专利名称：别嘌醇钠注射用无菌粉末及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种含别嘌醇钠的注射用无菌粉末及其制备方法，该注射用无菌粉末含有别嘌醇钠和氢氧化钠，配制成20mg/ml别嘌醇钠溶液时的毫渗透压摩尔浓度为250～262mOsm/kg。
背景技术：
别嘌醇钠(allopurinol sodium)的化学结构式为 化学名称为1，5-二氢-4H-吡唑[3，4-d]嘧啶-4-单钠盐别嘌醇钠为白色或类白色粉末，溶于水和乙醇。
别嘌醇钠溶液为无色或几乎无色的澄明溶液。
注射用别嘌醇钠于1996年5月17日获得FDA批准并在美国上市，上市公司为美国Nabi公司；商品名AloprimTM；上市剂型为注射用无菌粉末；上市规格为500mg/瓶。临床用于治疗正在接受白血病、淋巴瘤、实体恶性肿瘤治疗所引起的血清和尿中尿酸水平升高的患者，和不能耐受口服药物治疗的患者。
由AloprimTM产品说明书可知，上市产品是通过控制别嘌醇钠溶液20mg/ml浓度时pH为11.1～11.8来控制产品质量。本发明人在研制过程中发现，在别嘌醇钠溶液20mg/ml浓度时pH为11.1～11.8，其毫渗透压摩尔浓度范围波动较大，易出现溶血现象，因此，不能很好地控制产品质量。溶血是指红细胞细胞膜破裂，红细胞内物质被释放至细胞膜外。药物溶血会产生注射部位疼痛、红肿等刺激反应，严重时会对人的生命造成威胁。注射剂特别是静脉输注的注射剂对溶血性要求很高，教科书载明，输液或静脉给药制剂要求等渗(0.9％氯化钠溶液毫渗透压摩尔浓度为286mOsm/kg)或偏高渗，不能引起任何血象变化(如溶血)。所以溶血性和过敏性、血管刺激性一样成为注射剂的重要特殊安全性指标。
我们意外发现别嘌醇钠溶液在20mg/ml浓度时的毫渗透压摩尔浓度为250～262mOsm/kg，尤其是毫渗透压摩尔浓度为250～260mOsm/kg，此时用生理盐水或5％葡萄糖注射液稀释至6mg/ml后再用人血红细胞进行溶血性试验，结果为阴性(即不溶血)，在此毫渗透压摩尔浓度范围外则结果为阳性(即溶血)。并惊奇地发现通过控制注射用别嘌醇钠在一定条件下的毫渗透压摩尔浓度250～262mOsm/kg来控制产品的质量，无溶血性，克服了pH不能很好地控制产品溶血性的问题，非常有利于该产品工业化生产中的质量控制，保证产品质量的稳定性。
发明内容
本发明提供一种别嘌醇钠的注射用无菌粉末，包含别嘌醇钠和氢氧化钠，其中氢氧化钠的量足以使该注射剂配制成20mg/ml别嘌醇钠溶液时，其溶液的毫渗透压摩尔浓度为250～262mOsm/kg。该无菌粉末用生理盐水或5％葡萄糖注射液稀释至6mg/ml后再用人血红细胞进行溶血性试验，结果为阴性(即不溶血)，在此毫渗透压摩尔浓度范围外则结果为阳性(即溶血)。
本发明的另一目的是提供了一种别嘌醇钠注射用无菌粉末的制备方法在别嘌醇中加入适量(这里的“适量”是指与别嘌醇等摩尔或略过量的，相当于11.0～11.5)的NaOH溶液，形成别嘌醇钠，再用NaOH溶液调节毫渗透压摩尔浓度至250～262mOsm/kg(别嘌醇钠的浓度为20mg/ml)，再用适量注射用水定容，用活性炭除热原，过滤，灌装，冷冻干燥即得本品。
所得注射用无菌粉以每瓶含别嘌醇钠500mg(以别嘌醇计)为例，具体制备方法为将处方量的别嘌醇分散于适量的注射用水中，加入适量0.5M NaOH溶液，边加边搅拌，使其溶解，调节毫渗透压摩尔浓度至别嘌醇钠溶液浓度为20mg/ml时毫渗透压摩尔浓度为250～262mOsm/kg，再加入0.3％的针用活性炭搅拌30min除热原，初滤除去活性炭，再除菌过滤，向30ml冷冻干燥瓶中灌装10ml上述方法配置的50mg/ml的别嘌醇钠溶液，用适当的冷冻干燥工艺进行冷冻干燥即得本品。
本发明的别嘌醇钠的注射用无菌粉末，还可包含其它辅料剂，这些辅料包括赋形剂如甘露醇、甘氨酸、山梨醇，抗氧剂如亚硫酸钠，络合剂如EDTA-2Na，水解抑制剂等，经试验证明这些辅料对该粉末的溶血性没有影响，但也无显著改善，见表1，因此，这些辅料可有可无，为节约成本，优选只用氢氧化钠。
溶液毫渗透压摩尔浓度测定本发明涉及的毫渗透压摩尔浓度测定仪器为符合《中国药典》要求的FM-8P全自动冰点毫渗透压摩尔浓度计(上海医大仪器厂)，它的工作原理是以冰点下降值与溶液的摩尔浓度成正比例关系为基础，采用高灵敏度的感温元件——半导体热敏电阻测量溶液的结冰点，通过电量转化为毫渗透压摩尔浓度而实现的，将被测样品的试管置于半导体致冷器中，由不冻液作为传导媒介使试管内的溶液冷却，半导体致冷器的吸热则吸收不冻液的热量而使其降温。测定方法为先用一定体积新鲜制备的蒸馏水调节仪器的零点，然后先用标准溶液校正仪器再测定供试品溶液毫渗透压摩尔浓度摩尔浓度。
表1辅料与溶血性试验结果
通过试验证明，1瓶(500mg)别嘌醇钠注射用无菌粉末用25ml注射用水复溶后的毫渗透压摩尔浓度在250～262mOsm/kg时，用生理盐水或5％葡萄糖注射液稀释至6mg/ml后用人血红细胞进行溶血性试验，结果为阴性(即不溶血)，在此毫渗透压摩尔浓度范围外则结果为阳性(即溶血)。而在此范围内和范围外用兔血红细胞进行溶血性试验均溶血。
溶血性试验本发明所涉及溶血试验的方法是按照《新药临床前药理毒理研究指导原则》进行的，具体操作如下取一瓶(500mg)注射用别嘌醇钠，加入25ml注射用水使其溶解，再用生理盐水或5％葡萄糖注射液稀释至6mg/ml，备用。从健康志愿者肘静脉取血2ml左右，放入盛有玻璃珠的三角瓶中振摇10分钟，除去纤维蛋白原，使成脱纤血液，加约10倍量的生理盐水，摇匀，离心(2000转/min)，除去上清液，沉淀的红细胞再用生理盐水如法洗涤3次，至上清液不显红色为止。将所得红细胞用生理盐水配成2％(ml/ml)的混悬液备用。取试管7支，按表1配比量依次加入2％的人红细胞混悬液和生理盐水(或蒸馏水)，混匀后，于37℃恒温箱放置0.5hr。然后加入不同量的上述配制的6mg/ml的别嘌醇钠溶液，摇匀后，置37℃恒温箱中。第6管作为阴性对照，加生理盐水；第7管作为完全溶血(或阳性)对照，也不加受试药液，但用蒸馏水代替生理盐水，分别于37℃恒温后15min、30min、45min、1hr、2hr、3hr、4hr各观察一次。
表2 各溶液的配比
在上述7根试管中，如果溶液呈透明红色，即表示溶血；如果红细胞全部下沉，上层溶液无色透明，且振摇后均匀分散，表示不溶血；一般以0.3ml注射剂(第3管)在2hr内不产生溶血作用作为判断标准。
具体实施例以下通过实施例进一步阐明本发明，但不限于实施例。
实施例1称取25g别嘌醇，加入约50ml注射用水将其分散均匀，然后加入400ml(0.5M)的NaOH溶液，搅拌，至别嘌醇完全溶解，然后用注射用水定容至500ml，加入1.5g针用活性炭搅拌30min，初滤除去活性炭，再用0.22μ微孔滤膜过滤，向30ml冻干瓶内灌装10ml上述配制的别嘌醇钠溶液，冷冻干燥即得。
采用本实施例的别嘌醇钠注射用无菌粉末一瓶，用25ml注射用水复溶后，测定其毫渗透压摩尔浓度为255mOsm/kg，pH为11.10。再用生理盐水稀释至浓度为6mg/ml，用人血红细胞按上述的溶血性试验方法进行溶血性试验，并与阴性组对照和阳性组对照，结果可以看出在此毫渗透压摩尔浓度条件下本实施例的样品不溶血。
实施例2采用实施例1的方法，用402ml(0.5M)的NaOH溶液制备别嘌醇钠溶液，冷冻干燥后取瓶本品，用25ml注射用水复溶后测定毫渗透压摩尔浓度为261 mOsm/kg，pH为11.15。将此溶液用5％葡萄糖注射液稀释至浓度为6mg/ml后，用人血红细胞进行溶血性试验，并与阴性组对照和阳性组对照，结果本实施例的样品不出现溶血现象。
实施例3采用实施例1的方法，用403ml(0.5M)的NaOH溶液制备别嘌醇钠溶液，冷冻干燥后取一瓶本品，用25ml注射用水复溶后测定测定毫渗透压摩尔浓度为262mOsm/kg，pH为11.25。将此溶液用生理盐水稀释至浓度为6mg/ml后，用人血红细胞进行溶血性试验，并与阴性组对照和阳性组对照，结果本实施例的样品不出现溶血现象。
实施例4采用实施例1的方法，用401ml(0.5M)的NaOH溶液制备别嘌醇钠溶液，冷冻干燥后取一瓶本品，用25ml注射用水复溶后测定毫渗透压摩尔浓度为259mOsm/kg，pH为11.15。将此溶液用生理盐水稀释至浓度为6mg/ml后，用人血红细胞进行溶血性试验，并与阴性组对照和阳性组对照，结果本实施例的样品不出现溶血现象。
对比实施例1采用实施例1的方法用0.5M的NaOH溶液417ml制备别嘌醇钠溶液，冷冻干燥后取一瓶本品，用25ml注射用水复溶后毫渗透压摩尔浓度为291mOsm/kg，PH为11.72，将此溶液用生理盐水稀释至浓度为6mg/ml后，用人血红细胞进行溶血性试验，并与阴性组对照和阳性组对照，结果本实施例的样品出现溶血现象。
对比实施例2采用实施例1的方法，用微过量的0.5M的NaOH溶液制备别嘌醇钠，继续加入0.5M的NaOH溶液将别嘌醇钠溶液的PH值分别调成为11.15(与实施例4不同之处在于过量NaOH用盐酸中和而得)、11.25、11.33、11.45、11.50、11.68，各自冷冻干燥得到粉末。然后各取一瓶粉末用注射用水配成20mg/ml溶液，测定它们的毫渗透压摩尔浓度，再用生理盐水稀释至浓度为6mg/ml，测定其溶血性，结果见表3。
表3.对比实施例试验结果
注“+”代表阳性(溶血)。
通过对比实施例，可以看出Ph值与渗透压没有相关性，因此，仅以别嘌醇钠冻干粉末的PH值来控制制剂的质量会出现溶血反应，严重威胁患者的生命，不能保证产品质量和安全性。通过控制其毫渗透压摩尔浓度才可更好地保证别嘌醇钠冻干的质量和安全性。
权利要求
1.一种别嘌醇钠注射用无菌粉末，包含别嘌醇钠和氢氧化钠，其中氢氧化钠的量足以使该注射用无菌粉末配制为20mg/ml别嘌醇钠溶液时，其溶液的毫渗透压摩尔浓度为250～262mOsm/kg。
2.一种制备别嘌醇钠注射用粉末的方法，包括如下过程a)在别嘌醇分散于适量氢氧化钠溶液使其成为别嘌醇钠，并用氢氧化钠溶液调节渗透压，至20mg/ml的别嘌醇钠溶液的毫渗透压摩尔浓度为250～262mOsm/kg；b)加入注射用水至适量；c)用适量活性炭除热源；d)除菌过滤；e)将所得溶液灌于适量冻干瓶中，冻干得注射用无菌粉末。
全文摘要
本发明涉一种无溶血性的别嘌醇钠注射用无菌粉末及其制备方法。本发明涉及别嘌醇钠注射用无菌粉末含有别嘌醇钠和氢氧化钠，氢氧化钠的量足以使别嘌醇钠注射用无菌粉末用注射用水配制成浓度为20mg/ml的别嘌醇钠(以别嘌醇计)溶液时的亳渗透压摩尔浓度为240～260mOsm/kg。在此毫渗透压摩尔浓度条件下用人血红细胞进行溶血性试验，结果为阴性(即不溶血)。本发明注射用粉末有利于工业化生产的质量控制，保证产品质量的稳定性和安全性。
文档编号A61K47/02GK101023950SQ20071007831
公开日2007年8月29日 申请日期2007年3月23日 优先权日2007年3月23日
发明者宗太丽, 牟才华, 张涛 申请人:重庆医药工业研究院有限责任公司