专利名称：：分泌性IgA和IgG抗体诱导剂的制作方法
技术领域：
：本发明涉及通过同时经鼻给予作为黄病毒(flavivirus)的灭活抗原的疫苗和佐剂来诱导产生黄病毒特异性分泌性IgA和IgG抗体的方法。本发明还涉及通过经鼻给予诱导该分泌性IgA和IgG抗体的产生来防御黄病毒感染的方法以及分泌性IgA和IgG抗体诱导剂。
背景技术：
：最近，由黄病毒引起的传染病受到关注。由黄病毒科中的西尼罗病毒、登革病毒、日本脑炎病毒、黄热病毒、蜱传脑炎病毒和丙型肝炎病毒等引起的传染病成为全球性的重大问题。此外，最近由黄病毒之一的汉坦病毒(hantavirus)引起的传染病也逐渐成为重大问题。然而，在日本黄病毒引起的传染病受到关注是自1970年代中期开始，当时各地的在医学系动物实验设施中工作的大鼠处理者中相继出现原因不明的发热患者。这种当时病因尚不清楚的疾病持续发病至1984年，总计报告了127例，其中有l例死亡。第二次世界大战前，在流经中国和前苏联国境的黑龙江流域爆发过这种疾病，日本关东军进驻中国东北部(旧满洲)时也遭遇过不明性发热，报告为"流行性出血热"。之后，朝鲜战争时联合国军中报告了约3，200例不明性发热病例而备受关注。韩国高丽大学的李教授等首次从传染病流行地的姬鼠(Apodemus)中分离出了致病病毒，取流经姬鼠捕获地的河流汉滩河(HantaanRiver)的名字，命名为汉坦(Hantaan)病毒。原来上述疾病均起因于黄病毒属的汉坦病毒，1982年世界卫生组织(WHO)在日本就该病召开研讨会，将以后分离的类似病毒作为汉坦病毒名下的布尼亚病毒科(5w^aWn'^e)的第5个新属，命名为汉坦病毒属，总称为汉坦病毒，并决定将该病称为肾综合征出血热(HemorrhagicFeverwithRenalSyndrome:HFRS)。汉坦病毒传染病是以老鼠为自然宿主的汉坦病毒引起的人畜共患传染病，该病毒排泄到老鼠的粪、尿中，大部分传染病例是由于吸入了新鲜的粪便或干燥的粪便、尿中的粉尘病毒，但被老鼠咬伤也会传染。并且认为通过鼻、眼或口接触经由老鼠接触过的物品也会传染。引发HFRS的汉坦病毒广泛分布于欧亚大陆，主要是见于朝鲜半岛、中国的北部到中央部和苏联远东地区的以黑线姬鼠(Apodemusagrarius)为宿主的汉坦病毒。在中国每年报告的病例约数万人、在苏联有数千例、在韩国有数百例，广泛分布于世界各地的褐家鼠(Rattusnorvegicus)携带有汉城(Seoul)病毒，日本在1984年的医学系动物实验设施传染患者之后没有病例报告，但在日本港湾地域生存的褐家鼠现在仍携带该病毒，因此今后必需注意出现此类患者。另一方面，1993年在美国西南部的纳瓦霍印地安人(NavajoIndians)中报告了数例因伴有肺水肺的急性呼吸困难而导致的死亡。其不同于HFRS，不伴有肾综合征而是表现出急性呼吸道症状，死亡率约50%，但致病病毒确定是汉坦病毒。该汉坦病毒肺综合症(HantavirusPulmonarySyndrome:HPS)不仅出现在北美，1995年在南美也报告了汉坦病毒的传染病例。认为在HFRS和北美或南美的HPS等汉坦病毒传染病中没有发生人与人之间的传染。然而，1996年9月在南部阿根廷报告的病例中，居民和访问者中出现18例HPS，另有2例HPS与患者有过接触但并没有访问当地，致死率为50%。认为患者中有的并没有与鼠的接触而是人与人之间的传染，病毒学也证实了这一点，该事件成为重大问题，但之后没有再发生过。但是，通过老鼠的粪便进行空气传播的HFRS或HPS等汉坦病毒传染病的威胁依然存在，现在世界各地的生活场所都有褐家鼠等出没，随时都有可能出现新的爆发。事实上如上所述，在中国、苏联远东地区、韩国每年都有病例出现，因此人们迫切希望开发抗该汉坦病毒感染的疫苗。特别是在每年报告多起病例的中国、苏联远东地区、韩国等，提供抗该传染病的疫苗更是当务之急。然而，已知粘膜分泌的特异性IgA抗体对防御由空气传播的流感等呼吸道传染病非常有效。特别是针对不同类型病毒的交叉防御，粘膜中分泌的IgA抗体起主要作用。认为自然感染流感病毒后康复的人体中诱导了该IgA抗体，还可防御感染相同亚型的变异病毒。另一方面，未感染个体防御病毒或病原菌感染的方法为接种来源于病毒或病原菌的灭活抗原的疫苗，从而有目的地诱导抗体的方法，已知所述疫苗的例子有流感疫苗、霍乱疫苗、伤寒疫苗、天花疫苗和BCG疫苗等。其中，流感、严重急性呼吸道症候群(severeacuterespiratorysyndrome,SARS)等呼吸道疾病是由呼吸道的感染引起的，因此通过给予疫苗谋求在呼吸道粘膜中产生免疫应答。但是，目前使用的皮下注射的疫苗无法得到粘膜免疫应答，人们要求开发具有交叉防御能力的更有效的疫苗。特别是作为在呼吸道粘膜中诱导分泌性IgA抗体的方法，有通过鼻腔给药(经鼻给药)向鼻粘膜接种抗原的方法，但仅凭接种抗原无法得到足够的抗体应答，为了表现更有效的免疫应答，需要在接种疫苗的同时给予佐剂。立足于上迷观点，考察HFRS和HPS等以汉坦病毒为首的黄病毒传染病时，这种病毒感染基本上可以和流感一样看作是呼吸道传染病。因此，只要在呼吸道粘膜上诱导产生分泌性IgA抗体并在血清中得到IgG抗体应答，就能够有效预防以汉坦病毒为首的黄病毒传染病。为了达到上述目的，只要将该病毒的灭活抗原进行粘膜给药、特别是经鼻给药即可，但为了使这些病毒的灭活抗原的疫苗效果更完全，需要同时给予对该疫苗具有佐剂作用的物质。迄今为止，提案了各种对上述疫苗具有佐剂作用的物质，例如最近有报道称包含肌苷酸和胞苷酸的多核苷酸低聚物一Poly(I:C)具有佐剂作用(非专利文献l)。另外，作为天然资源的佐剂，报道了陶瓷化北极贝粉末(Ceramifiedpowdersofsurfdamshells)具有佐剂作用(专利文献l)。专利文献l:日本特愿2004-133268非专利文献l:J.ClinicalInvestigation,110(8)，1175-1184(2002)本发明人等使用上述具有特异性佐剂作用的物质，研究经鼻给予以汉坦病毒为首的黄病毒的灭活抗原，证实了可以有效得到粘膜上的IgA抗体分泌和血清中的IgG抗体应答，并且确认对致死量的以汉坦病毒为首的黄病毒的感染防御效果，从而完成了本发明。
发明内容发明所要解决的问题因此，本发明的目的在于提供使用Poly(I:C)以及陶瓷化北极贝粉末作为佐剂的、诱导产生以汉坦病毒为首的黄病毒特异性分泌性IgA和IgG抗体的经鼻用疫苗。本发明的另一目的在于提供通过诱导该分泌性IgA和IgG抗体来防御黄病毒感染的方法，这是本发明的另一方案。解决问题的方法为了达到上述目的，本发明的一个方案为提供经鼻用疫苗，具体而言，其特征在于该经鼻用疫苗包含来源于黄病毒的灭活抗原和作为佐剂的PoIy(I:C)或陶瓷化北极贝粉末，并有效地诱导鼻粘膜中IgA抗体的分泌和血清中的IgG抗体应答。并且，本发明的另一方案为提供诱导黄病毒特异性IgA和IgG抗体的方法，其特征在于该方法包括同时给予黄病毒的灭活抗原和作为佐剂的Poly(I:C)或陶瓷化北极贝粉末，更具体而言，提供诱导分泌性IgA和IgG抗体的方法，其特征在于是对呼吸道粘膜进行给药。发明效果本发明提供的通过将包含来源于以汉坦病毒为首的黄病毒的灭活抗原和作为佐剂的Poly(I:C)或陶瓷化北极贝粉末的疫苗经鼻给药，可以在呼吸道粘膜组织中诱导产生黄病毒特异性分泌性IgA和IgG抗体。分泌性IgA和IgG抗体是外分泌液中的主要免疫球蛋白，是对粘膜表面的感染防御起重要作用的病原菌特异性IgA和IgG抗体，在唾液、鼻液、胃肠道和呼吸道等的分泌液中或初乳中多见，还存在于血清中。因此，通过给予本发明提供的疫苗，可以有效诱导该IgA和IgG抗体的产生，从而防御黄病毒感染。实施发明的最佳方式在本发明提供的分泌性IgA或IgG抗体诱导剂中，用作疫苗佐剂的Poly(I:C)是作为Toll样受体(Toll-likereceptor:TLR)的配体的双链RNA，作为刺激自然免疫系统的TLR的配体，发挥对病原菌或病毒等微生物侵袭的保护性免疫。事实上，当将包含Poly(I:C)的作为TLR配体的双链RNA作为佐剂与疫苗一起给药时，其并不增强该疫苗的性能，而是使作为双链RNA的Poly(I:C)自身增强对各种病原菌或病毒等病原体侵袭的保护性免疫，特别是通过诱导病毒和病原菌特异性IgA抗体和IgG抗体来防御病原体感染。本发明中使用的双链RNA即Poly(I:C),其分子大小以碱基对(bp)数计可以不同，但已经判明为了有效刺激免疫应答，Poly(I:C)必需具有300bp以上的分子大小。作为具有上述分子大小的例子有分子大小为1001000bp的Poly(I:C)可以容易地从Toray林式会社获取。另一方面，本发明提供的分泌性IgA和IgG抗体诱导剂中，用作疫苗佐剂的陶资化北极贝粉末是烧结北极贝而得到的粉末，为多孔细粉。该物质的溶液具有除菌或杀菌作用，还具有除去微量有害物质例如残留农药等效果，陶瓷化北极贝粉末本身已作为产品市售。本发明中用作佐剂的所述陶瓷化北极贝粉末，当观察其电子显微镜照片时发现其是多孔细粉，由10100^m左右不均匀的结构物形成。因此，将该多孔物质作为疫苗的载体来激活抗原呈递细胞。另一方面，使用本发明提供的分泌性IgA和IgG抗体诱导剂、与作为佐剂的Poly(I:C)或陶瓷化北极贝粉末一起给药的疫苗通常是包含感染性因子或具感染性因子片段的抗原性悬浮液或溶液，将其接种在身体中诱发自动免疫。构成疫苗的抗原性片段通常可以是微生物(例如病毒或细菌等)或由微生物纯化的天然产物、或者是合成的或基因修饰的蛋白质、肽、多糖或其他产物。在本发明中，活疫苗或灭活疫苗的具体例子有抗黄病毒传染病的活疫苗。本发明中所说的灭活抗原是指失去了感染能力的抗原，包括毒粒(完全病毒粒子)、不完全病毒粒子、毒粒构成粒子及其翻译后修饰产物、非毒粒蛋白及其翻译后修饰产物、保护性抗原、中和反应的表位等。上述抗原例如可以通过物理(例如X射线照射、热或超声波)、化学(福尔马林、汞、醇、氯)等处理而将其灭活。本发明提供的分泌性IgA和IgG抗体诱导剂优选进行粘膜给药。脊推动物的粘膜包括消化器、呼吸器、排泄器、生殖器等特别是外通性中空器官的内壁。因此，本发明的优选给药途径一粘膜给药包括鼻腔给药(经鼻给药)、口腔给药、阴道给药、上呼吸道给药和肺泡给药等。其中优选鼻腔内粘膜给药。特别是由于鼻腔是汉坦病毒为首的黄病毒引发的呼吸道传染病疾患的感染途径的门户，因此通过将本发明的抗体诱导剂进行粘膜给药，发生分泌性IgA抗体反应，在粘膜上皮细胞中产生分泌性IgA抗体，并在血清中产生IgG抗体，对呼吸道传染病提供有效的防御。因此，作为诱导本发明的目标分泌性IgA和IgG抗体的产生、并发挥免疫保护的对象的病原体是能够使宿主产生疾病或障碍的微生物，具体包括西尼罗病毒、汉坦病毒、登革病毒、日本脑炎病毒、黄热病毒、蜱传脑炎病毒和丙型肝炎病毒等黄病毒。本发明提供的分泌性IgA和IgG抗体诱导剂的给药量可根据给药对象的年龄、体重、给药方法而改变，通常口服给药时成人每天10500mg左右；粘膜给药、特別是经鼻给药时，成人每天0.110mg，优选为0.11mg左右。实施例以下通过具体的实施例来进一步详细i兌明本发明。实施例l:合成双链RNAPoly(l:C)的IgA、IgG产生能力使用合成双链RNAPoly(I:C)作为佐剂，来确认作为灭活抗原的灭活病毒或亚单位抗原诱导中和抗体的能力，进而确认抗病原体的效果。(材料)小鼠BALB/c小鼠(6周龄，雌性)病毒汉坦病毒株(从国立传染病研究所(东京)获取)。疫苗汉坦病毒林(国立传染病研究所)；醚处理灭活疫苗佐剂作为阳性对照的CTB515[CTB(霍乱毒素亚单位B)，含有0.1。/。CT(霍乱毒素)]和poly(I:C)(方法)每组使用5只6周龄的BALB/c小鼠(日本SLC(林)、东京)。将含有l〃g汉坦病毒林疫苗和分别为0.1pg、1〃g、3pg或10〃gpoly(I:C)佐剂的5戸L溶液接种在小鼠鼻腔内，3周后将等量的含或不含佐剂的疫苗经鼻接种，再过2周后每个鼻腔接种1.2〃L含有100pfo汉坦病毒的溶液进行感染。作为对照组，仅给予IO^g和l戶g的poly(I:C)、仅给予疫苗、未处置的组。感染3天后回收鼻腔洗净液和血清，利用ELISA法测定鼻腔洗净液中的IgA和血清中的IgG。另外通过使用MDCK细胞的噬菌斑测定来测定鼻腔洗净液中的病毒效价。对按相同方法经鼻免疫的小鼠，用20pL含有40LD5o致死量(104'7EIO5Q(50%的发育鸡蛋中显示免疫性的病毒量的约10000倍量))的汉坦病毒的溶液进行感染，监测其存活率。另外，为了研究poly(I:C)对中枢神经系统的安全性，将0.25//g、2.5;/g和25,g的poly(I:C)溶解在25PBS中，使用两步针(two-stepneedle)进行脑内接种。监测动物接种后的体重变化和存活率。应说明的是，对照组是将2.5〃g、lO,g、25戸g的CTB+(含有0.10/。CT的CTB)同样溶解在25/^LPBS中，将所得溶液进行脑内接种的组。(结果)(1)通过接种含有poly(I:C)佐剂的经鼻汉坦病毒疫苗来进行抗体诱导和感染防御评价poly(I:C)的粘膜佐剂性能。6周前用^g疫苗和0.1pgl(Vgpoly(I:C)进行经鼻接种，再于2周前用等量的含或不含佐剂的疫苗进行经鼻接种。鼻粘膜中的IgA抗体应答和血清中IgG应答汇总在表1中。<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>以上事实表明poly(I:C)通过产生足以防御感染的分泌性IgA抗体来引发粘膜IgA抗体应答。实施例2:将灭活病毒粒子和。oly(l:C)结合使用的经鼻汉坦病毒疫苗的防御效果(材料)疫苗醚处理汉坦病毒HA疫苗；福尔马林灭活全病毒粒子NC疫苗小鼠BALB/c小鼠(6周龄，雌性)(方法)将O.l/^g福尔马林灭活全粒子NC汉坦病毒疫苗和0.1〃gpoly(I:C)[100-1000bp:Toray]结合使用作为经鼻汉坦病毒疫苗的疫苗成分对BALB/c小鼠(6周龄，雌性)进行给药，3周后再次给予相同疫苗。又过l周后，测定小鼠鼻洗净液和血清中的抗体应答，分别作为粘膜和全身保护性免疫的指标。(结果)其结果如表4所示。[表4<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>由表中的结果判明将灭活全病毒粒子和poly(I:C)结合使用作为汉坦病毒疫苗的疫苗成分时，也提高了粘膜和全身的保护性免疫。而且，即使在结合使用0.1pg疫苗和0.1pgpoly(I:C)时，也显示出与结合使用裂解产物疫苗(spilit-productvaccine)和CTB承来获得高佐剂活性、从而提供有效的抗病毒感染的阳性对照组同等的应答。并且，上述应答甚至高于同时使用裂解产物疫苗和poly(I:C)时的应答。以上事实表明不仅是使用裂解产物疫苗，当使用其他型的疫苗时，也可确认到结合使用poly(I:C)的经鼻疫苗的有用性。实施例3:确认polya:C)的分子大小(材料)病毒汉坦病毒Poly(I:C):大小(L):1300bp(Fluka)大小(M):1001000bp(Toray)大小(H):〉3.3xi。6bp(Fluka)Poly(A:U)小鼠BALB/c小鼠(6周龄，雌性)(方法)将0.4〃g汉坦病毒的裂解产物疫苗和0.1/^g各种大小的poly(I:C)对BALB/c小鼠(6周龄，雌性)进行经鼻给药，3周后再次给予相同疫苗。又过1周后，测定小鼠鼻洗净液和血清中的抗HA和NA的抗体应答，分别作为粘膜和全身保护性免疫的指标。(结果)其结果如表7所示。I表5]<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>由表中所示的结果判明在使用分子大小为10~300bp的poly(I:C)的实验组中粘膜应答较其他組低。因此，认为可用作佐剂的poly(I:C)的分子大小为约300bp以上。实施例4:使用陶瓷化北极贝粉末作为佐剂的经鼻疫苗的抗体诱导和感染防御作用1.材料使用以下材料。小鼠BALB/c小鼠^周龄，雌性)病毒汉坦病毒抹(从国立传染病研究所(东京)获取)。疫苗汉坦病毒抹(国立传染病研究所)；醚处理灭活疫苗佐剂作为阳性对照的CTB氺[CTB(霍乱毒素亚单位B)，含有O.P/。CT(霍乱毒素)]和陶瓷化北极贝粉末2.方法每组使用5只6周龄的BALB/c雌性小鼠。将含有3//g疫苗和作为佐剂的10,g或lOO/^陶瓷化北极贝粉末的5//L溶液接种在各小鼠的鼻腔内，3周后和5周后经鼻接种等量的疫苗和相同佐剂。再过2周后每个鼻腔接种1.2〃L含100pfo汉坦病毒的溶液进行感染。作为佐剂的阳性对照组，有给予1户gCTB*[CTB(霍乱毒素亚单位B),含有0.1%CT(霍乱毒素)]的组、仅给予3pg疫苗的组或未处置的组。感染3天后回收鼻腔洗净液和血清，利用ELISA法测定鼻腔洗净液中的IgA抗体和血清中的IgG抗体，另外通过使用MDCK细胞的噬菌斑测定来测定鼻腔洗净液中的病毒效价。同样，对经鼻免疫的小鼠，用20pL含有40LD5o致死量的病毒溶液进行感染，监测其存活率。3.结果为了评价陶瓷化北极贝粉末的粘膜佐剂性能，6周前用3pg疫苗和10//g100〃g陶f:化北极贝粉末进行经鼻接种，再以两周为间隔用等量的疫苗和同样的佐剂进行两次经鼻接种。研究鼻粘膜中的IgA抗体应答和血清中IgG抗体应答。为了观察陶瓷化北极贝粉末的用量依赖性的佐剂效果，给予10^g和IOO^g两种不同剂量的陶瓷化北极贝粉末，研究该佐剂作用。其结果，使用10//g陶资化北极贝粉末时在鼻腔粘膜中确认到IgA抗体的应答。在鼻腔粘膜中诱导的IgA抗体的量依赖于陶瓷化北极贝粉末的用量，若陶瓷化北极贝粉末的量增加至IOO^g，则其佐剂效果进一步提高。另外，按同样的免疫条件进行第3次免疫，两周后向每个鼻腔注射1.2〃L含有100pfliPR8病毒的溶液进行病毒感染。在未接种疫苗的对照组的鼻腔洗净液中确认病毒增殖至103pfu/mL以上的病毒效价。但是，在结合使用陶瓷化北极贝粉末作为佐剂进行3次经鼻疫苗接种的组中，病毒增殖完全被抑制。应说明的是，在单独使用3^g疫苗进行3次免疫的组中病毒增殖完全没有被抑制。以上结果表明陶资化北极贝粉末具有强效的佐剂效果。上述结果汇总在表6中。[表6<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>*:p<0.05另外，所诱导的血清中的IgG抗体的亚纲中，与lgG2a抗体相比主要诱导IgG，抗体，显示Th2型优势的免疫诱导。其结果如表7所示。[表7<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>实施例5:使用乳鼠(sucklingmouse)进行的感染实验使用乳鼠作为感染实验用'J、鼠进行感染实验。对乳鼠经鼻给予抗原(汉坦病毒)和佐剂poly(I:C),测定此时的抗体效价。以3周为间隔两次接种1Ag抗原和10pgpoly(I:C),l周后测定小鼠鼻洗净液和血清中的抗体应答。此时，小鼠的1mL鼻洗净液中的IgA抗体效价为200ng/mL左右，血清中的IgG抗体效价为34^g/mL。以3周为间隔两次接种1々g抗原和3poly(I:C)，l周后测定小鼠的鼻洗净液和血清中的抗体应答时，小鼠的1mL鼻洗净液中的IgA抗体效价为100ng/mL左右，血清中的IgG抗体效价为2~3〃g/mL。产业实用性如上所述，经鼻给予作为黄病毒的灭活抗原的疫苗和作为佐剂的poly(I:C)或陶瓷化北极贝粉末，诱导产生黄病毒特异性分泌性IgA和IgG抗体，来防御病毒或病原体的感染。目前条件下还没有有效的疫苗佐剂，而本发明能够应用于抗其他病原体的粘膜疫苗，其在医疗上的贡献非常大。权利要求1.分泌性IgA和IgG抗体诱导剂，其特征在于包含来源于黄病毒(flavivirus)的灭活抗原和作为佐剂的Poly(I:C)或陶瓷化北极贝粉末。2.权利要求l的分泌性IgA和IgG抗体诱导剂，其特征在于对呼吸道粘膜进行给药。3.权利要求l或2的分泌性IgA和IgG抗体诱导剂，其中黄病毒为西尼罗病毒(WestNilevirus)、汉坦病毒(hantavims)、登革病毒(denguevirus)、曰本月S炎病毒(Japaneseencephalitisvirus)、黄^j病毒(yellowfevervirus)、蜱传月S炎病毒(tick-borneencephalitisvirus)或丙型肝炎病毒(HepatitisCvirus)。4.诱导病毒特异性IgA和IgG抗体的方法，其特征在于同时给予来源于病毒的灭活抗原和作为佐剂的Poly(I:C)或陶瓷化北极贝粉末。5.权利要求4的诱导分泌性IgA和IgG抗体的方法，其特征在于对呼吸道粘膜进行给药。6.权利要求4或5的诱导病毒特异性IgA和IgG抗体的方法，其中病毒为西尼罗病毒、汉坦病毒、登革病毒、日本脑炎病毒、黄热病毒、蜱传脑炎病毒或丙型肝炎病毒。7.针对来源于黄病毒的灭活抗原的佐剂作用物质，其特征在于包含Poly(I:C)或陶瓷化北极贝粉末。8.权利要求7的佐剂作用物质，其中病毒为西尼罗病毒、汉坦病毒、登革病毒、日本脑炎病毒、黄热病毒、蜱传脑炎病毒或丙型肝炎病毒。全文摘要提供能够诱导产生以汉坦病毒为首的黄病毒特异性分泌性IgA和IgG抗体的经鼻用疫苗。还提供通过诱导该分泌性IgA和IgG抗体来防御黄病毒感染的方法。即经鼻用疫苗，利用该疫苗得到良好的鼻粘膜上的IgA抗体分泌和血清中的IgG抗体应答，其特征在于经鼻给予包含来源于黄病毒的灭活抗原和作为佐剂的Poly(I:C)或陶瓷化北极贝粉末的疫苗；以及诱导黄病毒特异性IgA和IgG抗体的方法，其特征在于对呼吸道粘膜同时给予黄病毒的灭活抗原和作为佐剂的Poly(I:C)或陶瓷化北极贝粉末。文档编号A61P11/00GK101300027SQ20068004120公开日2008年11月5日申请日期2006年9月13日优先权日2005年9月14日发明者仓田毅,佐多彻太郎,森山雅美,田中利明,长谷川秀树申请人:森山雅美