后，抽吸除去生长介质。用0.1ml每孔的亚甲蓝染色细胞(Sigma#M9140，0.5％的50∶50乙醇∶水溶液)，然后室温培养至少30分钟来评价细胞生物量。抽吸染剂，将培养民浸渍在去离子水中洗涤，然后空气干燥。通过加入0.1ml的增溶剂(1.0％N-l月桂基肌氨酸、钠盐、Sigma#L5121的PBS溶液)使细胞释放染剂。室温培养培养皿40分钟。用TecanSpectra全自动定量绘图酶标仪在620nM读数吸收率。计算相对于未处理的对照细胞的细胞生长抑制百分比。使用Levenberg和Marquardt方法(Mager，1972)和等式y＝Vmax*[1-(xn/(Kn+xn))](其中″K″等于IC50)来计算IC50值。
结果与其它细胞系的结果都显示在表1中。根据类似于在实施例2中描述的方法制备另外的细胞系，且暴露于GW 572016F。所有的细胞系得自American Type Culture Collection，放置的浓度为能提供化合物暴露与持续时间的对数生长的浓度。
表1
实施例3口服给药单一药剂lapatinib的临床研究，其为二线治疗患有泌尿道上皮道的局部晚期或转移性移行细胞癌患者的药物五十八名的患有局部晚期或转移性泌尿道上皮肿瘤患者，他们在铂基治疗后发展而致，接受每日一次的1250mg lapatinib，直到疾病加重或病理消退。分别在4周和8周的间隔进行安全性和有效性测定(独立评价)。也评价疾病消退的患者，每两周测定直至死亡。中值分析评价30名患者的数据(在研究的16周内)，在本文中列出。
平均年龄为62岁。大多数患者(67％)有内脏转移。已证实所有的患者表达erbB1和/或erbB2(1+，2+或3+，通过免疫组织化学)。仅19名患者(63％)接受lapatinib，其为预期的二线治疗剂。在最初试验中，三名患者(10％)的肿瘤减小，限制为部分反应(PR)；然而，在第8周，仅一名PR得到确认。八名患者(27％)有稳定疾病(SD)，记录5名有细胞缩减。在3名患者(10％)中发现临床益处(＞6月SD)。五名(17％)患者患有进展性疾病，11名患者(37％)在8周前退出，3名患者(10％)没有获得评价。疾病进展是退出的最常见原因。
用口服给药lapatinib的二线治疗显示出有希望的活性，其通常在局部晚期或转移性泌尿道上皮肿瘤中有良好的耐受性。
实施例3A口服给药单一药剂的lapatinib的II期临床研究，其为二线治疗患有泌尿道上皮道的局部晚期或转移性移行细胞癌患者的药物方法最初的端点为RECIST应答率(通过单独的放射学评价)。主要的合格标准包括膀胱的IIIB或IV期的TCC(在一线铂基用药图示后发展而致)、可预测的疾病、erbB1和/或erbB2的表达(1+，2+或3+，通过免疫组织化学)和Karnofsky体力状态为70或更高。口服给药lapatinib(1250mg，daily)，直到疾病进展或出现不可接受的毒性。分别在每8周和4周进行肿瘤或安全性测定。在基线和每8周，检测心脏功能。用多种生物标记分析肿瘤组织(TUNEL，p53，pAkt，Her3，pHer3，pErk，IGF-1R，Rb，pS6)。
结果登记了五十九名患有膀胱的局部晚期或转移的TCC的患者。研究者报道2(3％)部分应答(PR)，12(20％)有稳定疾病(SD)；单独的放射学评价报道1(2％)PR和18(31％)SD。基于研究者和独立的检查，六名和三名患者有持久的SD，分别持续4个月和6个月。在第8周，10名患者肿瘤生长高达20％，4名患者有白细胞郁积，10名患者有细胞缩减。大多数的肿瘤收缩是短期的；然而，一名患者在研究中保持了＞56周。平均TTP为8.6周(95％Cl，8.00，11.29)，中值存活期为17.9周(95％Cl，13.14，30.29)。在rbB1或erbB2为2+和3+的患者中观察到临床益处增加的趋势。最初的分析表明下述的生物标记物可预测患者将对Lapatinib有不应性高pHer3、高pErk和两种突变体p53&高pHer3。相反，患有高pAkt和高IGF-1R的患者对lapatinib敏感。
有10％的副反应(AEs)为腹泻(39％)、疹(32％)、恶心(27％)、呕吐(22％)、虚弱(12％)和疲劳(10％)。存在于多于一个患者的3/4级AEs为呕吐(7％)和腹泻(3％)。一名患者没有症状，2级为降低了心射血分数。
结论总之，对复发的、膀胱的晚期或转移性TCC，lapatinib为良好耐受性的，并表现出单治疗活性，研究者和单独观察评价证实临床益处(CR+PR+SD≥16weeks)分别为患者的14％和12％。平均TTP为8.6周，相当于二线治疗中各种化疗剂的报道。免疫组织化学表明在含有erbB1或erbB2 2-3+的患者中有趋向于临床益处的趋势。
实施例4口服给药患有实体瘤的患者lapatinib的临床研究用lapatinib处理八十一名患者(pts)(27名结肠癌、7名肺癌、6名未知原发性腺癌(AUP)，5H&N，6名肾癌、6名乳腺癌、4名卵巢癌和15名其它的(参见表II))，每日一次(qd)或两次(bid)，剂量设计按比例增加。给药四十名患者175-1800mg qd，给药四十一名患者500,750或900mg bid。每月评价患者，直到疾病进展或出现不能忍受的副作用。每8周测定临床应答。
在erbB1过表达的脑癌或颈部扁平细胞癌中观察到一名CR(持续16+月)。二十四名患者，患有多种肿瘤，最主要地过表达erbB1或erbB2，经历SD，平均持续时间为4个月(范围为1-13+个月)。给药患者lapatinib，剂量为≥1200mg/天，连续治疗＞4个月。在22名SD患者中，2名有非小细胞肺癌和AUP转移至肺，都对以前的治疗有进展，分另保留lapatinib12+和8+月。没有间质性肺炎的病例。
在重度预治疗人群中，临床活性证据表明，QD给药lapatinib有良好的耐受性。结果显示在表II中，表2中包括仅接受lapatinib超过4个月的患者。
表2
CR-定义为靶向损伤消失的完全应答PR-定义为至少30％靶向损伤减少的部分应答SD-定义为没有生长或某些靶向损伤减少的稳定疾病
权利要求
1.治疗哺乳动物中EGFR和/或erbB2过表达癌症的方法，包括给药所述哺乳动物治疗有效量的式(I”)化合物
2.权利要求1的方法，其中癌症为胰腺癌。
3.权利要求1的方法，其中癌症为前列腺癌。
4.权利要求1的方法，其中癌症为激素不应性前列腺癌。
5.权利要求1的方法，其中癌症为结肠直肠癌。
6.权利要求1的方法，其中癌症为结肠癌。
7.权利要求1的方法，其中癌症为直肠癌。
8.权利要求1的方法，其中癌症为非小细胞肺癌。
9.权利要求1的方法，其中癌症为卵巢癌。
10.权利要求1的方法，其中癌症为外阴癌。
11.权利要求1的方法，其中癌症为子宫颈癌。
12.权利要求1的方法，其中癌症为子宫内膜癌。
13.权利要求1的方法，其中癌症为间皮瘤。
14.权利要求1的方法，其中癌症为食管癌。
15.权利要求1的方法，其中癌症为唾液腺癌。
16.权利要求1的方法，其中癌症为肝细胞癌。
17.权利要求1的方法，其中癌症为脑癌。
18.权利要求1的方法，其中癌症为神经胶质瘤。
19.权利要求1的方法，其中癌症为黑素瘤。
20.治疗哺乳动物中EGFR过表达癌症的方法，包括给药所述哺乳动物治疗有效量的式(I”)化合物
21.治疗哺乳动物中erbB2过表达癌症的发方法，包括给药所述哺乳动物治疗有效量的式(I”)化合物
22.治疗哺乳动物中EGFR和erbB2过表达癌症的方法，包括给药所述哺乳动物治疗有效量的式(I”)化合物
23.治疗哺乳动物中肾癌的方法，包括给药所述哺乳动物治疗有效量的式(I)化合物或其盐或溶剂化物
24.权利要求23的方法，其中式(I)化合物为式(I′)化合物式或其无水物或水合物形式
25.权利要求23的方法，其中式(I)化合物为式(I”)化合物
26.权利要求23的方法，其中肾癌为肾细胞癌。
27.治疗哺乳动物中泌尿道上皮癌的方法，包括给药所述哺乳动物治疗有效量的式(I)化合物或其盐或溶剂化物
28.权利要求27的方法，其中式(I)化合物为式(I′)化合物或其无水物或水合物形式
29.权利要求27的方法，其中式(I)化合物为式(I″)化合物
30.权利要求27的方法，其中所述泌尿道上皮癌为膀胱癌。
31.权利要求27的方法，其中所述泌尿道上皮癌为晚期或转移性泌尿道上皮癌。
32.权利要求27的方法，其中所述泌尿道上皮癌为移行细胞癌。
全文摘要
本发明涉及通过给药哺乳动物4－喹唑啉胺(喹唑啉胺s)及包含其的药物组合物来治疗癌症的方法。具体而言，该方法涉及通过给药N－{3－氯－4－[(3－氟苯甲基)氧]苯基}－6－[5－({[2－(甲烷磺酰基)乙基]氨基}甲基)－2－呋喃基]－4－喹唑啉胺和其盐及溶剂化物来治疗由酪氨酸激酶EGFR和/或erbB2介导的癌症的方法。
文档编号A61K31/517GK1989112SQ200580017979
公开日2007年6月27日 申请日期2005年6月1日 优先权日2004年6月3日
发明者M·S·伯格, I·埃尔－哈里里, T·M·吉尔默, A·N·潘迪特, D·鲁斯纳克, N·L·斯佩克托尔 申请人:史密丝克莱恩比彻姆(科克)有限公司