专利名称：一种钆喷酸葡胺纳米球的制备方法
技术领域：
本发明涉及磁共振造影剂，尤其涉及钆喷酸葡胺(Gd-DTPA)纳米球的制备，这种新型的缓释制剂对提高和增强核磁共振造影成像具有重要意义。
背景技术：
核磁共振成像技术(magnetic resonance imaging，MRI)已经广泛应用于临床，为了提高核磁共振成像的效果，通常需要使用磁共振造影剂。钆喷酸葡胺(Gd-DTPA)是研究和应用最多的造影剂，其结构如下所示 钆喷酸葡胺(Gd-DTPA)主要用于颅脑、脊柱及全身的磁共振成像，由于它主要通过肾脏快速代谢，不适用于肝、脾等肿瘤组织的成像；游离的重金属离子Gd3+对人体的组织器官存在一定的毒害作用，因此需要将其制成缓释剂型，这样既能增强Gd3+的磁共振成相作用，又能减少给药量和次数，降低对人体组织的毒害作用。
目前，国内外对于具有靶向效应的造影剂的研究较少，报道较多的是钆喷酸葡胺脂质体的研究，并已有商品化的产品，如先灵宝雅公司的产品，由于制备复杂，这类产品的价格非常昂贵，因此也限制了其在临床上的应用。研究制备具有缓释功能的钆喷酸葡胺微球制剂，通过其在肿瘤组织中黏附与缓慢释放，从而提高和增强造影剂钆喷酸葡胺对肿瘤组织的造影成像作用，具有很好的应用前景。
壳聚糖是一种天然高分子材料，具有良好的生物相容性、生物降解性和生物活性，降解产物一般对人体无毒副作用，在体内不积蓄，无免疫原性，且原料易得，处理简单，因而在生物医学领域有着广阔应用。壳聚糖纳米粒子在生物体内具有良好的黏附性和生物降解性，能很好地被肠、胃等组织的黏膜透过吸附，进入病变区，发挥作用。若能利用壳聚糖制备纳米级颗粒，以简单的方法制备载有钆喷酸葡胺的纳米球，有望在临床上得到应用与推广。
发明内容
本发明提供一种利用壳聚糖制备钆喷酸葡胺纳米球的方法。提高和增强造影剂钆喷酸葡胺对肿瘤组织的造影成像作用，减少毒副作用，使其在临床上得到应用与推广。
本发明提供的钆喷酸葡胺纳米球的制备方法，利用壳聚糖制备纳米级颗粒，采用双乳化一中和沉淀法，制备步骤如下(1)将钆喷酸葡胺溶解于含量为0.5％～3％(w/v)的壳聚糖溶液中为水相，钆喷酸葡胺与壳聚糖的质量比在5∶2～20∶2之间；加入含有2％～8％(w/v)第一乳化剂的液体石蜡作为油相，水油相体积比2∶15，乳化1～8分钟，再加入第二乳化剂，第二乳化剂用量为第一乳化剂用量的15％～42％，继续乳化1～8分钟得乳液1；(2)取0.2～3mol·L-1的碱性溶液，加入含有乳化剂浓度2％～8％(w/v)的液体石蜡中，水油相体积比2∶15，乳化1～6分钟得乳液2；(3)将乳液2加入乳液1中，搅拌1～6分钟，加入异丙醇继续搅拌1～5分钟，离心分离，经有机溶剂和去离子水洗涤后，得悬浮液，或经真空干燥得到产物。
本发明壳聚糖溶液的含量为0.5％～3％(w/v)。壳聚糖的数均分子量在8000～120000之间，脱乙酰度为70％～99％。
本发明制备方法采用双乳化剂，第二乳化剂用量为第一乳化剂用量的15％～42％，第一乳化剂优选(Span80)，第二乳化剂优选(Tween80)。
本发明碱性溶液优选NaOH或KOH，其浓度为0.2～3mol·L-1。
本发明洗涤用有机溶剂甲苯、正己烷、石油醚有机溶剂，优选石油醚。
本发明利用壳聚糖具有良好的生物相容性、生物降解性和生物活性，降解产物一般对人体无毒副作用，在体内不积蓄，无免疫原性，提高和增强造影剂钆喷酸葡胺对肿瘤组织的造影成像作用，减少毒副作用，以较简单的方法制备载有钆喷酸葡胺的纳米球。
本发明的制备方法可以得到平均颗粒粒径在497nm～1100nm的悬浮液或真空干燥产物，钆喷酸葡胺包埋率为20％～40％。
具体实施例方式
实施例1取0.15g的钆喷酸葡胺溶解于2mL0.5％(w/v)的壳聚糖溶液中，壳聚糖的数均分子量为120000间，脱乙酰度为99％；加入含有2％(w/v)Span80乳化剂的液体石蜡，水油相体积比2∶15，乳化3分钟，加入30％(w/v)的第二乳化剂Tween80，得乳液1；另取0.5mol·L-1的NaOH溶液，加入含有2％(w/v)Span80乳化剂的液体石蜡中，水油相体积比2∶15，乳化6分钟得乳液2；将乳液2逐滴加入至乳液1中，搅拌3分钟；加入异丙醇磁力搅拌3分钟后离心分离；离心所得沉淀先经石油醚洗3次，待石油醚挥干后再用去离子水洗至中性；最后得到悬浮液样品，激光粒度仪测得产品粒径为852nm。
实施例2取0.3g的钆喷酸葡胺溶解于2mL2％(w/v)的壳聚糖溶液中，壳聚糖的数均分子量为8000，脱乙酰度为99％；加入含有2％(w/v)Span80乳化剂的液体石蜡，水油相体积比2∶15，乳化3分钟；加入30％(w/v)的第二乳化剂Tween80，再乳化3分钟，得乳液1；另取3mol·L-1的NaOH溶液加入含有2％(w/v)Span80乳化剂的液体石蜡中，水油相体积比2∶15，乳化3分钟，得乳液2；将乳液2加入至乳液1中，搅拌3分钟；逐滴加入异丙醇，经磁力搅拌3分钟后，离心分离；离心所得沉淀先经甲苯洗3次，待甲苯挥干后再用去离子水洗至中性；最后得到悬浮液样品，激光粒度仪测得产品粒径为497nm。
实施例3取0.3g钆喷酸葡胺溶解于2mL 2％(w/v)的壳聚糖溶液中，壳聚糖的数均分子量为8000，脱乙酰度为80％；加入含有2％(w/v)Span80乳化剂的液体石蜡，水油相体积比2∶15，乳化3分钟；加入30％(w/v)的第二乳化剂Tween80，再乳化3分钟；另取1.5mol·L-1的KOH溶液加入含有2％(w/v)乳化剂Span80的液体石蜡中，水油相体积比2∶15，乳化3分钟得乳液2；将乳液2加入至乳液1中，搅拌3分钟；加入异丙醇，经磁力搅拌6分钟后，离心分离；离心所得沉淀先经正己烷洗3次，待正己烷挥干后再用去离子水洗至中性；经真空干燥，样品经激光粒度仪测得粒径为708nm。
权利要求
1.一种钆喷酸葡胺纳米球的制备方法，其特征是利用壳聚糖制备纳米级颗粒，采用双乳化一中和沉淀法，制备步骤如下(1)将钆喷酸葡胺溶解于含量为0.5％～3％(w/v)的壳聚糖溶液中为水相，钆喷酸葡胺与壳聚糖的质量比在5∶2～20∶2之间，上述溶液中加入含有2％～8％(w/v)第一乳化剂的液体石蜡作为油相，水油相体积比2∶15，乳化1～8分钟，再加入第二乳化剂，第二乳化剂用量为第一乳化剂用量的15％～42％，继续乳化1～8分钟，得乳液1；(2)另取0.2～3mol·L-1的碱性溶液，加入含有乳化剂2％～8％(w/v)浓度的液体石蜡中，水油相体积比2∶15，乳化1～6分钟，得乳液2；(3)将上述乳液2加入乳液1中，搅拌1～6分钟，加入异丙醇继续搅拌1～5分钟，离心分离，经有机溶剂和去离子水洗涤后，得悬浮液，或经真空干燥得到产物。
2.根据权利要求1所述钆喷酸葡胺纳米球的制备方法，其特征是壳聚糖溶液的含量为0.5％～3％(w/v)，壳聚糖的数均分子量在8000～120000之间，脱乙酰度为70％～99％。
3.根据权利要求1所述钆喷酸葡胺纳米球的制备方法，其特征是采用双乳化剂，第一乳化剂Span80，第二乳化剂Tween80。
4.根据权利要求1所述钆喷酸葡胺纳米球的制备方法，其特征是所述碱性溶液NaOH或KOH，其浓度为0.2～3mol·L-1。
5.根据权利要求1所述钆喷酸葡胺纳米球的制备方法，其特征是洗涤用有机溶剂为甲苯、正己烷、石油醚。
6.根据权利要求5所述钆喷酸葡胺纳米球的制备方法，其特征是洗涤用有机溶剂优选石油醚。
全文摘要
一种钆喷酸葡胺纳米球的制备方法，利用壳聚糖制备纳米级颗粒，采用双乳化－中和沉淀法，制备步骤如下将钆喷酸葡胺溶解于的壳聚糖溶液中为水相，加入第一乳化剂的液体石蜡作为油相，乳化1～8分钟，再加入第二乳化剂，继续乳化1～8分钟，得乳液1；另取的碱性溶液，加入含有乳化剂的液体石蜡中，乳化1～6分钟，得乳液2；将上述乳液2加入乳液1中，搅拌1～6分钟，后处理得到产物。本发明以较简单的方法制备载有钆喷酸葡胺的纳米球，毒副作用减少。
文档编号A61K9/14GK1994472SQ20061015547
公开日2007年7月11日 申请日期2006年12月26日 优先权日2006年12月26日
发明者郑豪, 朱克龙 申请人:浙江大学