专利名称：：癌症治疗方法癌症治疗方法本申请系申请日为2005年6月3日、申请号为200580018262.X、发明名称为"癌症治疗方法"的发明专利申请的分案申请。本发明涉及1\-{3-氯-4-[(3-氟苯甲基)氧苯基}-6-[5-({[2-(曱烷磺酰基)乙基氨基}曱基)-2-呋喃基-4-喹唑啉胺及其盐和溶剂合物在制备与其它抗肿瘤化合物联合施用的用于治疗哺乳动物中癌症的药物中的应用。
背景技术：
：本发明涉及通过给药哺乳动物4-喹唑啉胺联合其它抗肿瘤化合物来治疗癌症的方法。具体而言，该方法涉及通过给药N-P-氯-4-[(3-氟苯甲基)氧1苯基}-6-[5-({[2-(曱烷磺酰基)乙基氨基}曱基)-2-呋喃基-4-喹唑啉胺和其盐及溶剂合物并联合其它抗肿瘤化合物来治疗癌症的方法。在肿瘤领域，癌症治疗的有效化学疗法是一个持续的目标。通常，癌症由控制细胞分裂、分化和凋亡细胞死亡的正常过程反常引起。细胞凋亡(编程性细胞死亡)在胚胎发育和多种疾病例如退化性神经元疾病、心血管疾病和癌症的发病中起重要作用。最通常研究的途径之一，其涉及细胞凋亡的激酶调节，为从细胞表面的生长因子受体向核的细胞信号传递(Crews和Erikson，Cell,74:215-17,1993)。尤其是来自erbB家族生长因子受体的细胞信号传递。ErbB家族中存在明显的相互作用，其调节这些受体介导的细胞作用。结合EGFR的六个重要的配体包括EGF、转化生长因子、双向调节因子、肝素结合EGF、P细胞调节素(betacellulin)和epiregulin(Alroy&Yarden，FEBSLetters,410:83-86，1997;Burden&Yarden，Neuron,18:847-855，1997;Klapper等人，ProcNatiAcadSci，4994-5000，1999)。Heregulins,其为另一类型的配体，直接结合HER3和/或HER4(Holmes等人，Science,256:1205,1992;Klapper等人，1997，Oncogene,14:2099-2109;Peles等人，Cell,69:205，1992)。特定配体的结合包括erbB家族成员内的同源或异源二聚化(Carraway&Cantley,Cell,78:5-8，1994;Lemmon&Schlessinger,TrendsBiochemSci，19:459-463,1994)。与其它的erbB受体成员相比，还没有鉴定出用于HER2的可溶性配体，HER2似乎是在异源二聚化后转激活的(transactivated)。erbB-2受体与EGFR、HER3或HER4受体的异二聚化优于同源二聚化(Klapper等人，1999;Klapper等人，1997)。受体二聚化导致ATP结合至受体的催化位点、受体的酪氨酸激酶的激活、C-末端酪氨酸残基的自磷酸化。然后，磷酸化的酪氨酸残基起到蛋白质例如Grb2、Shc和磷脂酶C的停泊位点的作用，即进而激活下游的信号通路，包括Ras/MEK/Erk和P13K/Akt通路，其调节转录因子和参与生物反应的其它蛋白，所述生物反应例如增殖、细胞运动性、血管生成、细胞存活和分化(Alroy&Yarden，1997;Burgering&Coffer，Nature,376:599-602,1995;Chan等人，AnnRevBiochem，68:965-1014，1999;Lewis等人，AdvCanRes，74:49-139,1998;Liu等人，GenesandDev,13:786—791，1999;Muthuswamy等人，Mol&CellBio,19,10:6845-6857,1999;Riese&Stern,Bioessays，20:41-48，1998)。已研究包括单克隆抗体(Mab)、免疫交联物、抗-EGF疫苗和酪氨酸激酶抑制剂的某些策略来靶向erbB家族受体，和阻断它们在癌症细胞中的激活((Sridhar等人，Lancet,4，7:397-楊，2003)中的评论)。因为包含异二聚体的erbB2最稳定，因此，用于发送信号、同时阻断erbB2和EGFR的优选启动事件为最感兴趣的治疗策略。已经合成了在癌症的临床前治疗中有功效的一系列6-噻唑喹唑啉双重erbB-2/EGFRTK抑制剂(Cockerill等人，BiorgMedChemLett，11:1401-1405,2001;Rusnak等人，CanRes,61:7196-7203，2001a;Rusnak等人，MolCanTher,l:85-94,2001b)。GW572016为6-呋喃喹唑啉，口服活性，可逆的EGFR和erbB2蛋白酶的双重激酶抑制剂(Rusnak等人，2001b)。在人类异种移植物的研究中，GW572016已显示有剂量依赖性抑制作用，并选择性抑制肿瘤细胞过表达EGFR或erbB2(Rusnak等人，2001b;Xia等人，Oncogene,21:6255-6263，2002)。联合治疗正在快速成为癌症治疗中的规范，而非特例。肿瘤学专家正在不懈地寻求抗肺瘤化合物，当其被联合利用时，给遭受癌症影响的个体提供了更为有效和/或改善的治疗。通常，成功的联合治疗提供了比单一治疗更为改进且甚至协同的效果。目前，本发明人已经发现了新的癌症治疗方法，包括给药N-{3-氯-4-[(3-氟苯曱基)氧]苯基}—6-[5-({[2-(甲烷磺酰基)乙基氨基}曱基)_2-呋喃基-4-喹唑啉胺(GW572016)及其盐和/或溶剂合物，联合额外的抗肿瘤化合物
发明内容在本发明的笫一方面，提供一种治疗哺乳动物中乳癌的方法，包括给药所述哺乳动物治疗有效量的(i)式(r)化合物H20和(ii)曲妥单抗。在本发明的第二方面，提供一种治疗哺乳动物中乳癌的方法，包括给药所述哺乳动物治疗有效量的(i)式(r)化合物(ii)来曲峻.在本发明的第三方面，提供一种治疗哺乳动物中乳癌的方法，括给药所述哺乳动物治疗有效量的(i)式(I〃)化合物包H20和7(ii)卡培他滨.在本发明的第四方面，提供一种治疗哺乳动物中乳癌的方法，包括给药所述哺乳动物治疗有效量的(i)式(I〃)化合物(ii)托泊替康.在本发明的第五方面，提供一种治疗哺乳动物中肺癌的方法，包括给药所述哺乳动物治疗有效量的(i)式(r)化合物/uOH二"1，H20J和(ii)多西紫杉醇。在本发明的第六方面，提供一种治疗哺乳动物中肺癌的方法，包括给药所述哺乳动物治疗有效量的(i)式(r')化合物(ii)托泊替康。在本发明的笫七方面，提供一种治疗哺乳动物中结肠直肠癌的方法，包括给药所述哺乳动物治疗有效量的(i)式(I〃)化合物(ii)托泊替康。在本发明的第八方面，提供一种治疗哺乳动物中乳癌的方法，包括给药所述哺乳动物治疗有效量的(i)式(I〃)化合物H20和(ii)抗雌激素化合物。-411-色烯-3-羧酸乙BI，可获自SanDiego，California.因此，根据本发明的联合治疗包括给药至少一种式(r)化合物和任选地应用至少一种其它抗肿瘤剂.这样的药剂组合可以一起或分开给药，当分开给药时，可以以任意顺序同时或顺次，在相近或相隔的时间给药。选择式(r')的化合物和其它药用活性试刑的用量以及给药时间以得到所需联合治疗效果.本发明中，还预期包括式(i〃)的化合物和至少一种抗肿瘤治疗的药物组合。该式(r)的化合物和至少一种抗肝瘸剂如上所述，并且可以在本发明治疗癌症的方法中以上述任一组合使用.尽管在本发明的癌症治疗方法中使用的治疗有效量的式(i〃)化合物和其盐或溶剂合物可以以未加工的化学品给药，其也可以将活性成分制成药物组合物，因此，本发明还提供可以在本发明的癌症治疗方法中给药的药物组合物.所述药物组合物包括治疗有效量的式(i〃)化合物和其盐或溶刑合物，和一种或多种可药用栽体、稀释剂或赋形剂.所述栽体、稀释剂或赋形剂与制剂的其它成分可相容和对其接受者无毒。药物制剂可以以每单元剂量包含预定量活性成分的单元剂型存在.这样的单元可以包含，例如0.Smg至lg，优选lmg至700mg，更优选5mg至100mg的式(l)化合物，取决于受治疗的病症、给药途径和患者的年龄、体重和状况，或者药物组合物可以以每单元剂量包含预定量活性成分的单元刑型存在.优选的单元刑型为那些包含日刑量或分刑量(sub-dose)，如上所述，或其适宜部分的活性成分。而且，这样的药物组合物可以通过药物领域众所周知的任意方法制备.式(I〃)的化合物可以通过任意给药途径给药。适宜的给药途径包括口服、直肠、鼻腔、局部(包括口腔或舌下)、阴道和胃肠外(包括皮下、肌内、静脉内、真皮内、膜内或硬膜外)。应当理解，优选的给药途径可以根据例如接收者的情况的综合而改变.适于口服给药的药物组合物可以为分离的单元例如胶囊或片刑；粉剂或颗粒剂；水性或非水性液体中的溶液或混悬液；可食用泡沫剂(foam)或搅拌剂(whip);或水包油型液体乳剂或油包水型液体乳剂。例如，对于片剂或胶囊形式的口服给药而言，活性药物组分可以与口服、无毒可药用惰性栽体联合，所述载体例如乙醇、甘油、水等。粉剂可通过将化合物捣碎成适宜的细小尺寸并且与类似的捣碎药物栽体例如可食用糖类例如淀粉或甘露醇混合制备。也可包含调味剂、防腐剂、分散剂和着色剂。胶囊可通过制备如上所述的粉末混合物并填充入成形的明胶鞘来制备.在填充操作之前，可给粉末混合物中加入助流剂和润滑剂例如胶体二氣化硅、滑石、硬脂酸镁、硬脂酸钾或固体聚乙二醇。也可加入崩解剂或增溶剂例如琼脂-琼脂、碳酸钙或碳酸钠来改善当摄取胶嚢时的药物利用度.而且，当需要或必要时，适宜的粘合剂、润滑剂、崩解剂和着色剂也可掺入到混合物中.适宜的粘合剂包括淀粉、明胶、天然树糖类例如葡萄糖或P-乳糖、玉米甜味刑、天然和合成树胶例如阿拉伯胶、西黄蓍胶或海藻酸钠、羧甲基纤维素、聚乙二醇、蜡类等.在这些剂型中使用的润滑剂包括油酸钠、硬脂酸钠、硬脂酸镁、苯甲酸钠、醋酸钠、氯化钠等.崩解剂包括，但不限于，淀粉、甲基纤维素、琼脂、膨润土、黄原胶等.片剂通过制备粉末混合物、制粒或预压，加入润滑剂和崩解剂，并压成片来制备。粉末混合物是通过将该化合物与如上所述的稀释刑或基质，任选地与粘合剂例如羧甲基纤维素、海藻酸盐、明胶或聚乙烯吡咯烷稱，溶液延緩剂例如石蜡，吸收促进刑例如四价盐和/或吸收剂例如膨润土、高呤土或礴酸二钙混合，并适当地捣碎来制备.粉末混合物可以通过与粘合刑例如糖浆、淀粉糊、阿卡迪亚粘胶、或纤維质或聚合材料溶液润湿，并加压过筛网来制备.作为备选制粒方法，粉末混合物可以用压片机来制备，结果为不完全成形的预压片破裂为颗粒。可通过加入硬脂酸、硬脂酸盐、滑石或矿物油来润滑颗粒以防止对片刑成形模的粘合。然后，将润滑的混合物压制成片.本发明的化合物也可与自由流动的惰性栽体混合而直接压制成片，不需要经过制粒或预压步骤，可提供由虫胶密封涂层、糖或聚合材料的涂层和蜡的抛光涂层组成的清澉或不透明的防护涂层。可将染料加入到这些涂层中以区分不同单元剂型.口服液体例如溶液、糖浆和醜剂可以制备成刑量单元，以便给定的剂量包含预定量的化合物，糖浆剂可以通过将化合物溶于适宜的有香料的液体溶液中制备，而Sfc剂可以通过使用无毒的含醇溶媒来制备。混悬刑可通过将化合物分散在无毒溶媒中来制备。也可加入增溶剂和乳化剂例如乙氣化的异硬脂醇和聚氧乙烯山梨醇酯、防腐剂、香味添加剂例如薄荷油或天然甜味剂或糖精或其它人工甜味剂等.当适宜时，口服给药的刑量单元制刑可以被微囊化，也可以制备该制剂以延緩或持续释放，例如通过包衣或将颗粒物质包埋在聚合物、蜡类中等。根据本发明使用的药剂也可以脂质体递送系统给药，例如小的单层囊泡、大的单层囊泡和多层囊泡.脂质体可由多种裤脂例如胆固醇、硬脂耽胺或裤酸卵礴脂来制备.根据本发明使用的药刑也可以通过使用单克隆抗体作为化合物分子偶合的独立栽体来递送。所述化合物也可以与可溶性聚合物例如靶向药物栽体偶合.这样的聚合物可包括聚乙烯吡咯烷嗣、吡喃共聚物、聚鞋丙基甲基丙烯酰胺-酚、聚轻乙基门冬酰胺酚、或用棕榈酰残基取代的聚乙烯氧聚賴氨酸.而且，化合物可以与一类用于得到药物控释释放的生物可降解的聚合物偶合，所述聚合物例如聚乳酸、聚s-己内癍、多羟基丁酸、多正醋类、聚羧搭、聚二氢吡喃类、聚腈基丙烯酸酯和水凝胶的交联或两亲嵌段共聚物，适于经皮给药的药物制刑可以为分离的貼剂，其预期可保持与接受者的表皮长期直接接触.例如，活性成分可通过离子透入法递送，如通常在PharmaceuticalResearch,3(6)，(1986)中描述的.适于局部给药的药物制刑可配制成软骨、乳骨、混悬剂、粉剂、溶液、糊刑、凝胶剂、喷雾刑、气溶剂或油.对于治疗眼部或其它外部组织例如口和皮肤而言，制剂优选以局部软骨或乳青应用.当制剂成软骨时，活性成分可以与石蜡或水混溶性乳奮基质一起应用.另外，活性成分可以被配制成含有水包油型乳骨基质或油包水型基质的乳骨。适于用于局部给药至眼部的药物制剂包含滴眼剂，其中活性成分溶解或混悬于适宜的栽体中，尤其是水溶液中。适于口内局部给药的药物制剂包含锭剂、软锭剂和口腔洗剂.适于直肠给药的药物制剂可以是栓剂或灌肠剂.适于鼻腔给药的其中栽体是固体的药物制剂包括粗粉，其具有的粒径为20至500微米，其以摄取其中嗅剂的方式给药，即，从靠近鼻子的含有粉末的容器通过具腔快速吸入.用于以喷真刑或滴真剂给药的其中栽体是液体的适宜制剂包括活性成分的水或油溶液.适于通过吸入给药的药物制刑包括细颗粒粉刑或雾剂，其可通过多种类型计量的刑量加压气溶胶、喷雾器或吸入器产生。适于阴道给药的药物制刑可以为阴道栓剂、棉塞、乳骨、凝胶刑、糊刑、泡沫剂或喷雾制剂.适于胃肠外给药的药物制剂包括含水或不含水无菌注射液，其可包含抗氧剂、緩冲刑、抑菌刑和使制刑与预期的接受者等渗的溶质；和含水或不含水无菌混悬刑，其可包含助悬剂和增稠刑.该制剂可装入单位剂量或多剂量容器中，例如密封的安瓿和药瓶，可贮存在冷冻干燥(冻干)条件下，在立即使用前，仅需要加入无菌液体栽体，例如注射用水。临时注射溶液或混悬剂可由无菌粉末、颗粒和片剂制备，应当理解，除了上述成分，所述制刑还可包含其它和涉案的制剂类型有关的本领域常用药剂，例如适于口服给药的那些可包括调味剂。如所指出的，将治疗有效量的式(I)的特定化合物给药哺乳动物。典型地，给药本发明药剂之一的治疗有效量取决于多种因素，包括例如哺乳动物的年龄、体重、需要治疗的精确情况、病症的严重程度、制剂的性质、给药途径。总之，治疗有效量将由护理医师或兽医慎重确定.典型地，式(I)化合物的给药范闺为0.1至100mg/kg接受者(哺乳动物)体重/天，更通常为1至10mg/kg体重/天。以下实施例仅用于阐述且无意于以任何方式限制本发明的范围。实施例如本文中使用的，在这些方法、方案和实施例中使用的标记和惯20例与当前科学文献中例如JournaloftheAmericanChemicalSociety或JournalofBiologicalChemistry中使用的那些一致，标准的单一字母或三个字母的缩写通常用于表示氨基酸残基，除非另有说明，假定其为L-构型.除非另有说明，所有起始物质得自市售供应商，不需进一步纯化使用.具体地，可在实施例和通篇说明书中使用下述缩写g(克);mg(毫克)；L(升)；mL(毫升)；PL(微升)psi(磅/平方英寸)；M(摩尔)；mM(毫摩尔)；N(当量);Kg(千克)；i.v.(静脉注射)；Hz(赫兹)；MHz(兆赫)raol(摩尔)；mmol(毫摩尔)；RT(室温)；min(分钟)h(小时)；mp(溶点)；TLC(薄层色谙)；Tr(停留时间)；RP(反相)；DCM(二氯甲烷)；DCE(二氯乙烷)DMF(N，N-二甲基甲酜胺)；HOAc(醋酸)；TMSE(2-(三甲基砝烷基)乙基)；TMS(三甲基硅烷基)；TIPS(三异丙基甲硅烷基)；TBS(叔丁基二甲基甲硅烷基)；HPLC(高压液相色详法)；THF(四氪呋喃)；DMSO(二甲亚巩)；EtOAc(乙酸乙酯)；DME(1，2-二甲氧基乙烷)；EDTA乙二胺四乙酸；FBS胎牛血清IM画Iscove，sModifiedDulbecco，s介质IMS工业甲基化酒精；PBS磷酸盐緩冲生理盐水；RPMIRoswellParkMemorialInstituteRIPA緩冲液*RT室温*150mMNaCl，50mMTris-HCI，pH7.5，0.25%(w/v)-脱氧胆酸，1%NP-40，5mM原钒酸钠，2mM象化钠和蛋白酶抑制刑鸡尾酒.除非另有说明，所有的温度用TC(摄氏度)表示.除非另有说明，所有的反应在惰性条件和室温下进行.GW572016F为拉帕替尼，其化学名为N-{3-氯-4-(3-氟苯甲基)氣苯基)-6-5-({2-(甲烷磺酰基)乙基氨基}甲基)-2-吹响基-4-全唑啉胺二甲苯磺酸盐一水合物.实施例1GW572016F的制备阶段1在20至25TC下，用三正丁胺(l.2当量)处理搅拌的3H-6-喹唑啉-4-胡(化合物A)的甲苯(5体积)混悬液，然后，加热至90TC。加入氯氧化裤(Phosphorousoxychloride)(1.1当量)，然后加热回流反应混合物.将反应混合物冷却至50TC,加入甲苯(5体积).加入固体形式的化合物C(1.03当量)，加热浆液返回至90TC，搅拌l小时.将浆液转移至第二个容器中；用甲苯(2体积)洗涤第一个容器，并且与反应混合22物混合.将反应混合物冷却至70C,在1小时内滴加1.0M水性氩氧化钠溶液(16体积)至搅拌的浆液中，保持成分温度为68-72"C。在65-70TC撹拌1小时，然后在l小时内冷却至201C.在201C搅拌混悬液2小时，过滤收集产物，连续用水(3x5体积)和乙醇洗涤，然后在50-60TC真空干燥。体积数根据使用的化合物A的数量引用.观察到的百分收率范围90%至95%，白色或黄色晶体.阶段2将N-{3-氯_4_(3-氟苯甲基)氧苯基)_6-棟_4-全峻啉胺—化合物D(lwt)、硼酸一化合物E(0.37wt，1.35当量)和活性炭上(0.028wt，50%水分)10%钯的混合物在IMS(15体积)中匀浆。搅拌得到的混悬液5分钟，用二异丙基乙胺(0,39体积，1.15当量)处理，然后加热至70TC约3小时，直到反应完全(用HPLC分析确定)，用四氢呋喻(THF，15体积)稀释混合物，然后热滤除去催化剂。容器用IMS洗涤(2体积)。在5-10分钟内，将对甲笨磺酸一水合物(1.5wt，4当量)的水溶液(1.5体积)加入到滤过的保持在65TC的溶液中.当在60-75TC搅拌混悬液l小时结晶后，在1小时内冷却至约25TC，再次室温搅拌2小时。过滤收集固体，用IMS(3体积)洗涤，然后在约50TC真空干燥，得到化合物F，呈桔黄色结晶固体(从包含约5%w/wEtOH的乙醇溶剂合物中分离),阶段3NaHB(0Ac)3将化合物F(l重量)和2-(甲磺酰基)乙胺盐酸盐(0.4重量，1.62当量)悬浮于THF(10体积)中。连续加入醋酸(0，354体积，4当量)和二异丙基乙胺(DIPEA，1.08体积，4.01当量)。在30-35TC搅拌得到的溶液约1小时，冷却至约2210.然后，在约15分钟内不断装料加入三乙酰氣基硼氢化钠(0.66重量，2.01当量)(在该点可看到某些泡腾现象)。在约221C搅拌得到的混合物约2小时，然后取样用于HPLC分析，加入水性氢氧化钠(25%w/w，3体积)淬灭反应，然后再加入水(2体积)，搅拌约30分钟(在开始加入苛性钠时可看到某些泡腾现象)，然后，分离水相。用THF(2体积)萃取，然后用25y。w/v水性氯化铵溶液(2x5体积)2洗涤混合的THF萃取物2次.制备对甲苯磺酸一水合物(p-TSA，0.74wt，2.5当量)的水溶液(l体积)1，加热至约60TC，加入GW572016F(化合物G)(0,002wt)晶种.在至少30分钟内给GW572016的游离碱THF溶液中加入对TSA溶液，同时保持批料温度(batchtemperature)在60±3"C'在约601C搅拌得到的混悬液l-2小时，在1小时内冷却至20-251C,在该温度老化约l小时.过滤收集固体，用95:5THF:水(3x2体积)洗涤，在约351C真空干燥，得到GW572016F-化合物G，亮黄色结晶固体。预期产率80%,理论产率117%w/w。i最小反应体积约l体积.2最大反应体积为约7体积。#分析矫正将N-(3-氯-4-[(3—氟苯甲基)氧苯基)-6-5-(U2—(甲烷磺酰基)乙基氨基}甲基)-2-呋喃基-4-喹唑啉胺一化合物G(1wt)的二甲苯横酸盐一水合物盐的四氬呋喃(THF，14体积)和水(6体积)的混悬液加热至约55-60TC，加热30分钟，得到溶液，其通过过滤澄清，用THF/水(7:3比例，2体积)引流(line)洗涤到结晶容器中。加热回流得到的溶液，在大气压下，蒸除四氢呋喃(9vo1，与水95。/。w/w的共淬混合物).所述溶液由N-{3-氯-4-(3-氟苯甲基)氣1苯基}-6-5-({2-(甲烷磺酰基)乙基1氨基}甲基)-2-呋喃基l-4-喹唑啉胺二甲苯磺酸盐一水合物(0.002wt)作为晶种.一旦开始结晶，加入水(6体积)，同时保持反应温度高于55TC.在约2小时内，冷却混合物至5-151C,过滤收集固体，用四氢呋喃/水(3:7比例，2体积)，然后用四氢呋喃/水(19:1比例，2体积)洗涤，在45TC真空干燥，得到N-{3-氯-4-(3-氟苯甲基)氣1苯基)-6-5-({2-(甲烷磺酰基)乙基氨基}甲基)-2-呋喃基l-4-喹唑啉胺二甲苯磺酸盐一水合物-化合物G，呈亮黄色固体结晶。实施例2通过拉帕替尼和多西紫杉醇或托泊替康给药细胞系得自AmericanTypeCultureCollection.所述细胞保存在含有RPMI1640(Invitrogen#22400-089)的组织培养瓶中，RPMI1640中含有10。/o的胎牛血清(FBS，HyCkme#SH30071,03)，并且在37"于含有5。/。C02的大气中培养，直到用于确定ICso的平皿接种.为了25确定ICso，将细胞以5,000细胞/孔接种于96孔组织培养皿中的适宜培养基中，放回培养器过夜.在最初引种约24小时后，将细胞暴露于GW572016的二甲苯磺酰盐形式、单独的GW572016F、单独的托泊替康或多西紫杉醇、或GW572016F与托泊替康或多西紫杉醇的联合之中。细胞在50%RPMI和50%低葡萄糖DMEM介质中，其包含5%FBS、50微克/ml庆大霉素和0.3y。DMSO.所有服药均相伴执行，并且每种药剂与GW572016F的服药比率被适当调节以反映各药剂对各细胞系的相对药效.在大多数情况下，药剂以单一固定比率服药。在一些情况下，该数据也包括通过以矩阵形式服药产生的CI值。当在两种服药形式中服药比率为1:l时，将来自矩阵服药的CI值包括在内。参见以下服药形式.在化合物暴露三天后，抽吸除去生长介质.用0.1ml每孔的亚甲蓝(Sigma弁M9140，0.5。/。的50:50乙醇:水溶液)染色细胞，然后室温培养至少30分钟来评价细胞生物重.抽吸染剂，将培养皿浸渍在去离子水中洗涤，然后空气干燥.通过加入0.1ml的增溶溶液(l.(T/oN-l月桂基肌氨酸、钠盐、Sigma#L5121的PBS溶液)使细胞释放染剂。室温培养培养皿40分钟'用TecanSpectra全自动定量绘困蘇标仪在620nM读数吸收率.计算相对于未处理的对照细胞的细胞生长抑制百分比。使用Levenberg和Marquardt方法(Mager，1972)和方程y=Vmas*l-(X7(K"+Xn))(其中"K"等于IC50)来计算IC50值.26<table>tableseeoriginaldocumentpage27</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage27</column></row><table>为各单独或联合药剂生成IC50值.将IC50值插入来自Chou和Talalay的联合指数方程Da，Cnmb/Da+Db，c。mb/Db,其中Da和Db是各单独药剂的IC50。Da,c。mb是产生50%抑制效果的联合中试剂a的量.Db，e咖b是产生50%抑制效果的联合中试刑b的量。若实际以彼此1:1比率服药，则Da，c。mb-Db,c。mb。大于l的值表示拮抗作用。小于l的值表示协同作用，可假定通过与1.0的差值来反映拮抗或协同程度，即0.5比0.8更具协同性且2.0比l.S更具拮抗性。需要重点指出数值l.O是预测的加和性。联合给药可能比任一单独药剂得到更大的抑制效果，但是仍被考虑为具有拮抗性。这种情况发生在当联合效果的幅度并非该数学模型能够预测的时候。正在开发另一种分析模板来比较该联合与最佳单一药剂。Chou和Talalay模型也假定该单独药剂正独立作用或者处于独立途径并且相互排斥.对该假定药剂通过与GW572016F相同的机制工作的模型的采用增加了一部分CI值，但是并未改变该数据组中药刑的排序。下表包括了对于相互排斥和相互未排斥的CI定值(determination)的联合指数值。表l<table>tableseeoriginaldocumentpage28</column></row><table>联合尼/拉帕脊尼/托泊替康,理!UI鹏龙，实施例3BT474vs.拉帕替尼和多西紫杉醇的联合具有BT474肿瘤的大鼠被单独给药拉帕替尼(200和100mg/kg;SIDx21天，或在多西紫杉醇的前2天和1天)，且联合多西紫杉醇(25和50mg/kgIP，一周一次x3周)。在两个试验中，单独的50mg/kg的多西紫杉醇且联合拉帕替尼是高效的，然而，在两个试验中，25和50mg/kg的泰索帝在3周的服药后引起体重损失。在第一个试验中没有死亡，且在第二个试验中在接受了多西紫杉醇U5mg/kg)和拉帕替尼(200mg/kgx21天)的8只大鼠组中有1只死亡.所有存活的大鼠在服药完成时迅速恢复体重。治疗组和结果如下。治疗组%抑制1.HPMCT80溶醃(qdx21天)ND2.Tax-25(3、10、17天)773.Tax—50(3、10、17天)984.GW016-200(sidx21天)1025.GW016-100(sidx21天)796.GW016-200(以连续日每周2次x3周)587.GW016-200(以连续日每周2次x3周)+泰索帝-50(每周一次x3周)988.GW016-100(sidx21天)+泰索帝-50(每周一次x3周)1039.GW016-200(sidx21天)+Tax-25(每周一次x3周)109实施例4拉帕替尼联合曲妥单抗的临床研究登记患有晚期或转移性乳癌(过表达erbB2蛋白2+或3+，由免疫组织化学和/或原位杂交荧光确认)的患者(pts).每日给药增加的拉帕替尼剂量水平(750-1500rag)，每4周重复(q4weeks),联合曲妥单抗的周标准服药(4mg/kg负荷剂量，随后每周2mg/kg输注)。三个pts以每种剂量水平治疗，在剂量-限制毒性事件中扩充到6个。获得有限的药物代谢动力学样本来确定峰浓度和治疗相关的毒性之间的任何关联。在1500rog/d的剂量水平个别地各报导了一次剂量—限制3级疲劳和3级恶心发病率.1—2级腹泻、食欲缺乏、疲劳和皮疹是通常的毒性。在第8周以及随后每8周进行每个RECIST标准的临场应答评估.治疗了26个pts(750组(cohort)-3;1000组-10;1250组-10;1500组-3).中值年龄为54岁(30-81)'完成了75个治疗周期(4周=1个治疗周期)中值为2.20个pts的应答值得评价4PR，期间1一4月；9SD，期间l-5月，和7PD，在l-6月内，在152个治疗周期之后的应答评价5PR，期间分别为1.9、2.6、3.9、5.0+，和6.9+月和1个7.7+月的CR,CR-定义为靶损伤的消失的完全应答PR-定义为至少30%靶损伤减少的部分应答SD-定义为没有生长或某些靶损伤减少的稳定疾病实施例5拉帕替尼联合来曲唑的临床研究登记患有晚期乳癌、ER或PR阳性、或可能应答于该联合治疗的其它肿瘤(例如卵巢、子宫内膜)的患者(pts),给药增加的拉帕替尼刑量(1250-1500rag)，每4周重复，联合来曲唑的标准剂量(2.5mg/d)。三个患者(pts)以每种剂量水平治疗，在剂量-限制毒性事件(DLT)中扩充到6个，在2个剂童水平(1250rog组-4pts，1500rag组-13pts)登记了17个pts(17F，中值年龄50，32-74岁，KarnofskyPS中值为卯％)完成了33个治疗周期(4周-l个治疗周期)中值为2.在1500mg/d的剂量水平报导了一次DLT(gr3腹泻)发病率.理想的耐受方案确定为来曲唑2.5mg+拉帕替尼1500mg/d.l-2级腹瑪、食欲缺乏、疲劳和皮渗是通常的血液毒性，在16个可评估的患者中，3个pts经历了》2月的SD(乳癌-lpt，膀胱癌-lpt，子宫内膜癌-lpt和子宫颈癌-lpt)且4个患者在2-4月内经历了PD.实施例6拉帕替尼联合卡培他滨的临床研究在45个患有晚期实体瘸的患者(pts)中进行联合拉帕替尼和卡培他滨的2-部分相(Phase)I研究(A)刑量-增大相(24pts)和(B)处于最佳耐受方案(OTR)的药物代谢动力学相(21pts):M/F(23:22)，年龄中值57yrs(34-78)，ECOG(0/1/2:29/13/3)，深度轻度预治疗(23:22)，肿瘤类型(H&N(8);乳癌(8)，结肠直肠癌(7)，肺癌(6)，其它(16))和中值周期3(1-9).每3周，Pts由14天的卡培他滨(C)(1500-2500mg/m2)和每曰的拉帕替尼(L)(1250-1500mg)治疗。刑量-限制毒性(DLT)为3级粘膜炎，疲劳和食欲缺乏-1250L/2000C(n-l);3级皮渗(n-l)，3级腹瑪(n-l)-1500L/2000C和2级出30血性口腔炎(11=1)，3级腹泻(n-l)-1250L/2500C。其它毒性包括口腔炎(36%),恶心/呕吐(30%)，腹泻(45%)，非结合性高胆红素血症(14%)，疲劳(19%)，皮渗(38%)和手足综合征(29%).OTR为1250L/2000C.应答(RECIST标准)包括在具有trastuzimab和化疗耐受性的炎性乳癌的妇女中的l个CR。她的肿瘤过表达ErbB2^+)，具有低TS,此外，观察到4个PR(l个erlotinib-抗性H&N;紫杉烷耐受性-H&N;乳癌；胃癌)和6个>12周的SD.实施例7拉帕替尼与Bc卜2抑制剂的联合检查了拉帕替尼与Bc卜2抑制剂(HA14-1)对MCF-7人类乳癌细胞，HER-2/神经鞘转染MCF-7细胞系和他莫昔芬(TAM)抗性MCF-7细胞系的生长的联合效果.采用MTT四唑盐染料试验确定细胞生长。对细胞给药拉帕替尼和HA14-l作为羊一治疗。拉帕替尼(1-10uM)和HA14-1(l-10uM)均给出对该3种细胞系中每一种的剂量依赖性生长抑制.用EGFR/erbB-2抑制剂拉帕替尼和Bcl-2抑制剂HA14-1的联合治疗得到了对所有3种细胞系的协同生长抑制。3权利要求1.下式(I″)化合物在制备与曲妥单抗联合施用的用于治疗哺乳动物中乳癌的药物中的应用。2.下式(I〃)化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>在制备与来曲唑联合施用的用于治疗哺乳动物中乳癌的药物中的应用。3.下式(I〃)化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>在制备与托泊替康联合施用的用于治疗哺乳动物中乳癌的药物中的应用。4.下式(I〃)化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>在制备与多西紫杉醇联合施用的用于治疗哺乳动物中肺癌的药物中的应用。5.下式(r')化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>在制备与托泊替康联合施用的用于治疗哺乳动物中肺癌的药物中的应用。6.下式(r')化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>在制备与托泊替康联合施用的用于治疗哺乳动物中结肠直肠癌的药物中的应用。7.下式(r')化合物在制备与抗雌激素化合物联合施用的用于治疗哺乳动物中乳癌的药物中的应用。全文摘要本发明涉及N-{3-氯-4-[(3-氟苯甲基)氧]苯基}-6-[5-({[2-(甲烷磺酰基)乙基]氨基}甲基)-2-呋喃基]-4-喹唑啉胺和其盐及溶剂合物在制备与至少一种其它抗肿瘤化合物联合施用的用于治疗哺乳动物中癌症的药物中的应用。文档编号A61K31/7068GK101564535SQ200910141549公开日2009年10月28日申请日期2005年6月3日优先权日2004年6月4日发明者A·N·潘迪特,M·S·伯格,T·M·吉尔默申请人:史密丝克莱恩比彻姆(科克)有限公司